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藏药砂生槐化学成分分析



全 文 :砂生槐 (Sophora moozeroftiana)为豆科槐属植物(用药部位)[1],藏药名为“蓟瓦”,主要分布于西藏拉
萨、林芝、山南、日喀则等地,生长在海拔2800 ∼ 4400m的山坡灌丛中、河漫滩砂质地、石质干山坡上。砂
生槐为藏族民间常用药,具有清热利湿、驱风杀虫的作用,可用于治疗肠炎、痢疾、湿热黄疸、痛肿疮毒与
皮肤疥癣等症。
目前,对砂生槐的研究主要集中在其药用价值及其商业开发等方面,已有文献报道砂生槐中主要成
分为苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱[2-4]等。为了解其药理功效的物质基础,本文主要分析了砂生槐种子的化
学成分,从中分离得到13种化合物,根据理化性质和波谱数据鉴定了化合物的结构。
1仪器与材料
Bruker AVANCE II-600型核磁共振仪;Thermo Fisher型质谱仪(Finnigan LCQ Deca XP MAX);薄层层
析硅胶(烟台芝罘黄务硅胶开发有限公司);Sephadex LH-20(Pharmacia公司);反向硅胶C18填料(日本进
口,北京绿百草科技发展有限公司);硅胶薄层板(上海上邦实业有限公司);WFH-203型三用紫外分析仪
藏药砂生槐化学成分分析
袁瑞瑛 崔超英 徐福春
(西藏大学医学院 西藏拉萨 850000)
摘要 为分析西藏豆科槐属植物砂生槐(Sophora moorcroftiana)的化学成分,采用硅胶柱层析、SephadexLH-
20凝胶柱层析和制备薄层层析,通过理化性质和波谱分析鉴定化合物结构。从砂生槐中分离得到了13
种化合物,分别鉴定为:①十八碳二烯酸,②7-甲氧基-3’,4’-二羟基黄酮,③芥子醛,④2-甲基庚基苯甲
酯,⑤苦参碱,⑥L-高丽槐素,⑦十八碳二烯酸三甘油脂,⑧羽扇醇,⑨β-谷甾醇,⑩3-甲氧基-4-羟基苯
乙酮,⑪槐果碱,⑫氧化槐果碱,⑬氧化苦参碱,其中前10种物质为砂生槐种子中首次被鉴定到的化学成
分。
关键词 砂生槐;化学成分;分离鉴定
DOI:10.16249/j.cnki.54-1034/c.2016.02.011
中图分类号 R284.1 文献标识码 A 文章编号 1005-5738(2016)02-073-005
收稿日期:2016-07-15
第一作者简介:袁瑞瑛,女,汉族,四川绵阳人,西藏大学医学院讲师,主要研究方向为天然药物化学。
(上海禾汽化工科技有限公司);所有试剂均为国产分析纯;实验用砂生槐种子于2009年采自西藏日喀则、
山南等地,并由西藏大学医学院王聚乐教授鉴定为豆科槐属植物砂生槐(Sophora moozeroftiana)的种子,标
本保存于西藏大学医学院药学系。
2提取与分离
取砂生槐干燥种子粗粉25kg,用6倍量的95%乙醇溶液加热提取,反复提取三次,合并滤液,减压蒸
馏除去乙醇得到20L提取浓缩液。乙醇提取浓缩液先用15L的石油醚萃取三次,每次5L,分出石油醚层,
减压浓缩得到石油醚部位3L,再用30L乙酸乙酯萃取三次,每次10L,分出乙酸乙酯层,减压浓缩至0.5L,
为乙酸乙酯部位。剩余液用正丁醇15L,萃取三次,减压浓缩得到正丁醇部位。正丁醇部位浓缩液过大孔
吸附树脂,用蒸馏水和95%乙醇依次洗脱,分别合并浓缩洗脱液,得到乙醇部位2L和水洗部位0.5L。石油
醚部位进行硅胶(200-300目,8×120cm)柱层析,用50:1的石油醚和丙酮,洗脱得到化合物1;流分分别进行
硅胶(200-300目)柱层析,以石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(50:1-40:1-30:1-20:1-5:1-2:1-1:1)与二氯甲
烷-甲醇混合溶剂(20:1-10:1-5:1-2:1-1:1)梯度洗脱,再经Sephadex LH-20凝胶柱层析,氯仿-甲醇(1:1)
和纯甲醇洗脱,制备薄层层析跟踪,从中分离得到化合物④⑦⑧⑨;TLC显示乙酸乙酯部位和乙醇部位点
成分基本相似,合并。合并后进行硅胶(200-300目,8×120cm)柱层析,用20:1的二氯甲烷-甲醇,洗脱得到
化合物②③⑥⑩。用与石油醚部位一样的处理方法对其余部分进行处理,从中分离得到化合物⑤⑪⑫
⑬。其中化合物⑤⑥⑪⑫⑬分别为已知的苦参碱、L-高丽槐素(L-山槐素)、槐果碱、氧化槐果碱、氧化苦
参等碱化合物。
3结构鉴定
根据砂生槐种子的提取分离结果,得到13种化合物,其中已知的有苦参碱⑤、L-高丽槐素(L-山槐素
⑥、槐果碱⑪、氧化槐果碱⑫、氧化苦参碱⑬,其它鉴定出的8种化合物如下(分子式和结构式见表1)。
化合物1:淡黄色油状,经核磁共振确定其分子量为280。1H-NMR(CDCl3,400MHz) δ5.35(4H,m,H-9,
H-10,H-12,H-13),2.76(2H,t,J=7Hz,H-11),2.34(2H,br.s,H-2),2.07(4H,m,H-8,H-13),0.89(3H,t,J=
6Hz,H-18);13C-NMR(CDCl3,100MHz) δ180.0(C-1),34.0(C-2),24.75(C-3),29.33(C-4),29.58(C-5),31.90
(C-6),29.68(C-7),27.18(C-8),127.87(C-9),130.21(C-10),25.6(C-11),130.01(C-12),128.03(C-13),27.18(C-
14),29.58(C-15),31.92(C-16),22.57(C-17),14.07(C-18),对照文献波谱数据[5],确定化合物1为十八碳二烯
酸(linolic acid),也称亚油酸。
化合物2:浅黄色粉末,经核磁共振确定其分子量为284。1H-NMR(CDCl3,400MHz) δ6.66(1H,s,H-3),
7.96(1H,d,J=8Hz,H-5),6.94(1H,dd,J=2,8Hz,H-6),6.96(1H,d,J=2Hz,H-8),7.41(1H,dd,J=2Hz,H-2’),
7.07(1H,d,J=8Hz,H-5’),7.50(1H,dd,J=2,8Hz,H-6’),3.94(3H,s,OCH3);13C-NMR(CDCl3,100MHz) δ
165.57 (C-2),106.20 (C-3),180.74(C-4),128.26(C-5),114.38(C-6),166.16(C-7),103.98(C-8),160.18(C-9),
117.68(C-10),125.80(C-1’),113.15(C-2’),148.72(C-3’),152.98(C-4’),116.89(C-5’),120.42(C-6’),56.96
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化合物
1
2
3
4
7
8
9
10
分子式
C18H32O2
C16H12O5
C11H12O4
C15H22O3
C57H98O6
C30H50O
C29H50O
C9H10O3
结构式
表1化合物的分子式和结构式(①②③④⑦⑧⑨⑩)
袁瑞瑛,崔超英,徐福春:藏药砂生槐化学成分分析 ·· 75
(OCH3),对照文献波谱数据[6],确定化合物2为7-甲氧基-3’,4’-二羟基黄酮。
化合物3:黄色针晶(何种溶剂中形成黄色针晶),经核磁共振确定其分子量为208。1H-NMR(CDCl3,
400MHz) δ7.00(2H,s,H-2,H-6),7.59(1H,d,J=16Hz,H-7),6.70(1H,dd,J=8,16Hz,H-8),9.58(1H,d,J=
8Hz,H-9),3.96(6H,s,OCH3);13C-NMR(CDCl3,100MHz) δ127.0(C-1),108.03(C-2),147.0(C-3),138.0(C-4),
147.0(C-5),108.03(C-6),157(C-7),125(C-8),193(C-9),57.35(OCH3),对照文献波谱数据[7],确定化合物 3
为芥子醛(sinapaldehyde)。
化合物4:淡黄色油状,经核磁共振确定其分子量为234。1H-NMR(CDCl3,400MHz) δ4.16(2H,t,J=6Hz
H-1),0.85、0.87(each3H,7-CH3,8-CH3),7.70、7.50(5H,H-苯环);13C-NMR(CDCl3,100MHz) δ67.55(C-1),
38.40(C-2),30.03(C-3),23.41(C-4),28.72(C-5),22.36(C-6),10.58(C-7),13.68(C-8),132.14(C-1’),130.48
(C-2’),128.40(C-3’),130.48(C-4’),128.40(C-5’),130.48(C-6’),167.19(C-7’),对照文献波谱数据[8],确定
化合物4为2-甲基庚基苯甲酯。
化合物7:淡黄色油状,确定其分子量为879。 1H-NMR(CDCl3,400MHz) δ5.35(4H,m,H-9,H-10,H-12,
H-13),2.76(2H,t,J=7Hz,H-11),2.34(2H,br.s,H-2),2.07(4H,m,H-8,H-13),0.89(3H,t,J=6Hz,H-18);
13C-NMR(CDCl3,100MHz) δ180.0(C-1),34.0(C-2),24.75(C-3),29.33(C-4),29.58(C-5),31.90(C-6),29.68(C-
7),27.18(C-8),127.87(C-9),130.21(C-10),25.6(C-11),130.01(C-12),128.03(C-13),27.18(C-14),29.58(C-
15),31.92(C-16),22.57(C-17),14.07(C-18),对照文献波谱数据[9],确定化合物7为十八碳二烯酸甘油脂(tri⁃
linoleine),也称三亚麻酯。
化合物 8:白色粉末,10%硫酸-乙醇显紫红色,10%磷钼酸显蓝色,确定其分子量为 426。1H-NMR
(CDCl3,400MHz) δ4.56,4.70(2H,H-29),3.20(1H,H-3),0.76、0.78、0.83、0.95、1.00、1.04、1.69(each3H,7×
CH3);13C-NMR(CDCl3,100MHz) δ38.66(C-1),27.19(C-2),78.99(C-3),38.84(C-4),55.25(C-5),18.3(C-6),
34.23(C-7),40.8(C-8),50.39(C-9),37.12(C-10),20.89(C-11),25.09(C-12),38.0(C-13),42.79(C-14),27.41
(C-15),35.55(C-16),42.98(C-17),48.22(C-18),47.96(C-19),150.99(C-20),29.7(C-21),39.97C-22),27.96
(C-23),15.36(C-24),16.11(C-25),15.94(C-26),14.52(C-27),17.98(C-28),109.31(C-29),19.28(C-30),对照
文献波谱数据[10],确定化合物8为羽扇豆醇(Lupeol)。
化合物9:无色针晶(结晶溶剂),10%硫酸-乙醇显紫红色,10%磷钼酸显蓝色,初步推断为甾体或萜类
的化合物。7:1的石油醚和丙酮=薄层展开的Rf值为 0.66。与B-谷甾醇标准品进行薄层对照分析,用 3
个不同的展开系统检验,混合点不分离,与标准品混合测熔点,熔点不下降,确定化合物9为β-谷甾醇(β-
sitosterol)。
化合物10:白色结晶粉末,确定其分子量为166。1H-NMR(CDCl3,400MHz) δ6.06(1H,br.s,H-2),7.55
(1H,m,H-6),6.96(1H,d,J=8Hz,H-5),3.96(3H,s,OCH3),2.56(3H,s,H-8);13C-NMR(CDCl3,100MHz) δ
130.0(C-1),109.63(C-2),143(C-3),145(C-4),113.71(C-5),124.02(C-6),197(C-7),26.23(C-8),56.02(OCH3),
对照文献波谱数据[11],确定化合物10为3-甲氧基-4-羟基苯乙酮(Acetovanillone),又称香草酮。
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4结论
对砂生槐种子的化学成分进行了系统分离和分析,一共分离得到化合物13种,其中未见报道的有8
种,分别是①十八碳二烯酸、②7-甲氧基-3’,4’-二羟基黄酮、③芥子醛、④2-甲基庚基苯甲酯、⑦十八碳
二烯酸三甘油脂、⑧羽扇醇、⑨β-谷甾醇、⑩3-甲氧基-4-羟基苯乙酮。在实验过程中有一些样品因为纯
度不高或量不足未能得到鉴定,在后续的研究中还需要提高分离能力。
砂生槐不仅是一种生态植物,还具有多种营养和药用化学成分。据文献报道,砂生槐的有效成分为
生物碱,已发现的生物碱有苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱、槐定碱和金雀花碱等6种[12]。从本
次试验分离得到的结果来看,砂生槐中除了含有生物碱外,还有黄酮类化合物、酯类化合物、甾体类化合
物、脂肪酸和脂肪酸酯等。因此,下一步的工作主要有两方面:一是继续对砂生槐成分进行系统分离与鉴
定以获取更加充足的样品,全面地阐明砂生槐的成分;二是对砂生槐成分中其他类型的化合物进行药理
活性测试,以此来发现具有良好活性的先导化合物。
参考文献
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Study on chemical constituents of Sophora moorcroftiana
Yuan Rui-ying Cui Chao-ying Xu Fu-chun
(Medical college of Tibet University, Lhasa 850000, Tibet)
Abstract: The chemical constituents of Sophora moorcroftiana was analyzed by using Silica gel column chroma⁃
tography and the structure of chemical constituents were identified by the physical and chemical properties, and
spectral analysis. 13 compounds were isolated and identified such as ①linoleic acid, ②3,4-dihydroxy-7-me⁃
thoxyflavone, ③sinapaldehyde, ④ 2-methyl benzene methyl, ⑤ Matrine, ⑥ L-maackiain, ⑦ trilinoleine, ⑧Lu⁃
peol, ⑨ β-sitosterol, ⑩ Acetovanillone, ⑪ Sophocarpine, ⑫ Oxysophocarpine and ⑬ Oxymatrine. The first 10
compounds were first time identified chemical constituents in the seeds of Sophora moorcroftiana.
Keywords: Sophora moorcroftiana; chemical constituent; isolation andidentification
[责任编辑:索郎桑姆]
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