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白饭树质量标准的研究



全 文 :白饭树为大戟科白饭树属植物白饭树Fluggea virosa(Roxb.
ex Willd.)Baill.的干燥枝叶,夏、秋两季采收。洗净,切为段状,
晒干。苦、涩,微寒;有小毒。归肺、脾经。清热解毒,消肿止痛,
祛风止痒,止血。外用治湿疹,脓胞疮,皮肤瘙痒(包括过敏性皮
炎),疮疖,烧、烫伤,外伤出血[1,2]。为保证其质量的稳定,本实验
将对白饭树标准进行研究。
1 显微鉴别[3]
1.1 实验仪器与试药
生物显微镜,水合氯醛试液,白饭树样品批号为 20140908-
1、20140908-2、20140908-3。
1.2 方法与结果
1.2.1 茎横切面显微特征
取本品茎横切面,制作水合氯醛透化片后,置显微镜下观
察,本品茎横切面呈类圆形或不规则棱形。木栓层细胞 1-2列,
细胞类方形,排列紧密,外侧有残留落皮层。皮层薄壁细胞类圆
形,内含有草酸钙簇晶,偶见草酸钙方晶,在棱角处有厚角组
织。韧皮部细胞多角形,排列紧密,内含较多的草酸钙簇晶,外
侧的纤维成群散在,断续排列成环。形成层不明显。木质部的
导管口径大,壁薄,单个散在或数个相聚,木纤维较多。髓部射
线明显,由1-2列细胞组成。髓部较大,呈不规则棱形,细胞类圆
形,含草酸钙簇晶。见图1、图2。
图1 白饭树茎横切面40倍
图2 白饭树茎横切面100倍
1.2.2 粉末显微特征
取本品粉末(过四号筛)适量,制作水合氯醛透化片后,置显
微镜下观察,本品粉末呈灰绿色至灰棕色。纤维较多,单个散开
或成束,淡黄色,较长而断裂,呈长梭形或长条形,直径 18~
50μm;壁厚,胞腔线形,纹孔沟明显。晶鞘纤维,内含大量草酸
钙簇晶。木栓细胞类方形,薄壁微弯曲,含红棕色物质。见图3、
图4、图5。
图3 纤维(×400)
图4 晶鞘纤维(×400)
【第一作者】陈小锐(1981-),男,广东英德人,主管中药师,研究方向:中药学、药品检验。
白饭树质量标准的研究
陈 小 锐 , 黄 丽 霞 , 吴 基 威
(清远市食品药品检验所,广东 清远 511517)
【摘 要】 目的:建立白饭树的质量标准。方法:通过显微镜观察白饭树的显微特征;通过薄层色谱对白饭树进行定性鉴别;
通过高效液相色谱测定没食子酸的含量,色谱柱为Kromasil 100-5C18柱,250×4.6mm E74036;流动相为甲醇-0.05%磷酸(5∶95);流
速为1.0ml/min;柱温:30℃;检测波长为272nm。结果:白饭树的显微特征易见;薄层色谱斑点明显,与对照药材和对照品色谱相应位
置上斑点对应整齐;没食子酸在0~36.5μg.mL-1μg.mL-1之间呈良好的线性关系,回收率达到99.83%。结论:本标准可靠、稳定,可应
用于控制白饭树的质量。
【关键词】 显微;薄层色谱;高效液相色谱法
【中图分类号】 R286 【文献识别码】A 【文章编号】2095-3518(2016)05-20-02
2016年5月
第5期(总第210期)
轻工科技
LIGHT INDUSTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY 化工与制药
20
图5 木栓细胞(×400)
2 薄层鉴别[4,5]
2.1 仪器与试剂
白饭树对照药材[20140908(自采,经广东省食品药品检验
所鉴定)],没食子酸对照品(110831-201204)中国食品药品检定
研 究 院 。 白 饭 树 样 品 批 号 为 20140908- 1、20140908- 2、
20140908-3。
2.2 方法与结果
2.2.1 供试品溶液的制备
取本品粗粉 1g,加 10%盐酸的 50%甲醇溶液 50ml,加热回
流 2小时,放冷,滤过,滤液用盐酸饱和的乙醚振摇提取 2次,
每次 25ml,合并乙醚液,挥干,残渣加甲醇 1ml使溶解,作为供
试品溶液。
2.2.2 对照药材溶液的制备
另取白饭树对照药材1g,同法制成对照药材溶液。
2.2.3 对照品溶液的制备
再取没食子酸对照品,加甲醇制成每 1ml含 0.5mg的溶液,
作为对照品溶液。
2.2.4 展开方法与显色方法
照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述三种溶液各10µl,
分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯(用水饱和)-乙酸乙
酯-甲酸(6∶3∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铁
乙醇溶液。结果见图6。
图6
3 没食子酸含量测定的试验方法及结果[5]
3.1 色谱条件
Kromasil 100-5C18柱,250×4.6mm E74036;流动相为甲醇-
0.05%磷酸(5∶95);流速为 1.0ml/min;柱温:30 ℃;检测波长为
272nm。
3.2 对照品溶液的制备
精密称取没食子酸对照品0.01825g,加50%甲醇制成每1ml
含36.50μg的溶液,作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液
10mL,至 100mL容量瓶中,加 50%甲醇稀释至刻度,摇匀,作为
对照品溶液。
3.3 供试品溶液的制备
取本品粉末约 0.5g,精密称定,精密加入 4mol/L盐酸溶液
50ml,水浴中加热水解 3.5小时,放冷,滤过。精密量取续滤液
1ml,置100ml量瓶中,加50%甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,
即得。
3.4 方法学考察
3.4.1 系统适应性考察
取对照品溶液和供试品溶液各10μL,按上述色谱条件分别
测定,结果见图7、图8。
图7 没食子酸对照品
图8 供试品溶液
3.4.2 线性关系考察
分别精密取量桂皮醛对照品贮备液 1.0,5.0,10.0,15.0,
50.0mL至100mL,容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,分别吸取
上述对照品溶液10μL,按上述色谱条件测定。以峰面积为纵坐
标,进样量为横坐标绘制标准曲线,结果见图9。
图9 桂皮醛的线性方程与标准曲线
3.4.3 精密度试验
取对照品溶液,连续进样 6次,每次进样 10μL,记录峰面
积。各为:108536、107309、107922、107703、109112、109069。计
算峰面积RSD值为0.3%。
3.4.4 重复性试验
取同一批白饭树药材,按“3.3 供试品溶液的制备”项下方法
制备供试品溶液6份,按制定的色谱条件测定其含量。结果分别
为 27.973、27.388、27.520、27.338、27.986、27.998,平均含量为
27.70mg/g,RSD为1.15%。
(下转第24页)21
酸基取代度的LBPs之间活性亦有一定差别。通过对比本实验
中3个不同取代度的LBPs抗肿瘤活性可知,高取代度LBPs活性
优于低取代度LBPs,但取代度相关性范围还需进一步验证,因
为有研究表明取代度过低会促进肿瘤增殖,且取代度过高反而
不体现抗肿瘤活性。
LBP及LBPs均能改善机体重要免疫器官-胸腺及脾脏指数,
胸腺通过产生T淋巴细胞以及胸腺素发挥免疫作用;脾脏与体
液免疫关系密切[15];另外,LBP及LBPs可使H22荷瘤小鼠血清中
IL-2及TNF-α的含量增加,IL-2通过调节机体的免疫系统发挥抗
癌活性[16],因此LBPs抗肿瘤作用机制之一可能为增强机体免疫
机能从而发挥抗肿瘤作用。LBPs可使荷瘤小鼠血清中具有强
烈杀伤肿瘤细胞的TNF-α含量增加,说明LBPs亦通过促进TNF-
α的释放而发挥抗肿瘤作用。
参考文献
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(上接第21页)
3.4.5 稳定性考察
取同一供试品溶液于0,2,4,6,8,10,24h按上述色谱条件测
定没食子酸峰面积。分别为:108812、108640、108210、109331、
109662、109665、109897平均峰面积为 109173 ,RSD为 0.58%。
供试品溶液在24h内基本稳定。
3.4.6 加样回收试验
精密称定已知含量的白饭树6份,分别精密加入与没食子酸
对照品溶液(3.5mg /mL)2mL,依照 3.3项的方法制备供试品溶
液,按制定的色谱条件测定含量,计算加样回收率(结果见表1)。
表1


1
2
3
4
5
6
取样量
(g)
0.2511
0.2542
0.2513
0.2525
0.2511
0.2513
药材含量
(mg)
6.9555
7.0413
6.9610
6.9942
6.9555
6.9610
加入量
(mg)
7
7
7
7
7
7
测得量
(μg)
13.9565
13.9984
13.9532
13.9593
13.9206
13.9101
回收率(%)
100.01
99.69
99.94
99.96
99.75
99.63
平均回收率
(%)
99.83
RSD
(%)
0.19
4 小结
经过对白饭树粉末在显微镜下观察后,得出白饭树显微特
征明显,专属性强;薄层色谱斑点清晰,在与对照药材和对照品
色谱相应位置上斑点对应整齐;高效液相色谱法实验结果桂皮
醛在0~36.5μg.mL-1之间呈良好的线性关系;系统精密度试验和
方法重复性试验RSD都小于 1%,分析物没食子酸 24h稳定,样
品的加样回收率也在合格范围内。三种方法结合运用,专属性
强、稳定、可靠,可应用于控制白饭树的质量。
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