全 文 :高效液相色谱法和薄层层析法鉴别骆驼蓬与骆驼蒿
王长虹 1 , 刘 军 1 , 郑立明 1 , 林伊梅 1 , 邹小广 2 , 陈 鸣 1 , 孙殿甲 3
( 1新疆医科大学第二附属医院药剂科 , 新疆 乌鲁木齐 830028; 2新疆喀什地区第二人民医院药剂科 , 新疆 喀什 844000;
3新疆医科大学药学院药剂学教研室 ,新疆 乌鲁木齐 830054)
摘要: 目的: 建立骆驼蓬与骆驼蒿的鉴别方法。 方法: 采用高效液相色谱法 ( HPLC)和薄层层析法 ( T LC)鉴
别骆驼蓬和骆驼蒿。 结果: HPLC法和 TLC法实验结果均说明骆驼蓬的根中不含骆驼蓬碱 ( HAL ) , 而骆驼蒿的
根中含有较多的 HAL;骆驼蓬种子中的去氢骆驼蓬碱 ( HAR)含量高于 HAL的含量 , 而骆驼蒿种子中的 HAL含
量高于 HAR的含量。结论: HPLC法和 TLC法可用于鉴别骆驼蓬和骆驼蒿。
关键词: 骆驼蓬 ; 骆驼蒿 ; 骆驼蓬碱 ; 去氢骆驼蓬碱 ; 鉴别 ; 高效液相色谱法 ; 薄层层析法
中图分类号: R917; Q949. 752. 6 文献标识码: A 文章编号: 1009-5551( 2003) 01-0072-03
骆驼蓬属蒺藜科多年生草本植物 ,我国有 3
种 [1 ] ,即骆驼蓬 , 又名欧骆驼蓬 ,多裂骆驼蓬和骆驼
蒿 ,又名细叶骆驼蓬 [ 2] ,主要分布于我国西北部地区
的干旱及半干旱地区。 该属植物全草及种子主要含
有骆驼蓬碱 ( HAL)、去氢骆驼蓬碱 ( HAR)、鸭嘴花
碱 ( Peganine)、鸭嘴花酮碱 ( Vasicinone)等多种生物
碱 [3 ]及多种氨基酸、胡萝卜素、各种糖类以及铁、锰、
铜、锌等多种微量元素 [4 ]。国内 20世纪 80年代首次
将骆驼蓬种子总生物碱制剂用于治疗消化系统肿
瘤 ,临床治疗 21例 ,有效率为 85. 7% [5 ]。 药理试验
表明 ,骆驼蓬总生物碱对肿瘤细胞有一定的抑制作
用 [6 ] ,具有广泛的抑瘤作用 [6~ 9 ]。笔者对新疆不同产
地骆驼蓬属植物各药用部位生物碱的含量进行分析
研究 ,发现不同产地骆驼蓬的各药用部位生物碱的
含量相差悬殊 [10 ] ,同时发现骆驼蓬和骆驼蒿根和种
子中生物碱成分含量迥异。 本文采用高效液相色谱
法 ( HPLC)和薄层层析法 ( TLC)对骆驼蓬和骆驼蒿
进行鉴别 ,现报道如下。
1 仪器与试剂
1. 1 仪器 SSI-2001型高压二元高效液相色谱系
统 ; SSI-525型紫外检测器 ;色谱柱: Kromasile填料
柱 ( 4. 6× 250; 5μm); SSI-OV 100型柱温箱 (美国科
学系统公司 ) ; DM S-100型紫外分光光度计 (美国瓦
里安公司 ) ; p HS-3C型精密 pH计 (上海雷磁仪器
厂 ) ;索氏提取器 (上海玻璃仪器厂 )。
1. 2 药品 HAR标准品 ( Sigma Co. 26C-0186) ;
HAL标准品 ( Sigma Co. CH-9471) ;甲醇 (色谱
纯 ) ;硫酸铵、二乙胺、磷酸等均为分析纯 ;乙醇 (药
用 )。骆驼蓬及骆驼蒿药材分别于种子成熟期采于新
疆各地 , 按植物检索表并对照中科院新疆分院骆驼
蓬植物标本进行鉴定 ,分部位阴干备用。
2 实验方法与结果
2. 1 生物碱提取 [10 ] 准确称取骆驼蓬和骆驼蒿种
子及根 (粉碎 )适量 ,置索氏提取器中 ,用 80%的乙
醇浸泡 12 h,加热回流提取 4 h。冷却 ,准确定容至
250 m l。
2. 2 HPLC法鉴别骆驼蓬和骆驼蒿
2. 2. 1 标准溶液的配制 分别精密称取 HAR和
HAL标准品各 25 mg用甲醇溶解 ,配成浓度为 1
mg /ml的标准储备液 ,置 4℃冰箱冷藏备用。
2. 2. 2 色谱条件的选择 [13 ] 色谱柱: 十八烷基硅
烷硅胶填充柱 ;流动相: 甲醇∶ 0. 01 mol /L硫酸铵
溶液∶二乙铵 ( 60∶ 40∶ 0. 4) ,用磷酸调 pH至 3. 82
± 0. 01;进样量: 20μl定量环进样 ;流速: 1. 0 ml /
min;柱温: 40℃ ;检测器灵敏度: 0. 1AU FS。分别准
确吸取 HAR和 HAL标准溶液各适量用水稀释成
约 10μg /ml的供试液 ,用 0. 45μm微孔滤膜过滤 ,
进样 20μl,在上述条件下记录色谱图。结果 HAR和
HAL的保留时间分别为 8. 26、 7. 26 min,两者的分
离度大于 2,理论塔板数按 HAR计不低于 4 000。
2. 2. 3 鉴别 分别准确吸取骆驼蓬和骆驼蒿的根
提取液 0. 5 m l置 50 m l量瓶中 ,加 0. 1 mo l /L盐酸
至刻度 , 用 0. 45μm微孔滤膜过滤 ,进样 20μl ,在
上述色谱条件下记录色谱图 (图 1、 2)。 分别准确吸
取骆驼蓬和骆驼蒿的种子提取液 0. 5 ml置 100 ml
量瓶中 ,加 0. 1 mol /L盐酸至刻度 , 用 0. 45μm微
孔滤膜过滤 ,进样 20μl,在上述色谱条件下记录色
谱图 (图 3、 4)。
72 新疆医科大学学报 JOU RN AL OF XIN JIANG M EDICAL UN IV ERSITY 2003 Feb. , 26( 1)
作者简介: 王长虹 ( 1964- ) , 男 ,副主任药师 , 博士 ,研究方向:药物新制剂与新剂型。基金项目:新疆维吾尔自治区卫生厅青年医学基金资助项目 ( 98Y-007)
图 1 骆驼蓬根色谱图 图 2 骆驼蒿根色谱图
1.去氢骆驼蓬碱 1.骆驼蓬碱 2.去氢骆驼蓬碱
图 3 骆驼蓬种子色谱图 图 4 骆驼蒿种子色谱图
1.骆驼蓬碱 2.去氢骆驼蓬碱 1.骆驼蓬碱 2.去氢骆驼蓬碱
2. 3 TLC法鉴别骆驼蓬和骆驼蒿
2. 3. 1 对照品溶液的配制 分别称取 HAR和
HAL标准品适量 , 用乙醇配制成 1 mg /m l的 HAR
和 HAL标准溶液作为对照品溶液备用。
图 5 骆驼蓬与骆驼蒿根及种子提取液的薄层层析图
A. 骆驼蓬种子提取液 B. 骆驼蒿种子提取液
C. HAR标准品 D. HAL标准品 E. 骆驼蒿根提取液
F. 骆驼蓬根提取液
2. 3. 2 鉴别 分别将 HAR、 HAL对照品溶液以及
骆驼蓬和骆驼蒿根和种子的乙醇提取液 5μl点于
硅胶 G(含 1% CMC-Na)薄层板上 ,用乙酸乙酯∶
甲醇∶氨水 ( 20∶ 5∶ 1) [ 11]为展开剂展开 ,薄层层析
色谱图见图 5。 即骆驼蓬的根中不含 HAL, 而骆驼
蒿的根中含有较多的 HAL;骆驼蓬种子中的 HAR
含量高于 HAL的含量 , 而骆驼蒿种子中的 HAL
含量高于 HAR的含量。
3 结论
骆驼蒿种子中 HAL的含量高于 HAR含量 10
倍以上 , 在骆驼蓬的根中未检测出 HAL,而在骆驼
蒿的根中却有较高含量的 HAL( 0. 54% ) [ 13] ,说明
品种不同 ,其化学成分有所不同。 HPLC和 TLC实
验结果均说明骆驼蓬的根中不含 HAL,而骆驼蒿的
根中含有较多的 HAL;骆驼蓬种子中的 HAR含量
高于 HAL的含量 ,而骆驼蒿种子中的 HAL含量高
于 HAR的含量。此实验结果为骆驼蓬和骆驼蒿的
鉴别提供了另一理论依据 , 有待于通过对更多的骆
驼蒿样本进行分析研究进一步证实。
参考文献:
[ 1 ] 刘瑛心 . 中国沙漠植物志 [M ] . 第 2卷 . 北京科学出版社 ,
1987. 306.
[ 2 ] 樊峥嵘 , 姚新生 . 骆驼蓬属 ( Peganum)植物成分及药理作用
[ J] . 沈阳药学院学报 , 1992, 9( 2): 144-151.
[ 3 ] 江苏新医学院 . 中药大辞典 (下册 ) [M ]. 第 1版 .上海人民出
版社 , 1977. 1757-1758.
[ 4 ] 马骥 , 王理德 . 西北地区骆驼蓬属元素化学成分的分析 [ J ].
西北植物学报 , 1995, 15(5) : 86.
(下转 76页 )
73新疆医科大学学报 JOU RN AL OF XIN JIANG M EDICAL UN IV ERSITY 2003 Feb. , 26( 1)
遇水后能迅速膨胀、崩解 ,混悬液在一定时间内较稳
定 ,体外溶出度实验表明 ,分散片的溶出度远快于普
通片。 本处方完全采用国产辅料 ,来源易于保证 ;分
散片的制备工艺简单 ,可采用普通片剂的生产设备
生产 ,用适宜的辅料及制剂工艺制备分散片 ,可提高
难溶性药物的生物利用度。
参考文献:
[1 ] 陈新 .新编药物学 [M ].第 14版 .北京:人民卫生出版社 , 1997.
160.
[2 ] 黄胜炎 .分散片进展 [ J] .中国药学杂志 , 1992, 27( 4): 226.
[ 3 ] Briti sh Pharmacopoeia Commission. Bri ti sh Pharmacopoeia
[ S] . volumeⅡ . London: HM SO, 1993. 755.
[ 4 ] 王泽民 .当代结构药物全集 [M ] .第 1版 .北京:科学技术出版
社 , 1993. 3291.
[5 ] 国家药典委员会 .中国药典 [ S] .二部 .北京:化学工业出版社 ,
2000.附录 XC.
[收稿日期: 2001-11-27 ]
Preparation of ibuprofen dispersible tablets
Abudukeyimi, Maierdan, HAN Hai-xia, et al
(Department of Pharmacy , First Af f iliated Hospital ,X injiang Medical University ,
Urumqi 830054, China )
Abstract: Objective: To select optimal composing of the prescription of ibuprofen solid dispersion tablet by
investigating the inf luence o f sev eral disinteg rants to disinteg rate time limited. Methods: Using the
o rthogonal design fo r selecting the best amounts of CM S-Na, MCC, the appea rance o f tablets, dissolution
ra te, suspensibi li ty and disinteg ra tion time w ere as index . Results: The dissolution of tha t tablets w as
fast, could be completely form into suspension, w hich could screen through the 710μm mesh. Conclusion:
The quali ty of ibuprofen dispersible tablet is most ly rela ted to the amounts of CM S-Na, MCC and the
binder etc. each index of tha t tablets confo rms to the design.
Key words: ibupro fen; dispersible tablets; o rthogonal design
(上接 73页 )
[5 ] 李春杰 ,刘德玺 ,买买提依明 ,等 . 骆驼蓬抗癌化学成分的分离
鉴定和药理实验研究 [ J] .新疆医学院学报 , 1987, 10 ( 1): 27-
31.
[6 ] 俞腾飞 , 朱惠珍 . 骆驼蓬的研究概况 [ J ]. 国外医药植物药分
册 , 1992, 7( 3): 104-107.
[7 ] 王晓华 ,王宏 , 何安光 . 骆驼蓬碱抗肿瘤作用的体外研究 [ J] .
中国医科大学学报 , 1993, 22( 3): 182-183.
[8 ] 胡海棠 ,潘启超 . 骆驼蓬总碱对鼠肝癌细胞周期学的影响 [ J] .
癌症 , 1993, 12( 6): 489-491.
[ 9] 齐海 , 马特 , 王仁裕 ,等 . 骆驼蓬总生物碱治疗食管细胞淋癌
57例临床病理学观察 [ J] . 中华胸心外科杂志 , 1991, 7 ( 1):
37-38.
[10 ] 王长虹 , 刘军 ,郑立明 ,等 . 不同产地骆驼蓬不同药用部位中
生物碱的含量分析研究 [ J] . 中国药学杂志 , 2002, 37 ( 2):
211-215.
[ 11 ] 刘勇民 , 沙吾提· 伊克木 . 维吾尔药志 [M ] . 乌鲁木齐: 新
疆人民出版社 , 1985. 332.
[收稿日期: 2002-03-13 ]
Identif ication of Peganum harmala L . and Peganum nigellastrum Bge.
using HPLC and TLC
WANG Chang-hong, LIU Jun, LIN Yi-mei, et al
(Department of Pharmacy , Second Af f il iated Hospital , X injiang Medical University ,
Urumqi 830028, China )
Abstract: Objective: To establish method to identify Peganum harmala L . and Peganum nigellast rum
Bge. Methods: Bo th the HPLC and TLC were emplo yed to identi fy Peganum harmala L . and Peganum
nigel lastrum Bge. Results: The results of HPLC and TLC show ed that there were a lot of ha rmaline in the
root o f Peganum nigel lastrum Bge. but there wa s no ha rmaline in the roo t of Peganum harmala L . Whi le
the content of ha rmine w as higher than that of ha rmaline in seed o f Peganum harmala L . , and the lev el of
harmaline w as higher than that of ha rmine in seed o f Peganum nigellastrum Bge. Conclusions: The HPLC
and TLC could be used to identify Peganum harmala L . and Peganum nigel lastrum Bge.
Key words: Peganum harmala L . ; Peganum nigellastrum Bge. ; ha rmaline; ha rmine; identification;
HPLC; TLC
76 新疆医科大学学报 JOU RN AL OF XIN JIANG M EDICAL UN IV ERSITY 2003 Feb. , 26( 1)