全 文 ：关系，证明了氨磺必利是一种安全、有效的非典型抗精神病
药。通过对氨磺必利的血药浓度监测，可以根据血药浓度及
时调整剂量，增加疗效。但由于本研究样本数量较小、样本来
源单一、观察时间较短、未考虑 CYP3A4 酶代谢的影响〔11〕，本
研究仍存在一定的缺陷。这有待于今后大样本多中心的临床
对照研究，避免酶诱导或酶抑制作用引起的个体差异性，进一
步展开群体性的临床药代动力学和药效学的研究。
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·实验研究·
千根草粗取物体外抑菌活性部位的筛选研究
王红刚，潘秋婷，梁斯婷(广东药学院中药学院 广州 510006)
摘要:目的 以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变异链球菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌为试验菌株研究千根草的体外抑菌活性。方法 通过
K-B纸片扩散法及利用连续( 试管) 稀释法对 70%醇提物，水层、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚相萃取物测定抑菌活性。结果 总提物对金黄色葡
萄球菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌的最低抑菌浓度( MIC) 为 25. 00g·L －1。粗分部位中，乙酸乙酯相萃取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、
绿脓杆菌、痢疾杆菌抑菌活性最好，其最低抑菌浓度分别为 25、12. 5、3. 13、25g·L －1，水层无抑菌活性。结论 千根草的抑菌活性成分主要存
在于乙酸乙酯萃取相中。
关键词:千根草;体外抑菌; 有效部位
中图分类号:Ｒ282. 71;Ｒ927. 2 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2014)-02-1059-0147-03
作者简介:王红刚，男 (1980. 9 －)。毕业于中国药科大学。职称:高级实验师。联系电话:020 － 39352182
项目来源:广州市科技计划(2012KP030)
Studies on the antibacterial effect of extracts from euphorbia thymifolia in
Vitro
WANG Hong-gang，PAN Qiu-ting，LIANG Si-ting (Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou
51006，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To study on antibacterial activities of crude extracts from Euphorbia thymifolia in
Vitro，with staphylococcus aureus，Escherichia coli，Streptococcus mutans，Pseudomonas aeruginosa，Salmonella typhi，
Shigella dysenteriae as tested strains. METHODS The antibacterial activities of crude extracts from Euphorbia thy-
mifolia in Vitro on 4 tested strains were investigated by the disc diffusion method and serial dilution meth-
·741·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 26 No. 2 2014
od. ＲESULTS MIC of staphylococcus aureus，Pseudomonas aeruginosa，Salmonella typhi，Shigella dysenteriae to
the 70% ethanol extract were 25、12. 5、3. 13、25g·L －1，respectively. In the concentrated extracts Ethyl acetate ex-
traction phases were provided with stronger antibacterial activities against tested strains than other extraction phases，
MIC of staphylococcus aureus，Escherichia coli，Pseudomonas aeruginosa，Shigella dysenteriae to which were 25、
12. 5、3. 13、25g·L －1. Water phases were not provided with any antibacterial activities. CONCLUSION Active in-
gredients of Euphorbia thymifolia mainly existed in Ethyl acetate phases.
KEY WOＲDS:Euphorbia thymifolial;Antibacterial;Active ingredients
千根草又名小飞扬草，为大戟科大戟属植物千根草 Eu-
phorbia thymifolia L. 的全草(见图 1)，分布于广东、广西、云
南、江西和福建。作为民间草药〔1〕，主要收录在一些地方志
或者地方中药手册中。千根草药用全草，味微酸、涩，性微凉，
具有清热利湿，消肿解毒，收敛止痒等功效，内服治疟疾，泄
泻，乳痈，痔疮，外用治湿疹，过敏性皮炎，皮肤瘙痒〔2〕。前
人〔3，4〕从其全草中从其地上部分分离得到一些具有抗病毒活
性黄酮类化合物。另外，实验研究证明〔4，5〕，其全草的粗取物
具有抗氧化，抗病毒活性，抗高血糖及镇痛等作用，都值得值
得进一步研究。由于千根草本草记载可以用于治疗痢疾，泄
泻等，乳痈，痔疮等作用，故推测其具有抑菌能力。本课题结
合中药提取的传统方法，对千根草体外抑菌有效部位的进行
研究，寻找千根草中抑菌作用的药效物质。
图 1 千根草
1 试验材料
1. 1 药材 2012 年 11 月购于广州市清平中药材市场，经过
广东药学院中药学院刘基柱教授鉴定，为大戟科(Euphorbi-
aceae)大戟属植物千根草(Euphorbia thymifolia L. )全草。药
材经粉碎后，阴凉干燥条件下保存，备用。
1. 2 菌种 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变异链球菌、绿脓杆
菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌均由广东药学院基础学院微生物教研
室提供。
2 方法与结果
2. 1 样品制备 ①千根草总体物的制备:取千根草粉末
200g，用 70%乙醇加热回流提取 2 次，第一次用 8 倍量提取
3h，第二次用 6 倍量提取 2h，合并提取液浓缩成浸膏。取一
半量作为总提物样品，分别用 70%乙醇配成质量浓度为 250g
·L －1(按原生药材重量计算)、500g·L －1、1000g·L －1的供
试药液各 10mL。另外，用 DMSO以同样方法配制质量浓度为
500g·L －1的供试药液各 10mL，备用。②四部位萃取物的制
备:取①项中剩余的一半浸膏用蒸馏水混悬分散后，依次用石
油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，等体积萃取 3 次，各
部分萃取液合并后，减压回收至干，分别得到得到石油醚、乙
酸乙酯、正丁醇、水层四部位浸膏，分别用原萃取容积配成质
量浓度为 250g·L －1(按原生药材重量计算)、500g·L －1、
1000g·L －1的供试药液各 10mL。另外，将各部分浸膏分别用
DMSO以同样方法配制质量浓度为 500g·L －1的供试药液各
10mL，备用。③菌液制备:将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、痢
疾杆菌、绿脓杆菌、变异链球菌、伤寒杆菌分别接种于普通肉
汤培养液中，37℃恒温培养 18 ～ 24h，用无菌生理盐水稀释，
用紫外分光光度计在波长 650nm(生理盐水参照调零)下调
至 0. 098，代表此时浓度约为 1 × 108 cfu·mL －1，再用生理盐
水 1∶10 稀释，此时菌浓度约为 1 × 107 cfu·mL －1。
2. 2 千根草体外抑菌实验 ①K-B纸片扩散法抑菌试验:取
上述“2. 1①”和“2. 1②”项中配制的 15 个用原提取溶剂溶解
的不同样品及浓度的供试液各 10mL，将 120℃干热灭菌 2h的
圆形滤纸片(直径 6mm)置供试液中浸泡 2h，取出挥干溶剂。
于备好的普通琼脂平板表面平涂一层试验菌液，用无菌小镊
子将药纸片轻置其上，每个普通琼脂平板表面贴同种样品的
浓度为 250g·L －1、500g·L －1、1000g·L －1的 3 个药敏纸片，
各纸片间距相当，在培养皿盖上标记浓度及菌种，37℃恒温箱
中培养 24h后观察并测量抑菌环直径，每种菌做 5 个平行试
验，取平均值，每个菌种设 1 个空白对照以及阴性对照(见表
1)。
结果表明，千根草提取物及各部位均对变异链球菌无抑
菌活性，千根草总提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、伤寒
杆菌、痢疾杆菌的抑菌圈均大于 10mm，故对这 4 种菌均有中
敏抑菌活性;水层部位对 6 种受试菌均无抑菌活性。正丁醇
萃取物对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌有抑菌活性;乙酸乙酯萃
取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌有中
敏的抑制活性;石油醚萃取物对金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌
有一定的抑菌作用。
②药物最小抑菌浓度(MIC)的测定:我们对有①项试验
中有抑菌活性的相关样品及菌种采用试管连续稀释法测定其
MIC，取灭菌具塞试管 10 支，编号，排列在试管架上。于第一
支管先加入无菌肉汤培养基 3. 6mL，剩余试管加入无菌肉汤
2mL，然后于第一管中加入灭菌的 DMSO 作溶剂质量浓度
·841·
海峡药学 2014 年 第 26 卷 第 2 期
500g·L －1的药液 0. 4mL，混匀后取出 2. 0mL 放入第二管中，
依次类推至第八管，配成含中药提取物分别为 1∶10，1∶ 20，1∶
40，1∶80，1∶160，1∶ 320，1∶ 640，1∶ 1280 各种浓度的液体，然后向
各试管中加入接种好受试菌液 0. 1mL。其中，第九支试管加
受试菌液不加药液作为阳性对照，第十支试管中加药液液但
不加受试菌液作为阴性对照，混匀后一起放入 37℃生化培养
箱中培养 24h观察结果。若肉汤混浊，表示细菌生长，若肉汤
完全清亮，表示无细菌生长。将未生长细菌的肉汤转种到琼
脂平板上，仍无细菌生长，表示该管药量就是受试中药的
MIC，记录结果(见表 2)。
表 1 千根草总提物及各部位纸片法抑菌圈直径 (mm)
菌株
总提物(g·L －1) 正丁醇(g·L －1) 乙酸乙酯(g·L －1) 石油醚(g·L －1)
1000 500 250 1000 500 250 1000 500 250 1000 500 250
金黄色葡萄球菌 11 10 9 11 － － 11 10 － 11 10 －
大肠杆菌 － － － － － － 11 10 － － － －
绿脓杆菌 11 10 10 － － － 12. 5 10 9 － － －
痢疾杆菌 10 9 8 9 8 8 12 － － 10 8 －
伤寒杆菌 12 11 8 － － － － － － － － －
变异链球菌 － － － － － － － － － － － －
表 2 千根草总提物及各部位试管法最小抑菌浓度
菌株
总提物
(g·L －1)
正丁醇
(g·L －1)
乙酸乙酯
(g·L －1)
石油醚
(g·L －1)
金黄色葡萄球菌 25 25 25 25
大肠杆菌 － － 12. 5 －
绿脓杆菌 25 － 3. 13 －
痢疾杆菌 25 3. 13 25 50
伤寒杆菌 25 － － －
实验结果表明，总提物对对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、
伤寒杆菌、痢疾杆菌的最低 MIC 为 25. 00g·L －1。正丁醇萃
取物(B)对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌的最低抑菌浓度分别
为 25. 00、3. 13g·L －1。乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌、
痢疾杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌的最低抑菌浓度分别为 25、
12. 5、3. 13、25g·L －1，石油醚萃取物对金黄色葡萄球菌、痢疾
杆菌的最低抑菌质量浓度分别为 25、50g·L －1。实验结果基
本上与纸片法的实验结果相吻合。
4 讨论
中草药的抑菌药敏等级目前尚无统一标准，参照抗生素
的相应药敏标准可分为高敏、中敏、轻敏或耐药 4 级〔6〕，即抑
菌环直径大于 20mm 为高敏，10 ～ 20mm 为中敏，小于 10mm
为耐药。本试验结果表明，千根草醇提物、乙酸乙酯、石油醚
和正丁醇萃取物均具有抑菌活性，抑菌活性大小顺序依次为:
乙酸乙酯、石油醚、正丁醇、水层。这与传统中医认为的，千根
草有清热利湿，消肿解毒等功效及其可以治疗疟疾、泄泻等作
用的说法基本吻合。
通过实验可以看出，千根草的的抑菌活性部位为乙酸乙
酯、石油醚、正丁醇 3 个部位，而乙酸乙酯部位为其主要的抑
菌活性部位，因此对于其抑菌活性成分的研究应主要集中于
此部位，应进一步的深入研究。
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350-351.
·更正·
本刊 2013 年第 12 期第 137 页刊载张燕峰“尼莫地平治疗急性颅脑损伤患者的疗效及心
电图分析”一文，作如下更正:“江苏吴江区第一人民医院心电图室”应改为“江苏省苏州市吴
江区第一人民医院心电图室”;摘要结果“……对照组共 5 例患者出现了明显不良反应”应改
为“……观察组共 5 例患者出现了明显不良反应”;文中结果 2． 1 两组治疗效果的比较“对照
组治疗的总有效率明显高于观察组”应改为“观察组治疗的总有效率明显高于对照组”;讨论
中倒数第二段“本实验观察结果显示对照组治疗的效果明显优于观察组”应该为“本实验观
察结果显示观察组治疗的效果明显优于对照组”。特向作者致歉。
《海峡药学》编辑部
·941·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 26 No. 2 2014