全 文 ：白鲜皮(DictamnusdasycarpusTurcz.)为芸香
科植物白鲜的干燥根。春、秋季采挖根部,除去泥
沙及粗皮,剥取根皮干燥。分布于东北、华北、西
北及江苏。另外,狭叶白鲜只在我国新疆生长,在
民间医学中,可以代替白鲜皮。李时珍称其为诸
黄风痹要药,具有清热燥湿、祛风解毒等功效;用
于治疗湿热疮毒、黄水淋漓、湿疹、风疹、皮肤瘙
痒、疥癣、黄疸和急慢性肝炎等病,另外还作为一
种抗炎症的抗原,退热并且解毒。近年来临床用
于治疗中晚期肝癌的散接片,其主药为白鲜皮和
白附子,经抗肿瘤实验证明,对肝癌细胞体内外
均有显著杀伤作用。
关于白鲜皮的化学成分,不同时期,人们都
有新的发现,并进行了综合研究。从白鲜皮中分
离出来的主要成分有:白鲜碱、梣酮、β—谷甾
醇、黄柏酮和柠檬苦素、茵芋碱、呋喃喹啉类生
物碱等。
本实验就是对白鲜皮的原材料进行提取分
离,最后将得到的化合物,通过氢谱鉴定,从而确
定所得到的成分,在实验过程中,探索并改进了
白鲜皮中某些成分的提取分离方法,使产率得以
大幅度提高。
中药材白鲜皮的成分鉴定分析初报
徐宁宁
(江苏联合职业技术学院 徐州生物工程分院,江苏 徐州 221000)
摘 要:文章对白鲜皮(DictamnusdasycarpusTurcz.)化学成分进行了研究,对其乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部
分经硅胶柱层析、重结晶等手段,分离得到 5个单体(A、B、C、E和 G),通过碳谱、氢谱等核磁手段鉴定:A为梣
酮(Fraxinelone),E为白鲜碱(Dictamine),G为黄柏酮(Obacunone)。其余化合物正在鉴定中。
关键词:白鲜皮;白鲜碱;黄柏酮;梣酮
中图分类号:S567 文献标识码:A 文章编号:1007-0907(2007)04-0050-04
StudyonChemicalCompositionof
DictamnusDasycarpusTurcz.
XUNing-ning
(XuzhouBiologicalEngineeringInstituteBranch
JiangsuJointVocationalandTechnicalColege,Xuzhou 221000,China)
Abstract:ThechemicalconsituentsofDictamnusDasycarpusTurcz.wasstudiedbywayofsilgel
andrecrystalizationetc.Fromtheethanolextract,fivecompoundshavebeenisolated,andthreeof
havebeencharacterizedasfolows:Fraxinelone(A),Dictamine(B),Obacunone(C)onthebasesof
theirphysico-chemicalpropertiesand1H,13CNMRspectradata.
Keywords:Dictamnusdasycarpus;Dictamine;Obacunone;Fraxinelone
收稿日期:2007-04-15
些叶面肥相比,常青液剂的肥效比较缓,增产效果
不是很明显,但这些叶面肥往往含有激素,而常青
液剂是一种不含激素的叶面肥,虽然肥效缓,但它
对蔬菜没有副作用,符合无公害蔬菜生产用肥标
准,是一种生产无公害蔬菜的理想叶面肥。
参考文献:
[1] 张炳丽.无公害芹菜主要病虫害及防治[J].内蒙古农业
科技,2004,(S2):124.
[2] 任小莲.保护地秋延后西芹高产、优质栽培技术及病
虫害防治[J].内蒙古农业科技,2006,(3):69-71.
(责任编辑 吴云霞)
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内蒙古农业科技2007(4):50~53
InnerMongoliaAgriculturalScienceAndTechnology
1 实验材料
1.1 实验药材
白鲜皮原药材购于河北省安国县,经有关专
家按药典方法鉴定为芸香科植物白鲜(Dictamnus
dasycarpusTurcz.)的干燥根皮。
1.2 实验仪器
BrukerAvance400型超导核磁共振仪 (瑞士
Bruker);R205旋转蒸发器(无锡星海王生化仪器
有限公司);PB303-N分析天平 (万分之一);
UV_BETRACHTER紫外光谱仪(254、366nm)。
1.3 实验试剂
三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮为工业试剂,石油
醚、乙醚为分析纯;柱层析硅胶和薄层层析硅胶
(青岛海洋化工厂);自制硅胶 G板(青岛海洋化
工厂)。
2 提取分离
2.1 白鲜皮的提取
取白鲜皮药材 6kg以 80%乙醇加热回流提
取 3次(8倍、6倍、6倍),提取液经减压回收,得
总醇浸膏[8]。
2.2 白鲜皮提取物的粗分
取总醇浸膏,加 2000mL水,加热溶解,依次
用乙酸乙酯、正丁醇萃取,取乙酸乙酯萃取部分减
压浓缩,称重;取正丁醇萃取部分减压浓缩,称重。
2.3 乙酸乙酯部分的分离
2.3.1 样品吸附 取乙酸乙酯部分样品 110g用
适量甲醇溶解,分次拌入 160g硅胶中,放置,挥
干即得。
2.3.2 乙酸乙酯部分的硅胶柱分离 (1)装柱:
取 1000g柱层析用硅胶,以石油醚装柱,让石油
醚从柱下端流出,轻轻敲打柱体,至柱面不再下
降为止。(2)上样:将 3.3.1处理好的样品均匀加
载于柱面,保持柱面平整。(3)洗脱:根据TLC摸
索的展开条件配备洗脱液 (石油醚-乙酸乙酯),
进行梯度洗脱:石油醚-乙酸乙酯 (95∶5)、(90∶
10)、(85∶15)、(80∶20)、(70∶30)、(60∶40),洗脱
10L,调节流速,每个流分收集洗脱液 300ml,得到
流分1～172,TLC检查。
2.3.3 样品处理 根据TLC显示的斑点,合并相
同组分,合并情况如下:1-11,12-27,28-39,40-
61,62-74,75-91,92-104,105-117,118-143,
144-161,162-172。减压浓缩,回收溶剂。放置,
12-27、62-74、92-104、118-143析出晶体,石油
醚-乙酸乙酯反复重结晶 ,得到A、E、G3个化合
物。40-61流分通过硅胶柱反复纯化,得到 B、C2
个化合物。
将样品各取出适量,用于核磁谱等测定,其
余装瓶,密闭,置干燥器妥善保存。
3 白鲜皮中化合物的结构鉴定
3.1 化合物A的鉴定
化合物 A:白色结晶(石油醚—乙酸乙酯),
m.p115～117℃。在 1H-NMR谱中可见 δ7.44(1H,
br.s),7.47(1H,br.s)和 6.35(1H,s),在 13C-NMR谱
中可见 δ148.5(CH),143.4(CH),108.5(CH)和
120(C)。说明化合物 A的结构中存在 β取代的
呋喃环;在 13C-NMR的 100～180mg/kg,还有
127.4(C),148.5(C),169.8(C)的碳信号,推断结构
中可能含有一个羰基-双键的共轭结构;在 2.2
(3H,s)推测可能为 CH3-C=结构;4.9(1H,s)表明
该氢与强烈吸电子基团相连,可能为-CH-O-。
综合上述信息,与文献值]比较,确证化合物 A为
梣酮(图 1)。
3.2 化合物E的鉴定
化合物 E:白色结晶(石油醚—乙酸乙酯),
m.p115～117℃。在 1H-NMR中存在4.44(3H,s)和
13C-NMR中存在 59.0,说明含有一个 OCH3;其余
碳谱信号均出现在 100mg/kg以上 (6个叔碳,4
个季碳),说明这些 C信号很可能为芳(杂)环骨
架;氢谱信号均出现在 7.0～8.5(6个 CH),7.05(d),
7.6(d)相互耦合(J=3HZ),可能为呋喃环上相邻 α、
-H的耦合;8.00(d),8.27(d)相互耦合(J=8HZ),7.42
(m),7.67(m)相互耦合,判断为邻位取代苯环的 4
个相邻氢信号。综合上述信息,参照文献,确证化
合物E为白鲜碱(图2)。
3.3 化合物G的鉴定
化合物 G:白色结晶(石油醚—乙酸乙酯),
m.p115～117℃在 1H-NMR中存在 7.39(1H,br.s),
4期 徐宁宁:中药材白鲜皮的成分鉴定分析初报 51
7.39(1H,br.s),6.34(1H,)和在 13C-NMR中 148.5
(CH),143.2(CH),109.7(CH),120(C),说明化合物
G的结构中存在 β取代的呋喃环;氢谱中 1.48
(6H,s),1.44(3H,s),1.20(3H,s),1.10(3H,s)为
5个甲基峰,且连在季碳原子上,这在碳谱信号
26.8,21.1,19.4,17.0,16.4得到验证;碳谱 207.4,
166.9,166.6为3个羰基峰,且166.9,166.6较靠
近高场,推测有内酯环结构;综合上述性质,查阅
相关文献,确证为黄柏酮(图3)。
4 化合物的光谱数据
4.1化合物A光谱数据
化合物 A:1H-NMR (400MHZ,CDCl3),δ(mg/
kg):7.44(2H,d),6.35(1H,s,4.88(1H,s),2.13(3H,
s),0.86(3H,s)。13C-NMR(100MHZ,CDCl3):169.8,
148.5,143.4,139.8,127.4,120.6,108.5,83.4,
43.0,32.1,3 .7,20.3,18.4,18.2(图4、图5)。
4.2化合物E光谱数据
化合物E:1H-NMR (400MHZ, CDCL3),δ(mg/
kg):8.24(1H,d),8.00(1H,d),7.5(2H,d),7.67(1H,m),
7.60(1H,d),7.42(1H,m),6.3(1H,s,4.9(1H,s),2.2
(3H,s),0.9(3H,s)。13C-NMR (100MHZCDCl3):
163.8,156.9,145.6,143.5,129.6,127.8,123.8,
122.4,118.7,104.7,103.4,59.0(图6、图7)。
4.3化合物G光谱数据
化合物 G:1H-NMR (400MHZ,CDCL3),δ(mg/
kg):7.39(2H,d),6.50(1H,d),6.34(1H,s),5.92
(1H,d),5.44(1H,s),3.64(1H,s),2.95(1H,t),
2.58(1H,dd),2.25(1H,dd),2.10( H,m),1.48
(6H,s),1.44(3H,s),1.20(3H,s),1.10(3H,s)。
13C-NMR:207.4,166.9,166.6,156.7,143.2,141.0,
123.0,120.1,109.7,83.9,78.0,77.3,77.2,77.0,
76.7,65.0,57.3,5 .3,52.9,4 .2,43.1,39.9,37.4,
32.8,32.0,26.8,21.1,19.4,17.0,16.4(图8、图9)。
52 内 蒙 古 农 业 科 技 No.4
5 小结
本实验对中草药白鲜皮进行了提取、分离和
鉴定。其目的在于从白鲜皮提取出来一系列的具
有活性成分的化合物,并进行分离,最后对这些化
合物用氢谱进行鉴定,从而确定所得到的化合物。
在实验过程中,用 75%的工业乙醇溶液进行提
取,然后分别用乙酸乙酯和正丁醇进行萃取。对
乙酸乙酯部分,用硅胶柱进行柱层析,分别用不同
梯度的石油醚—乙酸乙酯溶液来进行洗脱。最后,
共得到6个化合物,经过氢谱鉴定,确定了其中3
个化合物,其他3个有待进一步确定。
中草药的研究工作必须要将化学、药理和临
床等方面紧密结合,植物成分的分离如果没有药
理实验相配合就将是盲目的分离,同样,没有化学
的提纯,药理实验也受到一定的限制。鉴定了化
合物后,了解其化学结构,根据其成分寻查含此成
分的植物以扩大药物资源。
我们目前所掌握的中草药的有效成分的提取
和分离方法还远远不能满足实际工作的需要。特
别是对具有较强生理活性的超微量部分,以及水
溶性成分、大分子化学成分等还比较缺乏经验,因
此,需要在大量实践中大胆创新,并虚心学习国外
的经验。
6 讨论
在中草药的提取分离,并进一步寻找其有效
成分之前,首先必须正确鉴定品种,弄清其来源。
因为中草药的产地,采集季节和加工方法对有效
成分含量有很大影响。本次实验中所用药材白鲜
皮,购自河北安国,经过专门鉴定,药源可靠。
在用有机溶剂提取白鲜皮中有效成分之前,
要先用溶剂将药材浸泡一段时间,然后再进行提
取。这样,会提取的比较充分。并且用何种提取分
离方法,要针对具体中草药做具体分析,因为中草
药品种繁多,有效成分各不相同,伴随的物质也不
相同。本实验采用75%的工业乙醇溶液对白鲜皮
进行提取。
本次实验中用层析方法对药品的有效成分进
行分离,分别使用了薄层色谱和柱色谱。薄层色谱
的操作方法是:将吸附剂均匀的铺在玻璃板上,把
欲分析的样品点加到薄层上,然后用合适的溶剂
展开而达到分离、鉴定和定量的目的。对天然产物
的分离、鉴定有独到之处。本实验中用薄层色谱指
导选择柱层析的溶剂系统。柱色谱过程中,不断改
变洗脱液的梯度,按一定的体积收集,分别进行浓
缩处理。
薄层色谱所用硅胶板中的硅胶和柱色谱中的
硅胶均为青岛海洋化工厂生产。
提取浓缩液一般在60℃以下进行,对溶剂沸
点超过70℃的,在可能条件下,应采用减压浓缩。
要注意的是:有时提取浓缩液缩至小体积放置后,
有固体或结晶析出,就可以将析出物滤出,供进一
步分离。滤液再浓缩,放置,观察有无固体或结晶
再析出,直到母液蒸干为止。本实验提取分离过程
中无结晶或固体析出。
柱层析时,由于硅胶为多孔性物质,装柱一般
宜用湿法,即将硅胶混悬于装柱溶剂中,不断搅拌
待空气泡消失后,连同溶剂一起倾入层析柱中。最
好一次倾入,否则由于不同颗粒大小的硅胶沉降
速度不一,使硅胶柱有明显的分段,容易影响分离
效果。一般硅胶吸附层析,样品与吸附剂的比例可
为:1∶30~1∶60。
参考文献:
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院学报,1983,(6):11-16.
[2] HisayukiKanamorietal.FurtherstudyonMutagenic
FuroquinolineAlkaloidsofDictamniRadicis[J].Chem
PharmBul,1986,34(4):1826-1829.
[3] 胡昌奇,等.狭叶白鲜皮中得柠檬苦素类成分[J].植物
学报,1989,31(6):453-458.
(责任编辑 侯旭光)
4期 徐宁宁:中药材白鲜皮的成分鉴定分析初报 53