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白饭树提取物抗炎镇痛作用研究



全 文 :白饭树提取物抗炎镇痛作用研究
梁业飞1 周有旺2
(1 广西钦州市第一人民医院药剂科,钦州市 535000;2 广西百色市人民医院药学部,百色市 533000)
【摘要】 目的 探讨白饭树提取物的镇痛抗炎作用。方法 选用昆明种小鼠 360 只,每个实验选取 60 只小鼠,按随
机数字表法分为空白组(生理盐水)、阳性对照组、实验组。实验组小鼠分别给予 0. 2 mL /g的白饭树提取物灌胃,连续给药
7 d。用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、冰醋酸致痛,采用小鼠棉球肉芽肿模型、热板法,观察白饭树提取物的抗炎镇痛作用。
结果 白饭树醇提物及水提物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、冰醋酸致小鼠扭体、小鼠棉球肉芽肿、热致痛具有抑制作用,高剂
量的白饭树醇提物、水提物达到地塞米松、罗痛定的抗炎、镇痛水平。结论 白饭树提取物具有抗炎镇痛作用,值得进一步
研究开发。
【关键词】 白饭树;醇提物;水提物;镇痛;抗炎
【中图分类号】 R 248. 1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1673-7768(2015)06-0845-03
DOI:10. 16121 / j. cnki. cn45-1347 /r. 2015. 06. 29
白饭树来源为大戟科植物白饭树(Flueggea virosa
Baill)的干燥全草,分布于我国东南及西南地区,广西各
地均有分布,民间多随用随采;其味苦、微涩、性凉,具有
清热解毒、消肿止痛、止痒止血之功效。其外用可治疗
水痘、过敏性皮炎、湿疹、脓疱疮、疮疖和烧烫伤等[1 - 2]。
民间也有用于治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎以及
相关疾病的报道[3]。笔者采用不同溶剂提取了白饭树
全株的有效成分,并对不同提取物的抗炎、镇痛作用进
行了实验研究,旨在为白饭树的开发研究提供参考依
据。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 仪器与试剂 YLS-6A智能热板仪(张家港市青
松生物医学仪器有限公司),白饭树(F. virosa),采于广
西武鸣县腾翔,经广西汇科药物研究所工程师廖厚知鉴
定。醋酸、地塞米松(上海皇象铁力蓝天制药有限公司,
生产批号:13051724),硫喷妥钠(上海新亚制药厂,生产
批号:871201-03),冰醋酸为分析纯。
1. 1. 2 实验动物 小白鼠 360 只。由广西医科大学实
验动物中心提供,合格证号 SCXK(桂)2013-0001,体重
20 ~ 22 g,于(20 ± 2)℃,12 h光 /暗条件下饲养。
1. 1. 3 提取物的制备 (1)白饭树水提取物的制备:取
白饭树药材 3 000 g,用 10 倍、8 倍蒸馏水煎煮 2 次,
1 h /次,合并煎煮液,浓缩至稠膏。取适量提取物加入
水溶解,配制成 100 g /L(低剂量)、200 g /L 溶液(高剂
量)。(2)白饭树醇提取物的制备:取白饭树药材
3 000 g,用 10 倍 70% 乙醇溶液加热回流提取 2 次,
1 h /次,滤过,合并滤液、浓缩、干燥。取适量提取物加
入水溶解,配制成 100 g /L(低剂量)、200 g /L(低剂量)
溶液。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 白饭树提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影
响[4] 随机选取体重 20 ~ 22 g 的健康小白鼠 60 只,雌
雄各半,按随机数字表法分为 6 组,即空白对照组、阳性
对照组(地塞米松组)、实验组(白饭树低剂量水提取物
组、白饭树高剂量水提取物组、白饭树低剂量乙醇提取
物组、白饭树高剂量乙醇提取物组),每组 10 只。每日
给小鼠灌胃 2 次,每次灌胃 0. 2 mL /g,连续给药 7 d,末
次给药 30 min 后,于小鼠右耳两面均匀涂抹二甲苯
0. 1 mL致炎,同时留取左耳不涂抹二甲苯为正常对照,
1 h后颈椎脱臼处死,用圆形打孔器在左右耳同一部位
打下圆形耳片,精密称量,计算左右耳质量(mg)差值即
为肿胀度,并计算肿胀抑制率。肿胀抑制率 =(空白组
平均肿胀度 -处理组平均肿胀度)/空白组平均肿胀度
× 100%。
1. 2. 2 白饭树提取物对冰醋酸致小鼠扭体反应的影
响[4] 随机抽取体重 20 ~ 22 g 的健康小白鼠 60 只,雌
雄各半,按随机数字表法分为 6 组,即空白对照组(生理
盐水组)、阳性对照组 (0. 2%罗痛定组)、实验组(白饭
树低剂量水提取物组、白饭树高剂量水提取物组、白饭
树低剂量乙醇提取物组、白饭树高剂量乙醇提取物组),
每组 10 只。每日给小鼠灌胃 2 次,每次灌胃0. 2 mL /g,
连续给药 7 d,于末次给药 60 min后,各小鼠分别腹腔注
射 0. 5%冰醋酸(10 mL /g)(冰醋酸溶液为临用前配
制) ,观察并记录小鼠在 15 min 内出现的扭体(抬高臀
部、腹部收缩、蠕行、伸展后肢)次数,计算镇痛抑制率。
镇痛抑制率 =(空白对照组小鼠扭体次数 -处理组小鼠
扭体次数)/空白对照组扭体次数 × 100%。
1. 2. 3 白饭树提取物对小鼠棉球肉芽肿胀的影响[4]
随机选取健康小白鼠,体重 20 ~ 22 g,60 只,雌雄各半,
按随机数字表法分为 6 组,即空白对照组、阳性对照组
548内 科 2015 年 12 月 第 10 卷 第 6 期
(地塞米松组)、实验组(白饭树低剂量水提取物组、白
饭树高剂量水提取物组、白饭树低剂量乙醇提取物组、
白饭树高剂量乙醇提取物组),每组 10 只。各组小鼠用
乙醚麻醉,于无菌操作下,在小鼠两腋窝(剃毛消毒)各
切 1 cm 长小口,用镊子在左右腋窝各植入 1 枚高温灭
菌消毒棉球(10 mg /只),缝合。从植入次日起,每日给
予小鼠灌胃 2 次,每次灌胃 0. 2 mL /g,连续给药 7 d,于
末次给药 1 h后,处死小鼠,取出棉球,放烘箱中置 60℃
干燥 12 h,精密称定,该重量减去棉球重量即为肉芽肿
净重。肿胀抑制率 =(空白组肉芽肿平均净重 -处理组
肉芽肿平均净重)/空白组平均净重 × 100%。
1. 2. 4 白饭树提取物对小鼠热板反应的影响[4] 随机
选取体重 20 ~ 22 g的健康小白鼠 60 只,雌雄各半,按随
机数字表法分为 6 组,即空白对照组(生理盐水),阳性
对照组(0. 2%罗痛定组),实验组(白饭树低剂量水提取
物组、白饭树高剂量水提取物组、白饭树低剂量乙醇提
取物组、白饭树高剂量乙醇提取物组),每组 10 只。每
日给小鼠灌胃 2 次,每次灌胃 0. 2 mL /g,连续给药 7 d,
于末次给药后(0 min、30 min、60 min、90 min、120 min),
分别将小鼠置于(55 ± 0. 5)℃的热板上,用秒表记录小
鼠自投入热板至出现舔后足的时间(第 1 次舔足时间,
s)作为该鼠的痛阈值,若 60 s 内无舔足,则立即将小鼠
取出,以免烫伤小鼠。
1. 3 统计学处理 采用 SPSS 17. 0 统计学软件包进行
数据分析,计量数据以 x ± s 表示,组间比较采用 F 检
验,重复测量资料采用重复测量方差分析,以 P < 0. 05
为差异具有统计学意义。
2 结 果
2. 1 白饭树提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影
响 与空白对照组比较,地塞米松组(阳性对照组)、实
验各小组的肿胀度均明显降低,肿胀抑制率明显升高
(P < 0. 05);高剂量的醇提取物组、水提取物组与地塞米
松组肿胀度、肿胀抑制率比较,差异无统计学意义
(P > 0. 05)。见表 1。
表 1 白饭树提取物对二甲苯致小鼠耳廓
肿胀的影响 (n,x ± s)
组别 n
剂量
(g /kg)
肿胀度
(mg)
肿胀抑制率
(x ± s)%
空白对照组 10 - 3. 91 ± 0. 92 35. 86 ± 8. 49
地塞米松组 10 0. 003 0. 97 ± 0. 23* # 75. 41 ± 12. 35* #
醇提取物组 10 20 1. 32 ± 0. 44* # 66. 37 ± 10. 30* #
10 40 1. 04 ± 0. 71* # 73. 51 ± 13. 57* #
水提取物组 10 20 2. 10 ± 0. 83* 56. 61 ± 9. 73*
10 40 1. 18 ± 0. 85* # 70. 45 ± 15. 34* #
F值 18. 110 14. 864
P值 0. 000 0. 000
注:与空白对照组比较,* P < 0. 05;与低剂量水提取物组
比较,#P < 0. 05。
2. 2 白饭树提取物对冰醋酸所致小鼠扭体反应的影
响 与空白对照组(生理盐水组)比较,罗痛定组(阳性
对照组)、实验组各小组均能降低小鼠扭体次数、提高扭
体反应抑制率(P < 0. 05)。实验组中,高剂量的醇提取
物组、水提取物小组小鼠扭体次数、扭体反应抑制率,与
罗痛定组比较差异无统计学意义(P > 0. 05)。见表 2。
表 2 白饭树提取物对冰醋酸所致小鼠
扭体反应的影响 (n,x ± s)
组别 n
剂量
(g /kg)
扭体反应
(次)
扭体反应
抑制率(%)
空白对照组 10 - 26. 2 ± 9. 42 15. 37 ± 4. 82
罗痛定组 10 0. 2 4. 9 ± 1. 91* 81. 53 ± 16. 47*
醇提取物组 10 20 9. 1 ± 3. 23* 65. 79 ± 10. 27*
10 40 6. 3 ± 2. 40* 76. 54 ± 13. 53*
水提取物组 10 20 9. 7 ± 3. 98* 63. 75 ± 11. 48*
10 40 7. 5 ± 3. 91* 71. 38 ± 14. 41*
F值 17. 140 15. 078
P值 0. 000 0. 000
注:与空白对照组组比较,* P < 0. 05。
2. 3 白饭树提取物对小鼠棉球肉芽肿肿胀的影响 与
空白对照组(生理盐水组)比较,地塞米松组(阳性对照
组)、实验各小组小鼠 肉 芽 肿 干 质 量 明 显 降 低
(P < 0. 05),高剂量的醇提取物组、水提取物组与地塞米
松组比较差异无统计学意义(P > 0. 05),见表 3。
表 3 白饭树提取物对小鼠棉球
肉芽肿的影响 (n,x ± s)
组别 n 剂量(g /kg) 肉芽肿干质量(mg)
空白对照组 10 - 138. 84 ± 47. 21
地塞米松组 10 0. 03 29. 01 ± 7. 12*
醇提取物组 10 20 45. 31 ± 5. 84* #
10 40 33. 22 ± 6. 87*
水提取物组 10 20 49. 17 ± 7. 91* #
10 40 37. 82 ± 6. 17*
F值 41. 928
P值 0. 000
注:与空白对照组比较,* P < 0. 05;与地塞米松组比较,
#P < 0. 05。
2. 4 白饭树提取物对小鼠热板反应的影响 给药后小
鼠痛 阈 值 组 间 比 较,差 异 有 统 计 学 意 义 (F 组
间 = 5. 894,P < 0. 001),罗痛定组(阳性对照组)、各实
验小组小鼠痛阈值均高于空白对照组(P < 0. 05),而各
实验小组间比较差异无统计学意义(P > 0. 05)。各组小
鼠在不同时间点上的痛阈值有差异(F 时间 = 5. 894,
P < 0. 001),给药后 30 min,罗痛定组(阳性对照组)、低
剂量的醇提取物组小鼠痛阈值明显提高(P < 0. 05),且
稳定至 90 min;高剂量的醇提取物组、水提取物小组小
鼠痛阈值随时间延长而提高(P < 0. 05)。时间与药物不
648 Internal Medicine of China,Dec. 2015,Vol. 10,No. 6
存在交互效应(F交互 = 0. 318,P = 0. 759)。见表 4。
表 4 白饭树提取物对小鼠热板反应的影响 (扭体法,n,x ± s)
组别 n 剂量(g /kg)
给药后痛阈值 / s
0 min 30 min 60 min 90 min
空白对照组 10 - 15. 2 ± 3. 6 15. 8 ± 4. 3 15. 5 ± 5. 3 15. 4 ± 6. 1
罗痛定组 10 0. 2 15. 6 ± 4. 0 43. 7 ± 10. 5* 44. 8 ± 9. 3* 45. 1 ± 8. 8*
醇提取物组 10 20 15. 2 ± 1. 7 23. 5 ± 8. 3* 27. 2 ± 6. 8* 26. 4 ± 6. 1*
10 40 15. 1 ± 5. 2 27. 8 ± 5. 3* 38. 5 ± 6. 2* 38. 4 ± 8. 3*
水提取物组 10 20 15. 6 ± 3. 7 19. 2 ± 5. 9 20. 4 ± 6. 1 19. 9 ± 7. 7
10 40 15. 2 ± 3. 4 25. 8 ± 7. 5* 34. 5 ± 7. 0* 35. 4 ± 8. 2*
注:与空白对照组比较,* P < 0. 05。
3 讨 论
目前对白饭树的药理研究不多,相关应用也只限于
民间,民间在白饭树的用途上多外用于治疗烧、烫伤,湿
疹,溢脂性皮炎等皮肤相关病症,且单方用药即可取得
良好的疗效。有关白饭树的相关文献报道较少。白饭
树茎叶中含有 1l-O-乙酰岩白菜素、岩白菜素、右旋一叶
楸碱、山柰酚、槲皮素、没食子酸、胡萝卜苷[5];根茎中含
有有毒 - 叶荻碱、降 - 叶荻碱、白饭树醚碱、算盘子酮
醇[6]。相关药理研究结果显示,白饭树提取物作用于小
白鼠的急性毒性实验中未发现中毒情况,提示其安全范
围较广[3];白饭树对心血管[7]、关节炎亦有治疗作用[8]。
本实验用水、70%乙醇为溶媒提取白饭树有效成分,并
进行抗炎和镇痛实验。通过采用化学药物致小鼠耳肿
胀的急性炎症模型和棉球肉芽肿胀的小鼠慢性炎症模
型,观察了白饭树提取液对炎症的影响;采用热板法和
冰醋酸法对小鼠进行镇痛试验。结果显示,不同浓度的
白饭树醇提取液、水提液均可减轻炎症和抑制致炎剂引
起的急性炎症及慢性炎症反应,热板法及冰醋酸法镇痛
试验结果显示白饭树对疼痛具有减轻和抑制作用,且高
剂量比低剂量效果更显著,与地塞米松、罗痛定的抗炎、
镇痛作用相当,提示水、70%乙醇两种溶剂提取的物质
都有抗炎、镇痛的作用,值得深入研究。
参 考 文 献
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