全 文 ：籽收油率的影响不大 , 但对油中的化学组成 ,特别对
占近 95 % 的亚油酸和棕桐酸的含量影响较大 , 较佳
压力的确定 ,要视具体目的而定 。 对于只考虑收油
率 , 则 18 M aP 是较佳的萃取压力 。 如果要考虑油 中
某 一脂肪酸的含量 ,则收油率又高 、该成分含量又大
的压力为较佳萃取压力 。
3
.
2 在 30 ~ 5 ℃的萃取温度 范围 内 , 温度对棉籽
收油率的影响是随着温度的升高而升高 ,而且对油
中的化学组成影响也较大 。 对于较佳萃取温度的确
定 ,和上 面压力 的叙述相似 , 如 只考虑 收油率 , 则
5 ℃为较佳萃取温度 。
’ 中山大学
参 考 文 献
1 葛发欢 ,等 . 超临界 Cq 流体萃取技术在天然产物提取
及药物分析中的最新研究进展和前景 . 中药材 , 19 5 , 18
( 6 )
:
3 16
2 葛发欢 ,等 . 中药现代化与超临界 C仇 萃取技术的应
用 . 天然产物研究与 开发 , 2X( X) , 12 ( 3 ) : 8
( 2田 l 一 10 一 0 8 收稿 )
药理
火棘提取物对血液凝固的影响
华中科技大学生命科学院生物技术所 (武汉 43 X() 74 ) 梅兴国 万国晖 周忠强 常俊丽
郧阳医学院 (十堰 料2 (XX) ) 吴红菱
摘要 本实验对火棘浸膏和火棘浸膏的不同极性段进行了小鼠玻片法测凝血时间 、体外血浆复钙时间和凝血
酶原时间的研究 ,结果表明火棘浸膏灌胃给药可显著缩短小鼠的玻片凝血时间 ( P < 0 . 05 ) , 体外给药可 明显缩短血
浆复钙时间 ( P < 0 . 01 )和血浆凝血酶原时间 ( P < 0 . 01 , P < 0 . 05 ) ;而火棘浸膏的不同极性段 中 , 氯仿相灌胃给药后缩
短小鼠的玻片凝血时间 ( P < 0 . 01 )及体外给药缩短血浆复钙时间 ( P < 0 . 01 )和血浆凝血酶原时间 ( P < 0 . 01 )作用最
为显著 ,其次是乙酸受醋相 ( P < “ ” ` , ” < “ · 05 ) , 而石油醚相 ( ” > ” · 05 )无此作用 , 由此可筛选出火棘凝血活性部位
在氯仿和 乙酸 乙醋相 ,石油醚相无凝血活性 。
关键词 火棘提取物 凝血时间 复钙时间 凝血酶原时间
火棘 (乃 尸砚 a瓜ha fo 材~ an ( M ax im
.
) u
.
)是 蔷
薇科火棘属植物火棘的果实 , 又名将军粮 、 救军粮 、
红子 、 赤阳子等 ,广泛分布于我国湖南 、 湖北 、 陕西及
西南诸省 ,许多中药典籍〔’ 〕中均有记载 。 火棘能活
血止血 、健 胃消积 、 治痞块 (主要治肝脾肿大 、血瘤肿
块 )等 , 特别是其收敛止血的作用在一些民间偏方秘
方图中皆有收录 。 火棘在我 国传统医药 中历来人
药 , 临床应用十分广泛 ,但其药理活性和有效成分的
研究至今未有报道 。 本文首次研究了火棘酒精浸膏
的凝血活性 ,并对其不 同极性段进行 了凝血活性部
位的筛选 。
, 实验材料
1
.
1 动物 昆明种小鼠 , 体重 20 士 2 9 , 雌雄各半 ,
由华中科技大学同济医学院动物房和武汉市卫生防
疫站实 验动物 中心提供 ; 家兔 , 雌性 , 体重 2 一 2 . 5
k g
, 由武汉市洪山区实验动物协会提供 。
1
.
2 药品及试剂 火棘采自湖北十堰火棘产区 ,
经中科院武汉植物所王映明教授鉴定为 巧似 a瓜ha
为rt ~ a an ( M ax im
.
) iL
, 的果实 。 火棘浸 膏 : 火棘用
95 % 工业酒精浸泡 3 天 , 连续提取 3 次 ,合并后浓缩
,
8 74
`
为 卜 1 . 5 ( 1 9提取物含 1 . 5 ` g 生药 ) , 临用前用 0 . 5%
梭甲基纤维素钠 ( CM C一N a) 配成所需浓度的悬浊液
供药用 。 火棘酒精浸膏不同极性段 : 将上述火棘浸
膏充分溶于水 ,然后依次用石油醚 、 氯仿 、 乙酸乙醋
萃取 , 浓缩后分别得到火棘晕膏不同极性段 ,临用前
用 0 . 5% C M C一 N a 配成所需浓度的悬浊液供药用 ,浓
度为 卜 1 . 5 ( 1 9提取物含 l落 g 生药 ) 。 三七购 自武
汉市药材公司 , 临用前用 0 . 5% 竣甲基纤维素 ( CM)C
配成浓度为 0 . 巧 岁而 悬浊液 。 冻干含钙凝血活酶
试剂 (钾 ) ; 上海荣 盛生物技 术有 限公司武汉分公
司 ,批号 : 2田 1 10 。
2 方法与结果
2
.
1 火棘浸膏对血液凝固的影响
2
.
1
.
1 火棘浸膏对小鼠凝血时间的影响以 4〕(玻片
法 ) : 取小 鼠 40 只 , 体重 18 一 2 9 , 雌雄各半 ,按性
别 、 体重随机分为 4 组 : 空白对照组 (O , 5 % CMC , 0 . 3
耐 l/ 0 9 ) ;三七组 (0 . 4 耐 10 9 ) , 火棘提取物高 、中剂量组 (0 . 5 In l / 10 9 , 0 . 25 In l/ 10 9 ) , 灌胃给药 , 每日一
次 ,连续三天 , 于末次给药 l h 后 , 将其置于固定器
中 , 按文献方法采血并记录玻片法测得的凝血时间。
中药材第 24 卷第 12 期 2X() 1年 12 月
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 2001. 12. 014
实验数据以均数 士 标准差 ( x士 S )表示 , 以 t 检
验作统计学处理 。 结 果表 _明 , 与对照组相 比 , 三七
( 0
.
4 11 11/ 10 9 )
、 火棘提取物 ( 0 . 5 , 0 . 25 而 / 10 9 )均能
明显缩短小 鼠玻片法凝血时间 。 结果见表 1。
1知b le , E fl 烈 Of Huoj i xet n沈 t佣 山 e c斑卿阳 ti佣 tin此
by “ eI ht do of gl as
s加 e . ( x 土 s , n = 10 )
组别 剂量 ( 1111/ 1 0 9 ) 凝血时间 ( s)
空白对照组 208 . 2 土 50 . 3
三七组 0 . 4 138 . 9 士 4 1 . 0
火棘浸膏低剂量组 0 . 25 141 . 3 士 29 . 9 ’
火棘浸膏高剂量组 0 . 50 128 . 6 士 21 . 7 `
与空自组对照比较 , 苦 P < 0 . 05
2
.
1
.
2 火棘浸膏体外给药对血浆复钙时间 ( eR c al -
e in e at ion t im )的影响〔, 、 4〕 : 取体重 2 一 2 . 5 kg 的雌性家
兔 ,从家兔耳缘静脉采血 (血液与 3 . 8%拘椽酸钠之
比为 :9 1) 经 l《x x〕 n n p 离心 or 而 n ,上清液即为家兔
血浆不 , 按文献方法 ,测量记录血浆复钙时间 。 空白
对照组用生理盐水 , 阳性对照组用三七药液 。
实验数据 同 2 . 1 . 1 处理 。 结果表明 , 与对照组
相 比 : 火棘提取物 ( 20 , 10 I n g/ 而 )及三七药液均能
明显缩短血浆复钙时间 ( P < 0 . 05 ) 。 结果见表 o2
2
.
1
.
3 火棘 浸膏体外给药对血浆凝血酶原 时间
( p or tl
l or mb in it me
, 界 ) 影响陈4 〕 : 血浆制备与复钙时
间除离心速率 改为 3(x x ) 甲 n l 外 , 其他操作相 同 ,取
血浆与稀释的药液各 0 . 1 而 ; , 37 ℃水浴培养 3 m in ,
加入含钙凝血活酶液 (每支含钙凝血活酶浆干粉 ,加
人蒸馏水 2 . 2 而 ) 0 . 2 时 , 记录血浆凝固时间 。 空白
对照用生理盐水 , 阳性对照物用三七药液 。
实验数据同上处理 。 结果表明 ,与对照组相比 ,
火棘提取物 ( 20 , 10 i n g/ 妞 )及三七 药液均能 明显
缩短 件 ( P < 0 . 0 1 , P < 0 . 0 5 ) 。 结果见表 2 。
加b le Z E饰陀 t of H u oj i e Xt ar c st of r eC al c析aC灯佣
廿“ 沈 田记 件 in v动叩 ( x 士 s , n = 6)
组别 剂量 复钙时间 ( s ) 凝血酶原时间 ( s )
空白对照组 137 2 土 6 . 3 1.6 0 士 2 . 5
三七组 124 . 8 士 3 . 3 ’ 务 12 . 8 土 1 . 8 价
火棘浸膏低剂量组 1X() 1 17 2 士 1 . 3 ” 1 1 . 0 士 1 . 6 苦 `
火棘浸膏高剂量组 2X() 127 . 2 士 .2 0 ` ’ 13 . 4 士 1 . 7 甘
与空白组对照 比较 : ` P < 0 . 05 , ” P < 0 . 0 1
2
.
2 火棘浸膏的不 同极性段对血液凝固的影响
2
.
2
.
1 火棘浸膏的不 同极性段对小鼠凝血时间的
影响陈 4 〕(玻片法 ) : 取小 鼠 64 只 ,体重 18 一 2 9 , 雌
雄各半 , 按性别 、 体重随机分 为 8 组 : 空 白对照 组
( 0
.
5% CM e
一
N a
,
o
.
3 ml / 10 9 ) ;三七组 ( 0 . 4 m l / 10 9 ) ;
石油醚相高 、 中剂量组 ( 0 . 4 iln 月0 9 , 0 . 2 时 l/ 0 9 ) ;氯
仿相高 、 中剂量组 (0 . 4 n l l / 10 9 , 0 . 2 而八0 9 ) ; 乙酸乙
中药材第 24 卷第 12 期 2X() 1年 12 ’月
醋相高 、 中剂量组 ( 0 . 4 耐 l/ 0 9 , o . Z iln / 10 9 ) ,分别灌
胃相应药物 。 实验与数据处理方法 同 2 . 1 . 1 , 结果
见表 3 , 与对照组相 比 , 三七组 、 火棘 浸膏的氯仿相
各剂量组 、 乙酸乙醋相各剂量组均能明显缩短小 鼠
玻片法凝血时间 ,而石油醚相各剂量组无此作用 。
T a b le 3 F币戈t 健 het 山 feI 比 n t州 ar 介鱿山脂 or
H妇讨1 e xt 门以 佣 U能 份吻山廿佣 山拙 勿
“ 能也闭 ` 日翻 目刘比《又土 s , n 二 8)
组别 剂量 ( n刃 10 9 ) 凝血时间 ( s)
空白对照组 79 .4 士 7 . 6
三七组 0 . 4 7 1 . 3 土 6 . 2 号
石油醚相高剂量组 .0 4 84 . 0 土 12 . 8 #
石油醚相低剂量组 0 . 2 79 . 3 土 巧 . #6
氯仿相高剂量组 .0 4 57 . 6 士 .6 9 ”
氯仿相低剂量组 0 . 2 “ . 0 士 or . 7 “
乙酸乙酷相高剂量组 .0 4 59 . 8 士 7 . 6 ”
乙酸乙醋相低剂量组 0 . 2 68 . 3 士 8 . 1 ’
与空白组对照比较 , 份 P < .0 05 , ` 哥 P < 0 . 01
2
.
2
.
2 火棘浸膏不同极性段体外给药对血浆复钙
时间 ( R ec alc iifc at ion it me )的影响以 4〕 : 实验与数据处
理方法同 2 . 1 . 2 , 结果表 明 : 与对照组相 比 , 火棘浸
膏的氯仿 、 乙酸 乙醋相 ( 10 , 50 m g/ d )及三七药液
( 10
n lg/ 而 ) 均 能 明 显 缩 短 血 浆复 钙 时 间 ( P <
O
.
ol
.
P < 0
.
05 )
, 其中氯仿相效果大于 乙酸乙醋相 ,
石油醚相则不能缩短血浆复钙时间 。 结果见表 4 。
2
.
2
.
3 火棘浸膏不同极性段体外给药对血浆凝血
酶原时间 ( phort or n山ir n it me
,
PT )的影 响以 4〕: 实验与
数据处理方法 同 2 . 1 . 3 , 结果表 明 , 与对照组相 比 :
火棘浸膏的氯仿 , 乙酸乙醋相 ( 10 , 50 n州而 )及三
七药液均能 明显缩短 rP ( P < 0 . 01 , P < 0 . 05 ) ,石 油
醚相则不能缩短 rP 。 结果见表 o4
怕M e 4 E份比 t of 奴 山晚 n , t olp ar 介翻尤 . 陷 of
H呵 1 e xt n犯 t叨 n 兄日 d盯口位翔 山 .犯 . 日
PT in 访扛 , 《x 士 s , n = 6 )
组别 剂量n解耐 复钙
时间
(
,
)
凝血酶原时间
(
,
)
空 白对照组 137 . 2 土 6 3 15 . 0 士 1 . 4
三七组 124 . 8 土 3 . 3 ” 1 2 . 7 土 0 . 8 怪 长
石油醚相高剂量组 10 无限长 无限长
石油醚相低剂量组 50 无限长 无限长
氯仿相高剂量组 10 1加 . 5 土 6 . 9 铃 赞 12 . 3 土 1. 4 ”
氯仿相低剂量组 50 129 . 0 士 3 . 2 ’ 资 13 .0 土 0 .9 ’ 赞
乙酸乙醋相高剂量组 10 125 . 3 士 3 8 ” 12 . 5 土 1 . 4 , ’
乙酸乙醋相低剂量组 50 129 .2 士 3 . 9 ’ ` 13 . 2 士 1 . 1 ’
与空白组对照 比较 , ’ P < 0 . 05 , . 协 P < 0 . 01
3 讨论
血液凝固过程是血浆中许多凝血因子参与的化
·
875
.
学连锁反应 , 可分为内源性凝血系统和外源性凝血
系统 。 血浆复钙时间反映 的是 内源凝 血系统的功
能 ,血浆凝血酶原时间反映的是外源性凝血系统的
功能 。 由体内体外实验结果表明 , 火棘提取物对内 ,
外源性凝血系统均有明显的凝血作用 , 也证实了临
床上将其用于止血等疾病的合理性 。 火棘浸膏的凝
血活性部位的筛选对于分离提取其具有凝血活性的
有效成分具有重要意义 ,而体内体外实验结果表明 ,
火棘的凝血活性成分存在于火棘浸膏的氯仿 , 乙 酸
乙醋相中 ,而石油醚相不含凝血活性成分 ,但其是否
存在抗凝作用还有待进一步进行药理实验研究和证
明 。
参 考 文 献
, 江苏新医学院 . 中药大辞典 . 上海 : 上海人民 出版社 ,
197 7
: 2《刃7 , 1(刃6
2 傅景华 , 等 . 古代验方大全 . 北京 : 中医古籍出版社 ,
19男〕: 6 32
3 徐叔云 ,等 . 药理实验方法学 . 北京 : 人民卫生 出版社 ,
1982
:
834
一
839
4 陈奇 ,等 . 中药药理研究方法学 . 北京 : 人民卫生出版
社 , 19 3 : 480 一 487
( 2X() 1
一 伪 一 01 收稿 )
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w Ld l a l l 43 X() 74 )
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司 日山 ` in s咖 o n , 阴d al so s llo d e n het er e acl iif e iat on time a dn 四 t ll n l l山in t ime in l ,“ n , ( p < 0 . 0 2 , p < 0 .仍 ) , 咖 le in t ll ,℃ e 网 ar 加 c it osn
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e x坛朗 t , het 硫 e t s of het c hl o r 0 fo mr pl1aeS hat C oul d s ho ert n 山e c o a 邵 I}at io n t ime of gl as s s lids i n 而e e (p < 0 . 0 1 ) 砍 e r 耐 a山币in s atr -
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e al e讯 e at io n it me an d l〕or t l甘O ll d 〕in t ime in 谊or ( P < 0 . 0 1 ) aer moer not
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详加】e uln et he r Phase d脚 not .
心 y ” , n ls 乃 TaCI z瓜 j记厂对
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; R e c al
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e a t io n t ime
; P
r o t ih
、〕
imb
n t ime
·
癌宁诱导体外人胃腺癌细胞 S G C 一 7 901 凋亡及细胞周期分析
广东省珠海市国家中药现代化工程技术研究中心 (珠海 51 卯 20 ) 苏勉诚
四川大学公卫 学院 (成都 61 侧抖 l) 吕晓英
成都中医药大学 ( 61 X() 7 5 ) 李红冲 万 斌 刘继林
摘要 目的 : 探讨中药复方— 癌宁诱导人胃腺癌细胞凋亡的作用 。 方法 :采用 D N A电泳和流式细胞术 , 对中药复方— 癌宁诱导人胃腺癌细胞凋亡进行了研究 。 结果 :经癌宁处理后的人胃腺癌细胞出现 D入A 梯状图谱 , 流式细胞术检测其凋亡细胞百分数高达 43 . 5 % , 而对照组既无 DNA 梯状图谱 , 又无凋亡峰 。 细胞周期分析表明 , 经癌
宁处理后 ,细胞的增殖指数为 3 . 7 % ,无细胞周期特异性 。 结论 :癌宁在体外对人胃腺癌细胞具有诱导凋亡作用 。
关健词 中药复方 癌 宁 凋亡
肿瘤不仅是一种细胞增殖异常疾病 , 也是一种
细胞死亡异常疾病 。 oH vr it : 等 〔’ 〕指 出 ,组织 内部的
平衡主要是细胞增殖和死亡的平衡 , 过多的生长是
由于细胞 过少的死亡 以及过多 的增殖 的结 果 。 因
此 ,肿瘤可以被看作是一种较其正常组织增殖更快 、
死亡更少的组织 。 但迄今为止还没有证据表明癌细
胞是永生化的 。 在连续培养的肿瘤细胞中总可以找
到凋亡的细胞 ,只不过存活细胞的数量大 , 存活时间
长 , 超过了死亡的细胞而已 。 以往研究表明 , 化疗药
物虽然作用显著 , 但毒副作用很强 。 凋亡机制是抗
中药材第 24 卷第 12 期 2X() 1年 12 月