全 文 ：ｄｏｉ：１０．３９７１／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－８５７８．２０１２．０９．００３
收稿日期：２０１２－０２－２２；修回日期：２０１２－０６－０６
基金项目：国家自然科学基金资助项目（８１０７２８１６／
Ｈ２７０９）
作者单位：１．２０００３２上海，上海中医药大学附属龙华医
院乳腺科；２．上海交通大学医学院附属第九人民医院中医科
通信作者：陈红风，Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｈｆｌｕｋ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
作者简介：周瑞娟（１９８３－），女，博士，主要从事中医药防
治乳腺癌的研究
芒柄花素对不同亚型乳腺癌细胞增殖及细胞
周期的影响
周瑞娟１，陈红风１，叶媚娜１，廖明娟２
Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｏｎ　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｃｅｌ　Ｃｙｃｌｅ　ｏｆ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　Ｓｕｂｔｙｐｅｓ　ｏｆ　Ｂｒｅａｓｔ
Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｅｌ　Ｌｉｎｅｓ
Ｚｈｏｕ　Ｒｕｉｊｕａｎ１，Ｃｈｅｎ　Ｈｏｎｇｆｅｎｇ　１，Ｙｅ　Ｍｅｉｎａ１，Ｌｉａｏ　Ｍｉｎｇｊｕａｎ　２
１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｂｒｅａｓｔ　Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｌｏｎｇｈｕａ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２０００３２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｎｉｎｔｈ
Ｐｅｏｐｌｅ′ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　ｏｆ　Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｊｉａｏｔｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　Ａｕｔｈｏｒ：Ｃｈｅｎ　Ｈｏｎｇｆｅｎｇ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｈｆｌｕｋ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｏｎ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｓｕｂ－
ｔｙｐｅｓ　ｏｆ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ　ｌｉｎｅｓ：ＭＤＡ－ＭＢ－４６８，ＭＣＦ－７ａｎｄ　ＳＫ－ＢＲ－３．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｒｅｅ　ｓｕｂｔｙｐｅｓ　ｂｒｅａｓｔ
ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ　ｌｉｎｅｓ　ｗｅｒｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ．Ｔｈｅｎ　ｃｅｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ＰＣＮＡ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ｃｅｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ＭＴＴ　ａｓｓａｙ，Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ，ＴＵＮＥＬ　ｍｅｔｈｏｄ　ａｎｄ
ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｗｉｔｈ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｘｃｅｅｄｅｄ　２０μｍ　ｃｏｕｌｄ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ｃｅｌ　ｐｒｏｌｉｆ－
ｅｒａｔｉｏｎ，ｄｅｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＰＣＮＡ　ａｎｄ　ｉｎｄｕｃｅ　Ｇ１ｐｈａｓｅ　ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ　ａｒｒｅｓｔ　ｉｎ　ｔｈｒｅｅ　ｓｕｂｔｙｐｅｓ
ｏｆ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ　ｌｉｎｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ
ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｏｎ　ｏｆ　ＰＣＮＡ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ａｒｒｅｓｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ　ａｔ　Ｇ１ｐｈａｓｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ；Ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ；Ｃｅｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；Ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ；
摘　要：目的　研究芒柄花素对人乳腺癌细胞 ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＭＣＦ－７、ＳＫ－ＢＲ－３的增殖及细胞周期影响。
方法　以三种乳腺癌细胞为研究对象，经 ＭＴＴ法观察不同浓度芒柄花素对乳腺癌细胞的增殖抑制情
况；Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ法检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达情况；ＴＵＮＥＬ法检测细胞凋亡情况；流式细胞仪
观察细胞周期的改变情况。结果　芒柄花素用药浓度大于２０μＭ时，抑制３种乳腺癌细胞的增殖，降
低ＰＣＮＡ蛋白的表达，Ｇ１期细胞比例均明显增多。结论　芒柄花素可将细胞周期阻滞于 Ｇ１期、减少
ＰＣＮＡ蛋白的表达，从而抑制乳腺癌细胞增殖。
关键词：芒柄花素；乳腺癌；细胞增殖；细胞周期
中图分类号：Ｒ７３－３６；Ｒ７３７．９　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１０００－８５７８（２０１２）０９－１０５１－０５
0　引言
乳腺癌已成为全球女性发病率最高的恶性肿
瘤，现有的治疗方法主要包括手术治疗、化疗、放
疗、内分泌治疗、靶向治疗等，不同亚型乳腺癌的
诊治及预后亦存在差异［１］。芒柄花素（ｆｏｒｍｏｎｏｎｅ－
ｔｉｎ）是黄芪、鸡血藤等中药中含有的异黄酮类化合
物，具有抑制肿瘤细胞增殖的作用［２］，能够调控乳
腺癌细胞周期相关因子的表达引起细胞周期阻滞
的研究已有报道［３］。因此，本实验以不同分子亚
型人乳腺癌细胞 ＭＤＡ－ＭＢ－４６８（ＥＲ阴性、ＰＲ阴
性、ＨＥＲ２ 阴 性）、ＭＣＦ－７（ＥＲ 阳 性、ＰＲ 阳 性、
ＨＥＲ２阴 性）和 ＳＫ－ＢＲ－３（ＥＲ 阴 性、ＰＲ 阴 性、
ＨＥＲ２过表达）作为研究对象，观察芒柄花素对细
胞增殖的影响，分析其对不同亚型乳腺癌效应的
异同，并进一步观察芒柄花素对细胞凋亡及细胞
周期的影响，初探其作用机制。
1　材料与方法
１．１　细胞株
人乳腺癌细胞株 ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＭＣＦ－７、ＳＫ－
ＢＲ－３均购自中国科学院上海细胞库。
１．２　主要药物及试剂
化学成分标准品芒柄花素购自中国药品生物制
品检定所（批号：１１１７０３－２００６０２），细胞用药均以二甲
基亚砜（ｍｅｔｈｙｌ　ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ，ＤＭＳＯ）溶解。ＭｃＣｏｙ′ｓ　５Ａ、
·１５０１·肿瘤防治研究２０１２年第３９卷第９期
ＤＭＥＭ低糖及Ｌ－１５液体培养液、胎牛血清、胰酶、
ＰＢＳ（磷酸盐缓冲液）均为Ｇｉｂｃｏ公司产品；四甲基偶
氮唑蓝（ｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌｙｌ　ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ，ＭＴＴ）（ＣＡＳ＃：
２９８－９３－１）及ＤＭＳＯ（ＣＡＳ＃：６７－６８－５）购自上海生工生
物有限公司。原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（ｔｅｒ－
ｍｉｎａｌ　ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｉｔｉｄｙｌ　ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｎｉｃｋ－ｅｎｄ
ｌａｂｅｌｉｎｇ，ＴＵＮＥＬ）试剂盒为日本 ＭＢＬ公司产品
（ＣＡＳ＃：８４４５）；碘 化 丙 啶 （ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ　ｉｏｄｉｄｅ，ＰＩ）
（ＣＡＳ＃：２５５３５－１６－４）和ＲＮＡ酶（ＣＡＳ＃：９００１－９９－４）购
自Ｓｉｇｍａ公司；蛋白裂解液（０４７１９９５６００１）、蛋白酶抑
制剂（０４６９３１１６００１）购自ＲＯＣＨＥ公司；ＢＣＡ蛋白含
量测定试剂盒（２３２２５）购自ＰＩＥＲＣＥ公司；增殖细胞
核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｃｅｌ　ｎｕｃｌｅａｒ　ａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）单克
隆抗体（２５８６）购自ＣＳＴ公司。
１．３　ＭＴＴ法测定细胞存活率
选取对数生长期细胞，以每孔４　０００个的细胞
密度接种于９６孔板，培养４８ｈ后分别加入不同浓
度芒柄花素含药培养液，作用４８ｈ时，加入２０μｌ
ＭＴＴ溶液（５ｍｇ／ｍｌ），３７℃培养箱孵育４ｈ，吸去
废液，加入１５０μｌ　ＤＭＳＯ溶解细胞中的甲瓒，用酶
标仪在４９０ｎｍ波长处测定其吸光度值，计算细胞
存活率，观察芒柄花素对不同乳腺癌细胞增殖抑
制的现象。
１．４　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ法观察增殖细胞核抗原（ＰＣ－
ＮＡ）表达情况
分别选取对数生长期细胞，调整细胞密度为每毫
升２×１０４个，接种于２５ｍｌ培养瓶中，每瓶５ｍｌ，培养
４８ｈ后分为３组：空白对照组、芒柄花素４０μＭ组、芒
柄花素８０μＭ组。药物作用４８ｈ后，抽提细胞总蛋
白，采用ＢＣＡ试剂盒测定蛋白浓度，应用 Ｗｅｓｔｅｒｎ
ｂｌｏｔ技术检测增殖细胞核抗原ＰＣＮＡ蛋白表达情况。
１．５　ＴＵＮＥＬ法检测细胞凋亡情况
分别选取对数生长期细胞，调整细胞密度为每
毫升２×１０４个，在６孔板中进行细胞爬片，每孔
２ｍｌ，接种４８ｈ后分为３组：空白对照组、芒柄花素
４０μＭ组、芒柄花素８０μＭ 组。药物作用４８ｈ后，
进行ＴＵＮＥＬ染色，观察细胞凋亡情况。ＴＵＮＥＬ
法即原位末端转移酶标记技术，凋亡细胞的 ＤＮＡ
双链断裂或一条链出现缺口，产生一系列３′－ＯＨ末
端，在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（ＴｄＴ）作用下，将
脱氧核糖核苷酸和生物素所形成的衍生物标记到
ＤＮＡ的３′末端，从而进行凋亡细胞的检测。通过
与ＴＵＮＥＬ阳性对照组对比（实验中加入Ｄｎａｓｅ　１
室温孵育１５ｍｉｎ，ＰＢＳ清洗３次，加入ＴＵＮＥＬ　ｒｅ－
ａｃｔｉｏｎ　ｍｉｘｔｕｒｅ孵育，荧光显微镜观察可见细胞呈绿
色荧光染色并与ＤＡＰＩ染色重合，表明该 ＴＵＮＥＬ
试剂盒稳定可用）。
１．６　流式细胞仪检测细胞周期改变
细胞接种及分组用药同１．４。药物作用４８ｈ
后，胰酶消化收集细胞，ＰＢＳ洗２遍，以预冷７０％乙
醇固定２４ｈ，ＰＢＳ洗２遍，０．５ｍｌ　ＰＢＳ重悬细胞，并
加入ＰＩ和 ＲＮａｓｅＡ至终浓度５０μｇ／ｍｌ，３７℃ 孵育
３０ｍｉｎ，应用流式细胞技术检测细胞周期的变化。
１．７　统计学方法
采用ＳＰＳＳ　１６．０统计分析软件进行处理，计量
资料数据均以ｘ±ｓ表示。先对各组数值变量进行
正态性分析，不符合正态分布的数据采用非参数检
验。符合正态分布的数据，近一步检验方差齐性。
方差齐时两组间数据比较采用独立样本ｔ检验，多
组数据间的比较采用单因素方差分析ＬＳＤ－ｔ法检
验。方差不齐时，两组间数据比较采用非参数检验，
多组数据间的比较采用单因素方差分析Ｄｕｎｎｅｔｔ′ｓ
Ｔ３法检验。
2　结果
２．１　芒柄花素具有抑制乳腺癌细胞增殖作用
不同浓度芒柄花素干预４８ｈ后，经 ＭＴＴ法检
测结果显示：芒柄花素大于２０μＭ 时对三种乳腺癌
细胞生长均呈现出抑制作用。而且随浓度的增大，
其抑制效果明显增强，呈浓度依赖关系，见图１。
Ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｗｅｒｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｆｏｒ　４８ｈ．
Ｆｉｎａｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｗａｓ　ｓｈｏｗｎ．Ｃｅｌ　ｖｉａｂｉｌ－
ｉｔｙ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＭＴＴ　ａｓｓａｙ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎ－
ｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，＊：Ｐ＜０．０５；＊＊：Ｐ＜０．０１
图１　不同浓度的芒柄花素作用４８ｈ后三种乳腺癌细胞的
细胞活性情况
Ｆｉｇｕｒｅ　１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｆｏｒ　４８ｈｏｎ　ｃｅｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａ－
ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ　ｔｙｐｅｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｂｙ　ｄｉｆ－
ｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
２．２　芒柄花素可降低乳腺癌细胞ＰＣＮＡ的表达
芒柄花素作用４８ｈ时，三种乳腺癌细胞增殖
细胞核抗原ＰＣＮＡ蛋白表达均明显降低，其表达
量随着芒柄花素药物浓度的增高而降低，见图２。
２．３　芒柄花素无促进乳腺癌细胞凋亡作用
芒柄花素作用４８ｈ后，经ＴＵＮＥＬ法检测，发现
芒柄花素浓度为８０μＭ和４０μＭ时对三种乳腺癌细
·２５０１· 肿瘤防治研究２０１２年第３９卷第９期
胞均无明显的促凋亡作用。但ＤＡＰＩ染色显示，随着
浓度增加，同一倍数视野下的细胞数目逐渐减少，表
明芒柄花素具有抑制细胞增殖的作用，见图３。
２．４　芒柄花素具有诱导乳腺癌细胞Ｇ１期阻滞作用
不同浓度芒柄花素作用４８ｈ后，经流式细胞仪检
测结果显示：三种乳腺癌细胞Ｇ１期比例均明显增多；且
随着浓度的增高，Ｇ１期细胞比例也随之增加，见图４。
3　讨论
国内外许多学者观察到黄芪中含有多种抗肿瘤
成分［４－６］；能多方位调节免疫功能，进而发挥抗肿瘤
效应［７］；能降低血管内皮生长因子蛋白表达［８］，从而
抑制血管生成和肿瘤转移［９－１０］；对放化疗还有着增
效减毒及逆转耐药的作用［１１－１４］；并可延长乳腺癌患
者生存期、提高生存质量［１５］，从而起到抑制肿瘤生
长、提高生存率的目的。本研究的前期实验结果，也
表明黄芪注射液及主要成分能够减少Ａｋｔ的表达，
抑制乳腺癌细胞 ＭＤＡ－ＭＢ－４６８增殖［１７－１８］；但其有
效单体和可能的机制尚未明确，因此，本实验进一步
观察黄芪的主要单体之一—芒柄花素对三种不同亚
型乳腺癌细胞的作用。芒柄花素又名刺芒柄花素、
芒柄花黄素，作为黄芪中一种重要的化合物，其抗
肿瘤作用得到了广泛研究。文献报道芒柄花素具
有抑制结肠癌细胞的增殖和促进其凋亡的作
用［２］，亦有研究发现其具有芳烃受体抑制剂作用，
而芳烃受体的活性是调控细胞周期和细胞凋亡重
要因素，其ＥＣ５０（半数最大效应浓度）为１．３×１０－７
ｍｏｌ／Ｌ［１９］；另外，芒柄花素作为一种弱植物雌激素
对乳腺癌的防治表现为两方面的作用：（１）竞争雌
激素受体，拮抗雌激素作用［２０］；（２）促进 Ｔ细胞表
达ＩＬ－４，从而增强免疫反应［２１］。既往研究证实了
芒柄花素可通过多种途径起到抗肿瘤的作用，但
不同分子表型细胞是否存在不同效应，其作用的
机制如何尚待进一步研究。本研究发现，芒柄花
素对三种乳腺癌细胞 ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＭＣＦ－７和
ＳＫ－ＢＲ－３的存活率均具有抑制作用，并能够降低
乳腺癌细胞增殖核抗原（ＰＣＮＡ）蛋白的表达，对三
种不同亚型乳腺癌细胞效应相似，故进而从阻滞
细胞周期及诱导细胞凋亡两方面初步探讨其作用
机制。
细胞的增殖与其核抗原ＰＣＮＡ有着重要的关
系。研究表明，ＰＣＮＡ的表达与乳腺癌的恶性程度
和预后明显相关。ＰＣＮＡ是一种相对分子质量为
３６ｋＤ的蛋白质，在细胞核内合成，并存在于细胞核
内。ＰＣＮＡ可形成一个同源三聚体环围绕ＤＮＡ双
螺旋结构，并作为分子平台招募蛋白质用以合成
ＤＮＡ、细胞周期调控及 ＤＮＡ损伤与修复。ＰＣＮＡ
与细胞ＤＮＡ合成关系密切，在细胞增殖的启动上
起重要作用［２２］。在静止细胞中量很少，Ｇ１晚期开始
增加，Ｓ期达到高峰，Ｇ２、Ｍ 期明显下降，其量的变
化与 ＤＮＡ合成一致。检测ＰＣＮＡ在细胞中的表
达，是反映细胞增殖状态的良好指标［２３］。本实验结果
Ｄｏｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｏｎ　ＰＣＮＡ　ｗａｓ　ｅｘｓｉｔｅｄ　ａｔ　４０ａｎｄ　８０μＭ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，
＊：Ｐ＜０．０５；＊＊：Ｐ＜０．０１，ｎ＝３
图２　不同浓度芒柄花素作用４８ｈ后三种乳腺癌细胞的ＰＣＮＡ表达情况
Ｆｉｇｕｒｅ　２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｏｎ　ＰＣＮＡ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎ　ｔｈｒｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｔｙｐｅｓ
·３５０１·肿瘤防治研究２０１２年第３９卷第９期
Ａｆｔｅｒ　ｕｎｔｒｅａｔｅｄ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　４０μＭ　ａｎｄ　８０μＭ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｆｏｒ　４８ｈ，ｃｅｌｓ　ｗｅｒｅ　ｓｔａｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ＴＵＮＥＬ　ｆｏｌｏｗｅｄ　ｂｙ
ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ．Ａ：ａｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ；Ｂ：ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｃｅｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ｔｈｒｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｙｐｅｓ　ｂｒｅａｓｔ
ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ａｆｔｅｒ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　４０μＭ　ａｎｄ　８０μＭ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｆｏｒ　４８ｈ
图３　芒柄花素作用４８ｈ后三种细胞的ＴＵＮＥＬ染色情况
Ｆｉｇｕｒｅ　３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｏｎ　ｃｅｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ｔｈｒｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｔｙｐｅｓ
Ａ：ａｆｔｅｒ　ｕｎｔｒｅａｔｅｄ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　４０μＭ　ａｎｄ　８０μＭ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｆｏｒ　４８ｈ，ｃｅｌｓ　ｗｅｒｅ　ｓｔａｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ＰＩ　ｆｏｌｏｗｅｄ　ｂｙ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃ　ａ－
ｎａｌｙｓｉｓ；Ｂ：ｄｏｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｏｎ　ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ　ｗａｓ　ｓｈｏｗｎ
图４　芒柄花素作用４８ｈ后三种乳腺癌细胞的细胞周期改变情况
Ｆｉｇｕｒｅ　４　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｏｎ　ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ　ｉｎ　ｔｈｒｅｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｔｙｐｅｓ
·４５０１· 肿瘤防治研究２０１２年第３９卷第９期
显示，随着芒柄花素浓度的增加，三种乳腺癌细胞的
ＰＣＮＡ蛋白表达均随之减少，体现了细胞增殖能力
随之降低。细胞周期运行过程中有３个调控点
（ｃｈｅｃｋ　ｐｏｉｎｔ），及Ｇ１／Ｓ调控点、Ｇ／Ｍ调控点和纺锤
体组装调控点。其中以 Ｇ１／Ｓ调控点最为重要，细
胞一旦通过了此限制点，将会自主完成细胞周期而
不再依赖外源性增殖分裂信号的刺激［２４］。本研究
显示，芒柄花素作用于三种乳腺癌细胞后，Ｇ１期细
胞增加，Ｓ期细胞减少，表明芒柄花素主要是作用于
Ｇ１／Ｓ节点，能抑制乳腺癌细胞ＤＮＡ的合成，减少Ｓ
期细胞数量的比例，使细胞停滞于Ｇ１期，与已有的
报道相一致［３］。另外，以ＴＵＭＮＥＬ法检测，未发现
凋亡现象。由此我们推测，Ｇ１期阻滞可能是芒柄花
素导致细胞增殖抑制的原因。
参考文献：
［１］　Ｌｅｏｎｇ　ＡＳ，Ｚｈｕａｎｇ　Ｚ．Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｉｎｇ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｐａｔｈｏｌｏｇｙ　ｉｎ　ｂｒｅａｓｔ
ｃａｎｃｅｒ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｐａｔｈｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１１，７８（２）：
９９－１１４．
［２］　Ａｕｙｅｕｎｇ　ＫＫ，Ｋｏ　ＪＫ．Ｎｏｖｅｌ　ｈｅｒｂａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｐｒｏｍｏｔｅ　ａｐｏｐｔｏ－
ｓｉｓ　ｂｕｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｙ　ｉｎｄｕｃｅ　ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ　ａｒｒｅｓｔ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｃｏｌｏｎ
ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ ［Ｊ］．Ｉｎｖｅｓｔ　Ｎｅｗ　Ｄｒｕｇｓ，２０１１，２８（１）：１－１３．
［３］　Ｃｈｅｎ　Ｊ，Ｚｅｎｇ　Ｊ，Ｘｉｎ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ｉｎｄｕｃｅｓ　ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ　Ａｒｒｅｓｔ
ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｖｉａ　ＩＧＦ１／ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ　ｐａｔｈｗａｙｓ　Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ
ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｖｏ［Ｊ］．Ｈｏｒｍ　Ｍｅｔａｂ　Ｒｅｓ，２０１１，４３（１０）：６８１－６．
［４］　Ｎｉｕ　Ｙ，Ｚｈａｎｇ　ＹＦ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅｓ　ｏｎ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａ－
ｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ　ｌｉｎｅ　Ａ５４９［Ｊ］．
Ｍｕｄａｎｊｉａｎｇ　Ｙｉ　Ｘｕｅ　Ｙｕａｎ　Ｘｕｅ　Ｂａｏ，２００８，２９（３）：１６－８．［牛艳，
张羽飞．黄芪总苷对人肺腺癌 Ａ５４９细胞增殖及凋亡的影响
［Ｊ］．牡丹江医学院学报，２００８，２９（３）：１６－８．］
［５］　Ｚｈａｎｇ　ＸＬ，Ｂｏ　ＷＨ，Ｌｉ　ＬＹ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ
ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｎ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ
Ｘｉａｎ　Ｄａｉ　Ｙａｏ　Ｗｕ　Ｙｉｎｇ　Ｙｏｎｇ，２０１０，４（８）：２９－３１．［张喜林，孛文
虎，李路勇，等．黄芪总提取物抗肿瘤作用的实验研究［Ｊ］．中国
现代药物应用，２０１０，４（８）：２９－３１．］
［６］　Ｒｅｎ　ＭＰ，Ｌｉｕ　ＭＨ，Ｌｉ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ
Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ　Ｘｉｎ　Ｙａｏ　Ｚａ　Ｚｈｉ，２０１０，１９（３）：
２２１－４．［任美萍，刘明华，李蓉，等．黄芪多糖抗肿瘤活性研究
［Ｊ］．中国新药杂志，２０１０，１９（３）：２２１－４．］
［７］　Ｌｖ　ＳＨ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｎ　ａｎｔｉ－ｔｕｍｏｒ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　Ｐｏｌｙｓａｃ－
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［８］　Ｂａｉ　ＣＱ，Ｓｏｎｇ　ＹＦ，Ｗａｎｇ　ＤＴ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａ－
ｌｕｓ　ａｎｄ　Ｃｏｄｏｎｏｐｓｉｓ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｎ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｃｅｌ　ｍｉｇｒａｔｉｏｎ　ｉｎ－
ｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ［Ｊ］．Ｗｕ　Ｊｉｎｇ　Ｙｉ　Ｘｕｅ，２００８，１９（６）：
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２００８，１９（６）：５０５－８．］
［９］　Ｂａｉ　ＣＱ，Ｓｏｎｇ　ＹＦ，Ｗａｎｇ　ＤＴ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａ－
ｌｕｓ　ａｎｄ　Ｃｏｄｏｎｏｐｓｉｓ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｐａｃｉｌｉｔａｘｅｌ　ｏｎ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ
ａｎｄ　ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｏｎ　ｍｏｕｓｅ　Ｌｅｗｉｓ　ｌｕｎｇ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｍｏｄｅｌ［Ｊ］．Ｘｉ
Ｂａｏ　Ｙｕ　Ｆｅｎ　Ｚｉ　Ｍｉａｎ　Ｙｉ　Ｘｕｅ　Ｚａ　Ｚｈｉ，２００８，２４（４）：３７５－７．［柏长
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２００８，２４（４）：３７５－７．］
［１０］Ｌｉ　Ｑ，Ｌｉｕ　Ｓ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａｓｔｒａｇａｌｕｘ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｈｕｍａｎ　ｂｒｅａｓｔ
ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｕｏ　Ｚｈｏｎｇ　Ｙｉ　Ｙａｏ　Ｋｅ　Ｊｉ，２００７，１４（０２）：
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［１１］Ｈｕａｎｇ　ＨＳ，Ｈｕａｎｇ　ＷＴ，Ｗｅｉ　ＰＹ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａ－
ｌｕｓ　Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　Ｃｏｍｂｉｎｅｄ　Ｗｉｔｈ　５－Ｆｌｕｏｒｏｒｕａｃｉｌ　ｏｎ　Ｔｕｍｏｒ
Ｃｅｌｓ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ　Ｘｉａｎ　Ｄａｉ　Ｌｉｎ　Ｃｈｕａｎｇ　Ｙｉ　Ｘｕｅ，２００７，６（４）：
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［１２］Ｚｈａｎｇ　ＤＱ，Ｗａｎｇ　ＤＱ，Ｌｉ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｏｆ
ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｏｎ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｈｕ－
ｍａｎ　ｅｒｙｔｈｒｏｌｅｕｋｅｍｉａ　ｃｅｌ　ｌｉｎｅ　Ｋ５６２［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ　Ｙａｏ　Ｌｉ　Ｘｕｅ
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［１３］Ｐａｎｇ　ＹＰ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　Ｃｏｍｂｉｎｅｄ
ｗｉｔｈ　Ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　ｉｎ　Ｔｒｅａｔｉｎｇ　Ｍａｌｉｇｎａｎｔ
Ｔｕｍｏｒ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ　Ｄａｎｇ　Ｄａｉ　Ｙｉ　Ｙａｏ，２０１０，１７（２９）：４４－５．
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［１４］Ｄｏｎｇ　Ｊ，Ｌｖ　ＨＹ，Ｍａｏ　ＪＥ．Ｔｈｅ　Ｅｎｈａｎｃｉｎｇ　Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ａｎｄ　Ｒｅｄｕｃ－
ｉｎｇ　Ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｉｎ　Ｔｕｍｏｒ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ：Ａ　Ｍｅｔａ－
ａｎａｌｙｓｉｓ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇ　Ｙｉ　Ｙａｏ　Ｄａｏ　Ｂａｏ，２０１０，１６（３）：８７－９２．［董
菊，吕海燕，毛静娥．黄芪注射液在肿瘤化疗中增效减毒作用
的ｍｅｔａ分析［Ｊ］．中医药导报，２０１０，１６（３）：８７－９２．］
［１５］Ｌｕ　ＸＡ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｏｆ　ｌｉｆｅ　ｏｎ　ｂｒｅａｓｔ
ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ　Ｚｈｏｎｇ　Ｙｉ　Ｙａｏ　Ｘｉａｎ　Ｄａｉ　Ｙｕａｎ　Ｃｈｅｎｇ　Ｊｉａｏ　Ｙｕ，
２０１０（１１）：３６－７．［陆新岸．黄芪注射液对乳腺癌患者生活质量的
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［１６］Ｙｅ　ＭＮ，Ｃｈｅｎ　ＨＦ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａ－
ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂａｓａｌ－ｌｉｋｅ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ　ｌｉｎｅ　ＭＤＡ－ＭＢ－４６８ ［Ｊ］．
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红风．黄芪注射液对ｂａｓａｌ－ｌｉｋｅ型乳腺癌细胞 ＭＤＡ－ＭＢ－４６８增
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［１７］Ｄｅｎｇ　Ｙ，Ｃｈｅｎ　ＨＦ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｉｎｇｒｅｄｉ－
ｅｎｔｓ　ｏｎ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ａｋｔ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ
ｌｉｎｅｓ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇ　Ｘｉ　Ｙｉ　Ｊｉｅ　Ｈｅ　Ｘｕｅ　Ｂａｏ，２００９，７（１２）：１１７４－８０．［邓
樱，陈红风．黄芪注射液及其有效成分对乳腺癌细胞增殖和Ａｋｔ
磷酸化的影响［Ｊ］．中西医结合学报，２００９，７（１２）：１１７４－８０．］
［１８］Ｙｅ　ＭＮ，Ｃｈｅｎ　ＨＦ，Ｚｈｏｕ　ＲＪ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｐｏｌｙ－
ｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｏｎ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ａｋｔ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂａｓ－
ａｌ－ｌｉｋｅ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ　ｌｉｎｅ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇ　Ｘｉ　Ｙｉ　Ｊｉｅ　Ｈｅ　Ｘｕｅ　Ｂａｏ，
２０１１，９（１２）：１３３９－４５．［叶媚娜，陈红风，周瑞娟，等．黄芪多糖
对基底细胞样乳腺癌细胞增殖和Ａｋｔ磷酸化的影响［Ｊ］．中西
医结合学报，２０１１，９（１２）：１３３９－４５．］
［１９］Ｍｅｄｊａｋｏｖｉｃ　Ｓ，Ｊｕｎｇｂａｕｅｒ　Ａ．Ｒｅｄ　ｃｌｏｖｅｒ　ｉｓｏｆｌａｖｏｎｅｓ　ｂｉｏｃｈａｎｉｎ　Ａ　ａｎｄ
ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ　ａｒｅ　ｐｏｔｅｎｔ　ｌｉｇａｎｄｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ａｒｙｌ　ｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎ　ｒｅ－
ｃｅｐｔｏｒ［Ｊ］．Ｊ　Ｓｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｍｏｌ　Ｂｉｏｌ，２００８，１０８（１－２）：１７１－７．
［２０］Ｗｉｌａｒｄ　ＳＴ，Ｆｒａｗｌｅｙ　ＬＳ．Ｐｈｙｔｏｅｓｔｒｏｇｅｎｓ　ｈａｖｅ　ａｇｏｎｉｓｔｉｃ　ａｎｄ　ｃｏｍｂｉ－
ｎａｔｏｒｉａｌ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｅｓｔｒｏｇｅｎ－ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ＭＣＦ－７
ｈｕｍａｎ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ［Ｊ］．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ，１９９８，８（２）：１１７－２１．
［２１］Ｐａｒｋ　Ｊ，Ｋｉｍ　ＳＨ，Ｃｈｏ　Ｄ，ｅｔ　ａｌ．Ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ，ａｐｈｙｔｏ－ｏｅｓｔｒｏ－
ｇｅｎ，ａｎｄ　ｉｔｓ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ　ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅ　ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－４ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ
ａｃｔｉｖａｔｅｄ　Ｔ　ｃｅｌｓ　ｖｉａ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ＡＰ－１ＤＮＡ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．
Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００５，１１６（１）：７１－８１．
［２２］Ｗａｎｇ　Ｃ，Ｙｕ　Ｊ，Ｋａｌｅｎ　ＣＢ．Ｔｗｏ　ｅｓｔｒｏｇｅｎ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｅｌｅｍｅｎｔ　ｓｅ－
ｑｕｅｎｃｅｓ　ｎｅａｒ　ｔｈｅ　ＰＣＮＡ　ｇｅｎｅ　ａｒｅ　ｎｏｔ　ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ　ｆｏｒ　ｉｔｓ　ｅｓｔｒｏ－
ｇｅｎ　ｅｎｈａｎｃｅｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ＭＣＦ７ｃｅｌｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳ　Ｏｎｅ，２００８，３
（１０）：ｅ３５２３．
［２３］Ｚｈａｏ　Ｈ，Ｈｏ　ＰＣ，Ｌｏ　ＹＨ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｃｅｌ
ｎｕｃｌｅａｒ　ａｎｔｉｇｅｎ（ＰＣＮＡ）ｗｉｔｈ　ｃ－Ａｂｌ　ｉｎ　ｃｅｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｅ－
ｓｐｏｎｓｅ　ｔｏ　ＤＮＡ　ｄａｍａｇｅｓ　ｉｎ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．ＰＬｏＳ　Ｏｎｅ，２０１２，
７（１）：ｅ２９４１６．
［２４］Ｃａｌｄｏｎ　ＣＥ，Ｄａｌｙ　ＲＪ，Ｓｕｔｈｅｒｌａｎｄ　ＲＩ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｉｎ
ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｅｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍ，２００６，９７（２）：２６１－７４．
［编辑校对：刘红武］
·５５０１·肿瘤防治研究２０１２年第３９卷第９期