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硒对恩施碎米荠叶片光合色素及非酶抗氧化物的影响



全 文 :第 24 期
收稿日期:2011-05-14
基金项目:湖北省教育厅科学研究计划重点项目(D20101905)
作者简介:雷红灵(1967-),女,湖北鹤峰人, 副教授,博士,研究方向为植物生化及富硒植物资源的开发与利用,(电话)13986860035
(电子信箱)leihl123366@163.com。
第 50 卷第 24期
2011 年 12月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 50 No.24
Dec.,2011
硒是植物生长的有益元素,低浓度的硒可以促
进植物的光合作用 [1]、提高植物的抗氧化能力 [2-4],
并与植物的抗衰老 [5,6]、抗逆境胁迫 [7,8]等密切相关。
而对于富硒植物来说,硒则是其必需元素[9],可以促
进富硒植物叶片中有效成分的合成 [10],通过增强抗
氧化酶活性而提高富硒植物的抗氧化能力[11]。 试验
在前期研究 [10,11]的基础上,进一步探讨硒对恩施市
高硒区生长的超富硒植物恩施碎米荠(Cardamine
enshiensis T. Y. Xiang & Y. Y. Wu)叶片的光合色素
及非酶抗氧化物如还原型谷胱甘肽(GSH)、维生素
C(VC)等的影响,为进一步了解硒对富硒植物生长
发育的促进机制提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料及处理
取生长在高硒区 (湖北省恩施市双河乡鱼塘
坝)的恩施碎米荠种子,萌发后在植物培养室中进
行液体培养 [10],待长成一定大小的幼苗后,用含亚
硒酸钠 0、15、30、45、60、75、90 mg / L 7 个质量浓度
处理的营养液培养一个月, 采集各处理的叶片,用
硒对恩施碎米荠叶片光合色素及非酶抗氧化物的影响
雷红灵 1,吴金龙2
(1. 湖北民族学院生物资源保护与利用湖北省重点实验室,湖北 恩施 445000;
2.青岛啤酒[台州]有限公司,浙江 台州 318000)
摘要:为深入了解硒对富硒植物生长发育的促进作用,探讨了水培营养液中不同亚硒酸钠质量浓度对恩
施碎米荠(Cardamine enshiensis T. Y. Xiang & Y. Y. Wu)幼苗叶片的光合色素、还原型谷胱甘肽(GSH)、
维生素 C(VC)以及叶片中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量的影响。 结果表明,硒的质量浓度在 30~
90 mg / L 时,可以促进恩施碎米荠叶片叶绿素 b 的合成;而且叶片中 GSH 和 VC 的含量有显著增加,并在
45 mg / L 时达到最大值;在 30~60 mg / L 时,叶片中的 MDA 生成显著减少。 可见,适量的硒可以提高恩施
碎米荠叶片的光合效率,促进抗氧化物的生成,抑制脂质过氧化反应。
关键词:恩施碎米荠;硒;光合色素;谷胱甘肽;维生素 C;丙二醛
中图分类号:Q949.748.3;O613.52;Q945.1 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2011)24-5157-03
Effect of Selenium on the Photosynthesis and Nonenzymatic Antioxidants in
Cardamine enshiensis Leaves
LEI Hong-ling1,WU Jin-long2
(1. Key Laboratory of Biological Resources Protection and Utilization of Hubei Province, Hubei University for Nationalities, Enshi 445000,
Hubei, China; 2. Tsingtao Brewery [Taizhou] Co.,Ltd., Taizhou, 318000, Zhejiang, China)
Abstract: The effect of different Na2SeO3 concentrations on the photosynthetic pigments, nonenzymatic antioxidants such as
GSH and VC in Cardamine enshiensis T. Y. Xiang & Y. Y. Wu seedling leaves was studied. The results showed that the
synthesis of Chlorophyll b was improved at the Se concentration of 30~90 mg / L, the contents of GSH and VC were increased
at the Se concentration of 30~90 mg / L, and reached to peak value at the Se concentration of 45 mg / L, the generation of
MDA was significantly decreased at the Se concentration of 30~60mg /L. The above showed that the proper Se concentration could
improve the photosynthetic efficiency, increase the content of antioxidants and inhibit lipid peroxidation in C. enshiensis leaves.
Key words: Cardamine enshiensis T. Y. Xiang & Y. Y. Wu; selenium; photosynthetic pigment; GSH; VC; MDA
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2011.24.069
湖 北 农 业 科 学 2011 年
于各项生理生化指标的测定。
1.2 主要仪器与试剂
仪器主要是 TU-1810 紫外 /可见分光光度计
(北京普析通用仪器有限责任公司);GSH 试剂盒、
VC 试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒均为南京建成生
物工程研究所生产; 其他试剂均为国产分析纯;试
验用水为双蒸水。
1.3 光合色素的测定
取不同硒质量浓度营养液处理的恩施碎米荠
相同叶序和大小的叶片各 0.500 0 g,剪碎,放入 10
mL 棕色容量瓶中,加入 95%乙醇,定容。 黑暗中放
置 24 h(中间振摇若干次),直到叶片全部变白。 以
95%乙醇为空白,分别在 665、649、470 nm 下测定各
处理的吸光度值,按下列公式计算各种光合色素的
含量。
叶绿素 a(mg / L),Ca=13.95 A665-6.88 A649;
叶绿素 b(mg / L),Cb=24.96 A649-7.32 A665;
胡萝卜素(mg / L),Cx=(1 000 A470-2.05 Ca-114.8
Cb) / 229;
光合色素的质量分数(mg / g)=[光合色素的含
量×提取液体积×稀释倍数] /样品鲜重。
1.4 叶片中 GSH、VC和 MDA的测定
取不同硒质量浓度营养液培养的相同部位和
大小的恩施碎米荠幼苗叶片各 0.500 0 g, 边研磨边
加入少量的 5%三氯乙酸, 研磨成匀浆后于 9 000
r / min 离心 25 min,取上清液,用 5%三氯乙酸定容
至 25 mL。GSH、VC和 MDA的测定按照试剂盒说明
书进行。试验所得数据采用 DPS 6.2 统计软件进行
处理,应用 Duncan′s 新复极差法进行多重比较(x±
s,n=4)。
2 结果与分析
2.1 硒对恩施碎米荠叶片光合色素含量的影响
光合色素含量的多少可以影响植物的光合作
用强弱,从而影响植物的生长发育,试验中不同硒
质量浓度营养液对恩施碎米荠叶片光合色素含量
的影响结果见图 1。从图 1可见,硒对恩施碎米荠叶
片中的叶绿素 a、胡萝卜素含量的影响不大,而所有
硒处理的叶绿素 b 质量分数均高于对照, 其中 30~
90 mg / L 硒处理与对照有显著的差异, 而各处理之
间大多数无显著的差异, 并在 75 mg / L处理时达到
最大值。 可见,硒对植物光合色素含量的影响主要
表现在促进叶绿素 b的合成方面。
2.2 硒对恩施碎米荠叶片 GSH和 VC含量的影响
还原型谷胱甘肽(GSH)和维生素 C(VC)是植
物体内重要的非酶体系抗氧化物,考察不同硒质量
浓度营养液处理的恩施碎米荠叶片中 GSH、VC 含
量的变化规律,可以揭示硒对恩施碎米荠的抗氧化
能力影响程度。 不同硒质量浓度营养液中恩施碎米
荠叶片的 GSH、VC 两种物质的含量变化趋势见图
2。 由图 2可以看到,硒对恩施碎米荠叶片中的 GSH
和 VC 含量的影响趋势基本相同,GSH 含量的变化
(图 2A) 在质量浓度为 15 mg / L 硒营养液中与对照
无显著差异,在其他硒质量浓度营养液中的含量都
比对照有显著增加。 而所有硒处理的叶片中,VC含
量与对照相比,均有显著地增加(图 2B)。 两种物质
都在 45 mg / L的硒质量浓度时达到最大值, 随后增
加幅度减小。 说明硒质量浓度在 30~90 mg / L 时可
以促进叶片 GSH 和 VC 的生成,但当超过一定质量
浓度后,促进作用会逐渐减弱,甚至可能有相反作
用。 这说明硒也可以通过增加非酶体系抗氧化物的
合成来提高植物的抗氧化能力。
2.3 硒对恩施碎米荠叶片 MDA含量的影响
不同硒质量浓度营养液对恩施碎米荠叶片的
MDA 含量影响结果见图 3。 从图 3 可见,当硒的质
70
60
50
40
30
20
GS
H





//μ
g/
g
0 15 30 45 60 75 90
硒//mg/L
图 2 硒对恩施碎米荠叶片 GSH和 VC含量的影响
720
600
480
360
240
120
VC





//μ
g/
g
0 15 30 45 60 75 90
硒//mg/L
d
cd ab
a ab ab
bc
A
B
c
b
a
a
b
b b
图 1 硒对恩施碎米荠叶片光合色素含量的影响
12
10
8
6
4
2
0光








//m
g/
g
0 15 30 45 60 75 90
硒//mg/L
叶绿素 a
叶绿素 b
胡萝卜素d cd
cb
ab
a
bca
a
ab
b
ab
c
ab
b
b
c d
c
b
c
5158
第 24 期
量浓度为 15~75 mg / L 时,恩施碎米荠叶片 MDA 的
生成被抑制, 在 30~60 mg / L 时,MDA 的生成比对
照显著减少。 实际观测中发现,恩施碎米荠幼苗根
系在硒浓度为 30 mg / L 时,比对照的根数就显著增
多。 当硒质量浓度增加到 90 mg / L时, 恩施碎米荠
叶片的 MDA显著地增加。
3 小结与讨论
植物进行光合作用时,光合色素中只有少数的
叶绿素 a可以吸收光能并将之转化, 大多数的叶绿
素 a 和所有的叶绿素 b 都只是起传递光能的作用。
本研究显示, 硒可以促进恩施碎米荠叶片叶绿素 b
的合成,而叶绿素 b 的增加有利于光能的传递。 说
明适量浓度的硒是通过提高富硒植物恩施碎米荠
叶片对光能的传递而有利于光合作用的。
维生素 C 和谷胱甘肽都是植物体内重要的抗
氧化物质,VC 作为一种强抗氧化剂,可以通过自身
的氧化而保护其他的抗氧化物。 所以适量的硒通过
促进 VC的合成而保护其他抗氧化物如 GSH、 维生
素 E等的还原性。 GSH是生物体内最重要的非蛋白
巯基化合物,可直接或间接参与许多生物功能表达
过程, 提高机体解毒及增强抗氧化的能力, 而且
GSH 还是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的组成成
分,并且是其氧化还原反应的底物;而 GSH-Px 是植
物体内重要的抗氧化酶,硒是该酶的必需基团组成
成分;硒进入植物体内既能促进 GSH 的合成,还可
以参与 GSH-Px 的合成, 并保证 GSH-Px 所催化的
氧化还原反应顺利进行, 这将有利于清除自由基。
所以在适宜的硒质量浓度下,GSH 的质量分数随硒
质量浓度的提高而增加。 GSH与体内硒的质量浓度
相关性可以用二次多项式进行拟合 (待发表),具
体为 x2 =47.928 6 -0.000 964x1 + 0.000 005x12,R2 =
0.897 9,P=0.037 6<0.05。
丙二醛是植物发生脂质过氧化生成的产物之
一。 植物体内的 MDA 含量多少可以反映机体的脂
质过氧化程度大小。 恩施碎米荠是一种具有超富硒
能力的植物,硒对于此种植物的生长是一种必需元
素,所以一定量的硒水平提供了该富硒植物的适宜
生长营养环境,使脂质过氧化的发生在减少。 但随
着硒质量浓度的增加, 超出了植物的耐受限度后,
植物就会受到毒害,使过氧化物增加,造成 MDA 生
成增多。 这说明硒处理液质量浓度≥90 mg / L后,对
恩施碎米荠的生长已经开始产生逆境胁迫作用。
硒对富硒植物恩施碎米荠的影响可以通过提
高叶片对光能的传递而促进恩施碎米荠的生长,并
通过促进非酶抗氧化物生成而提高恩施碎米荠的
抗氧化能力,但营养液中硒质量浓度≥90 mg / L 时,
硒则开始对恩施碎米荠的生长发育产生不利影响。
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(责任编辑 王 珞)
图 3 硒对恩施碎米荠叶片 MDA 含量的影响
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20
15
10
5
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0 15 30 45 60 75 90
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