全 文 ：文章编号:1001-411X(2002)01-0093-01
影响蕉柑胚性愈伤组织增殖的因素
王声斌1 ,黄自然2 ,陈　歆1 ,徐建华1
(1 华南农业大学生命科学学院 , 广东 广州 510642;2 华南农业大学艺术设计学院 , 广东 广州 510642)
Effect of Relevant Factors on the Proliferation of Citrus reticulata var.
tankan Hayata Embryonic Callus
WANG Sheng-bin1 , HUANG Zi-ran2 , CHEN Xin1 , XU Jian-hua1
(1 College of Life Science , South China Agric.Univ., Guangzhou 510642 , China;2 College of Art Design , South China
Agric.Univ., Guangzhou 510642 , China)
关键词:蕉柑;胚性愈伤组织;增殖
Key words:Citrus reticulata var.tankan Hayata;embryonic callus;proliferation
　　柑橘胚性愈伤组织具有广泛的研究用途 , 是种质资源离
体保存 、外源基因转化的理想材料.柑橘胚性愈伤组织的生
长受培养基组成成分影响显著[ 1 , 2] , 探讨柑橘胚性愈伤组织
生长的影响因素将为胚性愈伤组织的长期继代保存提供依
据 ,而且生长状况良好的柑橘胚性愈伤组织的获得是进行原
生质体融合 、外源基因转化及相关生物技术研究的基础.
1　材料与方法
　　材料:华南农业大学生物物理实验室诱导的蕉柑(Citrus
reticulata var.tankan Hayata)胚性愈伤组织.
培养基:以 MT 为基本培养基 ,添加不同浓度的细胞分裂
素(BA、KT)、各种添加物(麦芽提取物 、水解酪蛋白 、谷氨酰
胺)或以其他碳源(葡萄糖 、乳糖 、半乳糖)替代原培养基中的
蔗糖 , 调节 pH=5.7 , 按 25 mL/瓶分装 , 在 121℃灭菌 17 min ,
保存备用.
蕉柑胚性愈伤组织培养:将胚性愈伤组织按 0.4 ～ 0.5
g/瓶的比例接种到上述培养基中 , 在胚性愈伤组织与培养基
之间隔有一层灭菌的滤纸 , 20～ 30 d 后 , 称取胚性愈伤组织的
鲜质量 ,每个处理重复 3 次 , 统计结果.数据统计分析采用邓
肯氏新复极差检验法(DMRT法).
培养条件:26～ 30℃,光照每 16 h/d , 光强 2 400 Lx.
2　结果与分析
2.1　不同碳源对蕉柑胚性愈伤组织增殖的影响
试验比较了葡萄糖 、蔗糖 、半乳糖 、乳糖 4 种碳源对蕉柑
胚性愈伤组织增殖的影响 , 结果显示 , 不同碳源对蕉柑胚性
愈伤组织生长的促进作用存在一定的差异.几种碳源相比 ,
蔗糖 、葡萄糖对胚性愈伤组织的增殖效果较好 , 与乳糖 、半乳
糖相比达到了 0.05 水平显著差异.
2.2　不同添加物对蕉柑胚性愈伤组织增殖的影响
　　将麦芽提取物 、水解酪蛋白 、谷氨酰胺 3种添加物添加到
MT培养基 , 比较其对胚性愈伤组织增殖的影响 , 结果显示 ,
不同添加物对蕉柑胚性愈伤组织的增殖都有一定的促进作
用.胚性愈伤组织在添加有 500 mg·L-1的水解酪蛋白(简称
CH)、谷氨酰胺 、麦芽提取物的 MT 培养基上生长 28 d 后 , 鲜
质量分别增长了 4.05、3.56 、3.50 倍 , 而在不含添加物的 MT
培养基上 ,胚性愈伤组织经过相同天数的生长 , 鲜质量只增
长了 3.16 倍.显著性测验表明 , 添加物 CH 与对照之间达到
了0.05 显著差异水平 ,可见 CH 的促进作用更为明显.
2.3　细胞分裂对蕉柑胚性愈伤组织增殖的影响
　　试验比较了含 5.0 、1.0 、0.5 mg·L-1BA 和 0.5 mg·L-1 KT
的MT+CH 500 mg·L-1+蔗糖 50 g/ L培养基对胚性愈伤组织
增殖的影响 , 结果显示 , 就愈伤组织的鲜质量而言 , 含 5.0
mg·L-1BA的处理与其他 3 种处理之间达到了 0.05 水平显著
差异 , 这一结果表明细胞分裂素对蕉柑胚性愈伤组织增长的
促进作用主要表现在高浓度条件下.
3　讨论
　　胚性愈伤组织是诱导胚状体 、植株再生的重要材料 , 为
此 ,本试验对影响蕉柑胚性愈伤组织生长的因素进行了研
究.陈善春等[ 1]较系统地研究了培养基中碳源对柳橙胚性愈
伤组织生长的影响 , 指出葡萄糖 、蔗糖对其胚性愈伤组织生
长的促进作用显著 , 而乳糖 、半乳糖 、麦芽糖的效果较差.吴
金虎等[ 3]发现培养基中高浓渡细胞分裂素(BA)有利于 柑
胚性愈伤组织增殖 , 而低浓渡细胞分裂素则促进胚状体发
生.甘霖等[ 4]指出培养基中谷氨酰胺能加快山金柑胚性愈伤
组织的增殖.本研究结果也表明 , 蕉柑胚性愈伤组织的生长
受培养中碳源 、添加物 、细胞分裂素影响.葡萄糖 、蔗糖是蕉
柑胚性愈伤组织生长较理想的碳源.植物组织培养中一些常
用的添加物 , 如水解酪蛋白 、麦芽提取物 、谷氨酰胺都能在一
定程度上促进蕉柑胚性愈伤组织的生长 , 尤其是水解酪蛋白
的促进作用更为显著.培养基中高浓度的细胞分裂素(BA)能
明显加快蕉柑胚性愈伤组织的增殖.
参考文献:
[ 1] 　陈善春 ,张进仁 , 吴安仁 ,等.糖类对柳橙胚性愈伤组织
生长的影响[ J] .植物学通报 , 1989 , 6(1):26-29.
[ 2] 　伊华林 ,邓秀新.柑橘愈伤组织保存初步研究[ J] .华中
农业大学学报 , 1998 , 17(1):89-92.
[ 3] 　吴金虎 ,陈吉笙 , 章文才 ,等.柑橘胚珠培养及胚状体发
生的研究[ J] .果树科学 , 1990 , 7(1):19-24.
[ 4] 　甘　霖 ,章文才 , 邓秀新.从败育的种子诱导柑橘的胚性
愈伤组织[ J] .华中农业大学学报, 1993, 12(5):490-492.
【责任编辑　柴　焰】
　收稿日期:2001-07-04　　　　作者简介:王声斌(1967-),男 , 讲师 ,博士.
　第 23 卷 第 1期　　2002 年 1月 　　　　华南农业大学学报Journal of South China Agricultural University　　 Vol.23 , No.1　　　Jan.2002