全 文 ：取，相同方法处理，用 HPLC 法测定，精密吸取供试品溶液
20 μl，注入液相色谱仪(微孔滤膜过滤，过滤后的溶液进样) ，
各进三针，记录色谱图，然后分别计算三种药材的 RSD(%)。
6．测定:对三种玉竹供试品用 HPLC 法测定，记录色谱
图，对谱图进行分析。
二、结果
1．三种玉竹供试品系统适用性实验结果:见表 1。
2．精密度实验结果:见图 1 ～ 3，表 2。
3．测定结果:见图 4 ～ 6。
表 1 系统适用性实验结果
n R T RSD(%)
湘玉竹 17 133． 68 2． 98 1． 00 0． 52
关玉竹 52 533． 65 1． 67 1． 04 0． 31
尚志玉竹 22 403． 75 3． 58 1． 25 0． 51
表 2 精密度实验结果
共有峰保留时间
(min)均值
共有峰保留时间
RSD(%)
共有峰峰面积
(me． sec)均值
共有峰峰面积
RSD(%)
湘玉竹 22． 097 3． 13 8297． 76 0． 52
关玉竹 22． 494 0． 14 578． 85 2． 50
尚志玉竹 12． 481 0． 52 73． 62 9． 06
根据三种玉竹的 HPLC 谱图，可以得到如下结论: (1)在
保留时间 11． 425 时，湘玉竹和关玉竹有峰，尚志玉竹无峰，且
湘玉竹峰面积大于关玉竹的峰面积。(2)在保留时间 8． 943
时，湘玉竹和关玉竹有峰，尚志玉竹无峰，且湘玉竹峰面积较
大。(3)在保留时间为 5． 354 时，三种产地玉竹均有峰，湘玉
竹峰面积最大，尚志玉竹峰面积最小。(4)在保留时间 2． 172
时，三个产地玉竹均有峰，且峰面积大小相似。
讨论 玉竹作为一种常用药材，分布范围较广，北到黑龙
江，南至广西。产地不同，其海拔、光照、温度、湿度、土壤等生
态因素存在较大差异，导致该药用植物的有效成分在种类和
含量上存在差异。本实验以其主要成分黄酮为研究对象，对
产自 3 个地区的玉竹进行研究，结果与古人所认可的道地产
区基本吻合。因此，自由基清除率这个指标可作为不同产地
玉竹质量分析评价的一个参考依据。
参 考 文 献
［1］ Chen H，Feng R，Guo Y，et al． Hypoglycemic effects of aqueous
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(收稿日期:2013-02-18)
白鲜皮化学成分分离及其抑菌活性实验
丛欢 郭丽娜 杨莹
【摘要】 目的 利用柱层析在 75%乙醇提取的白鲜皮氯仿层中分离梣酮、β-谷甾醇并验证其活性。
方法 利用柱色谱分离手段分离梣酮、β-谷甾醇，之后用核磁方法进行验证，通过抑菌环实验验证其活性。
结果 所提取物质谱图与相关文献一致鉴定为梣酮与 β-谷甾醇，梣酮对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形
杆菌的抑制直径为 19． 2、20． 1、16． 9 mm，其抑菌率为 64%、70． 4%、65． 7%。β-谷甾醇对金黄色葡萄球菌、
大肠杆菌、变形杆菌的抑制直径为 7． 6、6． 3、6． 4 mm，其抑菌率为 7． 9%、4． 8%、6． 3%。结论 分离物质为
梣酮与 β-谷甾醇，且梣酮对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌均有一定的抑制活性。
【关键词】 白鲜皮; 梣酮; β-谷甾醇; 抑菌活性
作者单位:150001 黑龙江中医药大学研究生院(丛欢) ;161006 齐齐哈尔医学院(郭丽娜、杨莹)
·358·齐齐哈尔医学院学报 2013 年第 34 卷第 6 期 Journal of Qiqihar University of Medicine，2013，Vol． 34，No． 6
白鲜皮为芸香科植物和狭叶白藓(又名新疆白鲜)的干
燥根皮，味苦性寒，归脾、胃、膀胱、小肠经，是皮肤病的常用中
药，具有清热燥湿、祛风解毒、杀虫止痒的功效，常用于治疗湿
热疮毒、黄水淋漓，湿疹、疥癣、风湿热痹、黄疽尿赤等症［1］，
尤其善于治疗湿疹的风热证和湿热证，在我国分布于东北、华
北、华东及河南、陕西、甘肃、四川、贵州等地［2-3］。其中梣酮和
β-谷甾醇为白鲜皮中主要物质成分中的两种。
一、仪器与材料
1． 仪器:EYEL4 N-1100 旋转蒸发仪(上海爱郎仪器)、
SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(上海华宇仪器)HP5988A 质谱
仪(美国惠普公司)AM-400 核磁共振仪(瑞士布其公司)、MP-
J3 熔点测定仪(日本岛津公司)、UV-Ⅲ三用紫外分析仪(北
京普析通用)。
2．材料:白鲜皮二氯甲烷层、石油醚 30-60(分析纯)、丙
酮、二氯甲烷、GF 薄层硅胶(254、青岛海洋化工)、柱层析硅
胶(青岛海洋化工) ，10%硫酸乙醇显色剂。
二、方法与结果
1．化学物提取:称取白鲜皮氯仿层药物 380． 2 g，采取湿
法上柱方式进行装柱，以二氯甲烷和丙酮混合溶剂为洗脱液，
采取梯度洗脱方法，收集馏分共计 236 瓶，根据薄层色谱检
视，合并 3-9 瓶，得油状固体混合物，放置 24 h，沉淀后分离油
层，得固体层 120 g，记为 H1，采用石油醚丙酮系统对 H1 进行
梯度洗脱，收集馏分共计 532 瓶，合并 29 ～ 69 瓶，记为 H2，再
次采用石油醚丙酮系统对 H2 进行梯度洗脱，收集馏分共计
42 瓶，合并 9-37 瓶，挥干有机溶剂得干燥白色晶体，采用石油
醚反复润洗，挥干溶剂后，将样品溶于二氯甲烷中，重结晶后，
得无色棍状结晶，重量为 9 g，记为化合物 1，在 254 nm荧光检
识下有暗斑，经硫酸乙醇显色剂显色后，呈暗绿色斑点。在以
上操作所得 236 瓶馏分中，根据薄层色谱检视，合并 11-14
瓶，溶于二氯甲烷，放置 24 h，重结晶后分离晶体，再次于二氯
甲烷重结晶，得白色针状结晶，重量为 4 g，记为化合物 2，在
254 nm荧光检识下有暗斑，经硫酸乙醇显色剂显色后，呈紫
红色斑点。
2．结构鉴定:化合物 1:无色棍状结晶，mp 170 ℃。分子
式:C15H18O2。
1H-NMR(CDCl3)δ:7． 47，7． 44，6． 34(H，Fura) ，
4． 88(1H-8，s) ，2． 13，0． 86(2 × CH3，s)
13 C-NMR(CDCl3)δ:
18． 4(C-1) ，18． 2(C-2) ，31． 6(C-3) ，148． 5(C-4) ，127． 4(C-
5) ，169． 8(C-6) ，83． 4(C-7) ，42． 9(C-8) ，32． 0(C-9) ，20． 3(C-
10) ，120． 6(C-11) ，143． 4(C-12) ，108． 5(C-13) ，139． 7(C-
14)。以上数据与文献［4］报道一致，故鉴定化合物为梣酮。
化合物 2:白色针状结晶，mp 140 ℃。分子式:C29 H54
O。1H-NMR(CDCl3)具有甾体类化合物普遍特征，
13 C-NMR
(CDCl3)δ:140． 72(s，C-5) ，121． 72(d，C-6) ，71． 80(d，C-3) ，
56． 73(d，C-14) ，55． 79(t，C-17) ，50． 07(d，C-9) ，45． 78(t，C-
4) ，42． 26(s，C-13) ，39． 73(t，C-12) ，37． 21(t，C-1) ，36． 48(s，
C-10) ，36． 12(d，C-20) ，33． 89(s，C-7) ，1． 89(d，C-8) ，31． 86
(t，C-22) ，31． 63(t，C-2) ，29． 69(t，C-24) ，29． 07(d，C-25) ，
28． 23(d，C-16) ，25． 97(t，C-28) ，24． 28(t，C-15) ，23． 0(t，C-
27) ，21． 05(t，C-11) ，19． 82(q，C-26) ，19． 39(q，C-19) ，18． 99
(q，C-27) ，18． 75(q，C-21) ，11． 96(q，C-29) ，11． 84(q，C-18)。
以上数据与文献［5］报道一致，故鉴定化合物为 β-谷甾醇。
3．抑菌试验:配制 0． 1 mg /ml 梣酮甲醇与 β-谷甾醇
0． 1 mg /ml甲醇溶液，取干净滤纸，用打孔器截取 6 mm直径纸
片，在上述溶液中和甲醇对照溶液中分别浸润 3 片，在 1 小时
之后取出阴干，将其分别放入 3 种含菌培养基中，将培养皿密
封好，放入 37 ℃培养箱中，24 h 后取出，测量抑菌环直径，分
别对三种菌种做 3 次平行实验，取平均值，计算抑菌率，结果
见表 1 与表 2。
抑菌率(%)=(样品抑菌环直径 －对照品抑菌环直径 /
样品抑菌环直径)× 100%
表 1 梣酮抑菌率结果
菌种种类
样品抑菌环
(mm)
对照溶液抑菌
(mm)
抑菌率
(%)
金黄色葡萄球菌 19． 2 7 64． 0
大肠杆菌 20． 1 6 70． 4
变形杆菌 16． 9 6 65． 7
表 2 β-谷甾醇抑菌率结果
菌种种类
样品抑菌环
(mm)
对照溶液抑菌
(mm)
抑菌率
(%)
金黄色葡萄球菌 7． 6 7 7． 9
大肠杆菌 6． 3 6 4． 8
变形杆菌 6． 4 6 6． 3
讨论 梣酮和 β-谷甾醇是药用白鲜皮中含量多的主要
成分，根据白鲜皮燥湿的特点，故对其进行了抑菌方面的实验
测定，证明梣酮对三种菌群均有一定的抑制作用，在提取工艺
中，根据梣酮和 β-谷甾醇的溶解特点，以非极性溶剂石油醚
对梣酮进行多次润洗纯化，之后溶于二氯甲烷中，降低温度进
行重结晶，从而得到纯化的梣酮和 β-谷甾醇，并通过了核磁
方法的验证。
参 考 文 献
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(收稿日期:2013-02-12)
·458· 齐齐哈尔医学院学报 2013 年第 34 卷第 6 期 Journal of Qiqihar University of Medicine，2013，Vol． 34，No． 6