全 文 ：中国药房 2012年第23卷第43期 China Pharmacy 2012Vol.23No.43
生理产后会阴切开缝合术是产科常用手术，容易发生感
染而影响产妇身心健康，延长住院时间。产后贴湿巾是用于
会阴切开缝合术后加速伤口愈合、改善肿痛的新型制剂，由蒲
公英、血竭、乳香、红花等药组成。其中以蒲公英、血竭、乳香
为君，红花等诸药为臣，共奏活血散瘀、收敛生肌、消肿抗炎之
效。根据方中药材的不同性质，笔者以君药中蒲公英主要成分
咖啡酸和臣药中红花主要成分羟基红花黄色素A为指标成分，
用正交试验优选处方中蒲公英、红花、苦参、龙骨的水提取工艺。
1 仪器与试药
高效液相色谱（HPLC）仪，包括515双泵、2487紫外-可见
检测器、Rheodyne进样器（美国Waters公司）；AEL-40SM电光
分析天平（日本岛津公司）；KQ-500VDE 超声波清洗器（昆山
超声仪器有限公司）。
咖啡酸、羟基红花黄色素A对照品（中国食品药品检定研
究院，批号分别为110885-200102、111637-200905）；蒲公英（批
号：100316）、红花（批号：100316）、血竭（批号：100301）、乳香
（批号：100301）、苦参（批号：100301）、龙骨（批号：100301），均
购于安徽丰原铜陵中药饮片有限公司，经南京中医药大学生
药学教研室刘训红教授鉴定为真品；乙腈（色谱纯，德国
Merck公司）；甲醇（色谱纯，江苏汉邦科技有限公司）；水为娃
哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 咖啡酸的含量测定[1]
2.1.1 对照品贮备液的制备 精密称取咖啡酸对照品7.45
mg，置于50mL量瓶中，以甲醇溶解并定容，精密量取1mL，置
于2mL量瓶中，以甲醇定容，制成浓度为0.0745mg·mL－1的
咖啡酸对照品贮备液，即得。
2.1.2 色谱条件 色谱柱：Lichrospher C18（250mm×4.6mm，5
μm）；柱温：40℃；流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液（23∶77，V/V），其
中磷酸盐缓冲液的制备方法为磷酸二氢钠1.56g+1000mL
水，用磷酸调 pH 值为3.8～4.0；流速：1.0mL·min－1；灵敏度：
0.1AUFS；检测波长：323nm。
2.1.3 线性关系考察 将浓度为0.0745mg·mL－1的咖啡酸对
照品贮备液逐级稀释2、4、8、16、32、64倍，得系列浓度的对照
品溶液。以峰面积积分值（y）为纵坐标，咖啡酸检测浓度（x）为
横坐标，进行线性回归，得回归方程为 y＝2×108x+110260（r＝
0.999，n＝7）。结果表明，咖啡酸检测浓度在0.0012～0.0745
mg·mL－1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。
2.2 羟基红花黄色素A的含量测定[2]
2.2.1 对照品贮备液的制备 精密称定羟基红花黄色素A对
照品3.11mg，置于5mL量瓶中，以25％甲醇溶解并定容，精密
Δ 南京市医学科技发展项目（ZKX09011）
＊副主任药师。研究方向：中药制剂与调剂。电话：025-
83106666。E-mail：whb2005-8@163.com
# 通讯作者：副研究员。研究方向：中药药剂学。电话：025-
86798399。E-mail：linmeip@yahoo.com.cn
正交试验优选产后贴湿巾中蒲公英、红花、苦参、龙骨的提取工艺 Δ
徐小燕1＊，陈军霞2，卞 凌2，邱碧菡3，潘林梅3#（1.南京大学医学院附属鼓楼医院，南京 210008；2.南京市妇幼
保健院，南京 210029；3.南京中医药大学中药复方分离工程重点实验室，南京 210029）
中图分类号 R283；R284.2 文献标志码 A 文章编号 1001- 408（2012）43-4063-02
DOI 10.6039/j.issn.1001- 408.2012.43.12
摘 要 目的：优选产后贴湿巾中蒲公英、红花、苦参、龙骨的提取工艺。方法：以提取时间、加水量、浸泡时间为考察因素，以咖啡
酸转移率、羟基红花黄色素A转移率、固含率的综合评分为评价指标，采用正交试验优选工艺。结果：最佳工艺为药材浸泡1.0h
后提取2次，第1次以7倍量水提取1.0h，第2次以5倍量水提取0.5h。结论：所选工艺简便、易行、经济、实用，可用于产后贴湿巾
中蒲公英、红花、苦参、龙骨的提取。
关键词 产后贴湿巾；正交试验；提取工艺；咖啡酸；羟基红花黄色素A；固含率
Optimization of Extraction Technology of Taraxaci Herba、Carthamus tinctorius、Sophora flavescens、Os
Draconis of Postpartum-stuck Wet Wipes
XU Xiao-yan（Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School，Nanjing 210008，China）
CHEN Jun-xia，BIAN Ling（Nanjing Maternal and Child Health Care Hospital，Nanjing 210029，China）
QIU Bi-han，PAN Lin-mei（Key Laboratory of Separation Engineering of Traditional Chinese Medicine Com-
pound，Nanjing University of Traditional Chinese Medicine，Nanjing 210029，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To optimize the extraction technology of Taraxaci Herba、Carthamus tinctorius、Sophora flavescens、
Os Draconis of Postpartum-stuck wet wipes. METHODS：The extraction technology was optimized by orthogonal test with extrac-
tion time，amount of water，soaking time as factors using comprehensire score of transfer rate of caffeic acid and HSYA and solid
content as index. RESULTS：Optimized technology was as follows：soaking for 1.0h，extracting for twice，7-fold water，extracting
for 1.0h for the first time，5-fold water，extracting for 0.5h for the second time. CONCLUSION：The process is simple，easy and
economical，and it can be used for the extraction of Taraxaci Herba、Carthamus tinctorius、Sophora flavescens、Os Draconis of Post-
partum-stuck wet wipes.
KEY WORDS Postpartum-stuck wet wipes；Orthogonal test；Extraction technology；Caffeic acid；HSYA；Solid content
··4063
China Pharmacy 2012Vol.23No.43 中国药房 2012年第23卷第43期
移取1mL，置于5mL 量瓶中，以25％甲醇定容，制成浓度为
0.124mg·mL－1的羟基红花黄色素A对照品贮备液，即得。
2.2.2 色谱条件 色谱柱：Lichrospher C18（250mm×4.6mm，5
μm）；柱温：40℃；流动相：甲醇-乙腈-0.7％磷酸溶液（26∶2∶
72，V/V/V）；流速：1.0mL·min－1；检测波长：403nm。
2.2.3 线性关系考察 将浓度为0.124mg·mL－1的羟基红花
黄色素A对照品贮备液逐级稀释2、4、8、16、32、64倍，得系列
浓度的对照品溶液。以峰面积积分值（y）为纵坐标，羟基红花
黄色素A检测浓度（x）为横坐标，进行线性回归，得回归方程为
y＝5×108x+362716（r＝0.999，n＝7）。结果表明，羟基红花黄
色素A检测浓度在0.0019～0.124mg·mL－1范围内与峰面积
积分值呈良好线性关系。
2.3 水提工艺的优选
2.3.1 正交试验设计 根据药物成分、性质以及预试验结果，
样品浸泡一定时间后分2次提取。选取提取时间（A）、加水量
（B）、浸泡时间（C）为考察因素，每个因素选取3个水平，按正
交试验L9（3）4表进行试验。因素水平见表1。
表1 因素水平
Tab 1 Factors and levels
水平
1
2
3
因素
A/h
1.5（1.0+ 0.5）
2.0（1.5+ 0.5）
2.5（2.0+ 0.5）
B/倍
9（5+ 4）
12（7+ 5）
15（9+ 6）
C/h
0.5
1.0
1.5
2.3.2 样品提取 按处方比例称取蒲公英、红花、苦参、龙骨4
味药材，共9份，分别按表1中条件进行提取，合并提取液，滤
过，得1～9号样品，备用。
2.3.3 正交试验结果 取1～9号样品各适量，分别加4倍量
甲醇，充分混匀，过0.45μm 微孔滤膜，作为供试品溶液。按
“2.1”、“2.2”项下方法分别测定咖啡酸和羟基红花黄色素A含
量，并照下式分别计算咖啡酸和羟基红花黄色素A转移率：转
移率＝（供试品溶液中咖啡酸或羟基红花黄色素A含量/药材
溶液中咖啡酸或羟基红花黄色素A含量）×100％。精密量取
1～9号供试品溶液各50mL，置于9个已恒重的容器中，在水
浴锅上蒸干水分后，转移至105℃烘箱中干燥3h，至恒重后取
出称重，计算固含率。以咖啡酸、羟基红花黄色素A转移率和
固含率的综合评分（综合评分＝咖啡酸转移率×50％+羟基红
花黄色素A转移率×40％+固含率×10％）为评价指标，优选最
佳提取工艺。正交试验结果见表2；方差分析结果见表3。
由表2、表3可知，各因素对提取工艺的影响均不显著，从
极差水平来看，加水量的影响相对较高。因K1A＞K2A＞K3A，故
因素A选择水平1；K2B＞K3B＞K1B，故因素B选择水平2；而K3C
略＞K2A＞K1A，结合实际生产综合考虑，因素 C 选择水平2即
可。因此，最佳水提工艺为A1B2C2，即浸泡1.0h后分2次提取，
第1次以7倍量水提取1.0h，第2次以5倍量水提取0.5h。
2.4 工艺验证试验
按处方比例称取蒲公英、红花等药材，根据上述最佳工艺
提取药材，按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液，并测定咖啡
酸、羟基红花黄色素A转移率以及固含率，计算综合评分。结
果，综合评分与正交试验最高值相当，表明所选工艺合理、可
行。工艺验证试验结果见表4。
3 讨论
根据预试验结果，正交试验没有考察提取次数对提取效
果的影响，而选择生产常用的提取次数，即2次。这是考虑到
提取次数的增加会导致工业化生产上能耗的增加，不利于节
约生产成本，且提取2次指标成分的转移率已较高。
在考察指标的选择上，本试验以君药蒲公英中主要成分
咖啡酸与臣药红花中羟基红花黄色素A为指标成分。文献报
道蒲公英有广谱杀菌作用，被誉为外科常用要药[3]；红花能够
活血化瘀，加快微血流，改善微循环，在临床中广泛应用[4，5]，故
选择这2味药材中主要药效成分的转移率作为考察指标，具有
较好的代表性。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].2010
年版.北京：中国医药科技出版社，2010：141、311.
[2] 曹云台，施栋磊，潘林梅，等. 正交试验法优选复方白葛
胶囊的提取工艺[J].中国中医药信息杂志，2009，16（2）：
57.
[3] 宋晓勇，刘 强，杨 磊，等. 蒲公英多糖提取工艺及其
抗菌活性研究[J].中国药房，2010，21（47）：4453.
[4] 盛雨辰，夏玉叶.羟基红花黄色素A对局灶性脑缺血后大
鼠脑组织诱导型一氧化氮合酶的影响[J].中国药理学通
报，2006，22（9）：1134.
[5] 成 龙，梁日欣，杨 滨，等.红花提取物对高脂血症大鼠
降脂和抗氧化的实验研究[J].中国实验方剂学杂志，
2006，12（9）：25.
（收稿日期：2011-11-29修回日期：2012-03-26）
表2 正交试验结果
Tab 2 Results of orthogonal test
试验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
K1
K2
K3
R
因素
A
1
1
1
2
2
2
3
3
3
192.84
187.20
169.23
23.61
B
1
2
3
1
2
3
1
2
3
162.80
211.32
175.14
48.52
C
1
2
3
2
3
1
3
1
2
161.84
192.23
195.19
33.35
D（误差）
1
2
3
3
1
2
2
3
1
171.49
173.47
204.30
32.81
咖啡酸转
移率/％
54.66
90.50
82.82
85.59
90.78
43.22
54.81
72.42
47.66
羟基红花黄色
素 A 转移率/％
41.52
62.86
69.66
49.60
57.95
62.78
49.83
66.07
64.38
固含
率/％
26.3
31.4
34.6
31.2
34.1
27.4
31.4
31.7
33.6
综合
评分
46.57
73.53
72.73
65.76
71.98
49.46
50.48
65.81
52.94
表3 方差分析结果
Tab 3 Analysis of variance
方差来源
A
B
C
D（误差）
离差平方和
101.34
423.99
227.21
225.59
自由度
2
2
2
2
均方
50.67
211.99
113.60
112.79
F
0.45
1.88
1.01
P
＞0.05
＞0.05
＞0.05
注：F0.05（2，2）＝19.00
note：F0.05（2，2）＝19.00
表4 工艺验证试验结果
Tab 4 Results of validation test
试验号
1
2
3
咖啡酸转移率/％
90.09
88.12
89.74
羟基红花黄色素 A 转移率/％
64.38
65.25
64.86
固含率/％
31.0
30.5
32.0
综合评分
73.90
73.21
74.01
··4064