全 文 ：龙爪槐角与槐角对照药材中芦丁和槐角苷的比较研究
刘景东， 王志玲， 勾凌燕， 王 憬， 刘惠敏， 王秀卿
(第四军医大学白求恩军医学院，河北 石家庄 050081)
收稿日期:2011-04-18
基金项目:全军“十一五”面上课题(06MB355)
作者简介:刘景东(1957—) ，男，高级实验师，硕士生导师，研究方向:药物分析研究。Tel: (0311)87977096，E-mail:sandongliujingdong@
163． com
摘要:目的 探索龙爪槐角替代槐角应用的可行性，为龙爪槐角替代槐角应用提供实验依据。方法 槐角对照药材与冬
季采摘于不同地点的龙爪槐角，经甲醇连续提取，260 nm波长绘制 HPLC色谱图，对龙爪槐角与槐角对照药材中主要黄
酮成分芦丁，主要异黄酮成分槐角苷进行比较研究，并测定其中的芦丁与槐角苷。结果 龙爪槐角与槐角对照药材
HPLC色谱图峰型一致，芦丁与槐角苷分别为 0． 45%和 4． 44%，与槐角对照药材没有明显差异。结论 龙爪槐角具有替
代槐角使用的应用前景，龙爪槐角的应用对于缓解目前槐角资源紧张将发挥积极的作用。
关键词:龙爪槐角;槐角;芦丁;槐角苷;HPLC法
中图分类号:R284． 1 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2011)10-1829-03
槐角 Sophorae Fructus，冬季采摘自槐 Sophorae L．的成熟
果实，《神家本草经》列为上品，是我国传统的中药材，也是
《中华人民共和国药典》历版收载品种［1］。槐角主产于我国
北部，华南及西南地区亦产，以河南豫西山区品质最佳。槐
树生长缓慢，木材经济价值低，农民从不把槐树作为药用经
济树种，广大农村地区槐资源接近枯竭。目前有限的槐资源
主要集中在城乡道路两旁。2010 年元月后槐角价格节节攀
升，从年初至 8 月价格上涨 70%以上且供不应求［2］。龙爪
槐 Sophora japonica var． pendula Loud．是槐在自然界中受到
雷击、动物的啃食、病虫伤害等外部因素刺激突然变异而形
成的新品种［3］，北京已有几百年的种植历史。文献［4］对龙
爪槐角与槐角对照药材中主要的黄酮苷元槲皮素、山柰酚与
染料木素进行的比较研究，初步探索了龙爪槐角替代槐角使
用的可行性。本实验参照王志玲等的方法［5］，考察了未水解
的龙爪槐角主要黄酮苷和异黄酮苷成分，绘制了龙爪槐角与
槐角对照药材在 260nm HPLC色谱图，测定了龙爪槐角中的
芦丁与槐角苷，进一步为龙爪槐角替代槐角使用提供理论依
据，也为开发新的槐资源提供参考。
1 仪器与药品
高效液相色谱仪(美国 Waters，1525 高压双泵系统，
2487 双波长紫外检测器，Breeze 色谱数据工作站) ;AG135
电子分析天平(d = 0． 01 mg /0． 1 mg，瑞士) ;索氏提取器(天
津玻璃仪器厂)。
龙爪槐角采自石家庄市不同地点(每处选 10 棵槐树，每
树向阳面采摘一枝，去除枝叶后，混匀，常水洗净，80 ℃烘干
备用。采摘日期:2008-12-15)。经本院药学教研室张书峰
博士鉴定为龙爪槐的果实。芦丁、槐角苷对照品及槐角对照
药材(中国药品生物制品检定所，批号:100080-200606、
11695-200501、121214-0101) ;甲醇和乙腈为色谱纯级，高纯
水由 Millipore纯水器制备。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件 Diamonsil C18柱(150 mm × 4． 6 mm，5
μm) ;流动相:甲醇 － 1%冰醋酸-乙腈(57 ∶ 38 ∶ 5，v /v) ;体积
流量 1． 0 mL /min;检测波长 260 nm;柱温为室温。
2． 2 对照品溶液的制备 准确称取减压干燥至恒质量的芦
丁和槐角苷对照品各 10 mg，分别置于 50 mL量瓶中，甲醇溶
解后定容即为标准贮备液。取上述溶液，配成芦丁和槐角苷
质量浓度均为 2 μg /mL的混合溶液，作为对照品溶液。
2． 3 样品溶液的制备 分别精密称取 0． 5 g 干燥恒质量的
龙爪槐角及槐角对照药材细粉，滤纸包成小包，置 150 mL索
氏提取器中，加甲醇 90 mL，100 ℃水浴连续提取 10 h，冷却
后用甲醇定容至 100 mL，0． 45 μm滤膜过滤，作为样品溶液。
2． 4 芦丁和槐角苷保留时间的确定 取芦丁和槐角苷对照
品溶液，按 2． 1 项条件，进样 10 μL，进行色谱分析，计算芦丁
与槐角苷的保留时间分别为 12． 540、14． 881(n = 3)。
2． 5 方法学考察
2． 5． 1 回归方程的计算及线性关系考察 分别精密吸取贮
备液适量，用甲醇配制成芦丁和槐角苷质量浓度分为 0． 08、
0． 1、0． 125、0． 25、0． 50、1． 0、1． 5、2． 0 μg /mL 的混合溶液，按
2． 1 项下条件进样 10 μL，每个质量浓度重复 3 次，记录色谱
图。以峰面积(A)与质量浓度(C)进行线性回归，芦丁质量
浓度在 0． 08 ～ 1． 0 μg /mL 线性关系良好，A = 144 × 102 C +
195，r = 0． 999 6，槐角苷在 0． 125 ～ 2． 0 μg /mL 线性关系良
好，A = 500 × 102C + 105，r = 0． 999 9。
2． 5． 2 仪器精密度考察 取芦丁、槐角苷分别为 0． 5、1． 0
μg /mL的混合溶液，按 2． 1 项中色谱条件，在一天内不同时
间分别测定 5 次，计算日内误差;连续 5 d每天测定 1 次，计
算日间误差，芦丁的日内和日间误差 RSD 分别为 0． 74%和
9281
2011 年 10 月
第 33 卷 第 10 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
October 2011
Vol． 33 No． 10
1． 23%，槐角苷的日内和日间误差 RSD 分别为 0． 75%和
1． 65%，表明仪器精密度良好。
2． 5． 3 加样回收率试验 取已测定芦丁与槐角苷的龙爪槐
角样品粉末(龙爪槐角-1)6 份，每份 0． 5 g，精密称定，分别
精密加入不同质量的芦丁与槐角苷对照品，按 2． 3 项方法制
备供试品溶液，按 2． 1 项色谱条件进样测定，测定峰面积代
入回归方程计算加样平均回收率，结果见表 1 。
表 1 加样回收率试验结果 (n =6)
成分
原有量
/mg
加入量
/mg
测出量
/mg
回收率
/%
平均回收
率 /%
RSD /%
芦丁 3． 55 2． 00 5． 24 94． 4 95． 7 1． 2
3． 55 2． 00 5． 32 95． 9
3． 55 3． 00 6． 38 97． 4
3． 55 3． 00 6． 21 94． 8
3． 55 4． 00 7． 31 96． 8
3． 55 4． 00 7． 18 95． 1
槐角苷 23． 9 20． 00 41． 75 95． 1 96． 2 1． 1
23． 9 20． 00 42． 76 97． 4
23． 9 25． 00 46． 46 95． 0
23． 9 25． 00 47． 58 97． 3
23． 9 30． 00 51． 58 95． 7
23． 9 30． 00 52． 12 96． 7
2． 6 龙爪槐角、槐角对照药材 HPLC 色谱图的绘制及芦丁、
槐角苷的测定 精密量取样品溶液适量，用甲醇稀释，使其
浓度在线性范围内，按 2． 1 项中所述条件，进样量为 10 μL
作 HPLC分析，每个样品重复 3 次，HPLC 色谱图结果见图 1
和图 2。将芦丁和槐角苷峰面积的平均值代入回归方程分
别计算，结果见表 2。
图 1 龙爪槐角样品色谱图
1．芦丁 2．槐角苷
图 2 槐角标准药材样品色谱图
1．芦丁 2．槐角苷
3 讨论
3． 1 研究证实，槐角中的主要活性成分为黄酮与异黄酮类
表 2 龙爪槐角与槐角对照药材样品中芦丁与槐角苷
的测定结果
样品 购买或采摘地 芦丁 /% 槐角苷 /%
槐角对照药材
中国药品生物
制品检定所
0． 61 4． 50
龙爪槐角-1 军医学院 0． 71 4． 78
龙爪槐角-2 西兴公园 0． 43 4． 33
龙爪槐角-3 裕西公园 0． 47 4． 61
龙爪槐角-4 五十四所 0． 31 4． 47
龙爪槐角-5 裕华路 0． 35 4． 03
化合物［6］。黄酮类化合物的药理学作用涵盖抗氧化、抗辐
射、抗肿瘤、抗炎、抗疲劳和免疫调节等诸多方面［7-10］。槐角
中的黄酮类化合物多达 27 种［11］，种类及含量多于银杏
叶［12］，异黄酮的量远远高于大豆［13］。刘景东等以往的研究
结果显示龙爪槐角中主要的黄酮苷元，槲皮素、染料木素和
山柰酚分别为其干质量的 0． 3%、3． 04%和 2． 74%［4］。本实
验结果显示龙爪槐角中主要的黄酮苷，芦丁与槐角苷的平均
质量分数分别为 0． 45%和 4． 44%。两者含有量均高于银杏
叶和大豆。槐角中丰富的黄酮类化合物种类以及多方面的
药理学活性极大促进了槐资源的研究、开发和利用，使其具
有广阔的应用前景。
3． 2 以往的研究结果［4］和本实验的研究结果均显示龙爪槐
角与槐角对照药材总黄酮提取物水解前后的 HPLC 色谱图
峰型基本一致，主要有效成分的量接近，提示两者具有极为
相似的黄酮类化合物谱型，有一定的可替代性。此外，龙爪
槐多种植于机关大院、大专院校、公园绿地，生态环境好，污
染少，植物资源品质优于种植于道路两旁的国槐，且龙爪槐
树冠低，极易采摘，资源极为丰富，具有开发利用的价值。本
实验为龙爪槐角替代槐角应用提供了实验依据。龙爪槐角
如能与槐角通用，将会极大丰富现有槐资源，提高槐角的质
量，从根本上解决槐角资源紧张的问题。龙爪槐角能否完全
替代槐角还需进一步药理学实验证实。
参考文献:
［1］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典:2010 年版一部［S］．
北京:中国医药科技出版社，2010:334．
［2］ 邢振杰．槐米减产已成定局，后市蕴藏无限商机［J］． 中国现
代中药，2010，12 (8) :51-52．
［3］ 徐 飞，郭卫华，王玉芳，等． 济南市校园 6 个绿化树种光合
荧光特征比较初探［J］． 山东大学学报:理学版，2007，42
(5) :86-94．
［4］ 刘景东，王志玲，勾凌燕，等． 龙爪槐角与槐角对照药材中主
要黄酮苷元成分的对比［J］． 第二军医大学学报，2010，31
(9) :990-992．
［5］ 王志玲，刘景东，勾凌燕，等． HPLC 同时测定槐角中的芦丁和
槐角苷［J］．华西药学杂志，2010，25 (1) :072-074．
［6］ QiY，Sun A，Liu R，et al． Isolation and purification of flavonoid
and isoflavonoid compounds from the pericarp of Sophora japonica
L． by adsorption chromatography on 12% cross-linked agarose gel
media［J］． Chromatogr A，2007，1140:219 – 224．
［7］ 杨 帆，刘艾林，杜冠华．黄酮类化合物对肿瘤多药耐药调节
0381
2011 年 10 月
第 33 卷 第 10 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
October 2011
Vol． 33 No． 10
作用的研究进展［J］．中国新药杂志，2010，19 (2) :109-113．
［8］ 王永红，龙晓莉，何 菲，等． 槐角总黄酮对高脂血症大鼠降
血脂及抗氧化能力的实验研究［J］． 第四军医大学学报，
2009，30 (22) :2677-2681．
［9］ 储金秀，李光民，韩淑英．荞麦花叶芦丁对糖尿病大鼠早期肝
损伤的保护作用［J］．江苏医药，2010，36 (8) :935-937．
［10］ 臧宝霞，金 鸣，吴 伟，等． 山柰酚拮抗血小板活化因子与
其受体结合的作用［J］． 中国中药杂志，2004，29 (8) :789-
791．
［11］ Kite C G，Veitch C N，Boalch E M，et al． Flavonol tetraglyco-
sides from fruits of Styphnolobium japonicum (Leguminosae)and
the authentication of Fructus Sophorae and Flos Sophorae［J］．
Phytochemistry，2009，70 :785–794．
［12］ 谢德隆，高 崎，黄新生，等． 中国银杏药品质量标准体系的
建立及规范的实践［J］． 世界科学技术-中药现代化，2002，4
(1) :61-62．
［13］ Rostagno M A，Palma M，Barroso C G． Solid-phase extraction of
soy isoflavones［J］． Chromatogr A，2005，1076:110-117．
黄精低聚糖的分离纯化及理化性质研究
王彦志， 董晶晶， 刘富岗， 杨 云*
(河南中医学院药学院，河南 郑州 450008)
收稿日期:2010-12-14
基金项目:河南省重大科技攻关项目(200422030700)
作者简介:王彦志(1976—) ，女，副教授，研究方向:中药药效物质基础研究
* 通信作者:杨 云，女，硕士生导师，教授。Tel:(0371)65680605，E-mail:Yyun@ china． com． cn
摘要:目的 研究黄精低聚糖的分离纯化技术，并进行理化性质的分析。方法 采用 80% 乙醇回流提取黄精中小分子
糖，然后通过 D101 大孔吸附树脂柱、活性炭柱层析、Sephadex LH-20 凝胶柱层析分离纯化，得灰白色粉末状黄精低聚糖
(RPO-1) ，对其进行理化性质鉴别和总糖测定。结果 RPO-1 为糖类化合物，样品中不含酚类物质、淀粉、糖醛酸、大分
子蛋白质、多肽和核酸，用苯酚-硫酸法测定其总糖质量分数为 91． 3%。结论 黄精低聚糖的分离纯化方法有效、实用，
为进一步开发应用提供了技术方法和理论依据。
关键词:黄精;低聚糖;分离纯化;理化性质
中图分类号:R284． 2 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2011)10-1831-03
黄精 Polygonti Rhizoma是百合科黄精属 Polygonatum 多
种植物的根茎，《中国药典》(2010 版)收载了滇黄精 Polygo-
natum kingianum Coll． et Hemsl、黄精 Polygonatum sibiricum
Red．或多花黄精 Polygonatum cyrtonema Hua．的干燥根茎入
药［1］，在民间同属其它一些植物的根茎也被当作黄精使用。
作为一种传统常用中药，其性平，味甘，入脾、肺、肾经，具有
补肾益精、滋阴润燥等功效，临床上多作为滋阴补益药使用。
所含化学成分丰富，有黄精多糖、皂苷、生物碱、醌类化合物、
强心苷、木脂素、维生素和多种人体必需的氨基酸等化合
物［2］。糖类是中药中普遍存在的成分，可分为单糖、低聚糖、
多糖及其衍生物。作为构成生命体的最基本物质之一，糖类
在生命过程中起着极其重要的作用，它不仅是能量储存和结
构物质的存在形式，同时也作为生物信息的载体存在［3］。其
中低聚糖因具有低热量、高稳定性、安全无毒等特点，近年来
在保健、食品、医药等领域被广泛应用［4］，关于低聚糖的研究
和应用也越来越受到人们的关注，但是由于自身在组成、连
接、衍生化、微观不均一性等方面的高度复杂性及其检测上
的困难，致使其分离纯化研究较少［5］。近年来关于黄精低聚
糖的分析尚未见报道，本实验首次对其分离纯化方法进行探
索性研究，以期为低聚糖的综合开发利用提供科学依据。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 METTLER AE240 电子分析天平(瑞士 MET-
TLER TOLEDO公司) ;DHG-9146A 型电热恒温鼓风干燥箱
(上海精宏实验设备有限公司) ;旋转蒸发器(上海亚荣生化
仪器厂) ;Revco ULT 1386-3-V39 型超低温冰箱(美国 Thermo
公司) ;Labconco Free Zone 6L真空冷冻干燥机(美国 Labcon-
co公司) ;UV-2201 型紫外可见分光光度计(日本岛津公
司)。
1． 2 试药 黄精药材采集于河南省洛阳市栾川龙峪湾，经
河南中医学院生药教研室董诚明教授鉴定为百合科黄精属
植物黄精 Polygonatum sibiricum Red．的干燥根茎。将采挖的
新鲜黄精除去芦头、须根及泥沙，清蒸 1 h 后干燥，粉碎，过
20 目筛，备用。D101 大孔吸附树脂(沧州宝恩化工有限公
司) ;活性炭粉末(天津市福晨化学试剂厂) ;硅藻土(天津市
永大试剂化学开发中心) ;薄层层析硅胶 G(青海海洋化工有
限公司) ;Sephadex LH-20(瑞典 GE Healthcare公司) ;茚三酮
(上海市灵锦精细化工有限公司) ;咔唑(国药集团化学试剂
有限公司) ;葡萄糖(天津市科密欧化学试剂开发中心) ;蔗
1381
2011 年 10 月
第 33 卷 第 10 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
October 2011
Vol． 33 No． 10