全 文 ： 中国现代应用药学 2012 年 10 月第 29 卷第 10 期 Chin JMAP, 2012 October, Vol.29 No.10 ·947·
C18(50 mm×2.1 mm，1.8 µm)，结果供试品溶液在
这 3 种色谱柱上均能得到很好的结果。柱温分别
为 35 ℃和 45 ℃时，供试品溶液均能得到很好的
分离效果。
2.10 样品含量测定
取硫酸亚铁缓释片，研细，取细粉约 0.1 g(共
5 批)，精密称定，置具塞玻璃离心管中，按“2.2”
项下方法制得供试品溶液。分别精密吸取供试品
溶液、对照品溶液各 5 μL，注入液相色谱仪，测
定 DOP MRM 391→149 的峰面积，按外标法计算
样品中 DOP 浓度，进一步换算为固体样品中 DOP
的含量(μg·g−1)，结果见表 3。
表 3 样品含量测定结果(n=3)
Tab 3 Determination results of samples(n=3)
批号 含量/μg·g−1 RSD/%
20101101 2.5 2.52
20110101 3.2 2.31
20100604 3.2 1.94
101118 2.8 2.43
110210 2.5 2.02
3 讨论
由于塑化剂广泛存在于塑料制品中，因此配
制样品时不能使用塑料制品，而是全部采用玻璃
容器。流动相如果只用甲醇-水，DOP 的响应很低。
改用 5%乙酸铵溶液后，响应明显增高。
采用多反应监测模式，显著提高了检测的灵敏
度和专属性，且样品处理操作简便、快速。美国 FDA
认为，DOP 可耐受的日摄入量为 600 μg·kg−1。实验
结果表明，5 批硫酸亚铁缓释片中 DOP 的含量均
很小，按照说明书的要求使用，摄入的 DOP 量对
人体几乎无害。
REFERENCES
[1] SONIA H, ALLEN A, KATHERINE E. Medications as a
potential source of exposure to phthalate in U.S. population [J].
Environ Health Perspect, 2009, 117(2):185-189.
[2] EVE M. RUSSELL C C, PAUL M D. Male reproductive tract
malformations in rats following gestational and lactational
exposure to di(n-butyl)phthalate: an antiandrogenic mechanism
[J]. Toxicol Sci, 1998, 43(1): 47-48
[3] Ch.P(2010)Vol Ⅱ(中国药典 2010 年版. 二部) [S]. 2010:
1198.
[4] LIU H H, HUANG X Q, WANG H. Determination of
phthalate acid esters in food by high performace liquid
chromatography-tandem mass spectrometry [J]. Mod Prev
Med(现代预防医学), 2008, 35(1): 119-121
[5] XIONG M J，FEI X F，CHEN C. Determination of di(2-
ethylhexyl) phthalate in PVC medicinal bags by LC-MS/MS
[J]. West Chin J Pharm Sci(华西药学杂志), 2008, 23(1):
92-93.
收稿日期：2011-12-18



HPLC 同时测定大血藤中红景天苷和绿原酸的含量

刘宇文，殷红妹，邹耀华(浙江省杭州市药品检验所中药室，杭州 310017)

摘要：目的 建立高效液相转换波长法，同时测定大血藤中红景天苷和绿原酸的含量。方法 采用 Inertsil ODS-SP色谱
柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱；流速 1 mL·min−1，柱温 30 ℃，检测波长 220，325 nm。结
果 红景天苷和绿原酸分别在 0.061 7~1.234 μg(r=0.999 7)和 0.030 2~0.605 μg(r=0.999 9)与峰面积呈良好的线性关系，平
均回收率(n=6)分别为 97.8%和 98.1%，RSD 分别为 1.9%和 1.7%。结论 该方法同时测定大血藤中的红景天苷和绿原酸
的含量，方法简单、准确度高、重复性好，可为大血藤药材的质量控制提供参考。
关键词：大血藤；红景天苷；绿原酸；波长转换法
中图分类号：R917.101 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2012)10-0947-03

Simultaneous Determination of Salidroside and Chlorogenic Acid in Sargentodoxa Cueata by HPLC

LIU Yuwen, YIN Hongmei, ZOU Yaohua(Hangzhou Institute for Drug Control, Hangzhou 310017, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To establish a wavelength conversion method for determination of salidroside and chlorogenic
作者简介：刘宇文，男，硕士，主管中药师 Tel: (0571)85463891 E-mail: liuyuwen01@126.com
DOI:10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2012.10.001
·948· Chin JMAP, 2012 October, Vol.29 No.10 中国现代应用药学 2012 年 10 月第 29 卷第 10 期
acid in Sargentodoxa cueata. METHODS The separation was performed on a Inertsil ODS-SP column(4.6 mm×250 mm, 5
μm). Acetonitril-0.1% H3PO4 was used as the mobile phase with gradient elution. The flow rate was 1 mL·min−1. The detection
wavelength was 220 nm and 325 nm. RESULTS The linear range was 0.061 7−1.234 μg(r=0.999 7) and 0.030 2−0.605 μg
(r=0.999 9), respectively. The average recoveries(n=6) of salidroside and chlorogenic acid were 97.8% and 98.1%, respectively.
CONCLUSION This method is simple, sensitive and it may be used for the quality control of Sargentodoxa cuneata.
KEY WORDS: Sargentodoxa cueata; salidroside; chlorogenic acid; wavelength conversion method

大血藤为木通科(Lardi zabalaceae)大血藤属
(Sargentodoxa Rehd. et Wils.)落叶木质藤本大血藤
Sargentodoxa cuneata Rehd. et Wils. 的干燥藤茎
根，味苦性平，归大肠、肝经。具有清热解毒、
活血、祛风止痛之功效，用于肠痈腹痛、热毒疮
疡、经闭、痛经、跌扑肿痛等[1]。药理研究证明，
其具有抗辐射、抗菌、抗炎、抗急慢性过敏、抗
癌及心血管系统等多种药理活性[2]。
与药理活性相对应的，大血藤亦含有多种有
效成分，本实验以红景天苷和绿原酸作为指标性
成分，采用高效液相转换波长法同时测定红景天
苷和绿原酸含量，为大血藤药材的质量标准的完
善提供参考。
1 仪器与试剂
1.1 仪器
Agilent 1260 高效液相色谱仪(美国 Agilent公
司)；XS105 分析天平(Mettler Toledo)；Agilent 1260
Infinity 可变波长检测器 (美国 Agilent 公司 )；
KQ-600DV 台式数控超声波清洗器 (昆山市超声
仪器有限公司)；DK-S24 恒温水浴锅(上海精宏实
验设备有限公司)；UE400 电子控温干燥箱(德国
Memmert)。
1.2 试剂
红景天苷对照品(中国药品生物制品检定所，
批号：110818-200103，纯度：100%)；绿原酸对
照品(中国药品生物制品检定所，批号：110753-
200212，纯度：100%)；色谱纯乙腈(德国 Merck)；
色谱纯甲醇(德国 Merck)；大血藤药材(市售)，经
本所殷红妹副主任中药师鉴定为木通科植物大血
藤(Sargentodoxa cuneata Rehd .et Wils.)的干燥藤
茎根。其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Inertsil ODS-SP 色谱柱(4.6 mm×250 mm，
5 μm)；流动相 A(乙腈)-B(0.1%磷酸水溶液)；流速：
1.0 mL·min−1；检测波长：0~15 min 为 220 nm，
15~30 min 为 325 nm；进样量：10 µL；柱温：30 ℃；
梯度洗脱：0~30 min(7%→10%A)。在上述色谱条
件下分析，理论板数按红景天苷计不低于 4 000，
按绿原酸计不低于 5 000，两种成分与共存的其他
成分分离良好，分离度均>1.5，色谱图见图 1。

图 1 高效液相色谱图
A−空白溶液；B−对照品溶液；C−供试品溶液；1−红景天苷；2−绿原酸
Fig 1 HPLC chromatograms
A−blank; B−standard solution; C−sample solution; 1−salidroside;
2−chlorogenic acid
2.2 对照品溶液的制备
精密称取红景天苷对照品 24.68 mg，置 100
mL 量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀；再
精密称取绿原酸对照品 12.10 mg，置 100 mL 量瓶
中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀；再精密吸
取上述对照品溶液各 5 mL，置 20 mL 量瓶中，甲
醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品混合溶液。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取过三号筛大血藤药材粉末 0.5 g，置
具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 100 mL，称定重量，
超声 30 min，放冷后补足重量，过滤，取续滤液
置微型离心管中以 12 000 r·min−1 离心 5 min，取上
清液作为供试品溶液。
2.4 线性关系考察
分别精密吸取 1，2，5，10，15，20 μL 的对
照品混合溶液，分别注入液相色谱仪中，按“2.1”
项下色谱条件测定色谱峰面积，红景天苷和绿原
酸的回归方程分别为 Y=1 423.8X+24.57，r=0.999 7；
Y=3 138.3X−0.005 4，r=0.999 9，表明红景天苷在
0.061 7~1.234 μg，绿原酸在 0.030 2~0.605 μg 呈良
中国现代应用药学 2012 年 10 月第 29 卷第 10 期 Chin JMAP, 2012 October, Vol.29 No.10 ·949·
好的线性关系。
2.5 仪器精密度试验
取同一批次大血藤供试品溶液，连续进样 6
次，进样量 10 µL，结果红景天苷和绿原酸的 RSD
分别为 0.30%，0.15%，仪器精密度良好。
2.6 稳定性试验
取同一批次大血藤供试品溶液，于 0，3，6，
9，12，18，24 h 进行测定，进样量 10 µL，结果
红景天苷和绿原酸的 RSD 分别为 0. 40%，0. 77%，
表明供试品溶液在 24 h 内稳定。
2.7 重复性试验
取同一批次大血藤药材 6 份，每份 0.5 g，精
密称定，按“2.3”项下方法制备，按“2.1”项下
色谱条件测定，进样量 10 µL，结果红景天苷和绿
原酸的 RSD 分别为 1.07%，0.98%，表明该方法重
复性良好。
2.8 加样回收率试验
取同一批次大血藤药材 6 份(编号 1)，每份
0.25 g，精密称定，分别精密加入适量红景天苷对
照品和绿原酸对照品，按“2.3”项下方法制备，
按“2.1”项下色谱条件测定，进样量 10 µL，分别
计算红景天苷和绿原酸的加样回收率，结果红景
天苷及绿原酸平均回收率(n=6)分别为 97.8%和
98.1%，RSD 分别为 1.9%和 1.7%，结果见表 1。
表 1 加样回收率试验
Tab 1 The recovery rate of added samples
被测成分 取样量/
g
原有量/
mg
加入量/
mg
测得量/
mg
回收率/
%
平均值/
%
RSD/
%
0.251 2 1.037 1.234 2.224 97.9
0.248 9 1.028 1.234 2.237 98.9
0.250 5 1.035 1.234 2.244 98.9
0.247 9 1.024 1.234 2.127 94.2
0.251 7 1.040 1.234 2.246 98.8
红景天苷
0.253 2 1.046 1.234 2.236 98.1
97.8 1.9
0.251 2 1.670 1.815 3.423 98.2
0.248 9 1.655 1.815 3.418 98.5
0.250 5 1.666 1.815 3.463 99.5
0.247 9 1.649 1.815 3.415 98.6
0.251 7 1.674 1.815 3.304 94.7
绿原酸

0.253 2 1.684 1.815 3.460 98.9
98.1 1.7
2.9 样品测定
取 3 批大血藤药材约 0.5 g，精密称定，按“2.3”
项下方法制备供试品溶液，分别精密吸取供试品
溶液 10 μL，进高效液相色谱仪测定，结果见表 2。
表 2 样品测定结果(n=3)
Tab 2 Determination results of sample(n=3)
红景天苷 绿原酸 编号
含量/% RSD/% 含量/% RSD/%
1 0.413 0.98 0.665 0.56
2 0.398 1.02 0.702 0.76
3 0.452 1.13 0.592 0.66
3 讨论
试验考察了甲醇、乙醇、水 3 种提取溶剂；
超声、回流 2 种提取方法；15，30，45 min 等提
取时间；最后确定以甲醇超声提取 30 min，提取
操作简便，效率高，且杂质干扰小。
本试验考察了甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.05
mol·L−1 磷酸二氢钾溶液、乙腈-0.1%磷酸水溶液 4
种流动相系统，发现前两者绿原酸峰峰形不理想，
且第 1 种系统基线不稳，而第 3 种系统分析时，因
含盐系统对仪器损耗较大，且分离效果也不好，最
后选择作为乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相系统。
目前中国药典 2010 年版大血藤项下尚无含量
测定项，而大血藤中大黄素、酚酸类、红景天苷
的含量测定方法文献[3-5]已有报道，但尚未见采用
高效液相转换波长法同时测定红景天苷和绿原酸
的含量的相关文献。红景天苷在 220 nm 波长处有
最大吸收，而绿原酸在 325 nm 波长处有最大吸收，
且干扰少，所以笔者采用转换波长法建立了同时
测定大血藤药材中红景天苷和绿原酸的 HPLC 测
定方法，选择在 15 min 从波长 220 nm 转换波长为
325 nm，能保证红景天苷和绿原酸都能在各自最
大吸收波长区域有稳定的紫外吸收，杂峰干扰也
减少，且不影响两者的紫外检测。
REFERENCES
[1] Ch.P(2010)Vol (Ⅰ 中国药典 2010 年版 .一部 ) [S]. 2010:
176-177.
[2] NI S F, FU C X, WU P. Progress in medical studies of
Sargentodoxa cuneata Rehd. et Wils [J]. Chin Wild Plant
Resour(中国野生植物资源), 2004, 23(4): 8-10.
[3] MA B Z, GAO Z P. Quantitative determination of emodin in
the vine of Sargentodoxa cuneata by RP-HPLC [J]. J Beijing
Univ Tradit Chin Med(北京中医药大学学报), 2005, 28 (1):
57-59.
[4] DENG C,YAN Y G. Multi-index evaluation of extraction of
phenolic compounds from Sargentodoxa cuneata [J]. Chin J
Exp Tradit Med Form(中国实验方剂学杂志), 2011, 17 (13):
12-14.
[5] SHI L L,GUI S Y,ZHOU J F. Determination of salidroside in
Sargentodoxa cueata by HPLC [J]. Anhui Med Pharm J(安徽
医药), 2011, 15(4): 441-442.
收稿日期：2012-01-18