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枸头橙茎陷点病种子带毒的鉴定(初报)



全 文 :19 9 5年第 3期 浙 江 柑 枯
拘头橙茎陷点病种子带毒的鉴定 (初报 )*
陈国庆 王洪祥 严森祥
(浙江省科学院柑桔研究所 刀 4 70 0 )
沂书
由柑桔衰退病毒 ( Ct r i u st r i st z e av ir u s,
C l
,
V )引起的茎陷点病是目前世界上为害柑
桔最严重的病害之一 长期以来一直认为
该病可通过嫁接和几种蚜虫媒介传播 , ·但
不能通过种子传播 . 近年来作者研究发
现 , 浙江黄岩桔区的砧木品种— 构头橙也受到该病的严重危害 , 病树矮化 , 树冠
缩小 , 树势下 降 , 产生高比率的小型果 ,
部分种子败育 。 作者通过大量的调查 , 认
为构头橙种子有带毒的可能性 .
1 9 91 年 , 在第十一届国际柑桔病毒学
会会议上 , 意大利学者 D va in 。 等报道 ,
通过酶联免疫吸附测定技术 (E u SA ) 和
免疫电镜技术 ( I E M ) 在沙莫蒂甜橙 、 ·袖
子和 马 叙葡 萄袖 的 病果种子 中检测 到
c T V
. 笔者从 19 2年开始 , 利用 E LI s A
对拘头橙茎陷点病种子的带毒情况进行了
研究 , 结果简报如下 . ’ `
供试种子来自浙江省柑桔
所本部受 C T V 严重侵染的实生拘头橙采
种母本树 。 对照种子采 自所本部的积实生
树 `
1
.
2 脱 IS 产检测 基本按 B ar 一 Jos cP h 等
( 1 9 7 9 ) 的双抗体夹 心法 ( D A S一 E L I S A )
对 1 993 年和 1 994 年成熟的拘头橙种子 、
积种子的外种皮 、 内种皮 、 胚和胚乳行测
定 . 并设墨西哥来檬 C T V 病叶脉为 阳性
对照 , 健康橄柑实生苗叶脉为 阴性对照 ,
缓冲液为空 白对照 . 每次检测重复 3 次 ,
每重复用 5 粒种子 . C T V 多克隆抗血清
(免抗 ) 和 单克隆抗体 ( 10 E 3 单株 , 鼠
抗 ) 由台湾大学 苏鸿基教授 提供 . 用
D G 3O2 2 A 型酶联免疫检测仪 , 在 ’ 49 9 n m
波长下定量测定结果 `
2 结果和讨论
经 2 次 D A S一 E L IS A 法测定 , 供试拘
头橙种子内种皮 、 胚和胚乳呈阳性 , 内种
皮 的带毒量高于肠和胚乳 , 外种皮呈阴
性 . 拘头橙种子在 4℃冰箱内贮藏 1 ~ 2 年
后仍携带 C T v , 但其带毒量有所下降 。 作
为对照的积种子各部位均呈阴性 .
结果表明 , 受茎陷点型衰退病严重感
染的构头橙病果种子携带有其病原 C T V ,
种子各部位 的含毒量 以内种皮为高 . 抗
C T v 的积种子不带毒 . 由于种子带毒 , 就
很有可能传毒 . 关予传毒方面的研究在进
一步进行中 .
(参考文献略 )
* 系浙江省自然科学基金资助项 目 . 福班农科院吴如健和杨辉先生帮助进行 E L sI A 检浏 ; 美国加州大学
c .N oR 讯 a hc er 博士和枷 W“ l祖。 s 、 .P .c aB 如n ce 先生提供有关资杆浓此一并致谢 .
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