全 文 ：的表达趋势与ＣＴＧＦ相同，而ＣＴＧＦ又是 ＴＧＦ－β１
的下游因子，因此我们认为槲皮素对ＤＮ大鼠肾脏
的保护作用与ＴＧＦ－β１／ＣＴＧＦ信号通路有关。
ＤＮ主要的病理改变是系膜细胞增生、ＥＣＭ 成
分产生增加、基底膜增厚和肾小球硬化。电镜下观
察发现：与正常大鼠相比，ＤＮ大鼠基底膜增厚、且
厚度在少数部位不均一，足突融合明显；ＱＥ及ＣＡＰ
组大鼠基底膜无明显增厚，且厚度均匀，足突微绒毛
化和扁平化明显下降，系膜细胞及基质无明显增生，
其中ＱＥ组可见到系膜细胞的凋亡。以上形态学实
验显示槲皮素可抑制系膜细胞的增生，减少ＥＣＭ
生成，减轻ＤＮ引起的肾小球基底膜增厚及足突融
合等病理改变，具有较强的肾保护作用。
槲皮素是一种天然的黄酮类化合物，广泛存在
于蔬菜、水果等绿色植物中。槲皮素具有抗肿瘤、抗
炎、抗氧化、抗血小板聚集和清除自由基等多种生物
活性。本课题组前期的研究已发现槲皮素对高糖培
养的大鼠肾小球系膜细胞有保护作用［３］。本试验结
果再次证实ＤＮ大鼠经槲皮素治疗以后，大鼠多饮
多尿症状减轻，蛋白尿明显减少，肾脏指数、血糖、肌
酐、尿素氮等指标明显降低；同时槲皮素可通过提高
机体抗氧化能力、抑制ＴＧＦ－β１／ＣＴＧＦ信号通路，来
发挥其对肾功能的保护作用。综前所述，ＣＴＧＦ及
ＴＧＦ－β１表达增加，可促进ＥＣＭ（如四型胶原、层黏
蛋白）以及Ｓｍａｄ蛋白的堆积，槲皮素对上述细胞因
子是否也起作用，尚有待进深入研究，以进一步阐明
其防治ＤＮ的作用机制。
参考文献：
［１］　何兰杰，刘萍．枸杞多糖对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响
［Ｊ］．中国医院药学杂志，２００６，２６（１３）：１４７５－１４７８．
［２］　舒冏，曾龙驿，王曼曼，等．舒洛地特对大鼠糖尿病肾脏的保
护作用及其机制［Ｊ］．中国医院药学杂志，２００９，２９（１）；１９－
２３．
［３］　Ｔａｎｇ　ＤＱ，Ｗｅｉ　ＹＱ，Ｙｉｎ　ＸＸ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ
ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｏｎ　ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒ　ｍａｔｒｉｘ　ａｃｃｕｍｕｌａ－
ｔｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｔ　ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ　ｍｅｓａｎｇｉａｌ　ｃｅｌｓ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｂｙ　ｈｉｇｈ　ｇｌｕｃｏｓｅ
［Ｊ］．Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ，２０１１，８２：９２０－９２６．
［４］　Ｍｄ．Ａｂｄｕｌ　Ｈｙｅ　Ｋｈａｎ，Ｍｕｎａｖｖａｒ　Ａｂｄｕｌ　Ｓａｔｔａｒ，Ｎｏｒ　Ａｚｉｚａｎ
Ａｂｄｕｌａｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｓｕｂｔｙｐｅｓ　ｏｆ　Ｒｅｎａｌα１– Ａｄｒｅｎｏ－
ｃｅｐｔｏｒ　ｉｎ　Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙ　Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ　Ｒａｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏ－
ｃｉｎ－Ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｄｉａｂｅｔｉｃ　Ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ［Ｊ］．Ｋｉｄｎｅｙ
Ｂｌｏｏｄ　Ｐｒｅｓｓ　Ｒｅｓ，２００９，３２：３４９－３５９．
［５］　Ｍｅｈｍｅｔ　Ｋａｎｔｅｒ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｙｍｏｑｕｉｎｏｎｅ　ｏｎ　ｓｔｒｅｐ－
ｔｏｚｏｔｏｃｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ［Ｊ］．Ｊ　Ｍｏｌ　Ｈｉｓｔ，２００９，
４０：１０７－１１５．
［６］　Ｒｅｎｕｇａｄｅｖｉ　Ｊ，Ｐｒａｂｕ　ＳＭ．Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｐｒｏｔｅｃｔｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ
ｓｔｒｅｓｓ－ｒｅｌａｔｅｄ　ｒｅｎａｌ　ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ｃａｄｍｉｕｍ　ｉｎ　ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｅｘｐ
Ｔｏｘｉｃｏｌ　Ｐａｔｈｏｌ，２０１０，６２：４７１－４８１．
［７］　徐向进，张家庆，黄庆玲，等．槲皮素对糖尿病大鼠肾脏非酶
糖化及氧化的抑制作用［Ｊ］．中华内分泌代谢杂志，１９９８，１４
（１）：３４－３７．
［８］　叶赏和，陈跃华，傅晓骏，等．银杏叶提取物治疗早期糖尿病
肾病的临床观察［Ｊ］．中国医院药学杂志，２００６，２６（９）：１１８２－
１１８３．
［９］　印晓星，张银娣．糖尿病肾病的发病机理及其药物治疗［Ｊ］．
广东药学院学报，２００４，２０（５）：５４１－５４４．
［１０］Ｅｖａｎｓ　ＪＬ，Ｇｏｌｄｆｉｎｅ　ＩＤ，Ｍａｄｄｕｘ　ＢＡ，ｅｔ　ａｌ．Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ
ａｎｄ　ｓｔｒｅｓｓ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙｓ：ａ　ｕｎｉｆｙｉｎｇ　ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ
ｏｆ　ｔｙｐｅ　２　ｄｉａｂｅｔｅｓ［Ｊ］．Ｅｎｄｏｃｒ　Ｒｅｖ，２００２，２３：５９９－６２２．
［１１］Ｍｕｒａｇｕｎｄｌａ　Ａ，Ｋａｎｗａｌｊｉｔ　Ｃ．Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ，ａｎ　ａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｎ　ｂｌｏｆｌａ－
ｖｏｎｏｉｄ　ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ　ｉｎ　ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｎｄ
Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２００４，３１：２４４－
２４８．
［１２］Ｈａ　Ｈ，Ｌｅｅ　ＨＢ．Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ　ｉｎ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ：ｂａｓ－
ｉｃ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｕｒｒ　Ｄｉａｂ　Ｒｅｐ，２００１，１：２８２－
２８７．
［收稿日期］２０１１－１２－０５
［基金项目］成都医学院院级科研课题（项目编号：ＣＹＺ０９－００８）　［作者简介］高秀蓉，女，博士，讲师，研究方向：药物新剂型设计及药物药动学
研究，电话：１３６７８０１１０２５，Ｅ－ｍａｉｌ：ｇａｏｍｕｘｏｕｚｉ＠１２６．ｃｏｍ
基于大鼠在体单向肠灌流模型研究Ｐ－糖蛋白抑制剂对蝙蝠葛碱肠吸收
的影响
高秀蓉１，２，蒋学华２，王凌２，王婷２　（１．成都医学院药学院药剂教研室，四川 成都６１００８３；２．四川大学华西药学院临床药
学与药事管理学系，四川 成都６１００４１）
［摘要］　目的：研究Ｐ－糖蛋白抑制剂对蝙蝠葛碱肠吸收的影响。方法：采用在体单向肠灌流法进行小肠吸收实验，利用
ＨＰＬＣ法测定灌流液中蝙蝠葛碱的浓度，考察不同浓度Ｐ－糖蛋白抑制剂环孢素Ａ、醋酸地塞米松和维拉帕米对蝙蝠葛碱肠吸
收的影响。结果：与对照组相比，高浓度和中浓度环孢素Ａ对蝙蝠葛碱的Ｋａ、Ｐａｐｐ、Ｐ％、吸收量和累积吸收量均有显著性影响
（Ｐ＜０．０５），而低浓度时上述参数差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；与对照组相比，高、中、低３个浓度醋酸地塞米松对蝙蝠葛碱的
Ｋａ、Ｐａｐｐ、Ｐ％、吸收量和累积吸收量均有显著性影响（Ｐ＜０．０５）；与对照组相比，高浓度维拉帕米对Ｄａｕ的Ｋａ、Ｐａｐｐ、Ｐ％、吸收
量和累积吸收量均有显著性影响（Ｐ＜０．０５），而中浓度和低浓度时上述参数无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论：Ｐ－糖蛋白抑制剂
·６１０１· 中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１３期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｌｙ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１３
DOI:10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2012.13.023
环孢素Ａ、醋酸地塞米松和维拉帕米对蝙蝠葛碱均有促吸收作用，其作用大小顺序为醋酸地塞米松＞环孢素 Ａ＞维拉帕米；
Ｐ－糖蛋白对Ｄａｕ的肠吸收有外排作用，蝙蝠葛碱为Ｐ－糖蛋白底物。
［关键词］　蝙蝠葛碱；在体单向肠灌注模型；高效液相色谱法；Ｐ－糖蛋白抑制剂；Ｐ－糖蛋白底物
［中图分类号］Ｒ９６　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３（２０１２）１３－１０１６－０６
Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｐ－ｇｐ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ｏｎ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ｉｎ　ｒａｔｓ　ｗｉｔｈ　ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｓｉｎｇｌｅ－ｐａｓｓ
ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｍｏｄｅｌ
ＧＡＯ　Ｘｉｕ－ｒｏｎｇ１，２，ＪＩＡＮＧ　Ｘｕｅ－ｈｕａ２，ＷＡＮＧ　Ｌｉｎｇ２，ＷＡＮＧ　Ｔｉｎｇ２（１．Ｔｈｅ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ
Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｃｈｅｎｇｄｕ　６１００８３，Ｃｈｉｎａ；２．Ｔｈｅ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｐｈａｒｍａｃｙ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｙ　Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，
Ｗｅｓｔ　Ｃｈｉｎａ　Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｃｈｅｎｇｄｕ　６１００８３，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｐ－ｇｐ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ｏｎ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ｉｎ　ｒａｔｓ．ＭＥＴＨ－
ＯＤＳ　Ｉｎ　ｓｉｔｕｓｉｎｇｌｅ－ｐａｓｓ　ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｍｏｄｅｌ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ｉｎ　ｐｅｒｆｕｓａｔｅ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＨＰＬＣ．
Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｐ－ｇｐ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ＣｓＡ，Ｄｅｘ　ａｎｄ　Ｖｅｒ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄ－
ｉｅｄ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｗｈｅｎ　ｈｉｇｈ　ａｎｄ　ｍｉｄｄｌｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＣｓＡ　ｗｅｒｅ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ，ｔｈｅ　Ｋａ，Ｐａｐｐ，
Ｐ％，ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｍｏｕｎｔ　ａｎｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０５），ｈｏｗｅｖｅｒ　ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ
ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ａｔ　ｌｏｗ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ａｂｏｖｅ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ（Ｐ＞０．０５）；ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｗｈｅｎ　ｈｉｇｈ，ｍｉｄｄｌｅ
ａｎｄ　ｌｏｗ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｄｅｘ　ｗｅｒｅ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ，ｔｈｅ　Ｋａ，Ｐａｐｐ，Ｐ％，ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｍｏｕｎｔ　ａｎｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ
ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０５）；ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｗｈｅｎ　ｈｉｇｈ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｖｅｒ　ｗａｓ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ，
ｔｈｅ　Ｋａ，Ｐａｐｐ，Ｐ％，ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｍｏｕｎｔ　ａｎｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０５），ｈｏｗｅｖ－
ｅｒ　ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｉｎｃｒｅａｓｅｓ　ａｔ　ｍｉｄｄｌｅ　ａｎｄ　ｌｏｗ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ａｂｏｖｅ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ（Ｐ＞０．０５）．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　Ｐ－ｇｐ
ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ＣｓＡ，Ｄｅｘ　ａｎｄ　Ｖｅｒ　ａｌ　ｃａｎ　ｐｒｏｍｏｔｅ　ｔｈｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ，Ｐ－ｇｐ　ｃａｎ　ｐｒｏｍｏｔｅ　ｅｆｆｌｕｘ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ａｔ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ａｂ－
ｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｓｉｔｅ　ａｎｄ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｓｕｂｓｔｒａｔｅ　ｏｆ　Ｐ－ｇｐ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：ｄａｕｒｉｃｉｎｅ；ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｓｉｎｇｌｅ－ｐａｓｓ　ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｍｏｄｅｌ；ＨＰＬＣ；Ｐ－ｇｐ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ；Ｐ－ｇｐ　ｓｕｂｓｔｒａｔｅ
　　北豆根（Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｍｅｎｉｓｐｅｒｍｉ）为防己科植物
蝙蝠葛（Ｍｅｎｉｓｐｅｒｍｕｍ　Ｄａｕｒｉｃｕｍ　ＤＣ．）的干燥根
茎，临床用于治疗咽喉肿痛、肠道痢疾和风湿痹
痛［１］。北豆根中含有近２０种生物碱，其中含量最高
的为蝙蝠葛碱（ｄａｕｒｉｃｉｎｅ，Ｄａｕ），约占总生物碱５０％
左右［２］。Ｄａｕ具有心血管系统、抗菌和抗癌等广泛
药理作用，是具有良好应用前景的抗心律失常药。
但其口服生物利用度低［３］，严重限制了其临床应用。
不少文献［４－５］报道Ｄａｕ具有逆转多种肿瘤细胞多药
耐药（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＭＤＲ）的作用，并推测
其逆转作用可能是通过与化疗药物竞争性同Ｐ－糖
蛋白（Ｐ－ｇｌｙｃｏｓｉｄｏｐｒｏｔｅｉｎ，Ｐ－ｇｐ）结合，抑制了 Ｐ－ｇｐ
作为外流泵的活性。
Ｄａｕ口服生物利用度很低，是什么因素影响了
其肠吸收？Ｄａｕ能够逆转Ｐ－ｇｐ介导的 ＭＤＲ，但其
是否是Ｐ－ｇｐ底物，Ｐ－ｇｐ是否在肠吸收环节抑制其
吸收从而造成其口服生物利用度降低，该问题尚未
见国内外文献报道。因此本课题采用大鼠在体单向
肠 灌 流 模 型 （ｓｉｎｇｌｅ－ｐａｓｓ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ，
ＳＰＩＰ），考察 Ｐ－ｇｐ抑制剂环孢素 Ａ（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ，
ＣｓＡ）、醋酸地塞米松（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ　ａｃｅｔａｔｅ，Ｄｅｘ）
和维拉帕米（ｖｅｒａｐａｍｉｌ，Ｖｅｒ）对 Ｄａｕ肠吸收的影
响，以揭示Ｐ－ｇｐ在Ｄａｕ肠吸收中的作用，以期为开
发出口服生物利用度高的Ｄａｕ口服制剂提供生物
药剂学相关实验依据。
１　材料
１．１　仪器　ＬＣ－２０１０Ｃ　ＨＴ高效液相色谱仪（包
括ＬＣ－１０ＡＴ泵、ＳＰＤ－１０Ａ 紫外检测器和 ＬＣ
ｓｏｌｕｔｉｏｎ色谱工作站，日本 Ｓｈｉｍｄａｚｕ）；ＶＯＲＴＥＸ
ＧＥＮＩＵＳ　３型混旋仪（德国ＩＫＡ公司）；ＨＬ－２型
恒流泵（上海青浦沪西仪器厂）；ＰＣＤ－１１－１０型超纯
水机（成都品成科技有限公司）；ＧＭ－０．３３Ⅱ津腾
隔膜真空泵（天津市腾达过滤器件厂）。
１．２　试药　Ｄａｕ原料药（深圳市维琪生物科技有限
公司，批号０９０３０６，ＨＰＬＣ级纯度９８．０％以上）；Ｄａｕ
对照品 （深圳市维琪生物科技有限公司，批号
０９０３１５，ＨＰＬＣ级纯度９９．０％以上）；维拉帕米（武汉
银河化工有限公司，批号０８０１２５，ＨＰＬＣ级纯度
９９．０％）；环孢素（武汉远成药业有限公司，批号
０８０３１５，ＨＰＬＣ级纯度９９．０％）；醋酸地塞米松（珠海
远城医药化工有限公司，批号０９０４２３，ＨＰＬＣ级纯
度９９．０％）；聚氧乙烯蓖麻油（分析纯，成都科龙化学
试剂厂）；甲醇和乙腈（色谱纯，迪马公司）；ＨＰＬＣ方
法所用有机溶剂均为色谱纯，ＨＰＬＣ方法所用水为
·７１０１·中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１３期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｌｙ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１３
二次重蒸水，其他试剂均为分析纯。
１．３　试验动物　ＳＤ大鼠，♂，体质量（２００±２０）ｇ，
试验前禁食过夜并自由饮水，未用任何药物，购自四
川大学实验动物中心［许可证号：ｓｃｘｋ（川）－１０－
２００６］。
２　方法
２．１　ＨＰＬＣ测定大鼠肠灌注液中Ｄａｕ的色谱条件
　色谱柱：Ｓｅｐａｘ　Ｃ１８色谱柱（４．６　ｍｍ×２５０　ｍｍ，５
μｍ）；流动相：甲醇－水（７８∶２２，含１％三乙胺和
０．２１％磷酸）；流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长：２８４
ｎｍ；柱温：３０℃，进样体积：２０μＬ。
２．２　样品处理方法　取０．５　ｍＬ灌注样品液，加入
０．５　ｍＬ甲醇沉淀蛋白，涡旋混合５　ｍｉｎ，１２　０００　ｒ·
ｍｉｎ－１离心５　ｍｉｎ，取上清液进样。
２．３　大鼠在体单向肠灌注模型试验方法［６－７］　ＳＤ
大鼠麻醉后固定于手术台上，沿腹中线打开腹腔约
３　ｃｍ，分离空肠段１０　ｃｍ，于两端切口插入塑料管并
用丝线固定，入口端连接恒流泵，备用。用恒流泵将
供试液泵入肠段，流速调至０．２　ｍＬ·ｍｉｎ－１左右。进
口处用已知质量的装有供试液的带盖ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管
进行灌流，出口处连接已知质量的带盖ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ
管，１５　ｍｉｎ停止一组实验，同时迅速更换供试液小
管和收集液小管，直到７５　ｍｉｎ结束实验。实验结束
后立即对供试管和接收管进行称重，计算灌入和收
集的供试液的质量。试验结束时，将所灌流的肠段
剪下，测量其长度和周长，计算半径。收集小瓶中
样品按“２．２”项下方法进行样品处理，按“２．１”项下
色谱条件测定Ｄａｕ的浓度。
２．４　考察助溶剂（聚氧乙烯蓖麻油∶乙醇＝１∶１）对
Ｄａｕ吸收的影响　由于Ｐ－ｇｐ抑制剂环孢素Ａ和醋
酸地塞米松均需加入聚氧乙烯蓖麻油－乙醇（１∶１）进
行助溶，考虑到其可能会影响Ｄａｕ的透膜性，故考
察该助溶剂对Ｄａｕ吸收的影响。
取１０只ＳＤ 大鼠，随机分成 Ａ、Ｂ组（每组５
只），按“２．４”项下实验方法，每组分别以供试液Ⅰ
（浓度为２．０４μｇ·ｍＬ
－１的Ｄａｕ灌注液）和供试液Ⅱ
（含０．８‰ 助溶剂的灌注液）对空肠段进行灌流，收
集出口灌流液，按“２．１”项下色谱条件测定Ｄａｕ浓
度。计算吸收速率常数 （Ｋａ）、表观吸收系数（Ｐａｐｐ）、
吸收百分率（Ｐ％）。
２．５　环孢素Ａ对Ｄａｕ肠吸收的影响　取２０只ＳＤ
大鼠，随机分成 Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组（每组５只），按“２．４”
项下方法，每组分别以供试液Ⅰ（Ｄａｕ质量浓度为
２．１５μｇ·ｍＬ
－１的对照组灌注液）、供试液Ⅱ（Ｄａｕ＋
ＣｓＡ１００．６４μｇ·ｍＬ
－１）、供试液Ⅲ（Ｄａｕ＋ＣｓＡ
５０．３２μｇ·ｍＬ
－１）和供试液Ⅳ （Ｄａｕ＋ＣｓＡ１０．０６
μｇ·ｍＬ
－１）对空肠段进行灌流，收集出口灌流液，按
“２．１”项下色谱条件测定 Ｄａｕ浓度。由公式计算
Ｋａ、Ｐａｐｐ、Ｐ％、不同时间点吸收量和累积吸收量。
２．６　醋酸地塞米松对Ｄａｕ肠吸收的影响　取２０
只ＳＤ大鼠，随机分成 Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组（每组５只），按
“２．４”项下方法，每组分别以供试液Ⅰ（Ｄａｕ质量浓
度为２．５５μｇ·ｍＬ
－１的对照组灌注液）、供试液Ⅱ
（Ｄａｕ＋Ｄｅｘ　１０１．２８μｇ·ｍＬ
－１）、供试液Ⅲ（Ｄａｕ＋
Ｄｅｘ　５０．６４μｇ·ｍＬ
－１）和供试液Ⅳ （Ｄａｕ＋ Ｄｅｘ
１０．１３μｇ·ｍＬ
－１）对空肠段进行灌流，收集出口灌流
液，按“２．１”项下色谱条件测定Ｄａｕ浓度。由公式
计算Ｋａ、Ｐａｐｐ、Ｐ％、不同时间点吸收量和累积吸收
量。
２．７　维拉帕米对Ｄａｕ肠吸收的影响　取２０只ＳＤ
大鼠，随机分成 Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组（每组５只），按“２．４”
项下方法，每组分别以供试液Ⅰ（Ｄａｕ质量浓度为
２．３２μｇ·ｍＬ
－１的对照组灌注液）、供试液Ⅱ（Ｄａｕ＋
Ｖｅｒ　１０１．１６μｇ·ｍＬ
－１）、供试液Ⅲ（Ｄａｕ＋ Ｖｅｒ
５０．５８μｇ·ｍＬ
－１）和供试液Ⅳ （Ｄａｕ＋ Ｖｅｒ　１０．１２
μｇ·ｍＬ
－１）对空肠段进行灌流，收集出口灌流液，按
“２．１”项下色谱条件测定 Ｄａｕ浓度。由公式计算
Ｋａ、Ｐａｐｐ、Ｐ％、不同时间点吸收量和累积吸收量。
２．８　参数的计算　采用重量法分别按公式１和２
计算Ｄａｕ的Ｋａ和Ｐａｐｐ。
　　Ｋα＝（１－
Ｃｏｕｔ·Ｑｏｕｔ
Ｃｉｎ·Ｑｉｎ
）Ｑ
Ｖ
（公式１）
　　Ｐａｐｐ＝
－Ｑ·ｌｎ（Ｃｏｕｔ
·Ｑｏｕｔ
Ｃｉｎ·Ｑｉｎ
）
２πｒｌ
（公式２）
其中，Ｃｉｎ和Ｃｏｕｔ分别为肠道进出口灌流液的浓度（μｇ
·ｍＬ－１）；Ｑ 为灌流速度（约０．２　ｍＬ·ｍｉｎ－１）；Ｑｉｎ和
Ｑｏｕｔ分别为肠道进出口灌流液的体积（ｍｌ）（假定进
出口灌流液密度为１．０ｇ·ｍＬ－１）；Ｖ 为灌流肠段的
体积（ｃｍ３）；ｒ和ｌ分别为所灌流肠段的半径（ｃｍ）和
长度（ｃｍ）。
每组小管（１５　ｍｉｎ）药物吸收量ｍ（μｇ），即每１５
ｍｉｎ从肠道消失的药物量，等于每１５　ｍｉｎ进入肠道
药物量减去离开肠道药物量，其计算公式见公式３。
　　ｍ（μｇ）＝ｍｉ－ｎｉ （公式３）
累积吸收百分率Ｐ％，即一定时间累积吸收药
物总量占累积进入肠段药物总量的百分比，其计算
公式见公式４。
　　Ｐ％＝
∑
５
ｉ＝１
ｍｉ－ｎｉ
∑
５
ｉ＝１
ｍｉ
×１００％ （公式４）
·８１０１· 中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１３期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｌｙ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１３
其中，ｍ为每１５　ｍｉｎ吸收的药物总量（μｇ）；ｍｉ
为每１５　ｍｉｎ进入肠段的药物量（μｇ）；ｎｉ为每１５　ｍｉｎ
离开肠段的药物量（μｇ）。
２．９　统计分析　采用ＳＰＳＳ　１１．５软件对数据进行
单因素方差分析（ＡＮＯＶＡ），当Ｐ＜０．０５时判定差
异有统计学意义。结果以珚ｘ±ｓ表示，组间差异的比
较采用ｔ检验。
３　结果
３．１　助溶剂（聚氧乙烯蓖麻油∶乙醇＝１∶１）对Ｄａｕ
吸收的影响结果　加入增溶剂前后Ｄａｕ的Ｋａ、Ｐａｐｐ
和Ｐ％见表１。
由表１可见，经ｔ检验比较，对照组和实验组的
Ｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％无显著性差异（Ｐ＞０．０５），说明聚氧
乙烯蓖麻油∶乙醇（１∶１）对Ｄａｕ吸收无影响，可以以
０．８‰的含量作为助溶剂应用到灌注液中。
表１　０．８‰增溶剂（聚氧乙烯蓖麻油－乙醇＝１∶１）对Ｄａｕ吸
收参数的影响（珚ｘ±ｓ，ｎ＝５）
Ｔａｂ　１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　０．８‰ｃｏｓｏｌｖｅｎｔ（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ　ＥＬ∶ｅｔｈａｎｏｌ
＝１∶１）ｏｎ　ｔｈｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｅｒｃｅｎｔ　ａｇｅ　ｏｆ
ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ（Ｐ％）ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ（珚ｘ±ｓ，ｎ＝５）
组别
吸收参数
Ｋａ×１０－２
／ｍｉｎ－１
Ｐａｐｐ×１０－３
／ｃｍ·ｍｉｎ－１
Ｐ％±ｓ
对照组 ４．９４±０．００６　５　４．８２±０．０１０　１　１８．１４±０．０１３　８
Ｄａｕ＋助溶剂 ５．１５±０．０１１　２　５．０３±０．００９　３　１９．３３±０．０１０　５
３．２　Ｐ－ｇｐ抑制剂环孢素Ａ对Ｄａｕ吸收的影响
３．２．１　环孢素Ａ对Ｄａｕｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％的影响结果　
未加入环孢素Ａ（对照组）和加入高、中和低３个浓度
环孢素Ａ后，Ｄａｕ的Ｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％分别见表２。
表２　不同浓度环孢素Ａ对Ｄａｕ吸收参数的影响（珚ｘ±ｓ，ｎ＝
５）
Ｔａｂ　２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ　Ａ　ａｔ　ｄｅｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ
ｏｎ　ｔｈｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｅｒｃｅｎｔ　ａｇｅ　ｏｆ　ａｂｓｏｒｐ－
ｔｉｏｎ（Ｐ％）ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ（珚ｘ±ｓ，ｎ＝５）
组别
吸收参数
Ｋａ×１０－２
／ｍｉｎ－１
Ｐａｐｐ×１０－３
／ｃｍ·ｍｉｎ－１
Ｐ％±ｓ
对照组 ５．７４±０．００２　５　 ５．１２±０．００１　１　 １９．０４±０．０２７　８　
Ｄａｕ＋ＣｓＡ
（１０．０６μｇ·ｍＬ－１）
５．９５±０．００１　２　 ５．４３±０．００２　３　 ２１．２４±０．０１３　６
Ｄａｕ＋ＣｓＡ
（５０．３２μｇ·ｍＬ－１）
７．６２±０．００４　４ａ ７．４０±０．０００　６ａ ２６．２６±０．００９　５ａ
Ｄａｕ＋ＣｓＡ
（１００．６４μｇ·ｍＬ－１）
８．９１±０．００５　３ａ ８．６３±０．００１　５ａ ３０．２５±０．００７　４ａ
注：与对照组相比，ａＰ＜０．０１
　　由表２可见，与对照组的Ｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％相比，
高剂量和中剂量组环孢素Ａ的Ｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％均显
著增大，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；而低剂量组
环孢素 Ａ 的 Ｋａ、Ｐａｐｐ和 Ｐ％无显著性差异（Ｐ＞
０．０５）。说明Ｐ－ｇｐ抑制剂环孢素 Ａ促进了Ｄａｕ的
透膜转运，且有浓度依赖性，Ｄａｕ可能是Ｐ－ｇｐ底物。
３．２．２　环孢素Ａ对Ｄａｕ不同时间点吸收量的影响
结果　未加入环孢素Ａ（对照组）和加入高、中和低
３个浓度环孢素Ａ后，Ｄａｕ在不同时间点的吸收量
结果见图１。
３．２．３　环孢素Ａ对Ｄａｕ累积吸收量的影响结果　
未加入环孢素Ａ（对照组）和加入高、中、低３个浓度
环孢素Ａ后，Ｄａｕ累积吸收量结果见图２。
从图１和图２可以看出，高浓度和中浓度环孢
素Ａ均显著增加了Ｄａｕ的吸收量和累积吸收量（Ｐ
＜０．０１），浓度越高，促吸收作用越明显，而低浓度无
显著性影响（Ｐ＞０．０５）。
图１　不同浓度环孢素Ａ对Ｄａｕ不同时间点吸收量的影响（ｎ＝５）
—◆—Ｄａｕ；—■—Ｄａｕ＋ＣｓＡ（１０．０６μｇ·ｍＬ－１）；—▲—Ｄａｕ＋ＣｓＡ
（５０．３２μｇ·ｍＬ－１）；—×—Ｄａｕ＋ＣｓＡ（１００．６４μｇ·ｍＬ－１）
Ｆｉｇ１　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ＣｓＡ　ｏｎ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ
ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｍｅ（ｎ＝５）
—◆—Ｄａｕ；—■—Ｄａｕ＋ＣｓＡ（１０．０６μｇ·ｍＬ－１）；—▲—Ｄａｕ＋ＣｓＡ
（５０．３２μｇ·ｍＬ－１）；—×—Ｄａｕ＋ＣｓＡ（１００．６４μｇ·ｍＬ－１）
图２　不同浓度环孢素Ａ对Ｄａｕ累积吸收量的影响（ｎ＝５）
—◆—Ｄａｕ；—■—Ｄａｕ＋ＣｓＡ（１０．０６μｇ·ｍＬ－１）；—▲—Ｄａｕ＋ＣｓＡ
（５０．３２μｇ·ｍＬ－１）；—×—Ｄａｕ＋Ｖｅｒ（１００．６４μｇ·ｍＬ－１）
Ｆｉｇ　２　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ＣｓＡ　ｏｎ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｅ　ａｂｓｏｒｐ－
ｔｉｏｎ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｍｅ（ｎ＝５）
—◆—Ｄａｕ；—■—Ｄａｕ＋ＣｓＡ（１０．０６μｇ·ｍＬ－１）；—▲—Ｄａｕ＋ＣｓＡ
（５０．３２μｇ·ｍＬ－１）；—×—Ｄａｕ＋Ｖｅｒ（１００．６４μｇ·ｍＬ－１）
３．３　Ｐ－ｇｐ抑制剂醋酸地塞米松对Ｄａｕ吸收的影响
３．３．１　醋酸地塞米松对Ｄａｕ的Ｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％的影
响结果　未加入醋酸地塞米松（对照组）和加入高、
中和低３个浓度醋酸地塞米松后，Ｄａｕ的Ｋａ、Ｐａｐｐ和
Ｐ％见表３。
由表３可见，与对照组的Ｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％相比，
经统计检验比较，高剂量和中剂量组醋酸地塞米松
的Ｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％均显著增大，差异有统计学意义（Ｐ
＜０．０１）；低剂量组的Ｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％也差异也有统
·９１０１·中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１３期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｌｙ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１３
计学意义（Ｐ＜０．０５）。
表３　不同浓度醋酸地塞米松对Ｄａｕ吸收参数的影响（珚ｘ±
ｓ，ｎ＝５）
Ｔａｂ３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ　ａｃｅｔａｔｅ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎ－
ｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｅｒｃｅｎｔ　ａｇｅ　ｏｆ
ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ（Ｐ％）ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ（珚ｘ±ｓ，ｎ＝５）
组别
吸收参数
Ｋａ×１０－２
／ｍｉｎ－１
Ｐａｐｐ×１０－３
／ｃｍ·ｍｉｎ－１
Ｐ％±ｓ
对照组 ５．６４±０．０１４　７　 ５．１１±０．００１　５　 １７．６９±０．０２５　７
Ｄａｕ＋Ｄｅｘ
（１０．１３μｇ·ｍＬ－１）
８．９３±０．００３　２ａ ８．５２±０．００５　３ａ ２３．２４±０．０１３　６ａ
Ｄａｕ＋Ｄｅｘ
（５０．６４μｇ·ｍＬ－１）
１４．６９±０．００８　４ｂ　１５．３±０．００１　０ｂ　 ３２．５９±０．０１６　３ｂ
Ｄａｕ＋Ｄｅｘ
（１０１．２８μｇ·ｍＬ－１）
２０．３２±０．０１４　３ｂ　１９．２１±０．００１　５ｂ　 ３７．２２±０．００１０　４ｂ
注：与对照组相比，ａＰ＜０．０５，ｂ　Ｐ＜０．０１
以上结果说明Ｐ－ｇｐ抑制剂醋酸地塞米松也促
进了Ｄａｕ的透膜转运，具有浓度依赖性，进一步证
明了Ｄａｕ是Ｐ－ｇｐ底物。
３．３．２　醋酸地塞米松对Ｄａｕ在不同时间点吸收量
的影响结果　未加入醋酸地塞米松（对照组）和加入
高、中、低３个浓度醋酸地塞米松后，Ｄａｕ在不同时
间点的吸收量结果见图３。
图３　不同浓度醋酸地塞米松对Ｄａｕ不同时间点吸收量的影响（ｎ＝
５）
—◆—Ｄａｕ；—■—Ｄａｕ＋Ｄｅｘ（１０．１３μｇ·ｍＬ－１）；—▲—Ｄａｕ＋Ｄｅｘ
（５０．６４μｇ·ｍＬ－１）；—×—Ｄａｕ＋Ｄｅｘ（１０１．２８μｇ·ｍＬ－１）
Ｆｉｇ　３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　Ｄｅｘ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａ－
ｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｍｅ（ｎ＝５）
—◆—Ｄａｕ；—■—Ｄａｕ＋Ｄｅｘ（１０．１３μｇ·ｍＬ－１）；—▲—Ｄａｕ＋Ｄｅｘ
（５０．６４μｇ·ｍＬ－１）；—×—Ｄａｕ＋Ｄｅｘ（１０１．２８μｇ·ｍＬ－１）
３．３．３　醋酸地塞米松对Ｄａｕ累积吸收量的影响结
果　未加入醋酸地塞米松（对照组）和加入高、中和
低３个浓度醋酸地塞米松后，Ｄａｕ累积吸收量结果
见图４。
从图３和图４可以看出，高、中和低浓度醋酸地
塞米松均显著增加了Ｄａｕ的吸收量和累积吸收量
（Ｐ＜０．０１），浓度越高，促吸收作用越明显。
３．４　Ｐ－ｇｐ抑制剂维拉帕米对Ｄａｕ吸收的影响
３．４．１　维拉帕米对Ｄａｕｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％的影响结果
　未加入维拉帕米（对照组）和加入高、中和低３个
浓度维拉帕米后，Ｄａｕ的Ｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％见表４。
图４　不同浓度醋酸地塞米松对Ｄａｕ累积吸收量的影响（ｎ＝５）
—◆—Ｄａｕ；—■—Ｄａｕ＋Ｄｅｘ（１０．１３μｇ·ｍＬ－１）；—▲—Ｄａｕ＋Ｄｅｘ
（５０．６４μｇ·ｍＬ－１）；—×—Ｄａｕ＋Ｄｅｘ（１０１．２８μｇ·ｍＬ－１）
Ｆｉｇ　４　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｄｅｘ　ｏｎ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｅ　ａｂ－
ｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｍｅ（ｎ＝５）
—◆—Ｄａｕ；—■—Ｄａｕ＋Ｄｅｘ（１０．１３μｇ·ｍＬ－１）；—▲—Ｄａｕ＋Ｄｅｘ
（５０．６４μｇ·ｍＬ－１）；—×—Ｄａｕ＋Ｄｅｘ（１０１．２８μｇ·ｍＬ－１）
表４　不同浓度维拉帕米对Ｄａｕ吸收参数的影响（珚ｘ±ｓ，ｎ＝
５）
Ｔａｂ　４　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｖｅｒａｐａｍｉｌ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ
（１０．１２，５０．５８，１０１．１６μｇ·ｍＬ
－１）ｏｎ　ｔｈｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｐａｒａｍｅ－
ｔｅｒｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｅｒｃｅｎｔ　ａｇｅ　ｏｆ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ（Ｐ％）ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ（珚ｘ±
ｓ，ｎ＝５）
组别
吸收参数
Ｋａ×１０－２
／ｍｉｎ－１
Ｐａｐｐ×１０－３
／ｃｍ·ｍｉｎ－１
Ｐ％±ｓ
对照组 ４．７８±０．００２　５　 ５．０２±０．００１　１　 １７．８１±０．０２７　８
Ｄａｕ＋Ｖｅｒ
（１０．１２μｇ·ｍＬ－１）
４．７６±０．００１　２　 ５．４３±０．００２　３　 １７．９４±０．０１３　６
Ｄａｕ＋Ｖｅｒ
（５０．５８μｇ·ｍＬ－１）
５．１１±０．００４　４　 ４．９５±０．０００　６　 １９．３６±０．０１９　５
Ｄａｕ＋Ｖｅｒ
（１０１．１６μｇ·ｍＬ－１）
６．７３±０．００５　３ａ ６．３８±０．００１　５ａ ２２．０３±０．０１７　４ａ
注：与对照组相比，ａＰ＜０．０１
经统计学ｔ检验，与对照组的相比，中剂量和低
剂量维拉帕米的Ｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％无显著性差异（Ｐ＞
０．０５）；而高剂量组下的Ｋａ、Ｐａｐｐ和Ｐ％差异有统计
学意义（Ｐ＜０．０１）。说明维拉帕米在高剂量下能促
进了Ｄａｕ的透膜转运，其促进作用较小。
３．４．２　维拉帕米对Ｄａｕ不同时间点吸收量的影响结
果　未加入维拉帕米（对照组）和加入高、中、低３个
浓度维拉帕米后，Ｄａｕ在不同时间点的吸收量见图５。
图５　不同浓度维拉帕米对Ｄａｕ不同时间点吸收量的影响（ｎ＝５）
—◆—Ｄａｕ；—■—Ｄａｕ＋Ｖｅｒ（１０．１２μｇ·ｍＬ－１）；—▲—Ｄａｕ＋Ｖｅｒ
（５０．５８μｇ·ｍＬ－１）；—×—Ｄａｕ＋Ｖｅｒ（１０１．１６μｇ·ｍＬ－１）
Ｆｉｇ　５　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　Ｖｅｒ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａ－
ｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｍｅ（ｎ＝５）—◆—Ｄａｕ；—■—Ｄａｕ＋
Ｖｅｒ（１０．１２μｇ·ｍＬ－１）；—▲—Ｄａｕ＋Ｖｅｒ（５０．５８μｇ·ｍＬ－１）；—×—
Ｄａｕ＋Ｖｅｒ（１０１．１６μｇ·ｍＬ－１）
·０２０１· 中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１３期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｌｙ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１３
３．４．３　维拉帕米对Ｄａｕ累积吸收量的影响结果　
未加入维拉帕米（对照组）和加入高、中、低３个浓度
维拉帕米后，Ｄａｕ累积吸收量见图６。
图６　不同浓度维拉帕米对Ｄａｕ累积吸收量的影响（ｎ＝５）
—◆—Ｄａｕ；—■—Ｄａｕ＋Ｖｅｒ（１０．１２μｇ·ｍＬ－１）；—▲—Ｄａｕ＋Ｖｅｒ
（５０．５８μｇ·ｍＬ－１）；—×—Ｄａｕ＋Ｖｅｒ（１０１．１６μｇ·ｍＬ－１）
Ｆｉｇ　６　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｖｅｒ　ｏｎ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｅ　ａｂ－
ｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｄａｕｒｉｃｉｎｅ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｍｅ（ｎ＝５）
—◆—Ｄａｕ；—■—Ｄａｕ＋Ｖｅｒ（１０．１２μｇ·ｍＬ－１）；—▲—Ｄａｕ＋Ｖｅｒ
（５０．５８μｇ·ｍＬ－１）；—×—Ｄａｕ＋Ｖｅｒ（１０１．１６μｇ·ｍＬ－１）
　　从图５和图６可以看出，高浓度维拉帕米显著
增加了Ｄａｕ的吸收量和累积吸收量（Ｐ＜０．０１），而
中、低浓度无显著性影响（Ｐ＞０．０５）。
４　讨论
在体肠灌流模型通过测定药物经过肠段后从灌
流液消失的量来计算Ｋａ和Ｐａｐｐ等吸收动力学参数。
ＳＰＩＰ方法一般是以较低流速（约０．２　ｍＬ·ｍｉｎ－１）对
一定肠段进行单向灌流，灌流速度能较好地模拟肠
道蠕动状态。由于肠道本身对水分的吸收较大，往
往会导致灌流液体积随时间变化，因此需选用肠不
吸收的物质作为灌流液体积的标示物，目前多选用
酚红和 １４Ｃ标记的聚乙二醇（ＰＥＧ）等。然而，酚红
灌流过程中也存在一定程度的肠吸收［８］，且本身可
能干扰某些化合物的分析测定；而１４　Ｃ标记的 ＰＥＧ
由于具有放射性，存在安全性问题。重量分析法是
用预先称重的具塞收集管收集一段时间的灌流液，
灌流结束后再称重，通过计算灌流前后重量差对灌
流液的浓度进行校正的方法［８］。用重量分析法校正
因肠道吸收分泌水分致灌流液体积发生的变化，与
加入标示物法相比，可避免采用标示物带来的系列
问题，且简便易行，降低了检测的工作量。
Ｐ－ｇｐ抑制剂能够抑制Ｐ－ｇｐ对药物的外排作
用，从而可能促进药物的吸收。本课题选择了典型
的Ｐ－ｇｐ抑制剂环孢素 Ａ、醋酸地塞米松和维拉帕
米，来考察其对Ｄａｕ吸收的影响，从而判断Ｐ－ｇｐ是
否会在吸收环节主动外排Ｄａｕ。结果显示，环孢素
Ａ或醋酸地塞米松能显著促进 Ｄａｕ的透膜转运。
维拉帕米仅在高剂量下能促进其吸收，其促进作用
较环孢素Ａ或醋酸地塞米松小。
Ｄａｕ在肠吸收过程中受到Ｐ－ｇｐ外排作用，Ｄａｕ
是Ｐ－ｇｐ的底物，这可能是造成其口服生物利用度
低的原因之一，但关于Ｄａｕ和Ｐ－ｇｐ之间的相互作
用机制尚需进一步深入研究。
另外，除Ｐ－ｇｐ外肠道上皮细胞中还有很多其
他转运体，Ｄａｕ是否会受到肠上皮细胞中其他转运
体的转运需要进一步的实验研究。
参考文献：
［１］　中国药典．一部［Ｓ］．２０１０：９２．
［２］　徐国钧，徐珞珊，何宏贤，等．中国药材学［Ｍ］．北京：中国医药
科技出版社，１９９６：１．
［３］　陈淑娟，杨毅梅，刘奕明，等．蝙蝠葛碱大鼠体内药物代谢动力
学研究［Ｊ］．中国药理学通报，２００１，１７（２）：２２５－２３３．
［４］　田晖，潘启超．双苄基异喹啉生物碱蝙蝠葛碱与蝙蝠葛苏林碱
逆转多药耐药性的比较研究［Ｊ］．癌症，１９９６，１５（６）：４１０－４１４．
［５］　李建华，秦凤绮，杨佩满．蝙蝠葛碱逆转 Ｋ５６２／ＡＤＭ 细胞多耐
药性的研究［Ｊ］．大连医科大学学报，２００２，２６（２）：９４－９７．
［６］　Ｒｉｔｅｓｈ　Ｊａｉｎ，Ｓｒｉｄｈａｒ　Ｄｕｖｖｕｒｉ，Ｖｉｒａｌ　Ｋａｎｓａｒａ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ
ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｎｏｖｅｌ－ｄｉｐｅｐｔｉｄｅ　ｐｒｏｄｒｕｇｓ　ｏｆ　ｓａｑｕｉｎａｖｉｒ　ｉｎ　ｒａｔｓ
［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，２００７，３３６：２３３－
２４０．
［７］　Ｙｕｎｎ－Ｆａｎｇ　Ｈｏ，Ｍｉｎｇ－Ｙｅｎ　Ｌａｉ，Ｈｓｉｕ－Ｙｉｎｇ　Ｙｕ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ
ｒａｔ　ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｓｉｎｇｌｅ－ｐａｓｓ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ
ｐｒｅｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎｄｉｎａｖｉｒ　ｕｎｄｅｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ
ｒａｔｅｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｆｏｒｍｏｓ　Ｍｅｄ　Ａｓｓｏｃ，２００８，１０７（１）：３７－４５．
［８］　聂淑芳，潘卫三，杨星钢．对大鼠在体肠单向灌流技术中重量法
的评价［Ｊ］．中国新药杂志，２００５，１４（１０）：１１７６－１１７９．
［收稿日期］２０１１－０９－２１
［基金项目］江苏省科技厅资助课题（编号：ＢＳ２００５０３７）　［作者简介］何斌，女，硕士，副主任医师，电话：０５１４－８７３７３８５５，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｚｈｅｈｉｎ＠ｙａ－
ｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ　［通讯作者］张育，男，硕士，教授，电话：０５１４－８７３７８５５，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｚｚｙ１０１８２００１＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
基于ＦＬＳ细胞ＥＲＫ信号通路机制的ＴＨＤ抗ＣＩＡ作用
何斌１，张学增２，张育１，许金鑫１，马莹莹１　（１．扬州大学临床医学院，江苏 扬州２２５００１；２．青岛市卫生学校，山东 青岛，
２６６０７１）
［摘要］　目的：研究沙利度胺（ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ，ＴＨＤ）对类风湿关节炎（ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ）动物模型ＣＩＡ大鼠血清炎症因
子白介素－１β（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１β，ＩＬ－１β）、肿瘤坏死因子－α（ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ－α，ＴＮＦ－α）、血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏ－
ｔｈｅｌｉａｌ　ｃｅｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）、基质金属蛋白酶－１，－２，－９（ｍａｔｒｉｘ　ｍｅｔａｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－１，－２，－９，ＭＭＰ－１，－２，－９）表达的影响，及
·１２０１·中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１３期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｌｙ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１３