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饿蚂蝗对四氯化碳致急性肝损伤小鼠保护作用研究
张前军1， 于海林2， 李传宽1， 康文艺1，2
(1． 贵州大学化学与化工学院，贵州 贵阳，550025;2． 河南大学中药研究所，河南 开封，475004)
收稿日期:2010-12-15
基金项目:贵州省中药现代化项目(黔科合中药字［2010］5029 号)
作者简介:张前军，女，教授，从事天然药物化学研究。Tel．:13837866695，E-mail:qianjunzhang@ 126． com
摘要:目的 探讨饿蚂蝗叶总提取物、叶正丁醇部位、根茎正丁醇部位对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用。方法
通过腹腔注射四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤，检测小鼠 ALT、AST、SOD和 MDA的各项水平，考察饿蚂蝗的保肝作用。
结果 小鼠的 ALT、AST、SOD和 MDA的水平显示，饿蚂蝗叶总提取物、叶正丁醇部位、根茎正丁醇部位具有较好的保肝
作用，叶正丁醇部位作用最好。结论 叶正丁醇部位对肝脏损伤保护作用最强。
关键词:饿蚂蝗;四氯化碳;急性肝损伤;保肝
中图分类号:R285． 5 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2011)11-1993-03
饿蚂蝗为豆科植物山蚂蝗属植物饿蚂蝗 Desmodium
multiflorum DC 的全株，分布于我国广西、贵州、云南、福建和
台湾等地。味甘、苦，性凉，具有活血止痛、解毒消肿功能，用
于脘腹疼痛、小儿疳积、妇女干血痨、腰扭伤、创伤、尿道炎、
腮腺炎和毒蛇咬伤等症［1］。该属植物的主要化学成分为黄
酮类、生物碱、三萜以及酸类成分等［2-5］。我们课题组对该植
物进行了持续研究［6-7］，文献研究发现未见饿蚂蝗治疗肝病
方面的研究报道。本实验采用 CCl4 诱导小鼠急性肝损伤模
型，对饿蚂蝗提取物的小鼠肝损伤保护作用进行研究，并对
其作用机理进行初步探讨，为合理开发和利用饿蚂蝗资源提
供科学依据。
1 材料
1． 1 实验动物 昆明种小鼠，雄性，体质量为(20 ± 2)g，河
南省实验动物中心提供，许可证号:SYXK (豫)2005-0012。
1． 2 药品与试剂 饿蚂蝗 2009 年 7 月采集于贵州省贵阳
市花溪区，经贵阳中医学院陈德媛教授鉴定为豆科植物山蚂
蝗属植物饿蚂蝗 Desmodium multiflorum DC．。
联苯双酯滴丸(浙江万邦药业有限公司，批号:080210) ;
ALT试剂盒、AST试剂盒、MDA试剂盒和 SOD试剂盒均购于
南京建成生物工程研究所;四氯化碳(CCl4) :分析纯，(开封
市试剂总厂) ;考马斯亮蓝 G250(上海化学试剂公司分装厂，
批号:20050115) ;UV-2000 型紫外可见分光光度计(美国
Unico公司)等。
1． 3 仪器 UV-2000 型紫外可见分光光度计(美国 Unico
仪器有限公司) ，Multiskan MK3 酶标仪(美国 Thermo Elec-
tron 公司) ，985370-395 型组织匀浆机(BIOSREC，Mexico)。
CS-H1 型混合器(北京博励阳科技公司) ，LRH-150 生化培养
箱(上海一恒科技有限公司) ，TGL-16 高速离心机(江苏金坛
市中大仪器厂)。
2 方法
2． 1 饿蚂蝗提取物的制备 干燥饿蚂蝗叶 1 000 g 粉碎后
加入 75%乙醇，回流提取 3 次(3 × 3 000 mL) ，每次 2 h，合并
乙醇提取液，回收溶剂，得叶总提物浸膏(TEL)。总提物浸
膏用水分散，用正丁醇(5 × 2 000 mL)提取，回收溶剂，得饿
蚂蝗叶正丁醇提取物(n-butanol extract of leaves，NBEL)。
干燥饿蚂蝗根茎 1 000 g粉碎后加入 75%乙醇，回流提
取 3 次(3 × 3 000 mL) ，每次 2 h，合并乙醇提取液，回收溶
剂，得根茎总提物浸膏(total extract of rhizome，TER)。总提
物浸膏用水分散，用正丁醇(5 × 2 000 mL)提取，回收溶剂，
得饿蚂蝗根茎正丁醇提取物(n-butanol extract of rhizome，
NBER)。
2． 2 实验分组和造模方法 小鼠(20 ± 2)g随机分为 9 组，
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中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
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每组 10 只，分别为正常组、模型组、联苯双酯组和 NBER
(500，125 mg /kg bw) ，TEL(1 000，250 mg /kg bw) ，NBEL
(500，125 mg /kg bw)6 个给药组，给药组剂量根据本课题组
对该药物体内急性毒性试验确定。正常组和模型组给予
0． 5%的 CMC-Na溶液 10 mL /kg;联苯双酯组给予 100 mg /
kg，给药组连续灌胃给药 8 d，于末次给药 2 h 后，除空白组
外均按照 0． 1 mL /10g小鼠体质量腹腔注射 0． 4%四氯化碳
油溶液，禁食不禁水 16 h 后，摘眼球取血并分离出血清，检
测 ALT和 AST，分离出肝脏称质量，并称质量约 300 mg和约
30 mg的肝脏用 0 ～ 3 ℃生理盐水匀浆成 10%(测 MDA)和
1% (测 SOD)的肝脏匀浆液，测定 MDA 和 SOD，考马斯亮
蓝除蛋白。
2． 3 统计学分析 ALT、AST、SOD和 MDA的测定均按照试
剂盒的要求进行，实验数据 珋x ± s 表示，实验统计采用 spss
17． 0统计软件进行单因素方差分析。
3 结果
3． 1 饿蚂蟥提取物对四氯化碳急性肝损伤小鼠 ALT和 AST
的影响 由表 1 可见，模型组与正常组比较，血清中 ALT、
AST值均明显升高，说明造模成功。NBER、TEL 和 NBEL 均
能显著降低四氯化碳急性肝损伤小鼠的 ALT 和 AST 活力
值，数据差异具有极显著性意义(P ＜ 0． 05，P ＜ 0． 01，P ＜
0． 001)。相同剂量(500 mg /kg)下三者 ALT和 AST值的降低
程度是:NBEL ＞ TEL ＞ NBER，其中，NBER 和 NBEL 低剂量
组能降低酶活力，并且具有统计学意义(P ＜ 0． 05) ，NBER高
剂量组和 TEL 低剂量组能显著降低酶活力(P ＜ 0． 01) ，
NBEL和 TEL高剂量组对酶活力值的降低程度高于阳性对
照药联苯双酯(100 mg /kg) ，与模型组比较有极显著性差异
(P ＜ 0． 001)。从结果可以看出:3 种饿蚂蝗提取物对四氯化
碳急性肝损伤具有极好的保护作用其中饿蚂蟥叶高剂量组
正丁醇提取物降低酶活力最强。见表 1。
表 1 饿蚂蟥提取物对小鼠 ALT和 AST的影响 (珔x ± s，n =10)
剂量 /(mg /kg) ALT /(U /L) AST /(U /L)
正常组 19． 80 ± 4． 27 46． 05 ± 5． 15
模型组 3 725． 84 ± 77． 72### 1 837． 96 ± 70． 33###
阳性对照组 100 745． 51 ± 98． 44＊＊＊ 595． 82 ± 4． 68＊＊＊
NBER高剂量组 500 1 385． 29 ± 78． 72＊＊ 777． 30 ± 38． 41＊＊＊
NBER低剂量组 125 2 378． 09 ± 90． 08* 1 614． 44 ± 48． 55
TEL高剂量组 1 000 283． 22 ± 124． 14＊＊＊ 267． 37 ± 50． 79＊＊＊
TEL低剂量组 250 1 190． 09 ± 28． 77＊＊ 1 133． 27 ± 3． 17*
NBEL高剂量组 500 203． 35 ± 34． 36＊＊＊ 517． 38 ± 67． 66＊＊＊
NBEL低剂量组 125 2 782． 59 ± 29． 29* 1 729． 28 ± 82． 19
注:与正常组比较，#P ＜ 0． 05，## P ＜ 0． 01，### P ＜ 0． 001;与模型组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01，＊＊＊P ＜ 0． 001。
3． 2 饿蚂蟥提取物对四氯化碳急性肝损伤小鼠抗氧化能力
的影响 四氯化碳模型组与正常组比较，MDA 含量明显升
高，SOD值降低。说明四氯化碳小鼠氧化应激能力增强。
NBER、TEL和 NBEL均能显著降低四氯化碳急性肝损伤小
鼠的 MDA含量，数据差异具有显著性(P ＜ 0． 05，P ＜ 0． 01，
P ＜ 0． 001)。其中，NBER 组小鼠 MDA 的降低效果最为明
显，其次为 NBEL。结果还显示:饿蚂蝗 3 种提取物均能提高
四氯化碳急性肝损伤的 SOD活性值(P ＜ 0． 05，P ＜ 0． 01，P
＜ 0． 001) ，其中 NBER的作用效果最好，其次为 NBEL。以上
结果表明 3 种饿蚂蟥提取物可能通过氧化途径(升高 SOD、
降低 MDA)来保护肝脏组织。见表 2。
4 讨论
肝损伤是由多种病因引起并且可以有多种因素参与的
复杂过程。腹腔注射 CCl4植物油溶液是目前常用的肝炎模
型［8］。四氯化碳对干细胞膜有直接溶解作用，但四氯化碳毒
性主要与其活性代谢产物有关。四氯化碳在干细胞内质网
中经细胞色素 P450依赖性混合功能氧化酶的代谢，生成活泼
的三氯氧自由基和氯自由基，这些自由基可与细胞内和细胞
膜的大分子共价结合，使酶的功能丧失，细胞膜脂质过氧化，
胞浆 Ca2 +浓度升高，导致干细胞损伤坏死，胞浆内转氨酶渗
入血液，存在于肝细胞浆的可溶性酶 ALT、AST 可以作为诊
断衡量早期肝损伤程度的指标［9-10］。
表 2 饿蚂蟥提取物对小鼠MDA和 SOD
的影响 (珔x ± s，n =10)
MDA(nmol /mg prot) SOD(U /mg prot)
正常组 7． 54 ± 0． 79 940． 43 ± 248． 86
模型组 12． 43 ± 3． 02### 486． 93 ± 80． 69###
阳性对照组 6． 59 ± 1． 7319＊＊＊ 684． 68 ± 168． 74＊＊＊
NBER高剂量组 6． 44 ± 1． 41＊＊＊ 659． 42 ± 62． 75＊＊＊
NBER低剂量组 7． 66 ± 1． 85＊＊ 608． 97 ± 56． 48＊＊＊
TEL高剂量组 9． 94 ± 0． 83＊＊ 640． 80 ± 69． 67＊＊＊
TEL低剂量组 10． 10 ± 0． 54＊＊ 403． 28 ± 44． 27
NBEL高剂量组 8． 00 ± 0． 76＊＊ 603． 28 ± 44． 27＊＊＊
NBEL低剂量组 10． 08 ± 1． 63* 505． 12 ± 28． 20＊＊
注:与空白组比较，#P ＜ 0． 05，## P ＜ 0． 01，### P ＜ 0． 001;与模
型组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01，＊＊＊P ＜ 0． 001。
MDA 是脂质过氧化的最终产物，可严重破坏细胞膜结
构，导致细胞肿胀、坏死，含量高低可反应氧化的损伤程度。
SOD是细胞内清除自由基的主要抗氧化酶，可抑制自由基启
动的脂质过氧化反应，从而起到保护细胞膜的作用。因此
MDA和 SOD可作为衡量脂质过氧化程度的指标。
从实验总体结果看，饿蚂蝗各提取物都具有降低四氯化
碳急性肝损伤小鼠的 ALT、AST 和 MDA 的值及提升小鼠的
SOD活力水平的作用，其中饿蚂蝗叶正丁醇对肝脏损伤保护
作用最强。
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珍菊降压片中西药物配伍对自发性高血压大鼠血压的影响
朱国琴1，2， 张 聪2， 蔡国琴2， 谢家骏3， 乔正东2， 成 苗2， 王建新1*
(1． 复旦大学药学院，上海 201203;2． 上海市中药研究所，上海 201401;3． 上海中医药大学，上海
201203)
收稿日期:2011-04-12
基金项目:上海市科委中药现代化专项 09DZ1977302 的资助。
作者简介:朱国琴(1975—) ，女，工程师，硕士研究生，从事药理与制剂研究。Tel:(021)37565576，E-mail:guoqin_zhu@ hotmail． com
* 通信作者:王建新(1971—) ，男，博士，从事新型给药系统研究。Tel:(021)51980088，E-mail:jxwang@ shmu． edu． cn
摘要:目的 研究珍菊降压片及其处方中中药部分与化学药物部分对自发性高血压大鼠(SHR)血压的影响，以探讨中西
药物配伍的合理性。方法 将 100 只 SHR随机分成 10 组:模型组、珍菊降压片复方低、中、高剂量组(133、200、300 mg /
kg)、相应剂量中药组(130、196、293 mg /kg)、相应剂量化学药物组(2． 96、4． 44、6． 66 mg /kg) ，每组 10 只，采用尾动脉测
压法测量单次给药前、给药后 1、2、4、6、8、24、48 h以及多次给药前、给药 1、4、8、11、15、18、21 d和停药 1、2 d 大鼠血压。
结果 单次和多次给药后，珍菊降压片及其组方中的化学药物部分可显著降低 SHR 大鼠的血压;中药组单独给药虽降
压效果不明显，但对化学药物组具有一定的协同增效作用。结论 珍菊降压片对 SHR 大鼠具有明显的降压作用，化学
药物为主要降压活性部分，中药部分具有一定的增效作用。
关键词:珍菊降压片;中西药物配伍;高血压
中图分类号:R285． 5 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2011)11-1995-04
中西药物复方制剂以其安全、有效得到了越来越广泛的
应用，也逐渐成为新药研究开发的重要方向之一。但由于大
部分中西药物复方制剂的基础研究不足，对于中西药物配伍
的必要性、机理及增效减毒的效果一直存在一定的争议［1-5］。
珍菊降压片作为中西药物复方制剂的典型代表，由野菊花浸
膏、珍珠层粉及芦丁三味中药提取物和氢氯噻嗪与盐酸可乐
定 2 种化学药物组成，是临床上治疗轻中度原发性高血压的
常用药物之一。本实验选用自发性高血压大鼠模型对珍菊
降压片单次和多次给药的药效活性进行研究［6］，同时，通过
拆方研究，探索中西药物配伍增效的实验依据。
1 材料与方法
1． 1 实验材料
1． 1． 1 实验动物 自发性高血压大鼠(SHR)100 只，雌雄
各半，雄性大鼠体质量(296 ± 38)g，雌性大鼠体质量(195 ±
17)g，购自上海斯莱克实验动物有限公司，实验动物生产许
可证号:SCXK(沪)2003-0003。
1． 1． 2 受试药物 珍菊降压片原料药(简称:复方，下同) ，
土褐色粉末，由上海雷允上药业有限公司提供，将野菊花膏
粉、珍珠层粉、芦丁、氢氯噻嗪、盐酸可乐定按 100 ∶ 100 ∶ 20
∶ 5 ∶ 0． 03 比例混匀，然后用 0． 5% CMC 蒸馏水液调配成
1． 33%、2． 0%、3． 0%的药液，备用。
1． 1． 3 对照药物 对照药物 1:珍菊降压片中药部分(简
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