全 文 ：第２５卷第４期 华　夏　医　学 Ｖｏｌ．２５Ｎｏ．４
２０１２年６月 Ａｃｔａ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｅ　Ｓｉｎｉｃａ　 Ｊｕｎｅ，２０１２

丙酮沉淀法提取杠板归多糖的工艺研究①
黄家伟１②，王非非２，邱玉婷２，曹庆生２，邹登峰２③
（１．南宁市青秀区南阳中心卫生院，广西 南宁　５３０２０８；２．桂林医学院，广西 桂林　５４１００４）
摘要：目的：探讨丙酮沉淀法提取杠板归多糖的最佳工艺条件。方法：以杠板归为研究对象，以水为溶
剂提取杠板归多糖，提取液用丙酮进行沉淀，选取离心时间、沉淀时间和沉淀剂用量３个因素做单因
素进行正交实验，探索最佳提取条件。结果：丙酮加入量７５ｍｌ、沉淀时间１８ｈ和离心时间１８ｍｉｎ是
丙酮沉淀法提取杠板归多糖的最佳工艺条件。结论：确定了丙酮沉淀法提取杠板归多糖的最佳工艺
条件。
关键词：杠板归；多糖；丙酮沉淀法；正交试验
中图分类号：Ｏ６－３３２　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００８－２４０９（２０１２）０４－０４８４－０３
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ａｃｅｔｏｎｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｆｒｏｍ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｐｅｒｆｏｌｉａｔｕｍ／ＨＵＡＮＧ　Ｊｉａ－ｗｅｉ　１，
ＷＡＮＧ　Ｆｅｉ－ｆｅｉ　２，ＱＩＵ　Ｙｕ－ｔｉｎｇ２，ｅｔ　ａｌ．／／１．Ｎａｎｙａｎｇ　Ｃｅｎｔｅｒ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｑｉｎｇｘｉｕ ，Ｎａｎｎｉｎｇ
５３０２０８，Ｃｈｉｎａ；２．Ｇｕｉｌｉｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕｉｌｉｎ　５４１００４，Ｃｈｉｎａ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｆｒｏｍＰｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｐｅｒ－
ｆｏｌｉａｔｕｍｂｙ　ａｃｅｔｏｎｅ　ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｗｉｔｈ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｐｅｒｆｏｌｉａｔｕｍａｓ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｂｊｅｃｔ
ａｎｄ　ｗａｔｅｒ　ａｓ　ｓｏｌｖｅｎｔ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｅａ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｕｎｄｅｒ　ｃｅｒｔａｉｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅｄ
ｗｉｔｈ　ａｃｅｔｏｎｅ．Ｔｈｅ　ｃｈｏｉｃｅｓ　ｌｅｖｅｌ　ｓｕｃｈ　ａｓ　ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ　ｔｉｍｅ，ｔｈｅ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｅ　ａｎｄ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ
ｔｉｍｅ　ｗｅｒｅ　ｍａｄｅ　ｂｙ　ｓｉｎｇｌｅ　ｆａｃｔｏｒ　ｔｅｓｔｓ　ａｎｄ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔｓ．Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｏｂ－
ｔａｉｎｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｅ　ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ
ｗｅｒｅ：ｔｈｅ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｅ　ｂｅｉｎｇ　７５ｍｌ，ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ　ｔｉｍｅ　ｂｅｉｎｇ　１８ｍｉｎ，ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ｂｅｉｎｇ　１８
ｈ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｆｒｏｍＰｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｐｅｒｆｏｌｉａｔｕｍｉｓ　ｄｅ－
ｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ａｃｅｔｏｎｅ　ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｐｅｒｆｏｌｉａｔｕｍ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ａｃｅｔｏｎｅ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ
　　杠板归（Ｐｅｒｆｏｌｉａｔｅ　Ｋｎｏｔｗｅｅｄ　Ｈｅｒｂ），植物学名
为：Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｐｅｒｆｏｌｉａｔｕｍ，为双子叶植物，蓼生草
本属蓼科植物。近年来主要是对杠板归的黄酮类、蒽
醌类、苯丙素等成分研究［１］。我国民间常用于化瘀补
血，清热解毒，活血化瘀等，近年动物实验表明杠板归
对肿瘤有抑制作用。杠板归含有酚类、有机酸、生物
·４８４·
①
②
③
基金项目：广西中医药管理局中医药科技项目（ＧＺＫＺ０９－５２）；桂林市科技局科学技术研究与开发项目（２０１２０１０５－９）。
作者简介：黄家伟（１９７４－），男，广西南宁人，１９９８年毕业于广西中医学院，药学本科，现任南宁市青秀区中心卫生院主管中药师，从事中医药
应用研究。
通信作者：邹登峰，副教授，从事天然药物的开发与研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｄｆ１２２６＠１６３．ｃｏｍ。
碱、氨基酸、鞣质、黄酮、蒽醌、甙类、糖类、植物甾醇及
三萜类等化学成分，具有利水消肿、清热解毒和止咳
作用。用于肾炎水肿、百日咳、泻痢、湿疹和疖的治
疗［２］。目前关于杠板归多糖的丙酮浸提工艺的研究
尚未见报道，笔者通过单因素实验和正交实验初步探
讨丙酮沉淀法提取杠板归的最佳工艺，为杠板归资源
的开发与利用提供实验和理论依据。
１　材料、仪器与实验方法
１．１实验材料
研究对象：杠板归，于２０１１年７月５日采自广西
壮族自治区南宁，经广西中医学院药用植物教研室韦
松基教授鉴定为真品，且药材符合《中国药典》２０１０
版相关项目规定，阴干，粉碎，备用。
１．２　实验试剂
丙酮，９５％乙醇，均为ＡＲ，西陇化工股份有限公
司；无水石油醚，为ＡＲ，成都市科龙化工试剂厂。
１．３　实验仪器
ＨＨ－Ｓ恒温水浴锅，由上海特迅公司生产；台式
离心机 ＴＤＬ８０－２Ｂ，上海安亭科学仪器厂生产；
Ｂ２２００Ｓ－Ｔ台式超声波清洗机由上海之信仪器公司生
产；玻璃仪器气流烘干机，陕西常仪实业公司生产；
ＵＶ－９６００紫外可见分光光度计，日本岛津公司生产。
１．４　实验方法
１．４．１　实验总流程　杠板归→取样→剪碎→温水浸
提→沉淀剂沉淀→离心得沉淀物→无水乙醇、丙酮、
无水石油醚交替搅拌洗涤２次→干燥→得粗杠板归
多糖→称量［３］。
１．４．２　丙酮沉淀法的实验研究　用浸提温度７０℃，
浸提时间６０ｍｉｎ，液固比２５∶１，浸提次数为２次的
浸提液，选取丙酮做沉淀剂，按照不同的实验条件分
别沉淀浸提液中的多糖，离心后，干燥６ｈ，称重［４－６］。
１．４．３　单因素实验　离心时间的影响：取浸提
液５０ｍｌ，选取浸提液：丙酮为１∶２进行沉淀操作，静
置时间为１５ｈ，离心时间分别为９ｍｉｎ，１２ｍｉｎ，１５
ｍｉｎ，１８ｍｉｎ，２１ｍｉｎ（４　０００ｒ／ｍｉｎ），沉淀物分别用无水
乙醇、丙酮、无水石油醚交替搅拌洗涤２次，干燥后称
重，分析离心时间的影响。沉淀时间的影响：取浸提
液５０ｍｌ，选取浸提液：丙酮为１∶２进入沉淀操作，
分别静置９，１２，１５，１８，２１ｈ，然后离心１５ｍｉｎ（４　０００
ｒ／ｍｉｎ），沉淀物分别用无水乙醇、丙酮、无水石油醚
交替搅拌洗涤２次，干燥后称重，分析沉淀时间的影
响。丙酮加入量的影响：取浸提液５０ｍｌ，丙酮分别
为１．５∶１，１∶１，１∶１．５，１∶２，１∶２．５加入到浸提液
中，静置１５ｈ，然后离心１５ｍｉｎ（４　０００ｒ／ｍｉｎ），沉淀
物分别用无水乙醇、丙酮、无水石油醚交替搅拌洗涤
２次，真空干燥后称重，分析沉淀剂加入量的影响。
１．４．４　丙酮沉淀法正交实验设计　由单因素实验结
果确定一个３因素、３水平的正交实验，３因素分别为
离心时间、沉淀时间、丙酮加入量；离心时间的３个水
平分别是１３，１５，１７ｍｉｎ；沉淀时间的３个水平分别
是１０，１２，１４ｈ；浸提液：丙酮的 ３ 个水平分别
是１∶１，１∶１．５，１∶２；。离心机转速为４　０００ｒ／
ｍｉｎ，沉淀物分别用无水乙醇、丙酮、无水石油醚交替
搅拌洗涤２次，干燥后称重，得出较佳的实验条
件［７－８］。
２　结果与讨论
２．１　单因素实验结果
２．１．１　离心时间对提取粗杠板归多糖的影响　离心
时间为９，１２，１５，１８，２５ｍｉｎ时，杠板归多糖沉淀分别
２．３，２．８，３．３，３．７，和３．８ｍｇ，随着时间的延长，杠板
归多糖沉淀量增加，１８ｍｉｎ以后趋于平缓，所以离心
时间１８ｍｉｎ左右较好。
２．１．２　沉淀时间对提取粗杠板归多糖含量的影响　
沉淀时间为９，１２，１５，１８，２１ｈ时，获得粗杠板归多糖
得的量分别为１．２，１．８，２．９，２．９和２．６ｍｇ，随着沉
淀时间的延长，杠板归多糖沉淀量增加，１５ｈ以后趋
于平缓。
２．１．３　沉淀剂加入量对提取粗杠板归多糖含量的影
响　沉淀剂加入量在５０～７５ｍｌ之间，杠板归多糖含
量有明显的增加，以后随着沉淀剂加入量的增大，杠
板归多糖沉淀量反而有所下降，表明沉淀剂加入量在
这一区间较合适，见表１。
·５８４·
第４期　　　　　　　　　黄家伟等：丙酮沉淀法提取杠板归多糖的工艺研究　　　　　　　　　第２５卷
表１　沉淀剂加入量对提取粗杠板归多糖的影响
浸提液：丙酮（Ｖ∶Ｖ）１．５∶１　 １∶１　 １∶１．５　 １∶２　 １∶２．５
丙酮加入量（ｍｌ） ３３．３３　 ５０．００　 ７５．００　 １００．００　１２５．００
粗杠板归多糖（ｍｇ） ２．５　 ３．１　 ３．９　 ３．２　 ２．１
２．２　正交实验方案及结果分析
各列极差Ｒ的大小，说明该列相应的因素在实
验中对指标作用的大小，极差大的因素往往是重要的
因素，极差小的因素可能是不重要的因素。表中第２
列的极差０．００１９比其他各列的Ｒ都大，说明丙酮加
入量是重要因素，丙酮加入量７５ｍｌ比５０ｍｌ能明显
提高多糖得率。第一列的极差０．００１２比其他各列的
极差都小，说明离心时间对得率的影响不大，实验方
案及结果见表２，３。
表２　因素水平表
因素 １　 ２　 ３
离心时间Ａ（ｍｉｎ） １５　 １８　 ２１
丙酮加入量Ｂ（ｍｌ） ５０　 ７５　 １００
沉淀时间Ｃ（ｈ） １５　 １８　 ２１
表３　正交实验方案及结果
试剂号
离心时间
（ｍｉｎ）
丙酮加入量
（ｍｌ）
沉淀时间
（ｍｉｎ）
粗杠板归多
糖的量（ｍｇ）
１　 １５　 ５０　 １５　 ２．１
２　 １５　 ７５　 １８　 ２．６
３　 １５　 １００　 ２１　 ２．０
４　 １８　 ５０　 １８　 １．９
５　 １８　 ７５　 ２１　 ２．３
６　 １８　 １００　 １５　 ２．４
７　 ２１　 ５０　 ２１　 ２．０
８　 ２１　 ７５　 １５　 ３．１
９　 ２１　 １００　 １８　 ２．７
Ｒ　 ０．００１２　 ０．００１９　 ０．００１３
３　讨论
采用Ｒ的大小，可以大致排出各因素的主次顺
序，即丙酮加入量＞沉淀时间＞离心时间。由上面分
析可得各因素水平最好搭配为：Ａ２Ｂ２Ｃ２。由于算过
的搭配不在已做过的实验中，为此需做验证实验，即
在同样的提取条件下，沉淀条件为：丙酮加入量７５
ｍｌ，沉淀时间为１８ｈ，离心时间１８ｍｉｎ。在此条件下
所得粗杠板归多糖量为４．１ｍｇ。所以确定丙酮沉淀
法的最佳沉淀条件为：丙酮加入量７５ｍｌ，沉淀时间
为１８ｈ，离心时间１８ｍｉｎ。
本实验建立的检测方法简便、快速，具有较强的
实用性。在实验过程中选择丙酮作为提取溶剂，考察
了提取时间对杠板归多糖的影响，实验通过单因素实
验和正交实验结果得出，杠板归多糖提取过程中，丙
酮沉淀法最佳工艺条件为：丙酮加入量７５ｍｌ，沉淀
时间为１８ｈ，离心时间１８ｍｉｎ。
参考文献：
［１］赵超，陈华国，龚小见，等．杠板归的化学成分研究（Ⅱ）
［Ｊ］．中草药，２０１０，４１（３）：３６５－３６７．
［２］李红芳，赵有兴，刘玉清，等．杠板归化学成分及药理作用
研究进展［Ｊ］．安徽农业科学，２００８，３６（２７）：１１７９３－１１７９４．
［３］陈海霞，谢笔钧．茶多糖不同提取工艺的比较研究［Ｊ］．食
品工业科技，２００１：２２（２）：１８－１９．
［４］杨其林，刘钟栋，任健，等．采用ＣＴＡＢ沉淀法提取茶多糖
［Ｊ］．食品与发酵工业，２００４，３０（１０）：１３９－１４２．
［５］任健，杨志宏，刘钟栋．丙酮沉淀法提取茶多糖研究［Ｊ］．
杭州食品科技，２００４，７２（１）：１０－１４．
［６］谢爱泽，邹登峰，章艳，等．丙酮沉淀法提取金花茶多糖的
研究［Ｊ］．安徽农业科学，２０１１，２５（１２）：１５２６８－１５２６９．
［７］程海涛，刘娟，刘德江，等．正交试验法优化刺五加多糖的
提取工艺［Ｊ］．佳木斯大学学报：自然科学版，２０１１，２９（２）：
３１１－３１３．
［８］程力惠，王建壮，卢丽霞，等．正交设计优选巴戟天中多糖
提取工艺［Ｊ］．中药材，２０１０，１（７）：１２５－１２７．
［收稿日期：２０１２－０１－１９］
［责任编辑：向　秋　英文编辑：田　晶］
·６８４·
第４期　　　　　　　　　　　 　　　　　华　夏　医　学　　　　　　　　　　　　　　　 　第２５卷