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高效液相色谱法和薄层层析法鉴别骆驼蓬与骆驼蒿



全 文 :高效液相色谱法和薄层层析法鉴别骆驼蓬与骆驼蒿
王长虹 1 , 刘 军 1 , 郑立明 1 , 林伊梅 1 , 邹小广 2 , 陈 鸣 1 , 孙殿甲 3
( 1新疆医科大学第二附属医院药剂科 , 新疆 乌鲁木齐  830028; 2新疆喀什地区第二人民医院药剂科 , 新疆 喀什  844000;
3新疆医科大学药学院药剂学教研室 ,新疆 乌鲁木齐  830054)
摘要: 目的: 建立骆驼蓬与骆驼蒿的鉴别方法。 方法: 采用高效液相色谱法 ( HPLC)和薄层层析法 ( T LC)鉴
别骆驼蓬和骆驼蒿。 结果: HPLC法和 TLC法实验结果均说明骆驼蓬的根中不含骆驼蓬碱 ( HAL ) , 而骆驼蒿的
根中含有较多的 HAL;骆驼蓬种子中的去氢骆驼蓬碱 ( HAR)含量高于 HAL的含量 , 而骆驼蒿种子中的 HAL含
量高于 HAR的含量。结论: HPLC法和 TLC法可用于鉴别骆驼蓬和骆驼蒿。
关键词: 骆驼蓬 ; 骆驼蒿 ; 骆驼蓬碱 ; 去氢骆驼蓬碱 ; 鉴别 ; 高效液相色谱法 ; 薄层层析法
中图分类号: R917; Q949. 752. 6  文献标识码: A  文章编号: 1009-5551( 2003) 01-0072-03
  骆驼蓬属蒺藜科多年生草本植物 ,我国有 3
种 [1 ] ,即骆驼蓬 , 又名欧骆驼蓬 ,多裂骆驼蓬和骆驼
蒿 ,又名细叶骆驼蓬 [ 2] ,主要分布于我国西北部地区
的干旱及半干旱地区。 该属植物全草及种子主要含
有骆驼蓬碱 ( HAL)、去氢骆驼蓬碱 ( HAR)、鸭嘴花
碱 ( Peganine)、鸭嘴花酮碱 ( Vasicinone)等多种生物
碱 [3 ]及多种氨基酸、胡萝卜素、各种糖类以及铁、锰、
铜、锌等多种微量元素 [4 ]。国内 20世纪 80年代首次
将骆驼蓬种子总生物碱制剂用于治疗消化系统肿
瘤 ,临床治疗 21例 ,有效率为 85. 7% [5 ]。 药理试验
表明 ,骆驼蓬总生物碱对肿瘤细胞有一定的抑制作
用 [6 ] ,具有广泛的抑瘤作用 [6~ 9 ]。笔者对新疆不同产
地骆驼蓬属植物各药用部位生物碱的含量进行分析
研究 ,发现不同产地骆驼蓬的各药用部位生物碱的
含量相差悬殊 [10 ] ,同时发现骆驼蓬和骆驼蒿根和种
子中生物碱成分含量迥异。 本文采用高效液相色谱
法 ( HPLC)和薄层层析法 ( TLC)对骆驼蓬和骆驼蒿
进行鉴别 ,现报道如下。
1 仪器与试剂
1. 1 仪器  SSI-2001型高压二元高效液相色谱系
统 ; SSI-525型紫外检测器 ;色谱柱: Kromasile填料
柱 ( 4. 6× 250; 5μm); SSI-OV 100型柱温箱 (美国科
学系统公司 ) ; DM S-100型紫外分光光度计 (美国瓦
里安公司 ) ; p HS-3C型精密 pH计 (上海雷磁仪器
厂 ) ;索氏提取器 (上海玻璃仪器厂 )。
1. 2 药品  HAR标准品 ( Sigma Co. 26C-0186) ;
HAL标准品 ( Sigma Co. CH-9471) ;甲醇 (色谱
纯 ) ;硫酸铵、二乙胺、磷酸等均为分析纯 ;乙醇 (药
用 )。骆驼蓬及骆驼蒿药材分别于种子成熟期采于新
疆各地 , 按植物检索表并对照中科院新疆分院骆驼
蓬植物标本进行鉴定 ,分部位阴干备用。
2 实验方法与结果
2. 1 生物碱提取 [10 ] 准确称取骆驼蓬和骆驼蒿种
子及根 (粉碎 )适量 ,置索氏提取器中 ,用 80%的乙
醇浸泡 12 h,加热回流提取 4 h。冷却 ,准确定容至
250 m l。
2. 2  HPLC法鉴别骆驼蓬和骆驼蒿
2. 2. 1 标准溶液的配制 分别精密称取 HAR和
HAL标准品各 25 mg用甲醇溶解 ,配成浓度为 1
mg /ml的标准储备液 ,置 4℃冰箱冷藏备用。
2. 2. 2 色谱条件的选择 [13 ] 色谱柱: 十八烷基硅
烷硅胶填充柱 ;流动相: 甲醇∶ 0. 01 mol /L硫酸铵
溶液∶二乙铵 ( 60∶ 40∶ 0. 4) ,用磷酸调 pH至 3. 82
± 0. 01;进样量: 20μl定量环进样 ;流速: 1. 0 ml /
min;柱温: 40℃ ;检测器灵敏度: 0. 1AU FS。分别准
确吸取 HAR和 HAL标准溶液各适量用水稀释成
约 10μg /ml的供试液 ,用 0. 45μm微孔滤膜过滤 ,
进样 20μl,在上述条件下记录色谱图。结果 HAR和
HAL的保留时间分别为 8. 26、 7. 26 min,两者的分
离度大于 2,理论塔板数按 HAR计不低于 4 000。
2. 2. 3 鉴别 分别准确吸取骆驼蓬和骆驼蒿的根
提取液 0. 5 m l置 50 m l量瓶中 ,加 0. 1 mo l /L盐酸
至刻度 , 用 0. 45μm微孔滤膜过滤 ,进样 20μl ,在
上述色谱条件下记录色谱图 (图 1、 2)。 分别准确吸
取骆驼蓬和骆驼蒿的种子提取液 0. 5 ml置 100 ml
量瓶中 ,加 0. 1 mol /L盐酸至刻度 , 用 0. 45μm微
孔滤膜过滤 ,进样 20μl,在上述色谱条件下记录色
谱图 (图 3、 4)。
72 新疆医科大学学报  JOU RN AL OF XIN JIANG M EDICAL UN IV ERSITY  2003 Feb. , 26( 1)
作者简介: 王长虹 ( 1964- ) , 男 ,副主任药师 , 博士 ,研究方向:药物新制剂与新剂型。基金项目:新疆维吾尔自治区卫生厅青年医学基金资助项目 ( 98Y-007)
         图 1 骆驼蓬根色谱图               图 2 骆驼蒿根色谱图
           1.去氢骆驼蓬碱               1.骆驼蓬碱  2.去氢骆驼蓬碱
          图 3 骆驼蓬种子色谱图             图 4 骆驼蒿种子色谱图
         1.骆驼蓬碱  2.去氢骆驼蓬碱            1.骆驼蓬碱  2.去氢骆驼蓬碱
2. 3  TLC法鉴别骆驼蓬和骆驼蒿
2. 3. 1 对照品溶液的配制 分别称取 HAR和
HAL标准品适量 , 用乙醇配制成 1 mg /m l的 HAR
和 HAL标准溶液作为对照品溶液备用。
图 5 骆驼蓬与骆驼蒿根及种子提取液的薄层层析图
  A. 骆驼蓬种子提取液  B. 骆驼蒿种子提取液
  C. HAR标准品  D. HAL标准品  E. 骆驼蒿根提取液
  F. 骆驼蓬根提取液
2. 3. 2 鉴别 分别将 HAR、 HAL对照品溶液以及
骆驼蓬和骆驼蒿根和种子的乙醇提取液 5μl点于
硅胶 G(含 1% CMC-Na)薄层板上 ,用乙酸乙酯∶
甲醇∶氨水 ( 20∶ 5∶ 1) [ 11]为展开剂展开 ,薄层层析
色谱图见图 5。 即骆驼蓬的根中不含 HAL, 而骆驼
蒿的根中含有较多的 HAL;骆驼蓬种子中的 HAR
含量高于 HAL的含量 , 而骆驼蒿种子中的 HAL
含量高于 HAR的含量。
3 结论
骆驼蒿种子中 HAL的含量高于 HAR含量 10
倍以上 , 在骆驼蓬的根中未检测出 HAL,而在骆驼
蒿的根中却有较高含量的 HAL( 0. 54% ) [ 13] ,说明
品种不同 ,其化学成分有所不同。 HPLC和 TLC实
验结果均说明骆驼蓬的根中不含 HAL,而骆驼蒿的
根中含有较多的 HAL;骆驼蓬种子中的 HAR含量
高于 HAL的含量 ,而骆驼蒿种子中的 HAL含量高
于 HAR的含量。此实验结果为骆驼蓬和骆驼蒿的
鉴别提供了另一理论依据 , 有待于通过对更多的骆
驼蒿样本进行分析研究进一步证实。
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(下转 76页 )
73新疆医科大学学报  JOU RN AL OF XIN JIANG M EDICAL UN IV ERSITY  2003 Feb. , 26( 1)
遇水后能迅速膨胀、崩解 ,混悬液在一定时间内较稳
定 ,体外溶出度实验表明 ,分散片的溶出度远快于普
通片。 本处方完全采用国产辅料 ,来源易于保证 ;分
散片的制备工艺简单 ,可采用普通片剂的生产设备
生产 ,用适宜的辅料及制剂工艺制备分散片 ,可提高
难溶性药物的生物利用度。
参考文献:
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[5 ] 国家药典委员会 .中国药典 [ S] .二部 .北京:化学工业出版社 ,
2000.附录 XC.
[收稿日期: 2001-11-27 ]
Preparation of ibuprofen dispersible tablets
Abudukeyimi, Maierdan, HAN Hai-xia, et al
(Department of Pharmacy , First Af f iliated Hospital ,X injiang Medical University ,
Urumqi 830054, China )
Abstract: Objective: To select optimal composing of the prescription of ibuprofen solid dispersion tablet by
investigating the inf luence o f sev eral disinteg rants to disinteg rate time limited. Methods: Using the
o rthogonal design fo r selecting the best amounts of CM S-Na, MCC, the appea rance o f tablets, dissolution
ra te, suspensibi li ty and disinteg ra tion time w ere as index . Results: The dissolution of tha t tablets w as
fast, could be completely form into suspension, w hich could screen through the 710μm mesh. Conclusion:
The quali ty of ibuprofen dispersible tablet is most ly rela ted to the amounts of CM S-Na, MCC and the
binder etc. each index of tha t tablets confo rms to the design.
Key words: ibupro fen; dispersible tablets; o rthogonal design
(上接 73页 )
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[收稿日期: 2002-03-13 ]
Identif ication of Peganum harmala L . and Peganum nigellastrum Bge.
using HPLC and TLC
WANG Chang-hong, LIU Jun, LIN Yi-mei, et al
(Department of Pharmacy , Second Af f il iated Hospital , X injiang Medical University ,
Urumqi 830028, China )
Abstract: Objective: To establish method to identify Peganum harmala L . and Peganum nigellast rum
Bge. Methods: Bo th the HPLC and TLC were emplo yed to identi fy Peganum harmala L . and Peganum
nigel lastrum Bge. Results: The results of HPLC and TLC show ed that there were a lot of ha rmaline in the
root o f Peganum nigel lastrum Bge. but there wa s no ha rmaline in the roo t of Peganum harmala L . Whi le
the content of ha rmine w as higher than that of ha rmaline in seed o f Peganum harmala L . , and the lev el of
harmaline w as higher than that of ha rmine in seed o f Peganum nigellastrum Bge. Conclusions: The HPLC
and TLC could be used to identify Peganum harmala L . and Peganum nigel lastrum Bge.
Key words: Peganum harmala L . ; Peganum nigellastrum Bge. ; ha rmaline; ha rmine; identification;
HPLC; TLC
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