全 文 ：基金项目：“十二五”国家科技计划（编号：２０１２ＢＡＤ３４Ｂ０５）
作者简介：刘翔宇，男，天津商业大学在读硕士研究生。
通讯作者：刘建福（１９６７－）男，天津商业大学教授，博士。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｊｆ＠ｔｊｃｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
陈庆森（１９５７－），男，天津商业大学教授，硕士。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｑｓｅｎ＠ｔｊｃｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
收稿日期：２０１５－１２－１８
第３２卷第３期
２　０　１　６年３月 食 品 与 机 械
OOD&MACHINERY Ｖｏｌ．３２，Ｎｏ．３
Ｍａｒ．２　０　１　６
ＤＯＩ：１０．１３６５２／ｊ．ｉｓｓｎ．１００３－５７８８．２０１６．０３．０３４
小扁豆中多酚物质的提取与组分鉴定
Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ　ｆｒｏｍ　ｌｅｎｓ　ｃｕｌｉｎａｒｉｓ　ｍｅｄｉｋ
刘翔宇１，２
ＬＩＵ　Ｘｉａｎｇ－ｙｕ１，２
　
赵　培１，２
ＺＨＡＯ　Ｐｅｉ１，２
　
阎亚丽１，２
ＹＡＮ　Ｙａ－ｌｉ１，２
　
刘建福１，２
ＬＩＵ　Ｊｉａｎ－ｆｕ１，２
　
陈庆森１，２
ＣＨＥＮ　Ｑｉｎｇ－ｓｅｎ１，２
（１．天津商业大学生物技术与食品科学学院，天津　３００１３４；２．天津市食品生物技术重点实验室，天津　３００１３４）
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｔｉａｎｊｉｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｏｍｍｅｒｃｅ，Ｔｉａｎｊｉｎ３００１３４，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｔｉａｎｊｉｎ　Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｔｉａｎｊｉｎ３００１３４，Ｃｈｉｎａ）
摘要：采用有机溶剂法提取小扁豆中多酚类物质，利用响应
面试验（ＲＳＤ）对提取工艺条件进行优化，并采用高效液相色
谱（ＨＰＬＣ）对提取物进行分析和鉴定。结果表明，当料液比
１︰１９０（ｍ︰Ｖ），提取温度８２．６０℃，丙酮浓度１２．９６％时
小扁豆多酚平均产率可达到２６．９４％（ｍ／ｍ）。分析结果显
示：采用该方法提取的小扁豆多酚主要由没食子酸、香草醛、
香豆酸、芦丁、槲皮素等物质组成。
关键词：小扁豆；多酚；浸提；高效液相色谱；成分分析
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｓｉｎｇ　ｏｒｇａｎｉｃ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ　ｉｎ　ｌｅｎ－
ｔｉｌｓ，ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｗａｓ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｂｙ　ｍａｋｉｎｇ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｕｒｆａｃｅ
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ，ｗｈｅｎ　ｔｈｅ　ｍａｓｓ　ｒａｔｉｏ
ｏｆ　ｓｏｌｉｄ　ａｎｄ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ｗａｓ　１９０︰１（Ｖ ︰ｍ）；ｔｈｅ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ
８２．６０℃；ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｅ　ｗａｓ　１２．９６％，ａ　ｂｅｔｔｅｒ　ｅｘｔｒａｃ－
ｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｃｏｕｌｄ
ｒｅａｃｈ　２６．９４％ （ｍ／ｍ）．Ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
（ＨＰＬＣ）ａｎａｌｙｓｉｓ　ｈａｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ　ｏｆ　ｌｅｎｔｉｌｓ　ｗｈｉｃｈ
ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗｅｒｅ　ｍａｉｎｌｙ　ｃｏｍｐｏｓｅｄ　ｏｆ　ｖａｎｉｌｉｎ，ｐ－ｃｏｕ－
ｍａｒｉｃ　ａｃｉｄ，ｒｕｔｉｎ　ａｎｄ　ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｌｅｎｓ；ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ；ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｏｒｇａｎｉｃ　ｓｏｌｖｅｎｔ；ｈｉｇｈ　ｐｅｒ－
ｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）；ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｉａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ
植物多酚（ｐｌａｎｔ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ）包括单宁以及与单宁有生
源关系的所有化合物，是分子结构中含有多个羟基的酚类化
合物［１］，为植物的次级代谢产物，其含量仅低于木质素、半纤
维素和纤维素［２］。目前已经发现植物多酚具有多种生物活
性功能，如清除体内自由基、抗氧化［３－４］、抗肿瘤［５］、抗骨质
疏松［６］、调节肠道菌群［７］等。
关于有机溶剂提取多酚，已经有研究发现用乙醇／水
（４︰１）、甲醇／水（４︰１）、丙酮／水（４︰１）和乙醇／丙酮／水
（７︰７︰６）４种溶剂体系提取大麦中的多酚类物质，发现丙
酮溶剂体系的提取效果最好，并且产率超出其他溶剂体系
１倍左右［８］。另有研究［９］发现，８０％的丙酮溶液对儿茶素、
咖啡酸、阿魏酸、香草醛和ｐ－香豆酸提取能力最佳，而原儿茶
素和没食子酸则用纯水提取效果最好。Ｇｈａｓｅｍｚａｄｅｈ等［１０］
对甲醇、丙酮和氯仿提取生姜叶、莲和根中酚类物质的效果
进行了比较，发现甲醇提取物中总酚、总黄酮、槲皮素、芦丁
和儿茶素含量较其它溶剂高。贾冬英等［１１］在研究香蕉皮中
多酚物质的提取工艺时发现，在不同的有机溶剂体系中，
４０％丙酮溶液提取效果最好。Ｍｉｔｉ　ｃ＇等［１２］用不同溶剂体系提
取干红莓中酚类物质，发现不同溶剂对单体酚的提取效果差
异较大，甲醇水有利于花青素类和酚酸类的提取，而丙酮水
溶剂对黄烷醇以及黄酮醇物质的提取效果较好。上述研究
成果报道了各种植物组织中多酚类物质提取的具体方法和
思路，特别是对不同的提取溶剂系统对制备组织中多酚类物
质的能力等方面的结论，为本研究提供了很好的启发和借
鉴，也对本研究开展小扁豆多酚类物质的提取、分析鉴定以
及深度开发具有较好的指导价值。
小扁豆学名兵豆（Ｌｅｎｓ　ｃｕｌｉｎａｒｉｓ　Ｍｅｄｉｋ），为豆科兵豆属
一年生或越年生草本植物［１３］，主要分布于中国北方干旱与
半干旱地区，属小杂粮作物［１４］。目前对小扁豆的研究，多集
中于其所含有的小扁豆凝集素［１５－１６］和植物学研究［１７－１８］上，
而对于其中含量约为２０％～３０％的多酚类物质，仅有使用未
优化的提取工艺对其粗略提取估计含量的报道［１９］。基于前
人对多酚与小扁豆的相关研究［２０］，本研究拟采用单因素与
响应面分析法确定有机溶剂浸提法提取小扁豆中的多酚物
质的最佳条件，并采用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）对提取物进行
定性分析，为特定多酚成分的提取和中国传统药食两用作物
小扁豆的加工利用提供基础资料。
４５１
１　材料与方法
１．１　材料与设备
小扁豆：天津市售；
乙醇、丙酮、乙酸乙酯、福林—酚试剂：分析纯；
甲醇、乙酸、没食子酸：色谱纯；
高效液相色谱用标准品（没食子酸、绿原酸、咖啡酸、大
豆苷、香草醛、香豆酸、阿魏酸、芦丁、槲皮素）：纯度９９．９９％，
上海融禾医药科技有限公司；
试验用水为去离子水；
紫外—可见分光光度计：Ｔ６新世纪型，北京普析通用仪
器有限责任公司；
高速中药粉碎机：ＷＮＤ－１００型，浙江省兰溪市伟能达电
器有限公司；
真空旋转蒸发仪：ＲＥ－５２ＡＡ型，上海亚荣生化仪器厂；
高效液相色谱仪系统：ＳＳＩ－１５００型，美国Ｅｖａｎｓ　Ｓｃｉｅｎｃｅ
ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ公司；
色谱柱：Ｃ１８，４μｍ×２５ｃｍ，日本Ｃｏｓｍｏｓｉｌ公司。
１．２　试验方法
１．２．１　样品前处理　小扁豆粉碎，过８０目筛。取小扁豆粉
用索氏提取器脱脂处理１２ｈ后，于抽气瓶中将乙醚彻底挥
发，脱脂样品置于－２０℃ 密封冻藏待用。
１．２．２　多酚提取工艺　称取一定量的脱脂小扁豆粉，分别
加入不同抽提溶剂，搅拌均匀后置于一定温度的电热恒温水
浴锅中提取；将提取的混合物进行真空抽滤，滤液于５５℃下
真空旋转蒸发至完全干燥，并回收溶剂。残留物用去离子水
溶解、定容至溶剂体积的１／１０，用于总多酚含量测定。试验
重复３次，结果取平均值。
１．２．３　单因素试验设计　从提取溶剂（丙酮：５％，１０％，
１５％，２０％，２５％，３０％，５０％，７０％，９０％；乙醇：１０％，２０％，
３０％，４０％，５０％，６０％，７０％，８０％，９０％），料液比（１︰１００，
１︰１２０，１︰１４０，１︰１６０，１︰１８０，１︰２００，ｍ︰Ｖ），提取
时间（０．２５，０．５，１，１．５，２，３，４，５，６ｈ）和提取温度（３０，４０，５０，
６０，７０，８０，９０℃）４个因素中分别选取１个作为变量同时其
余３个作为固定参数，室温、光照作为控制参数，以小扁豆多
酚提取产率（多酚质量／原料质量）为测定指标，研究确定最
适提取条件。
１．２．４　响应面优化（ＲＳＤ）分析　根据单因素试验结果及中
心组合设计原理［２１］，以小扁豆总多酚产率为响应值进行响
应面分析。
１．３　分析检测方法
１．３．１　总多酚含量测定　采用Ｆｏｌｉｎ－Ｃｉｏｃａｌｔｅｎ法［２２］，以没
食子酸质量浓度（ｇ／ｍＬ）为横坐标ｘ，吸光度Ａ７６５ｎｍ为纵坐标
ｙ，绘制没食子酸标准曲线，所得标准曲线方程为：ｙ＝
１．０６５　４ｘ－０．０３４　４，Ｒ２＝０．９９１　５。
１．３．２　高效液相色谱（ＨＰＬＣ）分析条件　使用Ｃ１８色谱柱，
紫外检测器，柱温３０℃；流动相 Ａ为１％冰乙酸水溶液，Ｂ
为甲醇；检测波长２８０ｎｍ，线性梯度洗脱（梯度洗脱程序见
表１），流速为１．０ｍＬ／ｍｉｎ，进样量２０μＬ。
标准品配置为１ｍｇ／ｍＬ的甲醇溶液（精密称取），进样
前０．４５μｍ滤膜过滤。标样包含有：没食子酸、绿原酸、咖啡
酸、大豆苷、香草醛、香豆酸、阿魏酸、芦丁、槲皮素。
表１　梯度洗脱程序
Ｔａｂｌｅ　１　Ｐｒｏｇｒａｍ　ｏｆ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ
时间／ｍｉｎ　Ａ液流量／％ Ｂ液流量／％
０～７　 ６５　 ３５
７～９　 ６５～５０　 ３５～５０
９～１２　 ５０　 ５０
１２～１４　 ５０～５９　 ５０～４１
１４～１９　 ５９　 ４１
１９～２２　 ５９～２０　 ４１～８０
２２～２８　 ２０　 ８０
２８～４０　 ２０～６５　 ８０～３５
１．４　统计学分析
试验数据的分析处理使用ＳＰＳＳ１７．０统计软件。进行单
因素方差分析时，处理结果以均数±标准差（±Ｓ）表示，定义
Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。
２　结果与分析
２．１　单因素试验结果与分析
２．１．１　溶剂系统对多酚产率的影响　多酚的分子结构中含
有多个羟基，使其易溶或可溶于水或醇、醚、酮、酯等有机溶
剂［２３］。采用不同溶剂体系时多酚物质的浸出率与组成成分
不同。本试验先使用纯水作为溶剂进行提取，最终得率平均
在５％左右，后选取乙醇与丙酮溶液作为溶剂，结果见图１。
由图１可知，乙醇／水作为溶剂体系，当乙醇浓度达２０％ 时
小扁豆多酚提取得到最佳得率（１４．７％）；而丙酮／水作为溶
剂时，丙酮浓度为５％，１０％，１５％时获得最佳得率（１７．２％～
１７．６％）。由于这３个试验点的最佳得率结果差异不显著，
但仍显著高于右侧试验点及左侧０％（即纯水作为溶剂时）的
提取率（５％），因此，考虑到系统误差与随机误差，以该丙酮
浓度１０％作为后续正交试验的中心试验点。另外，该结果与
前期报道［８－１２］的有关丙酮／水提取体系的研究结果相同。
图１　乙醇、丙酮浓度对多酚产率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ　１　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｃｅｔｏｎｅ　ｃｏｎ－
ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｅｎｓ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ
５５１
提取与活性 　 ２０１６年第３期
２．１．２　料液比对多酚产率的影响　由图２可知，随着料液
比的增大，多酚产率逐渐上升，在１︰１８０（ｍ ︰Ｖ）之后开
始下降。该变化趋势可能与小扁豆中多酚类物质的溶解度
与含量有关；也可能是溶剂体积的增加使得体系中溶氧的水
平也随之增加，小扁豆粉与提取体系中氧的接触，以及体系
中褐变的作用，导致多酚物质氧化，造成结果下降。试验还
发现当溶剂用量低于１︰５０（ｍ︰Ｖ）时，小扁豆粉与溶剂混
合后会形成糊状甚至结团现象。因此选择１︰１８０（ｍ︰Ｖ）
的料液比作为后续试验的中心试验点。
图２　料液比对多酚产率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ　２　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ｔｏ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ
ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｅｎｓ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ
２．１．３　提取温度对多酚产率的影响　由图３可知：随着温
度的上升，该体系对小扁豆多酚物质提取的产率缓慢上升，
６０℃后产率上升速度加快；当温度达到８０℃ 以后，提取产
率显著下降，其原因可能是温度升高时，小扁豆中多酚物质
溶解度增加，但过高的温度会导致多酚物质结构不稳定，发
生异构化和氧化等反应而遭到破坏。因此，后续试验选取
８０℃作为中心试验点。
２．１．４　提取时间对多酚产率的影响　由图４可知，提取产
率在１ｈ左右出现最高峰，之后随着时间的延长，产率下降
且基本维持在１９％的水平。该研究结果提示，在用较高的温
度（８０℃）进行提取时，提取时间过短会导致多酚物质不能
完全溶出，而时间过长则会使多酚物质在高温环境下发生氧
化反应，造成小扁豆粉中多酚物质的活性逐步降低，从而也
导致检测结果下降。因此以１ｈ作为最佳的提取时间。
２．２　响应面试验结果与分析
根据单因素试验结果，固定丙酮为提取溶剂，反应时间１ｈ，
图３　提取温度对多酚产率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ　３　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ
ｏｆ　ｌｅｎｓ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ
图４　提取时间对多酚产率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ　４　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｉｍｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ
ｌｅｎｓ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ
选择料液比、提取温度、溶剂浓度，进行响应面分析，试验因
素水平表见表２。使用Ｄｅｓｉｇｎ－Ｅｘｐｅｒｔ．Ｖ．８．０．５ｂ进行试验
设计与结果数理统计，结果见表３、４。得到的回归方程模
型为：
表２　响应面试验因素水平表
Ｔａｂｌｅ　２　Ｌｅｖｅｌｓ　ａｎｄ　ｃｏｄｅｓ　ｏｆ　ｖａｒｉａｂｌｅｓ　ｕｓｅｄ　ｉｎ
ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｄｅｓｉｇｎ
水平 Ａ料液比（ｍ︰Ｖ） Ｂ温度／℃ Ｃ溶剂浓度／％
－１　 １７０　 ７５　 ５
０　 １８０　 ８０　 １０
１　 １９０　 ８５　 １５
表３　响应面试验结果与分析
Ｔａｂｌｅ　３　ＲＳＤ　ｄｅｓｉｇｎ　ｍａｔｒｉｘ　ａｎｄ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｒｅｓｕｌｔｓ
试验号 Ａ　 Ｂ　 Ｃ 多酚得率／％
１　 ０　 ０　 ０　 ２６．０
２　 １ －１　 １　 １９．４
３ －１　 １　 １　 １７．４
４　 ０ －１．６８２　 ０　 ２１．８
５　 １　 １　 １　 ２５．０
６ －１．６８２　 ０　 ０　 ２３．０
７　 ０　 １．６８２　 ０　 １８．６
８　 ０　 ０　 ０　 ２４．８
９　 １　 １ －１　 ２２．８
１０　 ０　 ０　 ０　 ２６．４
１１　 ０　 ０　 ０　 ２５．６
１２　 １．６８２　 ０　 ０　 ２４．６
１３　 ０　 ０　 ０　 ２６．０
１４　 ０　 ０　 ０　 ２６．６
１５　 １ －１ －１　 １９．０
１６ －１ －１　 １　 ２２．０
１７　 ０　 ０　 １．６８２　 ２４．４
１８ －１ －１ －１　 ２５．８
１９ －１　 １ －１　 １９．８
２０　 ０　 ０ －１．６８２　 ２１．６
６５１
第３２卷第３期 刘翔宇等：小扁豆中多酚物质的提取与组分鉴定 　
表４　回归模型的方差分析表
Ｔａｂｌｅ　４　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｖａｒｉａｎｃｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆｉｔｔｅｄ　ｑｕａｄｒａｔｉｃ
ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｅｑｕａｔｉｏｎ
变异来源 平方和 自由度 均方 Ｆ值 Ｐ值
模型 １５１．５７　 ９　 １６．８４　 １４．４５　 ０．０００　１
Ａ　 １．１１　 １　 １．１１　 ０．９５　 ０．３５２　４
Ｂ　 ３．１７　 １　 ３．１７　 ２．７２　 ０．１３０　０
Ｃ　 ０．０９　 １　 ０．０９　 ０．０７７　 ０．７８６　７
ＡＢ　 ５０．００　 １　 ５０．００　 ４２．９１ ＜０．０００　１
ＡＣ　 ９．６８　 １　 ９．６８　 ８．３１　 ０．０１６　３
ＢＣ　 １．２８　 １　 １．２８　 １．１０　 ０．３１９　２
Ａ２　 １１．５１　 １　 １１．５１　 ９．８８　 ０．０１０　５
Ｂ２　 ６７．６５　 １　 ６７．６５　 ５８．０６ ＜０．０００　１
Ｃ２　 １９．９５　 １　 １９．９５　 １７．１２　 ０．００２　０
残差１１．６５　 １０　 １．１７
失拟项 ９．５９　 ５　 １．９２　 ４．６６　 ０．０５８　４
纯误差 ２．０６　 ５　 ０．４１
总和 １６３．２２　 １９
　　ｙ＝２５．９２＋０．２８Ａ－０．４８Ｂ＋０．０８１Ｃ＋２．５０ＡＢ＋１．１０ＡＣ＋
０．４０ＢＣ－０．８９Ａ２－２．１７Ｂ２－１．１８Ｃ２。 （１）
由表４可知，模型的Ｐ＝０．０００　１＜０．０５，表明回归模型
高度显著，建立的模型有意义。失拟项Ｐ＝０．０５８　４＞０．０５，
无显著性差异，说明模型拟合程度良好。模型的残差可能由
随机误差产生。对回归方程进行检验，其决定系数ｒ２＝
０．９２８　６，即此模型能够解释９２．８６％的响应值变化，说明该
模型能充分反映出各因素与响应值的关系，其影响不是简单
的线性关系。通过该方程发现，各种因素之间存在着一定的
交互作用，其中ＡＢ、Ｂ２、Ｃ２ 呈极显著影响（Ｐ＜０．０１），ＡＣ、Ａ２
呈显著影响（Ｐ＜０．０５）。在所选取的各因素水平范围内，按
照对结果的影响排序为温度＞料液比＞浓度。
各因素交互作用对小扁豆多酚物质提取产率的影响直
观地体现于图５～７。
由图５可知，响应值对料液比与温度的交互作用不敏
感，温度的变化对响应值影响较大。图６显示响应值对料液
比与溶剂浓度的作用敏感。等高线图反映了料液比对产率
图５　料液比与温度对多酚产率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ　５　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｏｕｒ　ｐｌｏｔｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ｔｏ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ　ｔｈｅ
ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｅｎｓ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ
图６　料液比与丙酮浓度对多酚产率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ　６　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｏｕｒ　ｐｌｏｔｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ｔｏ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｃｅｔｏｎｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｅｎｓ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ
图７　丙酮浓度与温度对多酚产率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ　７　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｏｕｒ　ｐｌｏｔｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏ－
ｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｅｎｓ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ
７５１
提取与活性 　 ２０１６年第３期
的影响较小，尤其是料液比较大时几乎不产生影响，可能是
小扁豆中多酚物质全部溶出或已达到饱和的缘故。图７显
示响应值对丙酮浓度与反应温度的变化敏感。从等高线可
以看出温度对响应值的影响较大。
２．３　最优反应条件的确定及模型验证
根据回归模型分析得出提取小扁豆多酚的最佳反应条
件为：料液比１︰１９０（ｍ︰Ｖ），提取温度８２．６０℃，丙酮浓度
１２．９６％。该条件下预测的小扁豆多酚产率可达到２６．１９％。
采用确定的最佳反应条件进行３次提取验证实验，得到的实
际平均产率为２６．９４％，与模型预测值基本一致，说明预测值
与实际值之间有较好的拟合性，模型可信度高。
验证结果显示，本试验建立的丙酮／水溶剂系统，对提取
小扁豆中多酚类物质具有很好的效果，也说明了该提取系统
优于甲醇／水系统，与Ｘｕ等［２４］的研究结果一致，即提取豆类
中酚类物质时，丙酮提取剂优于乙醇提取剂。
２．４　小扁豆多酚物质提取产物的 ＨＰＬＣ分析
对最佳条件提取的产物进行分析，结果见图８、９。
　　为了获得最佳的分析鉴定水平，本研究在流动相中添加
适量（１％）的冰乙酸，可有效地改善色谱的分离效果，获得良
好的峰型。研究还显示，进样量为５０μＬ时产生了较大的溶
剂峰，又出现峰的宽度变大；而进样量小于２０μＬ时峰形不
显著，因此综合考虑确定了进样量为２０μＬ。从１６个标准样
品中，通过比对保留时间，提取产物中 ＨＰＬＣ分析的结果可
知，该溶剂系统提取的产物主要含有多酚类物质的组分为：
没食子酸（３．８５７）、香草醛（１０．５２０）、香豆酸（１４．１９６）、芦丁
（１６．５９３）和槲皮素（３２．５４２）。
１．没食子酸　２．绿原酸　３．咖啡酸　４．大豆苷　５．香草醛
６．香豆酸　７．阿魏酸　８．芦丁　９．槲皮素
图８　标准样品色谱图
Ｆｉｇｕｒｅ　８　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｓａｍｐｌｅ
Ａ．没食子酸　Ｂ．香草醛　Ｃ．香豆酸　Ｄ．芦丁　Ｅ．槲皮素
图９　样品的色谱图
Ｆｉｇｕｒｅ　９　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　ｌｅｎｓ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ
４　结论
本研究建立的丙酮／水溶剂系统，通过对料液比、温度、
溶剂浓度以及提取时间做单因素试验，进而利用响应面分析
确定出小扁豆多酚物质最佳的提取条件，较系统地探讨了小
扁豆多酚物质的提取工艺条件。最佳的提取条件为料液比
１︰１９０（ｍ︰Ｖ），提取温度８２．６０℃，丙酮浓度１２．９６％，得
到的实际平均产率为２６．９４％。研究采用高效液相色谱
（ＨＰＬＣ）将该系统提取的小扁豆多酚产物进行分析和鉴定，
确定提取的产物中分别含有没食子酸、香草醛、香豆酸、芦
丁、槲皮素，这些组分均为豆类作物中常见多酚物质。
本试验以最佳提取得率为考量采用丙酮作为溶剂，但根
据提取用途的不同，需要考虑丙酮溶剂含有毒性，而乙醇作
为溶剂虽然得率略低于丙酮但更为安全，或者在后续试验、
加工过程中通过物理化学方法将丙酮去除干净。同时研究
为了尽可能检测出小扁豆多酚物质的种类，采用粗提取产物
作为检测样本；若进行后续研究时，还需要考虑增加纯化工
序的操作，如利用乙酸乙酯等有机溶剂，或使用大孔树脂吸
附工艺等对提取产物进行纯化处理［２５］。
对于小扁豆而言，丙酮系统提取效果好的原因可能是小
扁豆中香草醛与香豆酸的含量较高，而水分较多的溶剂提取
效果优于水分较少溶剂则是由于没食子酸的存在引起
的［２６］。而液相色谱图显示槲皮素与芦丁等含量高于前二
者，原因可能为流动相采用了甲醇作为载体，其在甲醇中的
溶解度高于其他多酚组分所致。总之，本研究初步探讨了小
扁豆多酚物质提取的体系和条件，并利用 ＨＰＬＣ定性地鉴定
了小扁豆主要的多酚类物质的组分，但没有进行以某单一组
分的最佳得率为目标的探讨，尚需进一步完善。
参考文献
［１］ＭｃＭａｎｕｓ　Ｊ　Ｐ，Ｄａｖｉｓ　Ｋ　Ｇ，Ｌｉｌｅｙ　Ｔ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｈｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ
ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｗｉｔｈ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｓｏｃｉｅｔｙ，
Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９８１（７）：３０９－３１１．
［２］宋立江，狄差，石碧．植物多酚研究与利用的意义及发展趋势
［Ｊ］．化学进展，２０００，１２（２）：１６１－１６２．
［３］周跃勇，王岸娜，吴立根．从猕猴桃中提取多酚的研究［Ｊ］．食
品研究与开发，２００７，２８（３）：５６－６０．
［４］Ｓｈａｒｍａ　Ｋ，Ｂａｒｉ　Ｓ　Ｓ，Ｓｉｎｇｈ　Ｈ　Ｐ．Ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｅａ　ｃａｔｅｃｈｉｎｓ
ｉｎｔｏ　ｔｈｅａｆｌａｖｉｎｓ　ｗｉｔｈ　ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ　ｏｘｉｄａｓｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃａｔａｌｙｓｉｓ　Ｂ：Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ，２００９，５６（４）：２５３－２５８．
［５］王修杰，袁淑兰．植物多酚的防癌抗癌作用［Ｊ］．天然产物研究
与开发，２００５，１７（４）：５０８－５１７．
［６］张润普，恪信．橄榄多酚对卵巢切除大鼠骨密度和骨钙含量的
影响［Ｊ］．中外医疗，２００８（１）：２２－２３．
［７］Ｌｅｅ　Ｈ　Ｃ，Ｊｅｎｎｅｒ　Ａ　Ｍ，Ｌｏｗ　Ｃ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｅａ　ｐｈｅｎｏｌｉｃｓ
ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ａｒｏｍａｔｉｃ　ｆｅｃａｌ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ　ｏｎ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｍｉｃｒｏ－
ｂｉｏｔａ［Ｊ］．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｉｎ　ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００６，１５７（９）：８７６－８８４．
［８］Ｂｏｎｏｌｉ　Ｍ，Ｖｅｒａｒｄｏ　Ｖ，Ｍａｒｃｏｎｉ　Ｅ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｐｈｅｎｏｌｓ　ｉｎ
ｂａｒｌｅｙ（Ｈｏｒｄｅｕｍ　ｖｕｌｇａｒｅ　Ｌ．）ｆｌｏｕｒ：ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏ－
ｍｅｔｒｉｃ　ｓｔｕｄｙ　ａｍｏｎｇ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　ｆｒｅｅ　ａｎｄ　ｂｏｕｎｄ　ｐｈｅ－
ｎｏｌｉｃ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ａｎｄ　Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓ－
８５１
第３２卷第３期 刘翔宇等：小扁豆中多酚物质的提取与组分鉴定 　
ｔｒｙ，２００４，５２（１６）：５　１９５－５　２００．
［９］Ｚｈａｏ　Ｈａｉ－ｆｅｎｇ，Ｄｏｎｇ　Ｊｉａｎ－ｊｕｎ，Ｌｕ　Ｊｉａｎ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃ－
ｔｉｏｎ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ｍｉｘｔｕｒｅｓ　ｏｎ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃａｐａｃｉｔｙ　ａｎｄ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ　ｆｏｒ　ｆｒｅｅ　ｐｈｅｎｏｌｉｃ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｉｎ
ｂａｒｌｅｙ（Ｈｏｒｄｅｕｍ　ｖｕｌｇａｒｅ　Ｌ．）［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ａｎｄ
Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００６，５４（１９）：７　２７７－７　２８６．
［１０］Ｇｈａｓｅｍｚａｄｅｈ　Ａ，Ｊａａｆａｒ　Ｈ　Ｚ　Ｅ，Ｒａｈｍａｔ　Ａ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ｔｙｐｅ
ｏｎ　ｐｈｅｎｏｌｉｃｓ　ａｎｄ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｉｎ　ｔｗｏ
ｖａｒｉｅｔｉｅｓ　ｏｆ　ｙｏｕｎｇ　ｇｉｎｇｅｒ（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ　ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ　Ｒｏｓｃｏｅ）ｅｘｔｒａｃｔｓ［Ｊ］．
Ｊ．Ｍｅｄ．Ｐｌａｎｔｓ　Ｒｅｓ，２０１１，５（７）：１　１４７－１　１５４．
［１１］贾冬英，李尧，姚开，等．香蕉皮中多酚的提取工艺条件研究
［Ｊ］．四川大学学报：工程科学版，２００５，３７（６）：５２－５５．
［１２］Ｍｉｔｉ　ｃ＇Ｍ　Ｎ，Ｏｂｒａｄｏｖｉ　ｃ＇Ｍ　Ｖ，Ｋｏｓｔｉ　ｃ＇Ｄ　Ａ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｈｅｎｏｌｉｃ　ｐｒｏ－
ｆｉｌｅ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｃａｐａｃｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｄｒｉｅｄ　ｒｅｄ　ｃｕｒｒａｎｔ　ｆｒｏｍ　Ｓｅｒｂｉａ，
ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｓｏｌｖｅｎｔ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｂｉｏｔｅｃｈ－
ｎｏｌｏｇｙ，２０１１，２０（６）：１　６２５－１　６３１．
［１３］张培轩，段瑞，黄鹏．中国远志属药用植物资源及地理分布
［Ｊ］．基层中药杂志，２００２，１６（６）：４２－４３．
［１４］李云霞．小扁豆种质资源筛选及评价［Ｊ］．杂粮作物，２００３，２３
（６）：３３１－３３２．
［１５］卓传尚，柳丽娟，吴秋芳．小扁豆凝集素结合型甲胎异质体在
肝癌诊断中的意义［Ｊ］．中国实验诊断学，２００９，１３（２）：
２０８－２１０．
［１６］魏群，黄介飞，孟宪镛，等．血清小便斗凝集素结合型－１抗胰
蛋白酶测定对原发性肝癌的诊断意义［Ｊ］．南通医学院学报，
１９９６，１６（４）：４９３－４９４．
［１７］李金霞，宋志蕾，张志鹏．重金属锌胁迫对小扁豆种子萌发和
幼苗生长的影响［Ｊ］．安徽农业科学，２０１５，４３（２６）：１－３．
［１８］韩燕来，远彤，陈锋，等．小扁豆花芽分化与结实率的研究
［Ｊ］．河南农业大学学报，１９９９，３３（４）：４０３－４０６．
［１９］刘明，谭斌，田晓红，等．七种食用豆化学组成及挤压加工特
性研究［Ｊ］．食品科技，２０１０（８）：１８９－１９７．
［２０］郑菲，黄亮，李安平，等．响应面法优化橡实壳中多酚提取工
艺条件［Ｊ］．食品与机械，２０１１，２７（１）：４９－５１．
［２１］朱晓阳，钟海雁，周波，等．油茶籽多酚超声辅助提取的响应
面优化［Ｊ］．食品与机械，２０１２，２８（１）：１６６－１７０．
［２２］Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ　Ｖ　Ｌ，Ｏｒｔｈｏｆｅｒ　Ｒ，Ｌａｍｕｅｌａ－Ｒａｖｅｎｔｏｓ　Ｒ　Ｍ．Ａｎａｌｙｓｉｓ
ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｐｈｅｎｏｌｓ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ
ｂｙ　ｍｅａｎｓ　ｏｆ　Ｆｏｌｉｎ－Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ　ｒｅａｇｅｎｔ［Ｊ］．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｅｎｚｙｍｏｌｏ－
ｇｙ，１９９９，２９９：１５２－１７８．
［２３］Ａｋｏｗｕａｈ　Ｇ　Ａ，Ｉｓｍａｉｌ　Ｚ，Ｎｏｒｈａｙａｔｉ　Ｉ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆ－
ｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｓｏｌｖｅｎｔｓ　ｏｆ　ｖａｒｙｉｎｇ　ｐｏｌａｒｉｔｉｅｓ　ｏｎ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ　ｏｆ
Ｏｒｔｈｏｓｉｐｈｏｎ　ｓｔａｍｉｎｅｕｓ　ａｎｄ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ－ｓｃａｖ－
ｅｎｇｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００５，９３（２）：３１１－３１７．
［２４］Ｘｕ　Ｂａｏ－ｊｕｎ，Ｓａｍ　Ｋ　Ｃ　Ｃｈａｎｇ．Ａ　ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｐｈｅｎｏｌｉｃ
ｐｒｏｆｉｌｅｓ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｌｅｇｕｍｅｓ　ａｓ　ａｆｆｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｅｘ－
ｔｒａｃｔｉｏｎ　ｓｏｌｖｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００７，７２（２）：
Ｓ１５９－Ｓ１６６．
［２５］袁英姿，曹清明，钟海雁，等．大孔吸附树脂纯化油茶籽多酚
的研究［Ｊ］．食品与机械，２００９，２５（１）：６１－６３．
［２６］唐华丽，熊汉国，王玮．响应面法优化葡萄籽多酚提取工艺
［Ｊ］．食品与机械，２０１２，２８（６）：１４７－１４９．
（上接第１４０页）
［４］Ｏｃａｏ－Ｈｉｇｕｅｒａ　Ｖ　Ｍ，Ｍａｅｄａ－Ｍａｒｔíｎｅｚ　Ａ　Ｎ，Ｍａｒｑｕｅｚ－Ｒíｏｓ　Ｅ，ｅｔ
ａｌ．Ｆｒｅｓｈｎｅｓｓ　ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ　ｏｆ　ｒａｙ　ｆｉｓｈ　ｓｔｏｒｅｄ　ｉｎ　ｉｃｅ　ｂｙ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ，
ｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　ｐｈｙｓｉｃａｌ　ｍｅｔｈｏｄｓ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１１，１２５
（１）：４９－５４．
［５］易宇文，范文教，贾洪峰，等．基于电子舌的微冻鲢鱼新鲜度识
别研究［Ｊ］．食品与机械，２０１４，３０（２）：１４２－１４５．
［６］史策．鲢鱼尸僵及贮藏过程中ＡＴＰ关联物及生化特性变化规律
的研究［Ｄ］．北京：中国农业大学，２０１５．
［８］Ｖáｚｑｕｅｚ－Ｏｒｔｉｚ　Ｆ　Ａ，Ｐａｃｈｅｃｏ－Ａｇｕｉｌａｒ　Ｒ，Ｌｕｇｏ－Ｓａｎｃｈｅｚ　Ｍ　Ｅ，ｅｔ
ａｌ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｒｅｓｈｎｅｓｓ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｉｎｄｅｘ（Ｋ　Ｖａｌｕｅ）ｆｏｒ　ｆｒｅｓｈ
ｆｉｓｈ　ｔｏ　ｃａｎｎｅｄ　ｓａｒｄｉｎｅｓ　ｆｒｏｍ　Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔｅｒｎ　Ｍｅｘｉｃｏ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ
Ｆｏｏｄ　Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　＆Ａｎａｌｙｓｉｓ，１９９７，１０：１５８－１６５．
［８］汤水粉，钱卓真，罗方方，等．高效液相色谱法测定水产品中
ＡＴＰ关联化合物［Ｊ］．渔业科学进展，２０１４，（２）：１１０－１１６．
［９］Ｋｕｄａ　Ｔ，Ｆｕｊｉｔａ　Ｍ，Ｇｏｔｏ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｆｒｅｓｈｎｅｓｓ　ｏｎ　ＡＴＰ－ｒｅ－
ｌａｔｅｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｉｎ　ｒｅｔｏｒｔｅｄ　ｃｈｕｂ　ｍａｃｋｅｒｅｌ　Ｓｃｏｍｂｅｒ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ［Ｊ］．
ＬＷＴ －Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００７，４０（７）：１　１８６－１　１９０．
［１０］ＡｕｂｏｕｒｇＳ　Ｐ，Ｐｉｅｉｒｏ　Ｃ，Ｇａｌａｒｄｏ　Ｊ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｈａｎ－
ｇｅｓ　ａｎｄ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｌｏｓｓ　ｄｕｒｉｎｇ　ｃｈｉｌｅｄ　ｓｔｏｒａｇｅ　ｏｆ　ｆａｒｍｅｄ　ｔｕｒｂｏｔ
（Ｐｓｅｔｔａ　ｍａｘｉｍａ）［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００５，９０（３）：４４５－４５２．
［１１］邹耀洪．香菇中５＇－核苷酸的高效液相色谱—质谱分析［Ｊ］．食
品科学，２００５（１）：１９６－１９８．
［１２］张岩，吕品，王红，等．高效液相色谱法同时测定浓缩枣汁中
环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的含量［Ｊ］．食品科学，２００９（１８）：
３２１－３２２．
［１３］李诚，沈晓玲，陈代文．宰后肉成熟过程中的风味变化［Ｊ］．食
品科技，２００８（２）：５２－５６．
［１４］关志苗．Ｋ值—判定鱼品鲜度的新指标［Ｊ］．水产科学，１９９５，１
（１４）：３３－３５．
［１５］王慥，张钟兴，冯媛，等．几种淡水养殖鱼鲜度变化的特点［Ｊ］．
水产学报，１９９４（４）：２７２－２７７．
［１６］刘亚，章超桦，陆子锋．高效液相色谱法检测水产品中的 ＡＴＰ
关联化合物［Ｊ］．食品与发酵工业，２０１０（６）：１３７－１４１．
［１７］ｚｏｇｕｌ　Ｆ，ｚｏｇｕｌ　Ｙ，Ｋｕｌｅｙ　Ｅ．Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｂｉｏ－
ｇｅｎｉｃ　ａｍｉｎｅ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｗｉｌｄ　ｗｈｉｔｅ　ｇｒｏｕｐｅｒ（Ｅｐｉｎｅｐｈｅｌｕｓ　ａｅｎｅ－
ｕｓ）ｓｔｏｒｅｄ　ｉｎ　ｉｃｅ　ａｎｄ　ａｔ　ｃｈｉｌ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ（４ ℃）［Ｊ］．Ｆｏｏｄ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００８，１０８（３）：９３３－９４１．
［１８］方燕，过世东．棚养和塘养甲鱼肌肉中呈味核苷酸的含量变化
及比较［Ｊ］．食品研究与开发，２００６，２７（８）：１７－２２．
［１９］Ｋｈａｎ　Ａ　Ｗ，Ｄａｖｉｄｅｋ　Ｊ，Ｌｅｎｔｚ　Ｃ　Ｐ．Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎｏｓｉｎｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ
ｃｈｉｃｋｅｎ　ｍｕｓｃｌｅ　ｄｕｒｉｎｇ　ａｓｅｐｔｉｃ　ｓｔｏｒａｇｅ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｕｓｅ　ａｓ　ａｎ　ｉｎｄｅｘ
ｏｆ　ｑｕａｌｉｔｙ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００６，３３（１）：２５－２７．
［２０］晋高伟，李婷婷，姜杨，等．０℃冷藏温度下草鱼新鲜度评价
［Ｊ］．食品工业科技，２０１４，３５（１３）：３１２－３１６．
［２１］邱伟强，陈刚，陈舜胜，等．离子对反相高效液相色谱法同时
检测水产品中６种ＡＴＰ关联化合物［Ｊ］．水产学报，２０１１（１１）：
１　７４５－１　７５２．
［２２］唐裕芳．鱼肉的腐败机理及其防腐措施［Ｊ］．肉类工业，２０００
（２）：３０－３２．
９５１
提取与活性 　 ２０１６年第３期