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大叶碎米荠的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第2期,2006年4月256
收稿 2005-08-03修定  2006-01-20
*通讯作者(E-mail: wentao@sicau.edu.cn, Tel: 0835-
2885793)。
大叶碎米荠的组织培养和快速繁殖
张宇 文涛* 梁莉 丰先红
四川农业大学农学院,四川雅安625014
Tissue Culture and Rapid Propagation of Cardamine macrophylla Willd
ZHANG Yu, WEN Tao*, LIANG Li, FENG Xian-Hong
College of Agronomy, Sichuan Agricultural University, Yaan, Sichuan 625014, China
1植物名称 大叶碎米荠(Cardamine macrophylla
Willd)。
2材料类别 茎尖叶片。
3培养条件 培养基为:(1) MS+NAA 1.0 mg·L-1 (单
位下同)+KT 1.0+2,4-D 0.1;(2) MS+NAA 2.0+KT
2.0+2,4-D 0.5;(3) MS+6-BA 1.0+KT 1.0+2,4-D
0.5;(4) MS+6-BA 2.0+KT 2.0+2,4-D 0.1;(5)
MS+6-BA 2.0+NAA 2.0+KT 1.0;(6) 1/2MS+IBA
1.0+活性炭 1.0 g·L-1。培养基均加30 g·L-1蔗糖和
6 g·L-1琼脂,pH 5.8。置于日光灯下培养,光照
时间12 h·d-1 ,光强约为30 mmol·m-2·s-1,培养温
度为25℃左右。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取大叶碎米荠上的茎尖幼叶,
清水冲洗3 h,4℃低温处理12 h,75%酒精浸
泡7 s,无菌水冲洗4次,0.1%氯化汞溶液浸泡
消毒6 min,无菌水冲洗4次,再将叶片剪成0.5
cm×0.5 cm的方块,叶面朝上摆放。
4.2 叶片愈伤诱导 接种后4 d,培养基(1)首先出
现愈伤组织,呈现淡绿色。培养基(2)、(3)、(5)
上都诱导形成愈伤组织,(2)、(3)上叶片带有黄
色,诱导率分别为41.6%、19%;培养基(5)叶
片卷曲, 部分枯黄,诱导率为22.7%。诱导愈伤
组织较理想的培养基为(1),诱导率为86.3%。
4.3 丛生苗诱导 丛生苗诱导速度较慢,接种后1.5
个月,培养基(4)、(3)、(5)相继出现丛生苗。培
养基(4)率先出现丛生苗,叶片先逐渐变厚、变
宽,体积为接种时的10倍左右,最后分化出颜
色鲜绿的丛生苗,诱导率高达71.4%;培养基
(3)、(5)在接种几天后就出现白色半透明的愈伤组
织,在(4)上丛生苗出现后10 d也分化出丛生苗,
诱导率分别为13.6%、18.1%。诱导丛生苗较理
想的培养基为(4)。
4.4 生根与试管苗移栽 将丛生苗分单株插入生根
培养基(6),15 d后出现不定根,生根率达到82.6%。
当根长度不小于1 cm时,打开封口膜,瓶内炼苗
3 d,然后把试管苗从瓶内取出,用清水洗去根
部培养基,将无菌小苗移栽入营养杯中。扶正小
苗,使苗根尽量舒展,用混合营养土将根盖住。
营养土配方为腐质土∶蛭石∶珍珠岩=3∶1∶
1。将其放入光照培养箱,温度25~28℃,光强
约为30 mmol·m-2·s-1。经过14 d的炼苗,有新叶
长出,根毛增多,小苗显得非常健壮。
5 意义与进展 大叶碎米荠是十字花科碎米荠属植
物,是一种生长在海拔2000~4200 m的野生蔬
菜,全草药用,利小便、止痛及治败血病;嫩
苗可食用,亦为良好的饲料。在自然条件下,大
叶碎米荠种子属短命种子,主要靠营养繁殖。由
于分布只限于高海拔区,在低海拔地区驯化移栽
时,用根繁殖常有退化现象。采用组织培养技
术,可能有助于问题的解决。大叶碎米荠的组织
培养和快速繁殖尚未见报道。
DOI:10.13592/j.cnki.ppj.2006.02.027