全 文 ：收稿日期:2005-03-08; 修订日期:2005-08-11
作者简介:汪 燕(1968-),女(藏族),新疆人 ,现任石河子大学医学院第
一附属医院药剂科副主任药师 ,学士学位 ,主要从事药学工作.
天山大黄黄酮提取方法的比较
汪 燕
(石河子大学医学院第一附属医院药剂科 ,新疆 石河子 832000)
摘要:目的:从天山大黄中提取总黄酮并测定其含量。方法:运用超声技术连续提取天山大黄总黄酮 , 用比色法测定总黄
酮含量。结果:测得天山大黄中总黄酮含量 0.357%, 平均回收率为 98.86%, RSD=1.35%(n=6)。结论:首次运用超声
技术从天山大黄中连续提取总黄酮 、多糖 , 速度加快 ,收率提高。
关键词:超声提取; 天山大黄; 总黄酮; 含量测定
中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2005)11-1118-01
ComparisonofExtractWayofTotalFlavonoidsofRheumwitrochiL.
WANGYan(DepartmentofPharmacy, TheFirstAfiliatedHospitalofShiheziMedicalColege, Shihezi, Xinjiang832002,
China)
Abstract:Objective:TotalflavonoidswereextractedfromRheumwitrochiiL.byultrasonicmethod, andthecontentwasdeter-
mined.Methods:Totalflavonoidswereextractedbyultrasonicmethod, andthecontentwasdeterminedbyspectrophotometer.Re-
sults:ThetotalflavonoidscontentofRheumwitrochiiL.was0.357%, recoveryratewas98.86%.Conclusion:Itisthefirsttime
toextracttotalflavonoidsfromRheumwitrochiiL.byultrasonicmethod, ultrasonicextractionisabettermethodfortotalflavonoids
ofRheumwitrochiL.
Keywords:Ultrasonicextraction; RheumwitrochiiL.; Totalflavonoids; Contentdetermination
天山大黄(RheumwitrochiL.), 多年生草本 , 主要生长在天
山山脉 , 为新疆特有大黄品种。维吾尔语发音 “热万”。维吾尔
族民间用于治疗血小板减少症 、闭经 、痢疾 、通淋不利等症 [ 1] 。
目前 , 对天山大黄蒽醌成分研究很多 , 而对其黄酮研究较少。药
理研究表明 , 天山大黄黄酮具有降血脂 、改善心肌功能的作
用 [ 2] 。为正确评价天山大黄的药材质量 , 我们首次运用超声技
术从天山大黄中连续提取总黄酮 [ 3]并测定其含量 , 结果令人满
意。
1 仪器 、试剂及样品
1.1 仪器 岛津 UV-2401PC紫外可见分光光度计 , DL-360超声
波仪(35kHz,浙江象山县石浦海天电子仪器厂), TG328B分析天
平 , DZKW-C电子恒温水浴(北京光明医疗仪器厂), R-201旋转
蒸发器(上海申胜生物技术有限公司), 索氏提取器。
1.2 材料与试剂 对照品芦丁购自中国药品生物制品检定所。
其余试剂均为分析纯。天山大黄:采自天山北坡新疆沙湾县林场
内 , 经石河子大学生物学院何敬琨教授鉴定为 Rheumwitrochii
L.。秋后采挖 , 洗净 , 切片晾干 , 破碎后备用。取天山大黄粉末
0.5 g,加甲醇 5 ml振摇后放置 30 min, 滤过。取滤液点在滤纸
上 , 在紫外灯下(365nm)处观察 ,天山大黄显亮紫色 [ 1] 。
2 天山大黄中黄酮提取与含量测定
2.1 样品溶液制备 取天山大黄样粉约 2 g,精密称定 , 置索氏提
取器中 , 用石油醚(60 ～ 90℃)水浴回流脱脂 2次(2h/次)。残渣
挥干溶剂后 ,置锥形瓶中 , 加 85%的乙醇 50 ml, 浸泡 12 h, 分别
超声提取 1, 2, 3次 ,每次 20, 30, 40 min。过滤 , 另用少量 85%乙
醇多次洗涤滤渣 , 并入提取液 , 并转入 100 ml容量瓶中 , 用 85%
乙醇定容 , 摇匀 , 即得测总黄酮的天山大黄样品液。 按标准曲线
的制定法 , 确定提取 2次 , 30 min/次吸收度最大。
2.2 总黄酮含量测定
2.2.1 标准曲线的制定 精密称取 120℃干燥恒重的芦丁对照
品 10 mg, 加 85%乙醇溶解 , 定容至 50ml容量瓶中 , 摇匀 ,制成浓
度为 0.2 g/L的对照品溶液。分别取对照品溶液 0.0, 0.2, 0.5,
1.0, 2.0, 3.0, 4.0ml于 10 ml容量瓶中 ,加 5%亚硝酸钠 0.4 ml,
放置 6 min后 , 加 10%硝酸铝 0.4ml,放置 6min,再加 4%的氢氧
化钠 4 ml,加水至刻度 , 摇匀 ,放置 15 min, 进行全波长扫描 , 在
510 nm处均有最大吸收。 以测定结果计算得直线方程 C=
79.23A-0.459, r=0.998 1。在 4 ～ 80 μg/ml的范围内 , 浓度与
吸收度有良好的线性关系。
2.2.2 样品含量测定 精密吸取供试品溶液 1.0ml, 置 10ml容
量瓶中 ,按标准曲线的制定项下相同的方法显色测定。通过标准
曲线 , 计算出样品总黄酮的含量。见表 1。
表 1 天山大黄黄酮含量
测定
次数
超声含量
(%)
总黄酮
( x±s)
RSD
(%)
常规含量
(%) X
1 0.361 0.357 0.301
2 0.357 ±0.004 6 1.29 0.296 0.304
3 0.352 0.315
2.2.3 定性分析
2.2.3.1 还原反应 ,将样品溶于乙醇 ,加入少量镁粉振摇 ,滴加
几滴浓盐酸 ,静置 1 ～ 2 min, 显红紫色。
2.2.3.2 络合反应 , 样品加入 1%三氯化铝溶液中 , 生成络合
物为黄色(λmax=415 nm),并有荧光。
2.2.4 回收率实验 取天山大黄样粉约 0.5 g, 精密加入芦丁对
照品 2 mg, 依法提取 、测定 , 结果平均回收率为 98.86%, RSD=
1.35%(n=6)。
2.2.5 精密度 精密吸取供试品溶液 1.0 ml共 5份 ,分别置 10
ml容量瓶中 ,按标准曲线的制定项下相同的方法显色测定(每隔
5 min测 1次 ,连续 5次)。通过标准曲线 , 计算出样品总黄酮的
含量。平均值为 0.351%, RSD=1.3%, 精密度良好。
2.2.6 重复性 称取天山大黄样品 5份 ,分别按 2.l项下操作 ,
依法测定 ,其含量结果为 0.357%, RSD=1.29%。
2.2.7 稳定性实验 按样品测定方法操作 , 测定同一供试液在不
同时间吸收度。结果表明 , 吸收度值在 5 ～ 45 min内基本不变。
因此测定应控制在 45 min内完成。
2.3 常规法提取 取天山大黄样粉 3份 , 每份约 2 g, 精密称定 ,
置索氏提取器中 ,用石油醚(60 ～ 90℃)水浴回流脱脂 2次(2 h/
次)。残渣挥干溶剂后 , 置锥形瓶中 , 加 85%的乙醇 50 ml, 浸泡
12 h,恒温 60℃水浴加热回流分别提取 12、24、 36 h。过滤 , 另用
少量 85%乙醇多次洗涤滤渣 ,并入提取液 , 并转入 100 ml容量瓶
中 , 用 85%乙醇定容 , 摇匀 , 即得测总黄酮的天山大黄样品液。
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时珍国医国药 2005年第 16卷第 11期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2005VOL.16NO.11
精密吸取供试品溶液 1.0 ml, 置 10 ml容量瓶中 , 按标准曲线的
制定项下相同的方法显色测定 。通过标准曲线 ,计算出样品总黄
酮的含量 , 结果见表 1。
3 讨论
超声技术已经广泛应用于总黄酮的提取 [ 3] , 可以大幅度地
提高总黄酮的提出率 , 极大地缩短提取时间 , 节省溶剂。超声提
取一般在常温条件下进行 , 避免了黄酮的分解。超声波破碎过程
是一个物理过程 , 浸提过程中无化学反应 , 被浸提的生物活性物
质在一定时间内保持不变 , 所提黄酮为常规法的 1.17倍。因此 ,
采用超声法提取天山大黄总黄酮 ,可避免因结构改变而使后续的
结构分析及药理活性研究产生错误的结论。超声法所用仪器简
单 , 操作方便 ,且自动化程度高 ,便于大规模工业生产。
参考文献:
[ 1 ] LiuYM, TheRecordofHerbalMedicineofWElWUERNation[ M] .
Urumuqi:XinjiangScienceandTechnologysPublishingHouse, 1999,
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[ 2 ] EditorCommitesofChineseHerbalMedicineofXinjiang.TheChinese
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[ 3 ] ZhaoB, WangYC, OuYF, eta1.ultrasonictechiqueappliedinextrac-
tionofplant[ J] .ChinTraditHerbDrug, 1999, 3(9):S-i-i.
收稿日期:2005-01-24; 修订日期:2005-09-08
作者简介:沈瑞君(1968-),女(汉族),河南人 ,现任河南省漯河市第三人
民医院药剂科主管药师 ,学士学位 ,主要从事药品和医疗器械的管理和经
营工作.
复方薄荷滴鼻液的制备与临床应用
沈瑞君 , 王 凯
(河南省漯河市第三人民医院 462000; 2.河南省安阳市人民医院 455000)
摘要:目的:探索复方薄荷滴鼻液的制备方法 、质量控制和临床疗效。方法:将复方薄荷滴鼻液用于萎缩性鼻炎患者 , 进
行临床疗效观察。结果:治疗 90例 , 治愈 69例 ,好转 21例 ,有效率 100%, 无不良反应。结论:该制剂处方合理 , 质量稳
定 , 疗效确切 ,使用方便 , 可用于临床。
关键词:复方薄荷滴鼻液; 制备; 临床应用
中图分类号:R283.6 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2005)11-1119-01
复方薄荷滴鼻液具有除臭 、消炎 、止痛 、润滑鼻腔作用 , 利于
鼻腔上皮细胞恢复 , 能有效促进伤口愈合 , 用于治疗萎缩性和干
燥性鼻炎及鼻出血等 ,临床疗效良好 , 无不良反应 ,现报道如下。
1 处方与制备
1.1 处方 薄荷脑 5 g,冰片 5 g, 液体石蜡 20 ml, 维生素 AD480
ml(每克含维生素 A500 u、维生素 D150 u)。
1.2 制法 取薄荷脑与冰片研磨溶于液体石蜡中 , 加维生素
AD480ml, 搅匀 ,分装。
2 质量标准
2.1 性状 本品为淡黄色油状液体 , 具特殊臭味。
2.2 鉴别
2.2.1 取本品 1ml, 加冰醋酸 1ml, 再加硫酸 6滴与硝酸 1滴 ,
显淡黄色 [ 1] 。
2.2.2 取本品 1ml, 加新制的 1%香草醛硫酸溶液 1 ～ 2滴 ,即
显紫色 [ 2] 。
2.3 检查 pH值 应为 5.5 ～ 6.5。其它应符合 《中国药典 》
(2000年版Ⅰ部)附录滴鼻液项下规定。
3 刺激性试验
选 2.5 ～ 3.0 kg成年健康家兔 6只 , 给药前双侧鼻腔检查正
常 , 将本品 0.1ml滴入左鼻腔 ,右鼻腔滴入 0.1 ml0.9%生理盐
水 , 观察 0.5, 1, 4, 12, 48h的局部反应情况 , 进行刺激性评价 ,结
果两者均无刺激性。
4 稳定性试验
按照《新药审批办法》附件 “中药新药稳定性研究的技术要
求”及《中国药典》(2000年版 Ⅰ 部)附录滴鼻液项下的有关规
定 , 考察项目包括:性状 、鉴别 、澄清度 、pH值 、微生物限度检查。
结果表明 , 该样品在存放 12个月时稳定。
5 临床应用
5.1 一般资料 根据萎缩性鼻炎诊断标准 , 选择确诊为萎缩性鼻
炎患者 90例 ,男 , 51例 , 女 , 39例 , 年龄最大 68岁 , 最小 2岁 , 平
均年龄 38.9岁 ,病程 1周 ～ 20年。
5.2 诊断标准 [ 3] (1)鼻腔黏膜 、骨膜及骨部萎缩 ,鼻内有脓痂
形成 , 有奇臭。 (2)常头痛 、鼻出血 、嗅觉明显减退或缺失 , 重者
鼻塞显著 ,并可伴有干燥或萎缩性咽喉炎症状。 (3)检查鼻黏膜
及鼻甲萎缩 ,鼻腔变宽 , 有黄绿脓痂附着 ,重者鼻外形呈鞍鼻或鼻
梁扁平 ,鼻前孔扁圆 , 鼻翼跷起。
5.3 治疗方法 使用复方薄荷滴鼻液滴鼻 , 3次 /d, 2 ～ 3滴 /次。
5.4 疗效判定标准 [ 3] 症状基本消失 , 鼻腔无脓性分泌物或脓
痂 , 鼻腔结构明显改善为治愈;症状减轻 , 鼻腔分泌物或痂皮减
少 , 鼻腔结构无明显改善为好转;病情未有改变或继续加重为无
效。
5.5 治疗结果 90例中 , 治愈 69例 , 好转 21例 , 无效 0例 ,总有
效率 100%。
6 讨论
复方薄荷滴鼻液的主要成分冰片有消炎止痛作用 ,薄荷脑可
用于皮肤或黏膜产生清凉感以减轻不适及疼痛 [ 4] 。加入维生素
AD油对糜烂面有促进愈合的作用。 有利于鼻腔黏膜上皮细胞
的修复 ,增强疗效 , 增加鼻内舒适度 , 无不适感与刺激性 , 薄荷脑
冰片在油剂中能较好地保持药效 ,作用持久 , 有利于药物的释放 ,
增加药物对鼻黏膜的渗透性 ,改善皮肤黏膜的干燥 、炎症状态。
复方薄荷滴鼻液疗效确切 ,制备工艺简便 , 质量易于控制 , 此
方值得推广使用。
参考文献:
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2000:113-311.
[ 2 ] 中华人民共和国卫生部药政局.中国医院制剂规范西药制剂 ,第 2
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2005VOL.16NO.11 时珍国医国药 2005年第 16卷第 11期