全 文 ：收稿日期:2013 － 02 － 25
基金项目:辽宁省科学事业研究公益基金资助项目(2012006005) ;
沈阳市科学技术计划项目(F11 － 241 － 00，F12 － 264 － 4
－ 01)
作者简介:刘豪华(1987 －) ，女，山东人，2010 级硕士研究生，研究
方向:中药活性成分研究及新药开发。
通讯作者:张东方(1975 －) ，男，辽宁人，教授，博士，研究方向:中
药活性成分研究及新药开发。E-mail:dfzhang@ mail．
cmu． edu． cn。
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第 31 卷 第 7 期
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中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
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鸡眼草的生药学研究
刘豪华1，胡春萍2，许莉3，程韵菲1，靳鑫1，祝峥1，崔泽实1，张东方1
(1．中国医科大学药学院生药学教研室，辽宁 沈阳 110001;2．鞍山生物工程有限公司，辽宁 鞍山 114000;
3．辽宁省中药研究所，辽宁 沈阳 110041)
摘 要:目的:建立民间用药鸡眼草的质量标准评价方法。方法:采用性状鉴别和叶、茎横切面及粉末的显微
鉴别方法鉴别鸡眼草，采用高效液相色谱法测定其中的山柰酚，色谱柱:C18(4． 6 mm × 150 mm，5 μm) ;流动相:
甲醇 － 0． 1%磷酸(63 ∶ 37) ;检测波长:370 nm。结果:在叶、茎横切面显微图可见乳汁管和韧皮纤维束。在粉末
显微图中，可见非腺毛、晶纤维束等。采用 HPLC法测定鸡眼草中山柰酚的含量，稳定性良好，精密度良好，重复
性良好，加样回收率良好，每 1 g鸡眼草中山柰酚含量为 0． 046 ～ 0． 049 mg。结论:鸡眼草的药材性状、显微鉴别
特征明显，对该生药鉴别具有重要意义。HPLC法可用于测定鸡眼草中山柰酚的含量。
关键词:鸡眼草;显微鉴别;山柰酚;含量测定
中图分类号:R284． 1 文献标志码:A 文章编号:1673 － 7717(2013)07 － 1637 － 03
Pharmacognosy Research on Herba Kummerowiae
LIU Haohua1，HU Chunping2，Xu Li3，CHENG Yunfei1，JIN Xin1，ZHU Zheng1，CUI Zeshi1，ZHANG Dongfang1
(1． School of Pharmaceutical Science ，China Medical University，Shenyang 110001，Liaoning，China;
2． Anshan Biological Engineering Company Limited，Anshan 114000，Liaoning，China;
3． Liaoning Institute of Traditional Chinese Medicine，Shenyang 110041，Liaoning，China)
Abstract:Objective:To set up a method of quality control of Herba Kummerowiae． Methods:Character identification
7361
DOI：10.13193/j.archtcm.2013.07.167.liuhh.046
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and microscopical identification of leaf，stem and powder were used． Content of kaempferol from Herba Kummerowiae was
determined by HPLC and chromatographic column was C18(4． 6 mm × 150 mm，5 μm) ;mobile phase was methanol －
0． 1% phosphonic acid(63 ∶ 37) ;wave length was 370 nm． Results:Laticiferous tube and phloem fiber were discovered
from leaf and stem． Nonglandular hair and crystalfibrin were found from powder． Stability，precision，repetition of HPLC
was better． Content of kaempferol was 0． 046 ～ 0． 049 mg /g in Herba Kummerowiae． Conclusion:Character identification
and microscopical identification of leaf，stem and powder of Herba Kummerowiae are distinct． The content determination of
kaempferol from Herba Kummerowiae is feasible．
Key words:Herba Kummerowiae;microscopical identification;kaempferol;content determination
鸡 眼 草 为 豆 科 植 物 鸡 眼 草 Kummerowia striata
(Thunb．)Schindl．的干燥全草。始载于《救荒本草》，又名
掐不齐，为民间用药。味微苦，性凉。具有清热解毒，健脾
利湿作用。主要用于感冒发热，暑湿吐泻，痢疾。［1］当前，
未检索到有关鸡眼草生药学研究的相关报道。本文对鸡眼
草进行了生药学研究，以期为鸡眼草的质量标准的建立提
供依据。
1 材料与仪器
1． 1 仪器
光学显微镜(Olympus) ，切片机(上海医疗器械四厂) ，
高效液相色谱仪(日立 L － 6200，日本) ，KQ －100 型超声波
清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
1． 2 试剂
甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯。
1． 3 药材
鸡眼草经中国医科大学生药学教研室张东方教授鉴定
为豆科植物鸡眼草(Kummerowia striata(Thunb．)Schindl．)
的干燥全草。
2 鉴定特征
2． 1 性状鉴别
本品茎长 10 ～ 30 cm，直径 1． 5 ～ 2 mm，多分枝;表面红
棕色;小枝密被向下反卷的白毛;质脆，易折断，断面纤维
性，淡黄白色，髓部充实或于老茎为中空。三出复叶互生，
叶多皱缩，完整小叶长椭圆形或倒卵状长椭圆形，中央 1 枚
较大，长 5 ～ 15 mm，宽 3 ～ 5 mm，上面棕绿色，下面灰绿色，
先端圆，具小短尖头，基部狭楔形，侧面两小叶较小而圆形;
具羽状网脉，常沿叶脉断开;叶柄叶缘及叶背主脉上均具细
毛;托叶膜质，棕褐色。气微，味淡。
2． 2 显微特征
2． 2． 1 叶横切面 上下表皮均为 1 列细胞;中脉维管为外
韧形，木质部较发达，导管呈放射状排列，韧皮部呈新月形，
可见韧皮纤维，栅栏组织为一列类长方形细胞，海绵组织细
胞排列疏松，在海绵组织中，与栅栏组织相邻处可见褐色内
容物。见图 1。
2． 2． 2 茎横切面 茎圆柱形，断面中空具较大的髓腔。表
皮细胞 1 列，类圆形，外壁角质化增厚，中柱鞘纤维束断续
排列成环，束间皮层组织含褐色内容物，维管束外韧形，韧
皮部较窄，细胞扁缩，木质部发达，由导管和薄壁细胞组成，
薄壁细胞类方形。见图 2。
2． 2． 3 粉末特征 粉末黄绿色，气微，味淡。(1)非腺毛
较多，壁较厚，可见层纹，多由 1 ～ 2 细胞构成，3 细胞少见，
1 上表皮;2 栅栏组织;3 含褐色内容物海绵组织;4 海绵组
织;5 木质部;6 韧皮部;7 韧皮纤维;8 下表皮
图 1 鸡眼草叶横切面显微图
1 表皮;2 皮层;3 含褐色内容物皮层组织;4 韧皮纤维;5 韧
皮部;6 木质部;7 髓
图 2 鸡眼草茎横切面显微图
长度为 1500 ～ 3500 μm，表面有的光滑、有的有疣状突起。
(2)晶纤维束的薄壁细胞中含有草酸钙方晶。(3)导管以
单纹孔导管、螺纹导管多见，直径 60 ～ 100 μm。(4)草酸钙
簇晶较小，尖端较钝，直径为 85 ～ 180 μm。(5)淀粉粒为单
粒淀粉粒，直径 70 ～ 80 μm。(6)纤维成束纹孔不明显。
(7)表皮细胞类长方形，壁略有增厚。见图 3。
2． 3 含量测定
2． 3． 1 色谱条件与系统适用性试验［2］ 色谱柱:Diamons
C18(4． 6 mm ×150 mm，5 μm) ;流动相:甲醇 － 0． 1%磷酸(63
∶ 37) ;流速:1． 0 mL·min －1;检测波长:370 nm;柱温:30 ℃;
进样量:10 μL;理论板数按山奈酚计算不低于 3000。山柰酚
与相邻成分色谱峰的分离度应不小于 1． 5。见图 4 ～5。
2． 3． 2 对照品溶液的制备 精密称取山奈酚对照品 7． 60
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1 非腺毛;2 晶纤维束;3 导管;4 草酸钙簇晶;5 淀粉粒;6 纤
维;7 表皮细胞
图 3 鸡眼草粉末特征图
图 4 山柰酚对照品溶液 HPLC色谱图
图 5 鸡眼草供试品溶液色谱图
mg，置 100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即
得 0． 076 mg·mL －1的对照品储备液。取储备液 1 mL于 50
mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得 0． 00152
mg·mL －1作为对照品溶液。
2． 3． 3 供试品溶液的制备 取鸡眼草研成粗粉，取本品 1
g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 50 mL，称重，
超声提取 30 min，取出，加甲醇至原重，摇匀，滤过，取续滤
液再经 0． 45 μm微孔滤膜滤过，即得。
2． 3． 4 测定波长的选择 取山柰酚对照品溶液，扫描紫外图
谱，结果在 370 nm处有最大吸收，故确定检测波长为 370 nm。
2． 3． 5 线性范围考查 分别取对照品溶液 2． 0、4． 0、8． 0、
12． 0、16． 0、18． 0 μL 进样，按上述色谱条件进行峰面积测
定，以山奈酚峰面积为纵坐标，山奈素进样量为横坐标，绘
制标准曲线，得回归方程:Y = 2047944X － 1973． 5，r =
0． 9992。测定结果提示，进样量在 0． 005 ～ 0． 03 μg范围内
线性关系良好。
2． 3． 6 稳定性试验 取供试品溶液，分别在 0、2、4、6、8、10
h进样，测定，山奈酚峰面积 RSD为 1． 4%，稳定性良好。
表 1 稳定性试验结果
时间(h) 0 2 4 6 8 10 珋x RSD(%)
峰面积 39780 38970 40360 39890 40632 40214 39974 1． 4
2． 3． 7 精密度试验 精密吸取供试品溶液 10 μL，连续进
样 6 次，测定，色谱峰面积 RSD 为 1． 1%(n = 6) ，仪器精密
度良好。
表 2 精密度试验结果
次数 1 2 3 4 5 6 珋x RSD(%)
峰面积 39778 39432 39009 39654 40213 39189 39546 1． 1
2． 3． 8 重复性试验 取同一样品依法操作 6 次，测定，计
算含量平均值为 0． 044mg，RSD为 1． 8% ．
表 3 重复性试验结果
次数 1 2 3 4 5 6 珋x RSD(%)
含量(mg/g) 0． 0446 0． 0449 0． 0442 0． 0437 0． 0434 0． 0455 0． 044 1． 8
2． 3． 9 回收率实验 精密称取 6 份已知含量(0． 044 mg·
g －1)的鸡眼草细粉约 1 g，分别加入 1 mL 山奈酚对照品溶
液(0． 076 mg·mL －1)。按含量测定方法测定，计算回收
率，结果见表 4，计算加样回收率为 100． 4%，RSD为 1． 4%。
表 4 回收率试验结果
序号
称样量
(g)
含量
(μg)
加入量
(μg)
测得量
(μg)
回收率
(%)
珋x
(%)
RSD
(%)
1
2
3
4
5
6
1． 0001
1． 0025
0． 9997
1． 0006
0． 9991
1． 0013
43． 98
44． 08
43． 96
43． 10
43． 93
44． 03
76
76
76
76
76
76
119． 7
120． 6
122． 0
119． 9
122． 4
120． 5
99． 6
100． 7
102． 7
101． 5
103． 2
100． 6
100． 4 1． 4
2． 3． 10 山柰酚的含量测定 取 3 批不同鸡眼草样品，依
法操作，测定，计算山柰酚的含量分别为 0． 046 mg /g、0． 049
mg /g、0． 048 mg /g。
3 讨 论
通过实验表明，鸡眼草的药材性状、显微鉴别特征
明显，对该生药鉴别具有重要意义。在叶横切面显微图
中海绵组织中，与栅栏组织细胞相邻处可见褐色内容
物。在茎横切面显微图中，中柱鞘纤维束断续排列成
环，束间为皮层含褐色内容物。在粉末显微图中，可见
众多非腺毛，壁较厚，可见层纹，多由 1 ～ 2 细胞构成，表
面有的光滑、有的有疣状突起;有晶纤维束存在，薄壁细
胞中含有草酸钙方晶。
建立了鸡眼草中山柰素的含量测定方法，为评价药材
优劣提供检测方法。为该药材的质量评价、资源开发提供
了依据。
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