全 文 ：鬼灯檠的体外抑菌及急性毒性试验
张东佳 1 , 杨永建 1 , 史彦斌1 , 白玉德 2
(1.兰州大学药学院 ,甘肃 兰州 730000;2.甘肃天水岐黄药业有限责任公司 ,甘肃 天水 741000)
收稿日期:2004-03-19
基金项目:甘肃省自然基金(ZS021-A25-051-N)
作者简介:张东佳(1976～ ),在读硕士 ,研究方向:药用植物资源的开发与利用。电话:013919283523。 Email:djz80112@sohu.com
关键词:鬼灯檠;岩白菜素;体外抑菌;急性毒性
摘要:目的:探讨鬼灯檠的体外抑菌作用和急性毒性。方法:用杯碟法研究鬼灯檠不同溶剂提取物的体外抑菌作用;采用
常规的急性毒性实验方法 , 对鬼灯檠的丙酮提取物和乙酸乙酯提取物的急性毒性进行评价。结果:鬼灯檠对实验所用的
细胞均有作用 , 其中丙酮提取物和乙酸乙酯提取物的抑菌效果最显著 , 其 LD50分别为:(7.200±1.841)g· kg-1;(9.215
±2.574)g· kg-1。结论:鬼灯檠有明显的体外抑菌作用 ,且毒性小。
中图分类号:R285.5 文献标识码:B 文章编号:1001-1528(2005)05-0604-02
鬼灯檠(RodgersiaaesculifoliaBatal.),又名七叶鬼灯檠 ,
系虎耳草科(Saxifragaceae)鬼灯檠属植物 , 以其根茎入药 , 具
有清热化湿 , 止血生肌之功用。 主治湿热下痢 , 久泻 , 白浊 ,
带下 , 崩漏 ,衄血 , 吐血 , 便血 , 疮毒 , 金疮 [ 1] 。本品广泛分布
于我国西部地区 , 多为民间使用 , 其主要有效成分为岩白菜
素(Bergenin)。近年研究发现鬼灯檠具有广谱的抗病毒作
用 , 尤其是对单纯疱疹病毒及柯萨奇病毒有较强的杀灭和抑
制作用 , 同时杀灭病毒后细胞仍有继续传代 [ 2] 。为了解该药
不同溶剂提取物的抑菌活性 , 我们用杯碟法对此进行了试
验 , 并对其安全性进行评价 ,现予以报道。
1 实验材料
1.1 药物 鬼灯檠根茎(饮片), 购自兰州黄河药材市场 ,
经兰州医学院生药药用植物教研室杨永建教授鉴定为
RodgersiaaesculifoliaBatal.
1.2 菌种 肺炎克雷伯氏菌 (C46101), 肺炎链球菌
(C55150), 金黄色葡萄球菌(C56001), 沙门氏菌(C50329),
支气管博德特氏菌(C58401),副溶血嗜血杆菌(C58602), 大
肠杆菌(C84008), 绿脓杆菌(C85109), 丹毒杆菌(C52322),
上述菌种由中国药品生物制品检定所提供。
1.3 培养基
1.3.1 水解酪蛋白琼脂:制备时取本品 36 g, 加入 1000 mL
蒸馏水中 , 加热至全部溶解 , 于 115 °C、 120 min灭菌 , 冷却
至 60°C左右时倾注于无菌平皿中 , 调 pH至 7.4±0.2即可。
1.3.2 血平皿:按 1 ～ 2 将无菌脱纤维羊血加入上述溶
液 , 摇匀后按上述操作即可。将普通营养琼脂培养基础上高
压消毒后 , 冷却至 56 °C时加上 1 ～ 2 无菌脱纤维绵羊血
混匀 , 到入培养皿中即得。
1.4 实验动物 昆明种小鼠 , ♀♂各半 , 体重 18 ～ 22 g(中
国生物制品集团兰州生物制品研究所提供 , 合格证号:医动
字第 14-001号),适应饲养 7 d后作用。
2 实验方法
2.1 抑菌实验
2.1.1 药液的制备 各称取药材粉末 20 g,分别用 3倍体
积的乙酸乙酯 、丙酮 、95 乙醇 、甲醇于索氏提取器中回流提
取 4h,然后蒸干溶剂 ,用丙酮定溶至 20 mL, 备用;取药材粉
末 20 g,用 3倍体积 1 盐酸 、蒸馏水分别煎煮 , 过滤 , 用 1
NaOH调 pH至中性 ,浓缩至 20 mL, 备用。上述 6种药物浓
度则为 1g· mL-1。 (按生药量折算)
2.1.2 抑菌试验 [ 3] 取 70个不锈钢钢管(D=0.6 cm),高
压灭菌后按此法操作即可。丙酮为空白对照。 37 °C培养 24
h观察测量抑菌圈直径。
2.2 急性毒性实验
2.2.1 药液的制备 分别选用乙酸乙酯 、丙酮为溶剂 , 各称
取药材粉末 1500 g,用连续回流提取装置提取 10 h, 蒸干溶
剂 ,冷冻干燥后研细 , 临用前用 “低比稀释法”配成相应浓度
的混悬液。
2.2.2 急性毒性试验 [ 4]取小鼠 100只 , 禁食 8 h, 不禁水 ,随
机分为 10组 ,每组 10只。 (1)给药途径 口服灌胃给药。
(2)试验周期和观察指标 给药后 24 h内和 7 d内小鼠的
反应和死亡小鼠的分布。 (3)剂量 按 0.2 mL· 10 g-1灌
胃。以改进寇氏法计算 LD50及 LD50的 95 平均可信限。
3 试验结果
3.1 抑菌试验结果(见表 1)
3.2 急性毒性试验结果(见表 2, 表 3), LD50及 LD50的 95
平均可信限。
4 讨论
4.1 鬼灯檠根系上世纪七十年代初期自陕西和云南发掘的
民间中草药 , 收载于《中华人民共和国药典》 1977年版(一
部), 用于腹泻 ,菌痢 , 便血 ,外治子宫脱垂 , 外伤出血。
604
2005年 5月
第 27卷 第 5期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
May2005
Vol.27 No.5
表 1 不同极性溶剂提取物的抑菌活性
抑菌圈直径(mm)
菌种 A B C D E F G
副溶血嗜血杆菌 11.0 17.0 19.0 15.5 16.0 13.5 14.0
支气管炎博
德物氏菌 11.5 19.0 18.0 15.0 15.5 11.0 12.5
金黄色葡萄球菌 11.0 16.5 17.5 16.0 16.0 12.0 12.0
肺炎链球菌 11.0 22.0 21.0 20.0 21.0 14.0 13.0
丹毒杆菌 11.0 17.0 14.0 15.0 16.0 12.0 11.0
沙门氏菌 11.5 14.0 12.5 11.5 11.0 11.0 11.5
绿脓杆菌 11.5 13.0 22.0 15.0 15.0 14.0 15.6
大肠杆菌 11.5 17.0 16.0 15.0 15.0 12.0 13.0
肺炎克雷件氏菌 11.5 14.0 15.0 15.0 15.0 13.0 12.0
A:丙酮对照 B:乙酸乙酯 C:丙酮 D:95 乙醇 E:甲醇 F:水 G:1
盐酸
表 2 鬼灯檠丙酮提取物急性毒性试验结果
组别剂量(g· kg-1)小鼠数(只)死亡数(只)存活数(只)死亡率
1 20.000 10 10 0 100
2 12.000 10 8 2 80
3 7.200 10 5 5 50
4 4.320 10 2 8 20
5 2.587 10 0 10 0
(组间剂量比为 1∶0.6)
LD50及其 95 的可信限为 7.200±1.841 g· kg-1
表 3 鬼灯檠乙酸乙酯提取物急性毒性试验结果
组别剂量(g· kg-1)小鼠数(只)死亡数(只)存活数(只)死亡率
1 23.148 10 10 0 100
2 13.889 10 6 4 60
3 8.333 10 4 6 40
4 5.000 10 3 7 30
5 3.000 10 0 10 0
(组间剂量比为 1∶0.6)
LD50及其 95 的可信限为(9.215±2.574)g· kg-1。
4.2 本实验证明鬼灯檠具有显著的抑菌作用 , 从表 1中可
知鬼灯檠对肺炎链球菌的抑菌效果最佳 , 对金黄色葡萄球
菌 、支气管炎博德特氏菌也有一定的抑菌活性。
4.3 从抑菌试验结果可知对主要病原菌的抑菌强度由大到
小为:醋酸乙酯的提取物 >丙酮提取物 >甲醇提取物 >95
乙醇提取物 >1 HCl提取物 >水提取物 , 所以选用丙酮和
乙酸乙酯提取液(提取的收率分别为 9.3 和 3.5 )进行毒
理学评价。
4.4 高剂量组小鼠给药后 10 min内即出现竖尾 、痉挛 、打
嗝 ,持续约 10min,以后活动减少 , 安静 ,翻正反射逐渐消失 ,
死亡 ,多数小鼠于给药后 24 h内死亡。经解剖发现部分死
亡小鼠胃肠胀气 ,多数为肝脏和肺部发生变化 , 提示该药可
能在肺部的分布浓度较大 , 这与岩白菜素治疗哮喘 、慢性支
气管炎的作用一致。
致谢:中国农科院兰州畜牧兽药研究所胡振英 ,罗永江 , 尚若
峰同志帮助完成了抑菌试验。
参考文献:
[ 1] 江苏新医学院.中药大辞典 [ M].下册.上海:上海科学技术
出版社 , 1977.2540-2541.
[ 2] 徐以珍 ,白翠贤 ,周琪 ,等.黄药子乙醇浸膏管内抑制灭活病毒
的研究 [ J] .药学通报 , 1988, 23(9):535-537.
[ 3] 陈奇.中药药理研究方法学 [ M] .北京:人民卫生出版社 ,
1993.112-118.
[ 4] 陈奇.中药药理研究方法学 [ M] .北京:人民卫生出版社 ,
1993.118-119.
薄层扫描法测定虎杖中白藜芦醇含量
赵瑞芝
(广州中医药大学第二临床医学院中药制剂学实验室 ,广东 广州 510120)
收稿日期:2004-03-16
基金项目:广东省教育厅及广州中医药大学总体规划资助课题 ,课题编号分别为 Z02016和GH0237。
作者简介:赵瑞芝(1968～ ),副研究员 ,硕士 ,研究方向:中药新剂型及其相关技术 ,电话:021-81887233-37403。
关键词:虎杖;白藜芦醇;含量测定;薄层扫描法
中图分类号:R284.1 文献标识码:B 文章编号:1001-1528(2005)05-0605-02
虎杖为蓼科植物虎杖(PolygonumcuspidatumSieb.et
Zucc)的根茎和根 ,具有祛风 、利湿 、破瘀 、通经等作用 , 为临
床常用中药。虎杖中含有游离蒽醌衍生物及二苯乙烯类化
合物白藜芦醇 、白藜芦醇苷 、蒽苷类成分等。其中白藜芦醇
具有调节脂质代谢 、抑制血小板聚集 , 保护心血管 , 抗炎 , 抗
肿瘤等多项生物活性和药理作用 [ 1 , 2] , 是虎杖治疗心脑血管
疾病的物质基础之一 ,其研究正越来越受到重视。
文献报道白藜芦醇含量测定方法主要为高效液相色谱
605
2005年 5月
第 27卷 第 5期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
May2005
Vol.27 No.5