全 文 ：书［收稿日期］ 20100411(003)
［基金项目］ 广 西 教 育 厅 自 然 科 学 基 金 面 上 项 目
(200911MS28)
［第一作者］ 林兴，讲师，硕士学位，主要从事生化药理学、心血
管药理学研究，Tel:0771-5358342，E-mail:gxLx60
@ 163. com
［通讯作者］ * 黄仁彬，教授，博士生导师，研究方向:心血管药
理学、生 化 药 理 学，Tel:0771-5358272，E-mail:
huangrenbin518@ 163. com
山芝麻对 CCl4 诱导小鼠肝损伤的
脂质过氧化反应的影响
林兴1，黄权芳2，张士军1，廖明1，黄仁彬1 *
(1. 广西医科大学，南宁 530021;2. 广西中医学院第一附属医院，南宁 530023)
［摘要］ 目的:研究山芝麻水提物(Helicteres angustifolia)对四氯化碳(CCl4)诱导肝损伤小鼠脂质过氧反应的影响。方
法:以 CCl4 造成小鼠急性肝损伤模型，山芝麻 ig，测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、丙二
醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)，以及检测肝组织 MDA，SOD，NO 和 T-AOC 含量。结果:
山芝麻能保护 CCl4 所致小鼠肝损伤，使血清 ALT，AST 活力和 MDA 含量下降，SOD 活性和 T-AOC 水平提高。山芝麻还能提高
肝组织 SOD，T-AOC 含量，降低 MDA，NO 水平。结论:山芝麻具有抗脂质过氧化作用。
［关键词］ 山芝麻;四氯化碳;脂质过氧化
［中图分类号］ R285. 5 ［文献标识码］ B ［文章编号］ 1005-9903(2010)10-0147-03
Influence of Water Extract from Helicteres angustifolia on
Lipid Peroxidation Induced by Carbon Tetrachlorile in Mice
LIN Xing1，HUANG Quan-fang2，ZHANG Shi-junv，LIAO Ming1，HUANG Ren-bin1*
(1. Guangxi Medical University，Nanning 530021，China;2 . The First Affiliated Hospital of
Guangxi University of Traditional Chinese Medicine，Nanning 530023，China)
［Abstract］ Objective:To study anti-lipid peroxidation effects of the water extract from H. angustifolia(HA)
on liver damage induced by carbon tetrachlorile (CCl4) in mice. Method:After acute liver injury model was
induced by CCl4，mice were administrated intragastrically with water extract of H. angustifolia，the content of
alanine transaminase (ALT)，aspartate aminotransferase (AST)，malondialdehyde (MDA) and activity of
superoxide dismutase (SOD)，ability of total antioxidation capacity (T-AOC)were measured respectively in serum.
The levels of MDA，SOD，NO，T-AOC were evaluated respectively in liver. Result:H. angustifolia could markedly
decrease ALT，AST，MDA content，increase SOD activity and ability of T-AOC respectively in serum，also could
increase the content of SOD and T-AOC，decrease the levels of MDA and NO respectively in liver. Conclusion:H.
angustifolia has the effect of anti-lipid peroxidation.
［Key words］ Helicteres angustifolia;CCl4;lipid peroxidation
山 芝 麻 系 梧 桐 科 植 物 山 芝 麻 Helicteres
angustifolia L. 的根，能清热解毒，主要用于感冒发
热、肺热咳嗽、咽喉肿痛、麻疹等。至今，对山芝麻公
开报道的研究主要集中在其化学成分的分离、鉴定
方面，其药效学研究很少。本研究以 CCl4 诱发小鼠
肝损伤的氧化应激模型，探讨山芝麻对氧化应激小
鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平、天门冬氨酸
氨基转移酶(AST)活性、总抗氧化能力(T-AOC)等
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第 16 卷第 10 期
2010 年 8 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16，No. 10
Aug.，2010
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2010.10.048
的影响，首次评价山芝麻对 CCl4 诱发的小鼠肝脏氧
化应激性肝损伤的保护作用。
1 材料与方法
1. 1 药物 山芝麻，经广西中医学院第一附属医院
药学部黄权芳中药师鉴定为梧桐科植物山芝麻 H.
angustifolia L. 的根，其水提物由广西医科大学药理
学教研室和广西医学科学实验中心自行提取。
1. 2 动物 昆明种小鼠，雌雄兼用，体重(25 ± 2)g，
由广西医科大学实验动物中心提供，动物使用许可
证号 SYKG(桂)2003—0005，实验动物生产许可证
号 SCXKG(桂)2003—0003。
1. 3 试剂 丙二醛(MDA)一氧化氮(NO)总抗氧
化能力(T-AOC)，SOD，ALT，AST 试剂盒，南京建成
生物工程研究所提供。
1. 4 山芝麻提取 山芝麻饮片1 000 g，加 10 倍量
水提取 2 次，每次 1. 5 h，合并提取液，浓缩至 500 mL
(即相当于生药 2 g·mL －1)。
1. 5 动物分组给药及指标测定 60 只小鼠随机分
6 组，分别为正常对照组、CCl4 模型组、阳性对照组、
山芝麻低、中、高剂量组。对照组和模型组分别 ig
给予生理盐水 10 mL·kg －1;阳性对照组 ig 维生素
E(VitE)2. 5 g·kg －1;山芝麻低、中、高剂量组分别
ig给予山芝麻水提物按生药量计为 5，10，20 g·
kg －1;每天给药 1 次，连续 15 d。末次给药后 2 h，正
常组 ip等容量花生油，其余各组均 ip 0. 1% CCl4 花
生油溶液 10 mL·kg －1 1 次。禁食，自由饮水，16 h
后各组小鼠断头取血。以16 000 r·min －1离心 5
min，取血清，采用 OLYMPUS AU600 型全自动生化
分析仪测定 ALT，AST活性;采用分光光度法测定吸
光度 A后计算出 MDA 含量。同时取适量肝组织用
冰冷生理盐水冲洗，置冰浴中匀化制得 10% 肝匀
浆，以 4 000 r·min －1 离心 10min，取上清液测定
MDA，蛋白定量采用考马斯亮兰法，以牛血清白蛋白
为标准，具体步骤均按各试剂盒说明书操作;T-AOC
和 SOD活性用黄嘌呤氧化酶法测定，NO 含量用硝
酸还原酶法测定。
1. 6 统计学处理 数据以 珋x ± s 表示，统计学采用
SPSS软件，配对 t检验，P < 0. 05 为有统计学意义。
2 结果
2. 1 山芝麻对 CCl4 损伤小鼠血清 ALT，AST 活性
的影响 与 CCl4 模型组比较，山芝麻高、中剂量组
小鼠血清 ALT，AST 活性明显降低(P < 0. 05 或 P <
0. 01)，其抑制作用呈现剂量依赖关系。见表 1。
表 1 山芝麻对 CCl4 所致肝损伤小鼠
血清 ALT，AST活性的影响(珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
/ g·kg －1
ALT
/U·L －1
AST
/U·L －1
对照 － 53. 82 ± 12. 29 91. 31 ± 30. 94
CCl4 － 191. 11 ± 55. 46 175. 59 ± 47. 66
Vit E 2. 5 120. 97 ± 61. 841) 104. 96 ± 52. 431)
山芝麻 5 156. 49 ± 63. 78 151. 99 ± 44. 46
10 135. 33 ± 35. 681) 138. 19 ± 51. 751)
20 129. 21 ± 30. 12 2) 111. 73 ± 46. 971)
注:与 CCl4 模型组比较1)P < 0. 05，2)P < 0. 01(表 2，3 同)。
2. 2 山芝麻对 CCl4 肝损伤小鼠肝血清中 MDA，
SOD，T-AOC含量的影响 与肝损伤模型组比较，山
芝麻高、中剂量可显著降低 CCl4 肝损伤小鼠血清
MDA 含量、明显提高 SOD 活性(P < 0. 05 或 P <
0. 01)，且呈剂量相关性;山芝麻高剂量组则呈显著
性地增加肝组织中总抗氧化能力(P < 0. 05)。结果
见表 2。
表 2 山芝麻对 CCl4 肝损伤小鼠血清中MDA，SOD，T-AOC含量的影响(珋x ± s，n = 10)
组别 剂量 /mg·kg －1 MDA /nmol·mL －1 SOD /nU·mL －1 T-AOC /U·mL －1
对照 － 9. 66 ± 3. 05 356. 99 ± 91. 75 31. 22 ± 9. 98
CCl4 － 31. 89 ± 8. 17 166. 53 ± 88. 12 13. 75 ± 4. 13
VitE 2. 5 11. 37 ± 4. 261) 323. 45 ± 78. 292) 26. 91 ± 8. 641)
山芝麻 5 26. 35 ± 8. 72 177. 58 ± 69. 43 19. 52 ± 6. 69
10 19. 92 ± 7. 641) 246. 77 ± 72. 671) 21. 47 ± 7. 93
20 13. 11 ± 4. 622) 295. 18 ± 83. 96 2) 24. 76 ± 5. 961)
2. 3 对 CCl4 肝损伤小鼠肝组织 MDA，SOD，NO，
T-AOC 含量的影响 与 CCl4 肝损伤模型组比较，
山芝麻各剂量组小鼠肝组织 SOD 活性、T-AOC 含
量有不同程度地升高，而 MDA 含量、NO 水平则有
明显下降，上述作用呈现剂量依赖性。结果见
表 3。
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第 16 卷第 10 期
2010 年 8 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16，No. 10
Aug.，2010
表 3 山芝麻对 CCl4 肝损伤小鼠肝组织中MDA，SOD，NO，T-AOC含量的影响(珋x ± s，n = 10)
组别 剂量 /mg·kg －1 MDA /nmol·mg －1 SOD /nU·mg －1 T-AOC /U·mg －1 NO /μmol·g － 1
对照 － 3. 11 ± 0. 57 179. 86 ± 65. 33 4. 06 ± 0. 61 2. 27 ± 0. 53
CCl4 － 6. 69 ± 0. 38 73. 92 ± 31. 88 1. 18 ± 0. 43 3. 57 ± 0. 48
VitE 2. 5 3. 41 ± 0. 64 2) 121. 57 ± 42. 66 2) 3. 57 ± 0. 891) 1. 26 ± 0. 521)
山芝麻 5 4. 56 ± 0. 68 103. 46 ± 41. 591) 1. 75 ± 0. 83 2. 69 ± 0. 95
10 3. 96 ± 0. 411) 129. 97 ± 28. 68 2) 2. 36 ± 0. 73 2. 37 ± 0. 66
20 3. 82 ± 0. 32 2) 138. 39 ± 33. 17 2) 3. 18 ± 0. 771) 1. 50 ± 0. 511)
3 讨论
用 CCl4 诱导小鼠肝损伤，其致毒机制是 CCl4
经肝微粒体细胞色素 P450 代谢生成自由基(·CCl3)
攻击肝细胞膜上磷脂分子引起脂质过氧化，或与肝
微粒体脂质和蛋白质发生共价结合，破坏肝细胞膜
结构和功能的完整。当肝细胞被破坏、细胞通透性
增高及线粒体损伤时，ALT，AST 活性增高，并且
ALT，AST活性的高低变化与肝细胞受损的程度相
一致，因此，血清中的 ALT，AST 是用于诊断肝实质
肝损害的主要酶类。除此之外，用于评价肝脏脂质
过氧化损伤程度的指标还:MDA，SOD，T-AOC 和 NO
等，其中，MDA是不饱和脂肪酸过氧化作用的终产
物，可严重破坏细胞膜结构，导致细胞肿胀、坏死，它
在血清及组织中的含量高低，间接反映了机体细胞
受自由基攻击时组织的破坏程度;SOD 是动物体内
重要的抗氧化酶系，其作用是清除自由基和过氧化
物，从而降低脂质过氧化物的生成并加速其清除，减
少其对细胞和组织的损伤，有利于抗衰老和疾病的
防治［1］;T-AOC，即机体抗氧化防御体系的整体状
态，包括酶促和非酶促两个部分，前者主要包括超氧
化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、谷
胱甘肽转移酶等，后者如维生素 E、维生素 C、胡萝
卜素等，体内 T-AOC，SOD 活性越高，自由基清除速
度越快［2］;NO对肝细胞既有保护功能又有促进炎症
的双重作用，生理浓度时有免疫防御作用，在肝损伤
时由于有毒物质诱导 Kupffer 细胞、肝窦内皮细胞内
的 iNOS活性显著增高，由其诱导肝内巨噬细胞及一
些杀伤细胞产生的 NO明显增多，增多的 NO作为一
种重要细胞因子引起肝损伤，一方面通过抑制线粒
体的呼吸，使肝细胞因能量缺乏或产生大量的自由
基而死亡，另一方面还原型 NO 能与超氧阴离子作
用形成过氧亚硝酸阴离子(ONOO －)，ONOO －与其
分解产物羟自由基(OH －)能引起组织细胞酯质过
氧化和细胞毒性，从而对肝细胞造成损伤。
本实验研究显示，山芝麻可明显下调 CCl4 肝损
伤小鼠血清 ALT，AST活性，显著降低血清和肝组织
中 MDA的含量以及增加 SOD，T-AOC 的活性，且呈
剂量相关性，同时能明显改善肝脏组织结构的病理
损害，提示山芝麻对化学性肝损害具有一定的保护
作用，其机制可能是通过增加 SOD，T-AOC 的活性，
加快体内自由基的清除，从而抑制 MDA 的生成，保
护细胞免受过氧化损伤。而对 NO 含量检测则表
明，模型组小鼠肝组织中 NO 含量明显增加，而山芝
麻组肝组织中的 NO 含量呈剂量相关性下降，表明
山芝麻干预 CCl4 肝损伤还可能通过抑制 NO生成而
起到保护肝组织的作用。
［参考文献］
［1］ 周青，周俐，许庆林，等. 佛甲草抗佛质过氧化作用的
实验研究［J］.中国医药发展论坛，2002，1(1):2.
［2］ 李龙，雷泽林，赵晋，等. 结核性胸膜炎患者 DNA 氧化
损伤和脂质过氧化的研究［J］. 中华结核和呼吸杂志，
2003，26 (12):781.
［责任编辑 聂淑琴］
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第 16 卷第 10 期
2010 年 8 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16，No. 10
Aug.，2010