全 文 ：中国雇 学 通报 , 一
苦葛提取物抑菌活性初步研究
王 静 , 黄林普 , 王 一 , 肖 春 , 叶 敏 , 范黎明 , 查友贵
农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室 农业生物多样性应用技术国家工程研究中心
云南农业大学植物保护学院 , 昆明
摘 要 研究苦葛提取物的抑菌活性 , 为利用苦葛开发高效 、安全 、 与环境友好的新型生物农药莫定基础 ,
为苦葛资源的综合开发利用提供理论依据 。 采用菌丝生长速率法 , 测定苦葛提取物对水稻纹枯病菌、 梨
黑星病菌 、 燕麦镰刀病菌 、 番茄早疫病 菌和烟草赤星病菌等植物病原菌菌丝生长的抑制作用 。 苦葛提取
物对水稻纹枯病菌菌丝生长具有很强的抑制作用 , 随着浓度的提高 , 抑制作用增强 , 其毒力回归方程为
产 , 相 关系数 为 , 曰少”值为 苦葛提取物对梨黑星病菌 、 燕麦镰刀
病 菌、 番茄早疫病 菌、 烟草赤星病菌的菌丝生长也具有较强的抑制作用 , 在 浓度下 , 菌丝生长
抑制率均达 以上 。 苦葛提取物具有很强的抑菌活性 , 并且具有较广的杀菌谱 , 值得进一步深入研究
开发新型生物农药 , 并进行综合开发利用 。
关键词 苦葛 植物提取物 抑菌活性
中图分类号 文献标志码 论文编号 一
八刃 初 “
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引言
苦葛「几 。〔加 泛 姑 , 豆科
葛属 , 又名云南葛藤 、 白苦葛 、 红苦葛 云南 , 为缠绕草
本 , 生长于海拔 的地区 , 多生长在荒地及
基金项目 云南省教育厅基金项目“ 苦葛提取物抑菌活性初步研究 ” 。
第一作者简介 王静 , 女 , 年出生 , 河南安阳人 , 讲师 , 硕士 , 主要从事生物多样性与农药安全及生物资源开发利用研究 。 通信地址 云南
省昆明市北郊黑龙潭 云南农业大学植物保护学院 , 一 , 一 ·
通讯作者 查友贵 , 男 , 年出生 , 湖北英山人 , 讲师 , 硕士 , 主要从事生物多样性与农药安全研究 。 通信地址 云南省昆明市北郊黑龙潭 云
南农业大学植物保护学院 , 一 , 一 · ·
收稿日期 一 一 , 修回日期 一 一 。
王 静等 苦葛提取物抑菌活性初步研究
杂木林中 , 广泛分布于 印度 、 锡金 、 克什米尔 、 尼泊尔 、
缅甸以及 中国等地 〕。 在中国 , 四川 、 西藏 、 广西 、 贵
州 、 云南等省都有分布 , 尤以云南分布最为广泛 , 昆明 、
鲁甸 、 威信 、 镇雄 、 剑川 、鹤庆 、 会泽 、 禄劝 、 大姚 、 篙明 、
楚雄 、 峨山 、 新平 、 广通 、 永胜 、 宾川 、 大理 、 景东 、 临沧 、巍
山 、 腾冲 、 蒙自、 绿春 、 勋海 、 景洪等县均有大量苦葛 。
苦葛根有毒 , 入药有清热解毒 、 生津止渴和杀虫之
功效 , 能治风热感 冒 、 咳嗽 、 口渴 、 痘疹不透 〕。 因此 ,
苦葛在医药上的应用有一定研究 。 应用苦葛 , 先后发
明了戒毒药 、 抗癌益寿茶 、 中药沐浴液 , 并申请了专利降 〕。
许多医学工作者对苦葛的化学成分也进行了深入研
究 , 先后从中分离出了一些化合物 。 从苦葛全草中 , 王
刚等 〕分离鉴定 了 个齐墩果烯型三菇 、 个幽醇和
个脂肪酸甘油酷 张晓璐等 〕分离得到 个齐墩果烯型
三菇皂昔 、 个异黄酮化合物 、 个羽扇豆烷型三菇和
个幽醇 。 从苦葛根中 , 分离得到一个引垛生物碱 、 个
齐墩果烯型三菇皂昔 一 〕 曾明等 〕分离得到 个齐墩
果烯型三菇化合物 。 从苦葛蔓中 , 丁立生等 〕分离得
到 个齐墩果烯型五环三菇化合物 。 曾明等 〕研究表
明 , 苦葛根挥发油主要含脂肪酸酷类 。 在民间 , 苦葛
根 、 藤叶切碎撒到 田里 , 既可作肥料又可以杀虫 。 人们
对苦葛的杀虫活性进行了研究 , 结果表明 , 苦葛提取物
对玉米螟和菜粉蝶有较强的拒食活性和毒杀活性 〕 ,
对玉米绩管蚜有明显的触杀活性 日 〕, 对蚜虫 、 红蜘蛛和
粘虫有较好的防治效果 一 〕, 对软体动物蜻蜿也有很好
的毒杀作用 。
苦葛具有较好的医用活性和农用杀虫活性 , 但其
具体活性成分尚不清楚 〕。 项 目组前期对 多种植
物抑菌活性进行了筛选 , 结果表明 , 苦葛提取物具有很
强的抑菌活性 。 本研究拟对苦葛的抑菌活性进行深
入研究 , 为开发高效 、 安全 、 与环境友好的新型生物农
药奠定基础 , 为苦葛资源的综合开发利用提供理论
依据 。
材料与方法
试验材料
供试植物 苦葛 , 采自云南省禄丰县碧城镇 。
供试 病原菌 水稻纹枯病菌 万 、 。翻刀力、
梨黑星病菌 论刀彻拍 了万之初 、 燕麦镰刀病菌 二
二 叱二 、 番茄早疫病菌 了枷 力和烟草赤星病菌 把 泛 刁把阴 哟由云南农业大学农业生物
多样性与病虫害控制教育部重点实验室提供 。
主 要 仪器及 试 剂 旋转蒸发 仪 , 型 号 为
, 由上海亚荣生化仪器厂生产 智能光照培养箱 ,
型号为 , 由宁波江南仪器厂生产 精密电子天平 ,
型号为 , 由上海精科天平仪器厂生产 超净工
作台 , 型号为 丫 一 , 由苏净集团安泰公司生产
灭菌锅 , 型号为 , 由上海核子仪器厂生产 水
浴锅 , 型号 为 一 , 由郑州长城科工贸有限公
司生产 微型植物粉碎机 , 型号为 , 由天津泰斯
特仪器公司生产 甲醇 、 丙酮等试剂均为市售分析纯 。
试验方法
苦葛提取物的制备 将采集的苦葛阴干 , 然后置
于 电热恒温鼓风干燥箱在 ℃下进一步烘干 , 再用粉
碎机粉碎 过 目筛 , 得苦葛植物粉 , 用密封袋密
封 , 避光保存 。
取适量苦葛植物粉 , 用滤纸包好 , 置于索氏提取器
中 , 加入足量甲醇 , 在 ℃下进行提取 , 直到索氏提取
器中溶液无色为止 。 用旋转蒸发仪把提取液浓缩至膏
状 , 即得苦葛提取物 。 刮下提取物 , 装入棕色广 口瓶
中 , ℃冰箱中保存 。
苦葛提取物对水稻纹枯病菌菌丝生长的影响 用
丙酮溶解苦葛提取物 , 与 培养基混合 , 配制
成 、 、 、 、 系列浓度的
带毒培养基 , 以 丙酮为对照 , 以水稻纹枯病菌为供
试病菌 , 以菌丝生长速率法进行抑菌活性测定 〕 , 求出
毒力回归方程 、 相关系数 和 石 。值 。
苦葛提取物对其他几种植物病原菌菌丝生长的
影响 用 丙酮溶解苦葛提取物 , 与 培养基混
合 , 配制成 的带毒培养基 , 以菌丝生长速率
法测定苦葛提取物对梨黑星病菌 、 燕麦镰刀病菌 、 番茄
早疫病菌 、 烟草赤星病菌的抑菌活性圈 。
数据分析 应用 和
进行数 据 分析 和
统计 。
结果与分析
苦葛提取物对水稻纹枯病 菌菌丝生长的影响
以菌丝生长速率法测定了 、 、 、
、 系列浓度梯度的苦葛提取物对水稻纹
枯病菌菌丝生长的抑制作用 , 结果表明 , 随着浓度的提
高 , 苦葛提取物对水稻纹枯病菌菌丝生长的抑制作用
增强 , 其毒力回归方程为产 , 相关系数
为 , 石 。值为 表 和图 。
苦葛提取物对其他 种植物病 原菌菌丝生长的
影响
以菌丝生长速率法测定 了 苦葛提取物
对梨黑星病菌 、 燕麦镰刀病菌 、 番茄早疫病菌 、 烟草赤
星病菌的抑制作用 , 结果表明 , 在 浓度下 , 苦
葛提取物对这 种植物病原菌都表现出了较强的抑制
.3 1 4
. 中国农学通报
表 苦葛提取物对水稻纹枯病菌菌丝生长的抑制作用
编号 供试浓度 们止 菌丝生长抑制率 戈士呈 显著性
士
士
石 士
〔讲 士
士
注 所有试验结果均为 次重复的平均值 同列数据具相同小写字母者表示在 水平上差异不显著 , 具相同大写字母者表示在 住 水
平上差异不显著 法 。
浓度对数
图 苦葛提取物对水稻纹枯病菌的抑制作用
的抑制作用 , 菌丝生长抑制率均达 以上 。 因此 , 苦
葛提取物具有较强的抑菌活性 , 且具有较宽的杀菌谱 ,
值得进一步深入研究开发新型生物农药 。
前人研究结果表明 , 苦葛在医药上具有较好的应
用价值 , 对农业害虫具有较强的毒杀活性 , 具有较好的
应用前景 。 本研究结果表明 , 苦葛提取物具有较强的
抑菌活性 , 且具有较宽的杀菌谱 , 有望进一步研究开发
为生物杀菌剂 。 本研究为苦葛资源的综合开发利用提
供了一条新的途径 。
本研究仅对苦葛提取物的抑菌活性进行了初步研
究 , 关于其活性成分 、 作用机理 、 田 间效果等尚有待进
一步深入研究 。
恻哥宾
作用 , 菌丝生长抑制率均达 以上 , 分别为 士
、 士 、 士 和 士
见表 。
结论与讨论
表 苦葛提取物对 种真菌菌丝生长的抑制作用
编号 供试病菌 菌丝生长抑制率工士
梨黑星病菌 认幻伽角了川川
燕麦镰刀病菌 “ 朋川
番茄早疫病菌 ” 列
烟草赤星病菌 枷 ” 闷
士
士
士
士 石
注 所有试验结果均为 次重复的平均值 。
本研究对苦葛提取物对植物病原菌的抑制作用进
行了深入研究 , 结果表明 , 苦葛提取物对水稻纹枯病菌
有很强的抑制作用 , 石 。值为 。 且苦葛
提取物在 浓度下对梨黑星病菌 、 燕麦镰刀病
菌 、 番茄早疫病菌 、 烟草赤星病菌等 种病菌也有较强
参考文献
中国科学院中国植物志编辑委员会编 中国植物志 第 卷 「
北京市 科学出版社 ,
郑水庆 , 曾明 云南葛属药用植物资源调查 中草药 ,
李荣昌戒毒药 中国专利 , ,
陈荣春 抗癌益寿茶 中国专利 , ,
云南省药物研究所一种中药沐浴液「 中国专利, ,
王刚,麻兵继 ,刘吉开 滇产苦葛化学成分研究 中草药 ,
一
张晓熔 ,王明奎 ,彭树林 ,等 葛根的化学成分研究 英文 中草药 ,
一
, , ,
尹 滋 ,
, , 、 厂卜、 一
叩 尹
一
, , 、 一
尹 ,
李娜 ,杨若林 , 闰知大 ,等 云南葛的化学成分研究 中国药科大学
王 静等 苦葛提取物抑菌活性初步研究
学报 , 一 ·
曾明 , 易杨华 ,郑水庆 ,等 苦葛根中的新三菇成分 药学学报 ,
, 一
丁立生 ,窦永泽 ,张晓 ,等 苦葛蔓中的新三菇成分 药学学报 ,
一
曾明 ,郑水庆 苦葛根挥发性成分分析 中药材 , 一
李彪 , 叶敏 ,熊智 ,等 苦葛不同溶剂提取物对玉米螟和菜粉蝶幼虫
的生物活性 江苏农业科学 , 一
施蕊 ,李彪 ,华燕 ,等 苦葛藤提取物对玉米蚜虫的杀虫活性初报
农药 , 一
陈煌 土法治蚜虫价廉效果好 四川农业科技 ,
充分发挥土农药的作用 昆虫知识 , 一 ·
毛焕旭 绿色无公害农药及其制备方法 中国专利, ,
陶家凤 ,叶华智 ,谢大竟 ,等 苦葛根毒杀蜻蝙初步观察 植物保护 ,
王静 ,范黎明, 肖春 ,等 中药苦葛资源开发与利用研究进展 安徽
农业科学 , , 一
王静 ,毛 自文 , 范黎明,等 种植物提取物抑菌活性研究「 安徽农
业科学 , 一
陈年春 农药生物测定技术「 北京 北京农业大学出版社 ,
一
,
,