全 文 ：中国药物应用与监测 2010年10月 第7卷 第5期 Chinese Journal of Drug Application and Monitoring, Vol.7, No.5, October 2010
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复方九里香颗粒由三叉苦、九里香、两面针、茯
苓、生地、黄芩、木香、薏苡仁、白芍等组成，具有
消炎止痛、理气健胃的作用，主治慢性胃炎、功能性
消化不良等上消化道疾病。本文采用体外扩散池法
（ussing chamber）[1-3]分析复方九里香颗粒对P-糖蛋白
（P-gp）的底物罗丹明 123（R123）经肠黏膜透过的影
复方九里香颗粒对大鼠空肠黏膜P-糖蛋白的影响
孔 艺，孙亚彬，李国锋，段 炼，陈业豪（南方医科大学南方医院药学部，广东 广州 510515）
[摘要 ] 目的：观察复方九里香颗粒对P-糖蛋白（P-gp）的调控作用，探讨其对临床联合用药的影响。方法：将20只SD雄性
大鼠随机分为4组，每组5只，空白组灌胃给予20 mL·kg-1的0.9%氯化钠注射液，实验组灌胃给予复方九里香颗粒20 g·kg-1，
每日2次。1周后采用体外扩散池法评价复方九里香颗粒对罗丹明123（R123）和荧光素钠（CF）经空肠黏膜透过性的影响，
用荧光分光光度法测定R123和CF的浓度，并分析各组表观渗透系数（Papp）差异。结果：与空白组相比，实验组对R123吸收
和分泌方向的透过性没有显著性影响，P值分别为0.955和0.843；与空白组相比，实验组对CF吸收和分泌方向透过性也没有
显著性影响，P值分别为0.892和0.500。结论：复方九里香颗粒对肠黏膜P-gp无显著影响，对细胞间紧密连接也无显著影响，
推测在临床联合用药中，不影响其他P-gp底物药物的吸收转运规律，不需要调整给药剂量。
[关键词 ] 复方九里香颗粒；P-糖蛋白；大鼠；空肠黏膜；透过性
[中图分类号 ] R96 [文献标识码 ] A [文章编号 ] 1672 – 8157(2010)05 – 0269 – 03
Effect of compound Jiulixiang granules on the P-glycoprotein in the jejunum of rat
KONG Yi, SUN Ya-bin, LI Guo-feng, DUAN Lian, CHEN Ye-hao(Department of Pharmacy, Nanfang Hospital, Southern Medical
University, Guangzhou 510515, China)
[ABSTRACT] Objective: To observe the regulatory function of compound Jiulixiang granules on P-glycoprotein (P-gp) and
to fi nd out its possible infl uences on clinical drug combination. Methods: Twenty SD (sprague dawley) male rats were randomly
divided into 4 groups, with 5 rats in each group.The control group were given 0.9% sodium chloride injection 20 mL·kg-1, while the
experimental groups received compound Jiulixiang granules 20 g·kg-1 twice one day. One week later, the permeabilities of rhodamine
123 (R123) and fl uorescein sodium (CF) across jejunum membranes were evaluated in vitro by ussing chamber, the concentrations
of R123 and CF were measured by fl uorescence spectrophotometry, and the difference of apparent permeability coeffi cient (Papp) of
each group was analyzed. Results: There was no signifi cant infl uence on the permeability of R123 absorptive (mucosal to serosal,
M-S) Papp and secretory (serosal to mucosal, S-M) Papp in experimental groups compared with that in control group, with P values of
0.955 and 0.843. In contrast to the control group, difference in the permeability of experimental groups between CF absorptive Papp
and secretory Papp showed no statistical signifi cance with the P values of 0.892 and 0.500 respectively. Conclusion: Compound
Jiulixiang granules may have no effect on P-gp and tight junctions between cells. Therefore, it may not need to adjust drug dose in
the combination of some P-gp substrate drugs and compound Jiulixiang granules, because compound Jiulixiang granules would not
change the absorption and transportation of the P-gp substrate drugs.
[KEY WORDS] Compound Jiulixiang granules; P-glycoprotein; Rat; Jejunum membrane; Permeability
响；选择荧光素钠（CF）作为对照药物进行试验，探
讨复方九里香颗粒对肠黏膜P-gp转运蛋白的影响，评
价其与P-gp底物药物联用时的作用效果。
1 材料
1.1 仪器
RF-5301荧光分光光度计（Shimadzu，日本）；台
式 pH1000型酸度计（Eutech，新加坡）；7 mL Ussing
chamber 装置（Harvard, 美国）。
1.2 药物与试剂
复方九里香颗粒（南方医院自制，规格：每
[基金项目 ] 广州市白云区科技计划资助项目（2009-SZ-36）
[通讯作者 ] 李国锋，E-mail：lgfnf@fi mmu.com
[作者简介 ] 孔艺，女，硕士研究生，研究方向：药剂学。 E-mail：
kongyijk@126.com
·实验研究·
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中国药物应用与监测 2010年10月 第7卷 第5期 Chinese Journal of Drug Application and Monitoring, Vol.7, No.5, October 2010
包 20 g，批号 20100128）；R123，CF，Hepes(2-[4-
(2-hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid)，
TRIZMA BASE[Tris(hydroxymethyl aminomethane)]均
购自美国Sigma公司；水合氯醛购自中国医药（集团）
上海化学试剂厂，其余试剂为分析纯。
1.3 实验动物
SD大鼠，雄性，体质量（250±20） g，合格证号
SC×K（粤）2006-0015，由南方医科大学实验动物中
心提供。动物实验的方法符合南方医科大学实验动
物伦理委员会的有关规定和要求。
2 方法与结果
2.1 样品溶液的制备
2.1.1 复方九里香溶液的制备 将复方九里香颗粒20 g
溶于20 mL蒸馏水中，制备成1 g·mL-1的复方九里香
溶液，将药液密封存于冰箱中备用。
2.1.2 Hepes缓冲液的制备 取Hepes约3 g，精密称
定，溶于 400 mL蒸馏水，使之完全溶解。通入混合
气体（O2∶CO2 = 95∶5）10 min后，加入0.9 mL KCl
（3 mol·L-1），0.9 mL CaCl2（1 mol·L-1），0.4 mL MgSO4
（1 mol·L-1），4.09 g NaCl，完全溶解后用Tris 溶液（1
mol·L-1）调节pH至7.4，再加入2.5 mL葡萄糖溶液（1
mol·L-1），用蒸馏水稀释至500 mL，混匀即得。该溶
液为每天新制备。
2.1.3 R123或CF溶液的制备 分别将R123或CF 溶
解在 pH 7.4的混合气体（O2∶CO2 = 95∶5）饱和的
Hepes缓冲液中，使实验用R123或CF的最终浓度均
为4 μg·mL-1。
2.2 R123和CF测定方法的建立
R123的激发波长为485 nm，发射波长为535 nm，
在此波长下测定其荧光强度。R123在 7.812 5 ~ 500
ng·mL-1浓度范围内，线性关系良好，荧光强度对浓
度进行回归，Y = 1.685 4X - 1.387 3（r = 0.999 8），回
收率和日间精密度分别为99.3%和0.3%。CF的激发
波长为490 nm，发射波长为520 nm，在7.812 5 ~ 250
ng·mL-1浓度范围内，线性关系良好，回归方程为Y =
0.401X + 2.102 9（r = 0.998 8），回收率和日间精密度
分别为99.5%和0.4%。
2.3 动物实验
将20只SD雄性大鼠随机分为4组，每组5只，空
白组灌胃给予0.9%氯化钠注射液20 mL·kg-1，实验组
灌胃给予复方九里香 20 g·kg-1，每日 2次，连续 7 d，
此给药剂量为大鼠的最大灌胃剂量，按体表面积折算
后为临床治疗剂量的10倍。7 d后，实验大鼠禁食16
~ 18 h，10%水合氯醛（ip，3 mL·kg-1）腹腔注射麻醉，
延腹中线将腹部切开2.5 cm左右，胃下5 cm处为空肠
（约 10 cm），在空肠前端插入塑料管（内径 2 mm）结
扎，空肠末端剪开一小口后，轻缓地用0.9%氯化钠注
射液冲洗干净，分离空肠置Hepes缓冲液中，冰浴培
养5 min，剪取3 ~ 4 cm的肠段，迅速分离筋膜层，将
肠黏膜固定于扩散池上。吸收方向（从黏膜侧到浆膜
侧的转运，M-S）实验时，黏膜侧加入37.5 ℃的R123
或CF 7 mL，浆膜侧加入等体积同温度的Hepes缓冲
液；分泌方向（从浆膜侧到黏膜侧的转运，S-M）实验
时，黏膜侧加入缓冲液，浆膜侧加入R123 或CF。在
混合气体（O2∶CO2 = 95∶5）的作用以及37.5 ℃水浴
保温下，分别于15，30，45，60，75，90，120 min在底
物的接收侧取样0.5 mL，同时补充0.5 mL缓冲液。各
份取样后的样品于冰箱中保存直到进行荧光分析。
2.4 表观渗透系数 (Papp)计算方法
计算公式为：Papp = （dQ/dT）×（1/A ·C0），单位：
cm·s-1，其中，dQ/dT表示稳态时时间 -累计透过量线
性回归所得的斜率，A为有效渗透面积（1.78 cm2），C0
为加入药液侧初始药物浓度。
2.5 统计方法
实验数据用（x±s）表示，所有实验数据均采用
SPSS 13.0统计软件进行显著性检验（双样本 t检验），
显著性标准为P < 0.05。
2.6 复方九里香对R123 经空肠黏膜透过的影响
给大鼠灌胃20 mg·kg-1复方九里香溶液每天2 次，
1周后，复方九里香对R123经空肠M-S方向和S-M方
向转运的影响如图1所示，表明复方九里香对R123吸
收和分泌方向透过与对照组相比无显著差异。但是
M-S和S-M组间有差异，空肠泵出比为2.45，与以往
研究 [4]中R123经空肠的泵出比为 2.35基本一致，表
明实验方法的重复性好。复方九里香组对R123经吸
收方向和分泌方向的透过性与 0.9%氯化钠注射液组
比较并未有显著差异，P值分别为 0.955和 0.843，对
R123经大鼠空肠黏膜转运的Papp的影响具体见表1。
图1 复方九里香对R123在空肠黏膜的经时透过曲线图 . x±s, n = 5
Fig 1 Time course of compound Jiulixiang granules on absorptive
(M-S), secretory (S-M) transport of R123 in rat jejunal membranes.
x±s, n = 5
0.9%氯化钠注射液组M-S
0.9%氯化钠注射液组S-M
复方九里香组M-S
复方九里香组S-M累
计
透
过
率
/%
t/min
2.0
1.5
1.0
0.5
0.0
0 50 100 150
中国药物应用与监测 2010年10月 第7卷 第5期 Chinese Journal of Drug Application and Monitoring, Vol.7, No.5, October 2010
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2.7 复方九里香对CF经空肠转运的影响
复方九里香对CF经空肠黏膜吸收和分泌方向的
透过性均无显著影响，P值分别为0.892、0.500，具体
见图2。
图 2 复方九里香对CF经过大鼠空肠黏膜的经时透过曲线图 . x
±s, n = 5
Fig 2 Time course of compound Jiulixiang granules on absorptive
(M-S), secretory (S-M) transport of CF in jejunal membranes of
rat. x±s, n = 5
3 讨论
慢性胃炎系由多种病因引起的胃黏膜弥漫性或
局限性慢性炎症病变，如慢性肾炎、尿毒症或慢性心
衰等病因皆可引起胃炎。复方九里香经常同其他药
物联合使用，而临床上大多数药物是P-gp的底物、抑
制剂或诱导剂 [5]，因此在临床实践中应明确复方九里
香颗粒对P-gp表达的影响，避免疗效降低和副作用。
P-gp是由多药耐药蛋白（multidrug resistance 1，
MDR1）基因编码，属于ABC家族的成员，是一种能
量依赖性的药物外运泵，通过ATP供能，将细胞内的
药物逆浓度梯度排出胞外，从而降低胞内药物浓度。
本文采用Ussing chamber实验法模拟胃肠道环境
的特点，操作简单，成本较低，易于推广，也可分析
药物之间或其主要成分之间可能发生的作用及其机
理，从而通过改变药物配伍或改进药物配方以提高疗
效，降低毒副作用。在实验中， 我们选择R123和CF
作为研究药物，首先因为两者转运机制不同，R123是
主动转运，是ATP 结合盒转运蛋白的一种外排转运蛋
白P-gp的底物，而CF 是经旁细胞通路的被动转运，
这两种药物都是作为各自转运机制的典型药物而被
广泛用于各种药理实验中； 其次，这两种化合物容易
分析，都具有可见光范围的荧光，检测灵敏度高，作
为其转运方式的标志物已广泛应用于各种研究。
复方九里香颗粒上市多年，在治疗胃炎胃溃疡方
面安全有效，但国内鲜有对复方九里香颗粒完善的安
全性报道，同时也未见与其他药物联用的报道。本实
验结果显示，灌胃给予复方九里香40 g·kg-1·d-1后，其
对R123的转运影响同对照组相比无显著差异。复方
九里香对CF的转运亦无统计学意义的影响，说明复
方九里香颗粒对肠黏膜上P-gp的表达无影响，对细胞
间的紧密连接亦无影响。实验结果表明：复方九里香
颗粒不抑制P-gp的表达，可以避免有毒物质在人体内
的积累；复方九里香与P-gp底物药物联合应用时，不
影响其在体内的药动学参数。当复方九里香颗粒同
P-gp底物药物地高辛联合应用时，不因抑制 P-gp表
达，使地高辛体内血药浓度增加而导致毒性反应，也
不因为诱导P-gp表达，使地高辛体内血药浓度减低而
致使疗效减低。与抗癌药物环孢菌素A联用时，复方
九里香颗粒不会影响环孢菌素A的血药浓度，环孢菌
素A在体内的血药浓度可以维持一个相对稳定的水
平。因此，复方九里香与临床典型的P-gp底物药物联
合应用，有效且安全。
[参考文献 ]
[1] Huang BB, Li GF, Luo JH, et al. Permeabilities of rebamipide
via rat intestinal membranes and its colon specifi c delivery using
chitosan capsule as a carrier[J]. World J Gastroenterol, 2008, 14
(31): 4928-4937.
[2] 孙亚彬，李国锋，唐中昆，等 . 甘草与甘遂的配伍对大鼠肠黏
膜P-gp的影响 [J]. 药学学报，2010，45（4）：510-516.
[3] 李国锋，孙亚彬，杨凌，等 . Labrasol对p-糖蛋白底物紫杉醇经
肠黏膜透过性的影响 [J]. 中国医院药学杂志，2009，29（8）：
617-620.
[4] Lin Y, Shen Q, Katsumi H, et al. Effects of labrasol and other
pharmaceutical excipients on the intestinal transport and
absorption of rhodamine123, a Pglycoprotein substrate, in rats[J].
Biol. Pharm. Bull, 2007, 30(7): 1301-1307.
[5] 高坤，孙进，何仲贵 . 肠道转运蛋白在药物吸收中的重要作用
[J]. 药学学报，2006，41（2）：97-102.
（收稿日期：2010-06-11 修回日期：2010-08-13）
表1 复方九里香对R123经大鼠空肠黏膜转运的Papp的影响 . x
±s, n = 5
Tab 1 Effect of compound Jiulixiang granules on the Papp of
rhodamine 123 across the jejunal membranes of rat. x±s, n = 5
组别
Papp/×10-6 cm·s-1 Papp（S→M）/Papp（M→S）
M→S S→M
对照组 3.54±0.86 8.68±3.76 2.45
复方九里香组 2.20±0.85 9.93±3.96 4.51
表2 复方九里香对CF经空肠黏膜转运的Papp的影响 . x±s, n
= 5
Tab 2 Effect of compound Jiulixiang granules on the Papp of CF
across the jejunal membranes of rat. x±s, n = 5
组别
Papp/×10-6 cm·s-1 Papp（S→M）/Papp（M→S）
M→S S→M
对照组 5.40±3.20 5.09±1.71 0.94
复方九里香组 6.47±3.11 7.13±2.44 1.10
0.9%氯化钠注射液组M-S
0.9%氯化钠注射液组S-M
复方九里香组M-S
复方九里香组S-M累
计
透
过
率
/%
1.5
1.0
0.5
0.0
t/min
0 50 100 150