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傣药材黑面神药材质量标准研究



全 文 :傣药材黑面神药材质量标准研究
徐 荔 彭 霞 王 娟 卯明霞
(云南省西双版纳州食品药品检验所,云南 景洪 666100) )
摘 要:目的:建立傣医常用药材黑面神的质量标准。方法:采用植物学、生药学、化学、毒理学等方法研究基源、性状、系统
成分、显微鉴别、薄层色谱鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、急性毒性等项目。结果:植物来源明确,显微鉴别、薄
层色谱鉴别重现性好、专属性强,水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物限度设定合理,急性毒性试验结果 LD50 为 123. 87g
生药 /kg。结论:该标准简便快速、实用,能有效控制傣药材黑面神的质量。
关键词:傣药;黑面神;质量标准;LD50
中图分类号:R295. 3 文献标识码:B 文章编号:1006 - 6810(2013)01 - 0035 - 03
傣药黑面神为大戟科植物黑面神 Breynia fruticosa
(L.)Hook. f.的干燥根,《西双版纳傣药志》(第一集)及
文献[1 ~ 2]记载为傣族地区傣族医习用药材,西双版纳傣医
将黑面神药材称为“哈帕弯藤”。黑面神性凉,味苦,入水、
土、风塔。有调补水血,清火解热,消肿止痛之功。用于产
后腹痛,水血不足;月经不调,痛经,闭经;感冒发热,咽喉肿
痛,咳嗽,痄鳃;腹痛下利,痢疾;风湿痹痛,斑疹;跌打损伤,
淤血肿痛。目前对其质量评价方法的研究未见文献报道,
为了有效控制其药材质量,作者对 3 批不同产地药材的性
状、成分系统预试验、显微鉴别、薄层色谱鉴别、水分、总灰
分、酸不溶性灰分、浸出物、急性毒性等方面对黑面神药材
进行了研究,为黑面神药材的质量评价提供了科学依据。
1 材料与仪器
1. 1 材料:样品采自景洪市嘎洒镇(1 号样)、景洪市景讷
乡(2 号样)、勐腊县勐腊镇(3 号样) ,植物标本经中国科学
院西双版纳热带植物园鉴定为大戟科植物黑面神 Breynia
fruticosa (L.)Hook. f.。硅胶 G(青岛海洋化工厂) ,所用
其它试剂均为分析纯。
1. 2 仪器 LEICA RM -2016 生物组织切片机(上海徕卡
仪器有限公司)、SA3300PL 生物显微镜(北京泰克仪器有
限公司)、计算机显微分析系统(北京泰克仪器有限公司)。
2 方法与结果
2. 1 性状:本品为短柱状,长 0. 5 ~ 3cm。表面灰褐色至浅
红棕色,具须根及须根痕,有的外皮脱落。质硬,断面皮部
薄,木部黄白色。残留茎断面可见同心环。髓部小,色稍
深。气微,味淡、微涩。
2. 2 成分系统预试验:试验显示含有还原糖、多糖类、酚
类、鞣质、内酯类、香豆素、强心苷、有机酸、蒽醌类等成分。
2. 3 显微鉴别:横切面:木栓细胞 5 ~ 8 列,外被落皮层,有
时形成 2 个木栓层带。皮层细胞形状不规则,内侧有乳汁
细胞散在,内含颗粒状物。韧皮部细胞较小,排列紧密。形
成层环明显。木质部宽广,导管多为单个径向排列,射线多
为 3 ~ 5 列细胞,薄壁细胞中含有淀粉粒及少量草酸钙簇晶
(见图 1)。
粉末:粉末棕色。木栓细胞类方形、长方形、多角形,壁
略厚,有的细胞内含黄棕色物质。具缘纹孔导管碎片直径
20 ~ 40μm。韧皮纤维长条形、长梭形,壁厚,孔沟明显,胞
腔内含黄棕色物质;木纤维多成束,细长、破碎,壁略增厚,
可见壁孔。木薄壁细胞类方形、菱形,壁呈连珠状增厚,壁
孔明显。乳汁细胞不规则条状、片块状,内含黄棕色颗粒状
物。淀粉粒多复粒,由 2 ~ 4 分粒组成,少单粒,类圆形、椭
圆形,脐点点状、短缝状,层纹不明显,直径 5 ~ 10μm。草
酸钙簇晶多见,直径 10 ~ 20μm。可见黄棕色色素块(见图
2)。
图 1 黑面神药材横切面显微图
532013 年 1 月第 1 期 中国民族医药杂志
DOI:10.16041/j.cnki.cn15-1175.2013.01.022
图 2 黑面神药材粉末显微图
1 木栓细胞 2 韧皮纤维 3 木纤维 4 木薄壁细胞
5 导管 6 淀粉粒 7 乳汁细胞 8 草酸钙簇晶 9 色素块
2. 4 薄层色谱鉴别:取本品粉末1g,加乙醇15ml,超声处理20
分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇 1ml使溶解,作为供试品溶
液。另取黑面神对照药材 1g,同法制成对照药材溶液。照薄
层色谱法(《中国药典》一部附录)试验,吸取上述两种溶液各
3μl,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以三氯甲烷 -丙酮 -甲
酸(6∶6∶1)为展开剂,预平衡 15 分钟,展开,取出,晾干,喷以
5%香草醛硫酸溶液。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应
的位置上,显相同颜色的斑点(见图 3)。
图 3 黑面神药材薄层色谱图(T:29℃ ,RH:35%)
1. 1 号样 2. 2 号样 3. 3 号样 4. 黑面神对照药材
2. 5 水分:取 1、2、3 号样粉末约 2g,精密称定,照水分测定
法(《中国药典》2010 年版一部附录第一法)测定,结果分
别为 9. 48%、9. 84%、10. 20%,平均值为 9. 84%。
2. 6 总灰分:取 1、2、3 号样粉末约 3g,精密称定,照(《中
国药典》2010 年版一部附录) ,结果分别为 2. 52%、2. 37%、
2. 57%,平均值为 2. 49%。
2. 7 酸不溶性灰分:取总灰分结果按(《中国药典》2010 年
版一部附录) ,结果分别为 0. 32%、0. 27%、0. 33%,平均值
为 0. 31%。
2. 8 重金属:取 1、2、3号样粉末约 2g,精密称定,照(《中国药
典》2010年版一部附录),结果均未超过百万分之一。
2. 9 浸出物:取 1、2、3 号样粉末约 4g,精密称定,照水溶性
浸出物测定法项下的热浸法(《中国药典》2010 年版一部附
录)测定,结果分别为 12. 58%、12. 88%、12. 54%,平均值
为 12. 67%。
2. 10 急性毒性试验:对黑面神药材的水煎浓缩液(13. 34g
生药 /ml)进行了小鼠急性毒性试验。取 18 ~ 22gSPF 级
ICR小鼠,雌雄各半,每组 10 只,共 6 组,以 5. 34g 生药 /ml
为最大给药浓度,其余按 1∶0. 70 等比稀释,各组按 40ml /kg
灌胃给药 1 次,观察 14 天。根据小鼠中毒和死亡表现,按
改进 Bliss法程序计算,小鼠灌胃给予黑面神的 LD50 为
123. 87g生药 /kg,95%可信区间为 104. 41 ~ 147. 75g 生药 /
kg。中毒表现主要为活动减少、呼吸急促及死亡,死亡时间
集中在给药后 48 小时至 72 小时内。死亡动物和观察结束
后处死的小鼠,肉眼观察除肺部瘀血外,心、肝、脾、肾等各
主要脏器色泽、形状、大小等未见异常。
3 讨 论
3. 1 水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物是评价药材质
量的重要参数,因此制定相应的限度是十分必要的。根据
试验结果,规定其水分不得过 12. 0%,总灰分不得过 3.
5%,酸不溶性灰分不得过 1. 0%,浸出物不得少于 8. 0%。
重金属结果均未超过百万分之十,暂不在质量标准中设置
此项目。
3. 2 试验分别以水、乙醇、稀乙醇为溶剂,采用冷浸法及热
浸法测定本品浸出物的含量。结果表明,水浸出量高于乙醇
和稀乙醇的浸出量,热浸法浸出量高于冷浸法浸出量。因
此,确定以水为溶剂,热浸法测定本品浸出物的含量。
3. 3 在急性毒性试验中测出 LD50 为 123. 87g生药 /kg,显
示黑面神药材在处方用药范围内仍是安全的。
3. 4 上述研究项目内容全面,方法简便快速,能有效控制
傣药材黑面神的质量。
参考文献
[1]林艳芳,依专,赵应红. 中国傣医药彩色图谱[M]. 昆
明:云南民族出版社,2003. 643 ~ 646
[2]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(傣药
卷) [M].上海:上海科技出版社,2005. 244 ~ 245
2012 年 11 月 11 日收稿
63 中国民族医药杂志 2013 年 1 月第 1 期