全 文 ：梁平柚皮抗氧化作用的研究
彭述辉1 , 黄泳梅2 , 刘胜龙2 , 黄丹3 , 蔡桂芬1　(1.广州城市职业学院生物与环境工程系,广东广州 510405;2.福建农林大学食品科
学学院 ,福建福州 350002;3.福建农林大学园艺学院,福建福州 350002)
摘要　采用光照核黄素(IR)—氯化硝基四氮唑兰(NBT)—分光光度法实验模型 ,证明梁平柚皮提取液对活性氧O-2 有明显的清除作用 ,
水提液清除效果强于阳性对照抗坏血酸。动物实验结果表明 ,梁平柚皮水提液对小鼠脑 、心、肝组织的脂质过氧化有较强的抑制作用 ,
可明显增强小鼠全血的超氧化歧化酶(SOD)活性(p<0.01)。
关键词　梁平柚皮;活性氧;超氧阴离子;脂质过氧化;SOD;抗氧化
中图分类号　Q946　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2006)01-0003-01
　　根据梁平柚皮提取物对猪油自然氧化的抑制作用和对
羟自由基的清除作用[ 1, 2] ,笔者研究了其对超氧阴离子的清
除作用并进行了动物实验 ,为深入研究柚皮抗氧化功能性成
分 ,以及开发新保健食品基料和天然抗氧化剂提供理论
依据。
1　材料与方法
1.1　材料　市购梁平柚 ,取皮待用 。
1.1.1　水提液制备 。将梁平柚皮打碎后加入适量蒸馏水 ,
煮沸提取过滤 ,收集滤液。共提取 3次 ,每次 30min 。将滤液
浓缩 ,使 1 ml提取液相当于 1.0 g鲜柚皮。
1.1.2　70%乙醇 、正丁醇 、乙酸乙酯提取液的制备 。将上述
打碎的皮渣分别加入浓度 70%乙醇 、正丁醇 、乙酸乙酯溶液
浸泡过夜 ,然后振动摇动提取 3次 ,每次 15 min ,收集滤液 ,挥
发溶剂 ,最后用无水乙醇定容至 1 ml提取液相当于 1.0 g鲜
皮渣 ,但乙醇提取液仍用 70%乙醇定容。
1.2　方法
1.2.1　清除超氧阴离子。采用光照核黄素(IR)—氯化硝基
四氮唑兰(NBT)—分光光度法(Spectrophotometer ,简称 SPM),
检测梁平柚皮提取液清除超氧阴离子的能力[ 3] 。
1.2.2　动物实验。昆明种小白鼠 30只(购于第三军医大学
实验动物中心),体重(18±2)g ,雌雄各半 。采用随机法[ 4] ,
将小白鼠分为 5组 ,每组 10只 ,雌雄各半 ,自由取食 。用梁平
柚皮对其做抗氧化实验 。根据动物实验结果 ,选用抗氧化效
果明显的柚皮水提取液 ,浓度为 0.1和 0.2 g/ml(下分别称
1#、2#),灌胃量 2.22和 1.11 g/kg(体重),每天灌胃 1次 ,每
次 0.2 ml ,灌胃 15d后处死 。
1.2.2.1　梁平柚皮水提液对小鼠脂质过氧化的影响[ 5 , 6] 。
小鼠头天禁食 12h ,次日采用颈椎脱臼法[ 7]将其处死 ,立即断
头取全血处理备用。取出肝 、心 、脑 ,称重后 ,放入 0 ℃浓度
0.9%NaCl溶液中冷却 ,并用之洗涤。以 1 g新鲜组织和 9ml
1.15%KCl混合进行组织匀浆。于 4 ℃保存 ,用TBA[ 8]法测定
小鼠脂质过氧化程度。
1.2.2.2　柚皮和皮渣提取液对小鼠全血 SOD的影响。先提
取红细胞 SOD[ 9] ,再采用光照核黄素体系[ 3 , 10] 。
2　结果与分析
2.1　清除超氧阴离子实验结果(图 1)　梁平柚皮水提液具
有良好的清除超氧阴离子的效果 ,它的半数清除浓度(IC50)
为 0.76mg鲜皮/ml ,明显低于阳性对照抗坏血酸(IC50 =1.20
mg鲜皮/ml),说明其清除效果优于阳性对照物;其次为梁平
柚皮正丁醇提取液 ,它的 IC50为 10.22 mg鲜皮/ml;其他提取
液效果很差。
图 1　梁平柚皮提取液清除超氧阴离子的效果
2.2　动物实验结果
2.2.1　梁平柚皮水提液对小鼠体内组织脂质过氧化的影
响。笔者通过TBA实验 ,测定并比较了实验小鼠脑 、心 、肝组
织脂质过氧化的差异性 ,结果见表 1。
　　表 1 梁平柚皮水提液对小鼠脑、心、肝组织脂质过氧化的影响
处理 脑组织
MDA均值 比对照± 比 1#±
心肌
MDA均值 比对照± 比1#±
肝组织
MDA均值 比对照± 比 1#±
0#(CK) 0.1620±0.0031 0.166±0.004 4 0.4226±0.010 3
1# 0.0917±0.0085 0.0703＊＊ 0.170±0.006 8 　0.004 0.2597±0.010 0 0.162 9＊＊
2# 0.1200±0.0030 0.0420＊＊ 0.0283＊＊ 0.102±0.006 7 0.064＊＊ 0.068＊＊ 0.3187±0.009 0 0.143 9＊＊ 0.059＊
　注:1#、2#分别表示低 、高浓度;＊＊P<0.01 , ＊P<0.05。
　　表 1表明:饲喂梁平柚皮水提液的小鼠脑组织脂质过氧
化作用与对照(CK)相比明显减轻 ,且差异显著;高浓度的柚
作者简介　彭述辉(1965-),男 ,湖南澧县人, 硕士, 工程师 ,工商管理
师 ,从事食品新技术开发和食品安全与质量管理研究。
收稿日期　2005-09-17
皮水提液的作用效果(2#)比相应低浓度的水提液(1#)弱 ,
且差异显著性大。饲喂柚皮水提液的小鼠心肌脂质过氧化
程度与对照相比有一定减轻;处理 1#的柚皮水提液对小鼠
心肌脂质过氧化无抑制作用 , 但是处理 2#表现出较强的
(下转第 8页)
安徽农业科学, Journal of Anhui Agri.Sci.2006 ,34(1):3, 8　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　责任编辑　金琼琼　责任校对　金琼琼
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2006.01.002
　　表 1 马齿苋黄酮类物质的抑菌效果
供试菌种 抑菌圈直径∥mm 无菌水对照(CK)
大肠杆菌 21.2 -金黄色葡萄球菌 23.8 -枯草芽孢杆菌 20.0 -青霉 ± -毛霉 ± -根霉 ± -黑曲霉 ± -啤酒酵母 - -热带假丝酵母 - -
　注:“ -”表示无抑菌效果, “ ±”表示抑菌圈不明显。
　　从表 2可以看出 ,马齿苋黄酮类物质对大肠杆菌 、金黄
色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度分别为
0.0625%、0.03125%、0.0625%。可见 ,马齿苋黄酮类物质对
金黄色葡萄球菌的抑制作用要比对大肠杆菌和枯草芽孢杆
菌强。
　　表 2 马齿苋黄酮类物质的最低抑菌浓度(MIC)
浓度∥% 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 金黄色葡萄球菌
　0.5 - - -
0.25 - - -
0.125 - - -
0.062 5 - - -
0.031 25 + + -
0.015 625 ++ ++ +　对照 +++ +++ +++
　注:“ -”表示无菌生长 , “+”表示菌体较少, “ ++”表示菌体较多 , “ +
++”表示菌体非常多。
2.3　抗热性　由表 3可见 ,马齿苋黄酮类物质经 3种温度处
理 15min后 ,仍具很强的抑菌力 ,与未经高温处理样品对比 ,
无明显差异。说明高温对其抑菌能力基本无影响 ,即使在
121 ℃条件下处理 15min ,仍能保持其抑菌效力。
　　表3 热处理对马齿苋黄酮类物质抑菌效果的影响
温度∥℃ 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 金黄色葡萄球菌
　　　80 - - -
100 - - -
121 - - -
　注:“-”表示无菌生长。
3　结论与讨论
马齿苋黄酮类物质对大肠杆菌 、金黄色葡萄球菌 、枯草
芽孢杆菌的抑制作用较强 ,对青霉 、毛霉 、根霉 、黑曲霉的抑
菌效果不明显 ,对啤酒酵母和热带假丝酵母无抑制作用 。表
明马齿苋黄酮类物质可能是马齿苋中最主要的抑菌成分[ 1] 。
马齿苋黄酮类物质对大肠杆菌 、金黄色葡萄球菌和枯草
芽孢杆菌的最低抑菌浓度分别为 0.062 5%、0.031 25%、
0.0625%,且热稳定性好。马齿苋资源丰富 ,其黄酮类物质有
一定的抑菌作用 ,可作为天然食品防腐剂进行开发和利用。
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(上接第 3页)
抑制作用。说明饲喂高浓度水提液的小鼠心肌脂质过氧化
程度比低浓度的大 。饲喂柚皮水提液的小鼠肝组织脂质过
氧化作用与对照相比明显减轻 ,差异显著;且随着柚皮水提
液浓度的增加 ,小鼠肝组织脂质过氧化程度加深。
2.2.2　柚皮提取液对小鼠全血 SOD活性的影响(表 2)。饲
喂柚皮水提液可增强小鼠全血 SOD活力 ,与对照相比对全
血中O-2 有明显的清除作用 ,且差异显著 。
　　表2 柚皮水提物对小鼠全血 SOD活性作用的差异比较
处理 A 均值 比对照± 比 1#±
0#(CK) 0.507±0.0195
1# 0.279±0.0226 0.291＊＊
2# 0.408±0.0225 0.162＊＊ 0.129＊＊
　　由上述实验结果和分析可知:柚皮的水提液在浓度为
0.1和 0.2 g/ml ,以及灌胃量 2.22和 1.11 g/kg(体重)的条件
下 ,对小鼠肝 、脑 、心组织的脂质过氧化有很强的抑制作用 ,
对于不同组织的脂质过氧化 ,其抑制作用不同;可明显增强
小鼠全血的 SOD活性。
3　小结与讨论
在猪油自然氧化实验体系中 ,梁平柚皮提取液对猪油
自然氧化具有较强的抑制作用 ,特别是柚皮乙醇提取液[ 1] ;
在清除·OH 实验体系中 ,梁平柚皮水提液表现出很好的清
除作用[ 2] ;在清除 O-2 的实验体系中 ,梁平柚皮水提液抗氧
化作用最强 , IC50为 0.76 mg鲜皮/ml ,清除效果甚至优于阳
性对照物抗坏血酸(IC50 =1.20mg/ml);与对照组比较 ,梁
平柚皮水提液对小鼠脑 、心 、肝组织的脂质过氧化表现较强
的抑制作用。
综上所述 ,梁平柚皮的确具有较好的抗氧化作用 ,可为
开发新保健食品和天然抗氧化剂提供基料 ,不仅能节约资
源 ,又不会对环境造成污染。但是对其功能因子构效和量
效的确定 ,尚待进一步研究。
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8 　　　　　　　　　　　　　安徽农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2006年