全 文 ：最佳工艺为第 1煎 pH为 6,第 2煎 pH值为 7,第 3
煎 pH值为 10,用水量为药材的 12倍 ,提取时间为 8
h,且工艺稳定 、可行 。通过与水提法比较可知 ,半仿
生法提取银翘散比普通水提更优越 ,能改善复方银
翘散的生物利用度 ,提高疗效 ,值得推广。
参考文献:
[ 1] 　白　刚 ,肖洪彬.中药方剂研究与应用大全 [ M] .北京:中国科
学技术出版社 , 1995:972.
[ 2] 　张瑞亭 ,张兆旺 ,孙秀梅.思维方式的转换与中药 “半仿生提取
法 ”[ J] .中国中药杂志.1997, 22(9):542.
[ 3] 　ZhangZW, SunXM.OralPreparationsofChinesemateriamedi-
cabysemi-bionicextraction[ P] .ChemAbstract, 1996, 124.
[ 4] 　张兆旺 ,孙秀梅.试论 “半仿生提取法 ”制备中药口服制剂 [ J].
中国中药杂志 , 1995, 20(11):670-673.
[ 5] 　张兆旺 ,孙秀梅.“半仿生提取法 ”是中药药剂现代化的科学途
径 [ N] .中国中医药报 , 2000-5-8(4).
[ 6] 　李云雁 ,胡传荣.试验设计与数据处理 [ M] .北京:化学工业出
版社.2005:79-112.
[ 7] 　DuXQ, LiuHR.DeterminationofGlycyrihizicAcidContentin
ChinesePatentmedicinebyHPLC[ J] .JShanxiUniversity(Nat.
Sci.Ed, )2002, 25(1):48-51.
白鲜皮脂质体凝胶剂的研制与质量评价
冯淑华 1 , 　林　强 1 , 　周　晶2 , 　李可意 1 , 　马晓平 1
(北京联合大学生物化工学院 ,北京 100023;2.天津医科大学药学院 ,天津 300070)
收稿日期:2006-10-14
作者简介:冯淑华(1958～ ),女 ,硕士 ,教授 ,研究方向:中西药制剂 ,天然产物活性成分 , 010-52072019, 010-87734275。
关键词:白鲜皮;脂质体凝胶;质量评价
摘要:目的:制备白鲜皮提取物的脂质体凝胶 , 并进行质量初步评价。方法:用正交设计优选该脂质体的处方及制备工
艺 , 并用扫描电镜观测其外观 、大小及分布 ,用微型凝胶柱以白鲜碱为指标 , 以紫外分光光度法测定其包封率 ,并进一步
制备成凝胶 , 初步考察该制剂的稳定性。结果:所得脂质体外观圆整 ,分布较均匀 ,平均包封率(80.54±1.6) (n=3),
所得凝胶剂为半透明黏稠状胶体 ,稳定性良好。结论:含有白鲜皮提取物脂质体凝胶制备工艺简便 , 脂质体制备的包封
率较高 , 具有良好的稳定性 ,可开发成为新型外用治疗皮肤感染的中药制剂。
中图分类号:R944　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2007)12-1774-03
　　白鲜皮为芸香科植物白鲜 Dictamnusdasycarpus
Turcz(DT)的干燥根皮 [ 1] ,为我国常用中药。其主
要功效为清热解毒 ,祛风止痒 ,用于风热疮毒 ,皮肤
瘙痒 ,荨麻疹 、湿疹 、神经性皮炎等的治疗。白鲜皮
对多种致病真菌有抑制作用 [ 2, 3] ,对皮肤化脓性溃
疡有一定效果 ,是中医临床治疗皮肤病的常用中药 ,
本文以乙醇为溶剂在超声条件下对白鲜皮进行提
取 ,并首次将提取物制备成外用脂质体(liposomes,
LP)凝胶 ,对脂质体的制备工艺 、凝胶剂处方 、凝胶
剂的稳定性进行了研究 ,以期开发成为白鲜皮的外
用制剂 。
1　仪器与药品
TU-1810PC紫外分光光度计(北京普析通用仪
器有限责任公司);高压均质机(意大利 NIRO-SOA-
VI公司);Mastersizer2000激光粒度测定仪(英国
Malvern公司);RE-52C旋转蒸发器(上海亚荣生化
仪器厂);80-2型离心机 (上海浦东物理光华仪器
厂);KQ-250B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有
限公司);电子天平(METTLER公司);FEIXL-30场
发射环境扫描电子显微镜(美国);白鲜碱对照品
(中国药品生物制品检定所);白鲜皮(购自北京同
仁堂药店 ,产地:本溪);胆固醇(北京市海淀区微生
物培养基制品厂);葡聚糖凝胶 G-50(北京拜尔迪生
物公司);大豆卵磷脂(北京华清美恒天然产物技术
开发有限公司);卡波姆 940(上海人民制药厂)。
2　方法与结果
2.1　白鲜皮的提取
精密称取白鲜皮 50g, 200 mL95 乙醇 ,于超声
波清洗机上 70℃提取 40 min,提取 2次 ,合并提取
液 ,减压浓缩至 5mL(相当于 10 g药材 /mL),得白
鲜皮提取物 ,其中白鲜碱含量 0.05 。
2.2　脂质体的制备
1774
2007年 12月
第 29卷　第 12期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
December2007
Vol.29　No.12
2.2.1　正交试验及结果[ 4] 　依据预试验及参考有
关文献 ,白鲜皮脂质体(DTLP)拟采用薄膜超声法制
备 ,以包封率为指标 ,选择对包封率(Y)影响较大的
以下 4个因素进行考察:大豆卵磷脂与胆固醇的质
量比 A(PC/CH, mg/mg),水化温度 B(℃),水化溶
液 PBS用量 C(mL),有机溶剂氯仿用量 D(mL),每
个因素取 3个水平(见表 1),按 L9(34)使用表安排
实验(见表 2)。
表 1　 因素水平表
水平 A(mg/mg)(×200mg) B/℃ C/mL D/mL
1 2∶1 40 8 30
2 2.5∶1 45 10 40
3 3∶1 50 12 50
表 2　 L9(34)实验设计表
实验号 因素A/mg/mg B/℃ C/mL D/mL
包封率 /
Y
1 1(400∶200) 1(40) 1(8) 1(30) 74.03
2 1(400∶200) 2(45) 2(10) 2(40) 72.31
3 1(400∶200) 3(50) 3(12) 3(50) 73.18
4 2(500∶200) 1(40) 2(10) 3(50) 66.72
5 2(500∶200) 2(45) 3(12) 1(30) 78.71
6 2(500∶200) 3(50) 1(8) 2(40) 71.66
7 3(600∶200) 1(40) 3(12) 2(40) 78.39
8 3(600∶200) 2(45) 1(8) 3(50) 70.15
9 3(600∶200) 3(50) 2(10) 1(30) 81.80
K1 73.20 73.05 71.95 78.18
K2 72.36 73.75 73.63 74.14
K3 76.78 75.55 76.76 70.02
R 4.42 2.50 4.81 8.16
因素主次 DCAB
优化方案 A3B3C3D1
　　对以上数据进行直观分析 ,在 A、B、C、D四个
影响因素对包封率影响顺序是 D※C※A※B, D因
素影响最大。因素-指标图显示了各因素的变化趋
势(见图 1),从而确定以包封率为指标的最佳工艺
条件为:A3 (3∶1)、B3 (50℃)、C3 (12 mL)、D1 (30
mL)。即卵磷脂 600 mg,胆固醇 200 mg,水化温度
50℃,水化溶液 PBS用量 12mL,氯仿用量 30 mL。
图 1　因素-指标图
2.2.2　DTLP的制备工艺　精密称取卵磷脂 200
mg,胆固醇 600mg,维生素 E10 mg、白鲜皮提取物 2
mL(相当于药材 20 g)及 30 mL氯仿 ,振摇均匀 ,置
于 500 mL茄形瓶中 ,于 50℃水浴上用旋转蒸发仪
在转速 100 r/min及减压条件下蒸除氯仿 ,使膜材
在瓶壁上形成均匀的类脂薄膜 。加入 50℃的 PBS
12 mL(pH7.4), 置于浴式超声波仪 50℃震荡 5
min,使溶液转变为半透明状 ,即得到白鲜皮脂质体
悬液 。将其在高压均质机上 ,在 860bar压力下循环
12次 ,置棕色瓶中密闭保存 。
2.3　DTLP的质量评价
2.3.1　显微观察　DTLP混悬液在 FEIXL-30场发
射环境扫描电子显微镜 40 000倍下观察并拍照 ,可
见粒子呈球形或类圆形 ,表面规整 、连续 ,分散性良
好。如图 2。
图 2　DTLP电子显微镜照片
2.3.2　粒径与粒度分布　DTLP混悬液用 Mastersi-
zer2000激光粒度测定仪进行粒度分布测定 ,可见
集中分布在 45-160 nm范围内 ,如图 3。
图 3　DTLP粒径分布
2.3.3　包封率的测定 [ 5] 　采用微型柱离心法测定
包封率。取 5mL塑料注射针筒 ,填上滤纸作衬片 ,
加入用 PBS溶液溶胀的 0.5 g葡聚糖 G-50凝胶 ,将
针筒置离心机以 2 000 r/min转速离心 3 min,定量
加入 DTLP悬液 0.5mL,离心 3min,收集离心液 ,再
加 PBS溶液 1 ～ 2 mL依上法离心 ,与前 1次离心液
合并 。进一步用 PBS溶液反复洗脱 2-3次 ,离心液
另外收集 ,此时药物被洗脱进入离心液中。分别精
密量取经无水乙醇破膜的含有脂质体的溶液和含有
游离药物的溶液 ,按 2.4.3.3项下方法测得含量 W1
和 W2 ,包封率 =W1 /(W1 +W2)×100 ,结果包封
率为(80.54±1.6) (n=3)。
1775
2007年 12月
第 29卷　第 12期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
December2007
Vol.29　No.12
2.4　DTLP凝胶剂的制备
称取 1.0 g卡波姆 940,甘油 10 mL,加入 PBS
溶液 5 mL充分搅拌 ,溶胀过夜 ,滴加三乙醇胺调整
pH为 6.0 ～ 6.5。取 DTLP混悬液 10 mL,加入适量
PBS稀释后 ,滴加到溶胀好的凝胶基质 , 加山梨酸
0.1g,最后加 PBS至 100 g,搅匀 ,置于棕色瓶密闭
贮存(标示含量 8.3 mg白鲜碱 /100gDTLP凝胶)。
2.5　DTLP凝胶剂的质量评价
2.5.1　性状　本品为均匀 、细腻 、黏稠的半透明胶
体 。
2.5.2　pH值　取本品 1.0 g置烧杯中 ,加纯化水
搅拌稀释后测其 pH,为 6.0 ～ 6.5。
2.5.3　DTLP凝胶剂中白鲜碱的含量测定[ 6]
2.5.3.1　标准曲线和线性范围　精密称取干燥至
恒重的白鲜碱对照品适量 ,用 95 乙醇制备成浓度
为 1 mg/mL的储备液 ,精密吸取 1.0 mL置 100 mL
量瓶中 ,用 95 乙醇稀释至刻度 ,分别从中吸取
1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL于 10 mL量瓶中 ,加
95 乙醇定容至刻度 ,在 236.5 nm处测吸收度 ,得
标准曲线方程 A=0.352 85C-0.056 67, r=
0.999 7,吸收度与浓度线性关系良好 ,线性范围 10
～ 60 μg/mL。
2.5.3.2　回收率与精密度试验　分别定量量取 5 g
脂质体凝胶所含白鲜碱的 80 、100 、120 的对
照品 ,加入相应的空白脂质体凝胶 ,按 2.4.3.3项下
测定 ,每个浓度各做 3份 ,结果 3种浓度的平均回收
率为 100.06 , RSD为 1.73 (n=9)。
2.5.3.3　样品含量测定　按处方制备 3批 DTLP
凝胶剂样品(批号:060503, 060508, 060515),各取样
品 5.0 g,精密称定 ,加无水乙醇适量 ,充分振摇 5
min,用 95 乙醇稀释至刻度 ,过滤 ,精密量取续滤
液 ,在 236.50nm处测吸收度 ,计算其含量 ,结果 3
批样品中白鲜碱的含量分别为标示量的 100.54 ,
100.44 , 99.20 ;RSD分别为 1.57 ;1.82 ;
2.66 (n=5)。
2.6　皮肤刺激性实验
选用家兔 4只 ,体重(4.0±0.6)kg,于给药前
24 h将兔背部脊柱两侧对称脱毛 ,每侧约 5 cm×5
cm,正常饲养 ,一侧涂不含药脂质体凝胶剂 ,另一侧
涂 ML脂质体凝胶剂 0.3 g,每日 1次连续给药 1
周 ,观察皮肤变化 ,未出现红斑和水肿等情况。
2.7　DTLP凝胶剂初步稳定性试验
2.7.1　温度实验　精密称取一定量样品 ,密封于棕
色玻璃瓶中 ,置 20, 40, 60℃恒温干燥器中放置 10
d,分别于第 0, 5 , 10天取出 ,观察外观 ,并依前述含
量测定方法及包封率测定方法测定制剂的含量及包
封率 ,结果见表 3。
表 3　 DTLP凝胶稳定性试验结果(n=3)
条件 时间 外观 包封率 / 含量 /mg/10g
20℃ 0d 乳白色 80.50 0.833 5
5d 无变化 80.28 0.834 2
10d 无变化 80.10 0.833 7
40℃ 0d 乳白色 80.50 0.833 5
5d 无变化 80.12 0.828 6
10d 无变化 79.84 0.825 4
60℃ 0d 乳白色 80.50 0.833 5
5d 颜色变深 79.82 0.821 6
10d 颜色更深 78.56 0.818 8
4000lx 0d 乳白色 80.50 0.833 5
5d 颜色变深 76.52 0.824 6
10d 颜色更深 70.46 0.816 2
RH75 0d 乳白色 80.50 0.833 5
5d 无变化 80.46 0.832 8
10d 无变化 80.20 0.830 2
RH92.5 0d 乳白色 80.50 0.833 5
5d 无变化 80.26 0.833 0
10d 无变化 65.36 0.833 4
2.7.2　光照实验　精密称取一定量样品 ,密封于无
色玻璃瓶中 ,于照度为 4 000Lx的条件下光照 10 d,
第 0, 5, 10天取出测定各项指标 ,结果见表 3。
2.7.3　湿度影响试验　精密称取 3批样品 ,于相对
湿度(RH)分别为 75 和 92.5 ,恒温 25℃的密闭
容器内放置 20 d,定时取样测定各项指标 ,结果见
表 3。
3　讨论
3.1　在比较了各种提取方法后 ,超声提取法提取物
中白鲜碱含量最高 ,故本文采用超声波法进行提取。
实验中白鲜碱为指标采用紫外分光光度法测定
制剂中的白鲜碱的含量 ,因白鲜碱在乙醇中的溶解
度较小 ,在配制对照品溶液时需超声或放置 12 ～ 24
h,方可进行测定。
3.2　脂质体具有良好的生物相容性 、生物膜相似
性 、无毒和促进药物透皮吸收 、在皮肤内形成药物储
库而维持较恒定的有效浓度等特性 ,成为外用制剂
的新型载体。本试验采用薄膜超声法制备白鲜皮脂
质体(DTLP),并将其制备成凝胶。动物刺激性试验
表明本品对家兔皮肤无刺激 。有关的研究正在进一
步进行。
3.3　凝胶剂作为外用制剂的载体可增加脂质体在
皮肤表面的接触 ,提高局部组织药物浓度 ,且清凉 、
无污染 ,易于使用 ,便于储存和运输。
3.4　光和热对脂质体凝胶的稳定性影响较大 ,特别
1776
2007年 12月
第 29卷　第 12期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
December2007
Vol.29　No.12
是光照下 5d内包封率下降了约 4 , 10d下降了约
10 ,因此应避光储存 。
3.5　因为凝胶剂本身为含水制剂 ,所以湿度对稳定
性影响不明显。
参考文献:
[ 1] 　中国药典 2005年版一部 [ S].2005:72.
[ 2] 　江苏新医学院.中药大词典上册 [ M] .上海:上海科学技术出
版社 , 1998:737.
[ 3] 　谭家莉 ,谢艳华 ,匡　威.白鲜皮抗炎作用的实验研究 [ J] .中
国新医药 , 2004, 3(8):35.
[ 4] 　李云雁 ,胡传荣.试验设计与数据处理 [ M] .北京:化学工业出
版社 , 2005:79.
[ 5] 　梅兴国.生物技术药物制剂 [ M] .北京:化学工业出版社 ,
2004:242.
[ 6] 　朱丹妮 ,徐　强 ,邱南生.白鲜皮中白鲜碱含量测定 [ J] .植物
资源与环境 , 1998, 7(2):61.
茅苍术多糖的提取工艺研究
韩　丽 , 　欧阳臻＊ , 　李晓昕 , 　杨　凌
(江苏大学药学院制药工程系 ,江苏 镇江 212013)
收稿日期:2006-12-10
基金项目:江苏省自然科学基金项目(编号:BK2004062)
作者简介:韩　丽(1980～ ),女 ,在读硕士研究生,主要从事天然药物研究与开发 ,电话:13952818096。
＊通讯作者:欧阳臻 , E-mail:yshkong@ujs.edu.cn。
关键词:茅苍术;多糖;提取
摘要:目的:研究茅苍术多糖的提取方法及最佳提取工艺。方法:采用单因素实验和 L9(34)正交实验法考察了提取时
间 、温度 、次数和料液比对茅苍术多糖得率的影响。结果:影响茅苍术多糖得率的主次因素为提取次数 、料液比 、提取时
间及提取温度。最佳提取工艺条件为提取温度 80℃,料液比 1∶20, 提取时间为每次 4h,提取 2次。结论:在此最佳工艺
条件下茅苍术粗多糖含量为 3.90 。
中图分类号:R284.2　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2007)12-1777-03
　　茅苍术为菊科植物茅苍术 Atractylodeslancea
(Thunb.)DC.的干燥根茎。味甘 ,苦;性温 ,归脾 、
胃 、肝经。具有燥湿健脾 ,祛风散寒 ,明目的功效 。
江苏句容茅山为其道地产区 ,因而得名茅苍术 。茅
苍术不仅是一种燥湿健脾的常用中药 ,而且道家
(尤其是茅山道士)用于抗衰老已经有两千多年的
历史。迄今 ,对茅苍术的研究多集中在对挥发性成
分的化学和药理研究上 [ 1, 2] ,对水溶性成分的研究
报道较少 ,近年来已有报道苍术中的水溶性多糖具
有肠免疫活性[ 3] ,但对苍术多糖的提取工艺研究国
内外尚未见报道 。本研究采用热水提取方法 ,选取
料液比 、提取次数 、提取时间及温度 4个因素 ,在单
因素实验的基础上 ,采用 L9(34)正交实验对茅苍术
水溶性多糖进行最佳提取工艺研究 ,以期为茅苍术
的进一步活性研究与应用提供依据。
1　材料 、仪器及试剂
1.1　材料　茅苍术采自江苏茅山自然保护区 ,经欧
阳臻教授鉴定为菊科植物茅苍术 Atractylodeslancea
(Thunb.)DC.的干燥根茎 。
1.2　仪器及试剂　UV-2102 PCS型紫外分光光度
计(尤尼柯上海仪器有限公司), SHB-111循环水式
多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司), ALRa冷
冻干燥机(德国)R-200旋转蒸发仪(Buchi公司),
METTLERAE240分析天平(上海托利多 -梅特勒仪
器有限公司)。
乙醇 ,石油醚 ,葡萄糖 ,苯酚 ,浓硫酸及其它试剂
均为分析纯;双蒸水(本实验室自制)。
2　实验方法
2.1　茅苍术的预处理　将茅苍术根茎剪去须根 ,低
温干燥 ,粉碎 ,过 40目筛 。
2.2　茅苍术粗多糖的提取　称取经预处理后茅苍
术干燥粉末 100 g,分别用石油醚和无水乙醇进行脱
脂 ,然后将药材粉末置于 1 000 mL圆底烧瓶中按设
计的料液比加入蒸馏水 ,于恒温水浴中浸提 ,趁热抽
滤 ,提取液经旋转蒸发仪浓缩至原液的 1 /5,缓缓加
入 95 的乙醇 ,使乙醇含量达 80 (V/V),于冰箱
中静置 12 h,可见大量的浅棕色沉淀析出 ,以 3 000
r/min离心 15 min,沉淀依次用无水乙醇 ,丙酮 ,乙
1777
2007年 12月
第 29卷　第 12期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
December2007
Vol.29　No.12