全 文 :蕉柑茎尖嫁接脱毒技术
吴娜芬 , 朱三平 , 陈文才
(揭阳市农业科学研究所 , 广东 揭阳 522031)
关键词:蕉柑;茎尖嫁接;脱毒;脱毒株系
中国分类号:S666.1 文献标识码:B 文章编号:1004-874X(2006)07-0080-01
蕉柑是潮汕地区传统名优特果品 ,也称“潮州柑”。
蕉柑果实硕大 ,橙红鲜艳 ,易剥皮 ,果肉柔软化渣多汁 ,
酸甜爽口 ,少核 ,营养丰富 ,特别是其早结果 、丰产 、耐
贮运 、品质极优的特性而深受生产者和消费者欢迎 ,早
已享誉中内外 ,是我国出口极具竞争力 、创汇力的宽皮
柑桔 ,发展前景广阔。但是 ,近十年来 ,由于栽培管理
不当及病虫害的发生 ,严重影响了蕉柑的品质和产量。
为适应国内外水果市场的激烈竞争 ,蕉柑必须实行规
范化生产技术 ,以提高质量和产量 。我所于 2003年建
立蕉柑无病毒良种母本园 ,采用茎尖嫁接脱毒技术(也
称S TG技术)进行脱毒 ,该技术能有效防治病毒病 ,降
低发病指数 ,从而为大田生产提供脱毒无病优良接穗
和种苗 ,取得了一定的经济效益和社会效益。
1 砧木苗的形成
1.1 药品和器械
药品分大量元素 、微量元素及维生素类 ,器械主要
是超净工作台 、恒温箱 、智能光照培养箱及双目显微
镜。
1.2 培养基的配制
采用改良 MS 固体培养基和液体培养基。固体培
养基由 MS 加入 3%蔗糖和 0.64%琼脂 ,液体培养基
加入 7.5%蔗糖 ,不加琼脂 , pH值调至 5.7。配制好的
培养基经过高压消毒 。
1.3 种子的处理及播种
砧木苗种子用甜橙 、江西红桔等。播种时先将种
子放在 50 ~ 55℃温水中预热处理 30 min ,取出后在超
净工作台用 75%酒精消毒片刻 ,再用 0.1%氯化汞消
毒10 min ,分别用无菌水清洗3次 ,放在培养皿中 。用
消毒过的镊子剥去种子内外种皮 ,然后放在装有固体
培养基的试管中 ,用棉花塞封好试管口 ,用黑色薄膜袋
包起来 ,放在恒温箱培养 13 天 ,温度设为 27±1℃。
13天后 , 拿出试管放在自然光中照射 1 天 ,形成砧
收稿日期:2006-05-11
作者简介:吴娜芬(1969-), 女 ,农艺师
木苗 。
2 茎尖脱毒
对提供茎尖的各品种苗木进行预先脱毒 ,通常是
在温室内进行热处理达到脱毒目的 。温室内配有加温
设备和温控系统 ,一般玻璃温室 ,要求高 1.8 m 、长 27
m 、宽 1.7 m 。温室四周的下半部为塑料薄板 ,上半部
左右设玻璃窗 ,窗的外侧以 60目的网纱密封 ,室内气
温超过 50℃时可推开玻璃隔着网纱通风。茎尖脱毒
要求日温 40 ~ 50℃持续 8 h 以上 ,累积天数在 20天以
上。
3 茎尖嫁接
茎尖嫁接在无菌室超净工作台进行 ,器械应消毒。
取热处理过的芽用 75%酒精消毒片刻 ,用 0.1%氯化
汞消毒5 min ,再分别用无菌水冲洗3次 。取试管内的
砧木苗用无菌水冲洗掉琼脂 ,在双目显微镜下用镊子
剥去外层叶片 ,露出茎尖分生组织区域 ,用嫁接刀切下
带有 2 ~ 3个叶原基(长 0.14 ~ 0.25 cm)的茎尖 ,将砧
木苗取出 ,去掉须根 ,并切断主根尖 ,留下 3 ~ 5 cm ,切
去茎的上段 ,留下 2 ~ 3 cm茎段 ,在茎段的中间用嫁接
刀切下一个“ ■”切口 ,深度达木质部。把已切下的茎
尖迅速放进切口 ,使两切口的垂直面贴合 ,嫁接后的茎
尖苗植入试管内 ,放在已备好的液体培养基滤纸杯上 ,
并封好试管口 ,放置在 27℃光化培养箱中培养 。开始
时光照为 1 000 lx ,培养两周后光照增强至 1 500 lx 。
约 1个月的时间 ,嫁接苗有 2 ~ 3片叶片展开 ,此时即
可将其转接在盆栽的砧木苗上 ,以便加快生长 。
4 茎尖嫁接苗的培养
茎尖嫁接苗的培养采用转移嫁接的方法 ,即当试
管内的茎尖嫁接苗长有 2 ~ 3片叶片 、叶色变为深绿色
后即可移出转接 。具体做法是 ,从试管里移出茎尖苗
用清水冲洗干净根部的培养基后 ,把根部浸在 5%漂
白粉水或0.1%氯化汞水溶液中消毒 5 min ,再用清
(下转第 98页)
80 广东农业科学 2006 年第 7 期
DOI :10.16768/j.issn.1004-874x.2006.07.031
内支持政策 ,通过财政 、税收 、金融和技术服务等手段 ,
在产品研发 、环境保护 、食品安全 、信息服务 、支持贫困
地区发展 、应对技术性贸易壁垒和加强政府服务职能
等方面重点支持符合条件且具有比较优势的农产品出
口 ,给企业营造良好的农产品出口环境 。推动国内认
证机构开展农产品 、食品认证的国际互认工作;建立农
产品出口信息服务平台 ,有效整合信息资源 ,为农产品
出口企业提供市场 、商品 、技术标准 、贸易政策等各类
信息 ,帮助企业开拓国际市场 。
3.3 构筑风险防范体系 ,提高企业抗风险能力
加强农产品出口信用保险的宣传推广力度 ,针对
农产品出口的特点和需要 ,研究开发农产品出口信用
保险的新险种;对企业投保农产品短期出口信用保险
的 ,政府应提高农产品出口信用保险的保费扶持比例;
鼓励金融机构大力推广出口信用保险 ,鼓励农产品出
口企业积极参加出口信用保险 ,提高风险管理水平;健
全农产品出口信用保险制度 ,增强农产品出口企业的
风险防范能力。
3.4 继续强化农产品质量安全管理 ,提高广东出口农
产品的竞争力
强化国内市场的农产品特别是食品市场的准入制
度 ,加强农药 、兽药和食品添加剂的管理 ,建立起国内
食品安全保障体系 ,也为企业营造一个公平竞争的市
场环境。要鼓励企业进行符合进口市场要求的有机产
品认证和其他国际认证 ,取得卫生注册和原产地标记
注册 ,建立农产品种植 、养殖履历和质量可追溯体系。
要进一步完善出口农产品的检验检测 、安全监测体系 ,
鼓励检验检测机构取得实验室国家认可 ,重点加强和
完善出口优势农产品及相关农业投入品的检验检测工
作。
3.5 提高农产品加工水平 ,增加产品的科技含量和附
加值
广东各级政府应考虑给予政策倾斜 ,简化手续 ,鼓
励社会资本投资农产品深加工 ,大力发展农产品加工
业 ,推进技术创新 ,加快科研新成果的转化;政府甚至
应拨出款项对企业涉及食品安全和环境保护等方面的
改造项目给予扶持 ,迅速提高广东农产品后续加工的
档次和质量;在全省范围内选择几个农业生产基础较
好的县 ,建立外向型农业开发示范区 ,大力开发出口农
业产业。
3.6 发展民间合作组织 ,为扩大广东农产品出口服务
针对目前农产品出口市场出现无序 、恶性竞争行
为 ,相关部门要积极推动企业在自愿基础上组建行业
协会 ,实行企业自主管理 、自我服务和自我监督;充分
发挥行业组织的作用 ,实施行业自律 ,维护正常的出口
秩序 ,积极应对国际贸易纠纷 。
(上接第 80页)
水冲洗 3次 ,然后用消毒过的刀片切去根部 ,靠接在盆
栽已经 6个月的砧木苗上(砧木苗在靠接前应喷杀菌
剂消毒)。靠接时 ,在茎段上用消毒过的刀片削一个长
约 2 cm的切口 ,另用嫁接刀在砧木上削一个同样长的
切口 ,把茎尖苗靠紧并用塑料薄膜袋连同茎尖苗下面
的茎段一起包轧 ,只露出芽及叶片。然后用薄膜袋将
砧木及茎尖苗一起套入 ,袋口用小绳固稳 ,移至阴凉处
并保持土壤湿度 。经 15天左右即见茎尖苗生长成活 ,
此时解开套袋 ,每天早上放置于较柔和的阳光下炼苗
至 10:00左右 ,再移至阴凉处 ,直到小苗叶片在阳光下
不再表现萎蔫时 ,即可放置在网室里;待长有 5片叶片
以上时 ,再移至无病毒材料库内保存或在无病毒网室
内培养。
5 茎尖嫁接苗的鉴定和复查
茎尖苗一般在冬季用指示植物鉴定是否脱毒 。黄
龙病 、裂皮病 、碎叶病 、衰退病分别用实生 柑 、Etrog
香橼 Arizona861-S -1 选系 、Rusk 枳橙 、厚皮来檬作
指示植物 。具体做法是:在网室病毒病检测室内 ,分别
将指示植物的芽片接到芽尖苗上 ,可采用以下 3种方
法:一是茎尖苗转接成活后 ,在转接株的基砧上腹接指
示植物的芽片 ,使指示植物成活生长 ,观察其是否有病
毒病 、类病毒病的症状出现;二是茎尖苗转接时 ,在基
砧上同时接上指示植物芽片;三是将转接后的茎尖苗
的老熟芽条的芽片与指示植物的芽片同时接到砧木
上 ,让茎尖芽与指示植物同时在一个砧木上生长。被
鉴定的茎尖苗在表现症状的气温范围值内不再出现症
状时 ,表明茎尖嫁接苗不再带有指示植物所显示症状
的病毒 ,应在隔离条件下种植保存 ,以作建立无病毒类
病害的接穗母本园 。若茎尖苗表现症状 ,说明脱毒不
成功 ,应将此苗淘汰 。茎尖苗母树隔 2 ~ 3年要作指示
植物的复查。
两年多来 ,经过热处理+茎尖嫁接转接 ,我们已获
得南 3号蕉柑 、孚优选蕉柑和 85-2蕉柑等脱毒株系 ,
这些脱毒株系都成为柑桔无病良种资源 。试验研究
中 ,我们还发现茎尖嫁接的成活率因季节而有不同。
一般情况下 ,秋季的成活率高 ,冬春次之 ,夏季最低。
这可能与气温 、湿度 ,各个时期萌发的芽质有关 ,有待
进一步研究。
98