免费文献传递   相关文献

白鲜皮水提液的杀菌效果观察



全 文 :坏。该灭菌方法提高了手术器械的周转率和使用效
率,降低了医疗成本和医源性感染发生率,是一种安
全、可靠的灭菌方法。由于其灭菌条件严格,因此操
作者需认真执行器械清洗消毒规范,使灭菌物品的
质量得到有效保障,才能发挥新的灭菌技术的优越
性。①指定经过专业培训的人员操作,每半年指定
专业设备维修人员对低温等离子灭菌器进行保养维
修,保证机器正常运转。②严格规范清洗操作流程,
正确清洗器械是灭菌前的关键步骤。操作人员应严
格按照内镜清洗消毒技术规范流程操作〔4〕,避免因
清洗不彻底,有机物在微生物表面形成保护膜而影
响灭菌效果。③动力系统内部清洁后及时干燥尤为
重要。不及时干燥,管腔内部残留的水分非常容易
从内部缝隙进入马达导致生锈,影响动力系统的使
用寿命;灭菌前干燥不彻底,会导致抽真空过程受
阻,使灭菌舱压力无法降低到所需指标,循环自动取
消。④选择专用的纸塑袋包装,以保证过氧化氢等
离子体的穿透。⑤正确合理的装载是安全有效灭菌
的基础。最大装载量 < 80%,以免物品过多影响等
离子的产生和扩散,导致灭菌循环终止。
参 考 文 献
〔1〕 庄水华,刘承军,郑培英.低温等离子灭菌器在消毒供应中心
的应用[J].中华医院感染学杂志,2011,21(11):2331.
〔2〕 孙玲,韩晶,赵莉,等.低温等离子体灭菌器在手术室的使用效
果及分析[J]. 中华医院感染学杂志,2012,22(16):3585 -
3586.
〔3〕 刘玉红,许多朵.低温等离子体灭菌方式在手术室的应用与管
理[J]. 中华医院感染学杂志,2010,20(3):356 - 357.
〔4〕 黄昕,李洁,李思,等.过氧化氢低温等离子灭菌机灭菌效果及
有机物对其影响[J].中国感染控制杂志,2007,6(1):35 - 37.
(收稿日期:2014 - 11 - 15)
【信息交流】
白鲜皮水提液的杀菌效果观察
陈 羽,徐 威,马淑坤1,徐世义
(沈阳药科大学,辽宁沈阳 110016; 1 沈阳医学院)
关键词 白鲜皮;消毒剂;悬液定量杀菌试验
中图分类号:Q815 文献标识码:B 文章编号:1001 - 7658(2015)09 - 0956 - 02
〔通讯作者〕 徐世义,Email:gzweishengwu@ 126. com
白鲜(Dictamnus dasycarpus Turcz)为芸香科白
鲜属植物,生长于山坡丛林中,我国辽宁、甘肃、陕
西、安徽、河北等省均有分布。白鲜的干燥根皮即为
传统中药白鲜皮,具有抗菌抗癌、祛风解毒、清热燥
湿等作用,临床上主要用于治疗湿热疮毒、黄水淋漓
和湿疹等,并对心血管及血液病有一定的疗效〔1,2〕。
本研究以白鲜皮水提液作为研究对象,对其杀菌效
果进行了实验室观察。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
试验用白鲜皮购于安国昌达中药材饮片有限公
司。试验指标菌为金黄色葡萄球菌(ATCC 6538),
大肠埃希菌(8099),枯草芽孢杆菌(ATCC 9372),白
色念珠菌(ATCC 10231)和黑曲霉(ATCC 16404),
由沈阳药科大学微生物学与细胞生物学教研室提
供。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 白鲜皮水提液的制备 取白鲜皮 200 g,加适
量水煎煮 3 次,煎煮时间分别为 60 min、40 min 和
20 min,用 8 层纱布过滤,合并滤液,浓缩至 500
ml,保存于 4℃冰箱中备用。
1. 2. 2 菌悬液的制备 取各试验指标菌进行单个
菌落分离培养,然后选取单个典型菌落分别接种营
养琼脂培养基(白色念珠菌接种沙堡培养基)斜面。
将新鲜斜面上的菌苔用胰蛋白胨生理盐水洗下并稀
释至 1 × 108 ~ 5 × 108cfu /ml,备用。
1. 2. 3 芽孢悬液的制备 取已经活化 3 代的枯草
芽孢杆菌(ATCC 9372)液体培养物 3 ml,接种于罗
氏瓶中营养琼脂培养基表面,置于 37℃恒温培养箱
内连续培养 8 d。采用孔雀绿法进行芽孢染色,当芽
孢形成率达 95%以上时,即可进行芽孢悬液的制
备。用胰蛋白胨生理盐水 30 ml 轻轻推刮下菌苔,
集中于一含玻璃珠的无菌三角瓶中,振摇 30 min,分
散培养物,使成均匀悬液。将盛装上述悬液的三角
瓶置于 45℃水浴中 24 h,使菌自溶断链分散成单个
·659· Chinese Journal of Disinfection 2015;32(9)
芽孢。最后,将三角瓶放于 80℃水浴中 10 min,以
杀灭残余的细菌繁殖体,待冷却至室温后即为芽孢
悬液。
1. 2. 4 黑曲霉孢子悬液的制备 用接种环划线接
种黑曲霉(ATCC 16404)于沙堡斜面培养基上,置
28℃恒温培养箱中培养 10 d。吸取 0. 05%吐温 -
80 胰蛋白胨生理盐水溶液置于斜面表面,刮洗分
生孢子,将孢子悬液移入装有玻璃珠的三角瓶中,轻
轻振摇 30 min后,滤过除去菌丝。
1. 2. 5 中和剂鉴定试验 以金黄色葡萄球菌
(ATCC 6538)为指标菌,试验设 6 组,按悬液定量杀
菌试验程序进行〔3〕。中和剂及其浓度的判定标准:
1 组不长菌或仅有极少数菌生长;2 组有菌生长,较
1 组为多,但较 3、4、5 组为少;3、4、5 组菌落数分别
在 1 × 108 ~ 5 × 109 cfu /ml 之间,且组间菌落数误差
率不应超过 15%;6 组无菌生长。表明所选中和剂
及其浓度适宜。
1. 2. 6 悬液定量杀菌试验 试验时,先将内装5 ml白
鲜皮水提液的试管置于 20℃水浴中 5 min,再将
0. 1 ml菌悬液加入其中,混匀,作用至规定时间。取
0. 5 ml菌药混和液,移入 4. 5 ml 中和剂溶液的试管
中,混匀,中和作用 10 min。取 0. 1 ml涂平板,置恒
温培养箱内培养,活菌计数。以内装 5 ml标准硬水
的试管同步操作所得活菌数为基准,计算杀菌率。
1. 2. 7 模拟现场杀菌试验 选择木质桌面,在桌面
上划定 5 cm ×5 cm范围的二个不同区域,分别标记
为基准区和白鲜皮区。以涂抹法污染大肠埃希菌
(8099)悬液(菌数为 1 × 104 cfu /ml),待自然干燥后
进行试验。消毒前,将无菌棉拭于胰蛋白胨生理盐
水溶液试管中沾湿,以涂抹法在基准区采样作基准;
将白鲜皮水提液均匀喷涂在白鲜皮区,作用 10 min,
以同样方法进行消毒后采样。分别将消毒前后采样
棉拭采样端剪入 5 ml 中和剂试管内,活菌计数,观
察杀菌效果。
2 结果
2. 1 中和剂的考察试验结果
经检测,用 2 g /L 硫代硫酸钠可有效中和白鲜
皮水提液的杀菌作用,中和剂及中和产物对受试菌
及培养基均无影响(表 1)。
2. 2 悬液定量杀菌试验结果
从悬液定量杀菌试验结果(表 2)可看出,随着
作用时间的增加,白鲜皮水提液杀菌效果不断增强。
2. 3 模拟现场试验结果
用白鲜皮水提液进行模拟现场试验。试验结果
表明,白鲜皮水提液对大肠埃希菌悬液作用 10 min,
杀菌率为 97. 21%。
表 1 消毒剂中和剂鉴定试验结果
组序 检测内容 平均菌数(cfu /ml)
1 消毒液 +菌悬液 320
2 (消毒液 +菌悬液)+中和剂 4 500 000
3 中和剂 +菌悬液 233 000 000
4 (消毒液 +中和剂)+菌悬液 228 000 000
5 磷酸盐缓冲液 +菌悬液 231 000 000
6 试液、培养基 0
表 2 白鲜皮水提液的杀菌效果
试验菌
不同作用时间(min)的杀菌率(%)
2 5 10 20
金黄色葡萄球菌 97. 50 99. 99 100. 00 100. 00
大肠埃希菌 96. 01 97. 34 98. 34 100. 00
枯草芽孢杆菌 43. 36 57. 52 72. 86 80. 83
白色念珠菌 52. 54 74. 58 75. 42 76. 27
黑曲霉 97. 48 97. 89 99. 16 100. 00
3 讨论
传统医学临床实践以及文献报道证实,多种中
草药对细菌有不同程度的抗菌作用,部分中草药还
能逆转细菌的耐药性。中草药不同于单一组分的化
学消毒剂,其成分十分复杂,细菌不易对其产生耐药
性。因此,研究和开发新型抗菌中草药消毒剂对杀
灭耐药菌株具有重要意义〔4,5〕。据文献〔2〕报道,白
鲜皮提取物对红色毛癣菌、絮状表皮癣菌、石膏样小
孢子菌等丝状真菌具有明显的抑制作用,但对细菌
和单细胞真菌的作用鲜有报道。本研究发现,白鲜
皮水提液对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢
杆菌、白色念珠菌和黑曲霉均起到了显著的杀菌效
果,为将来合理开发新型白鲜皮复配消毒产品提供
了理论依据。
参 考 文 献
〔1〕 白媛媛,唐文照,王晓静. 白鲜皮化学成分研究[J]. 中药材,
2014,30(2):264 - 266.
〔2〕 许玲玲,杨晓东,李群力,等.白鲜皮提取物抑制皮肤癣菌活性
研究[J].现代中药研究与实践,2014,28(1):31 - 34.
〔3〕 中华人民共和国卫生部.消毒技术规范[S]. 2002.
〔4〕 王瑞君.几种中草药对金黄色葡萄球菌体外抑制作用的研究
[J].现代食品科技,2009,25(9):1104 - 1106.
〔5〕 高慧,张思超. 中药消毒剂研究现状[J]. 山东中医药大学学
报,2004,28(6):476 - 478.
(收稿日期:2014 - 10 - 16)
·759·中国消毒学杂志 2015 年第 32 卷第 9 期