全 文 ：— 25 —现代中药研究与实践2010年第24卷第6期Chin Med J Res Prac,2010 Nov.,Vol.24 No.6
厚 朴 为 木 兰 科 植 物 厚 朴 Magnolia offi cinalis
Rehd.et Wils. 或凹叶厚朴 Magnolia offi cinalis Rehd.et
Wils.var.biloba Rehd.et wils 的干燥干皮、根皮及枝皮，
苦、辛，温。具有燥湿消痰、下气除满功效。 厚朴
主要含厚朴酚、和厚朴酚等成分，目前尚缺少黔北凹
叶厚朴指纹图谱分析方法。因此，本实验对黔北厚朴
进行了指纹图谱的研究，以期为完善黔北凹叶厚朴的
质量控制提供参考依据。
1 仪器与材料
Waters 1525 型高效液相仪，二元梯度泵 ；KQ-
300DE 超声仪 ；AG 系列电子分析天平（瑞士梅特勒
公司）；乙腈（色谱纯 , 美国 Merck 公司）；纯化水，
其余试剂均为分析纯。厚朴酚对照品（中国药品生物
贵州黔北凹叶厚朴 HPLC 指纹图谱研究
冯 华 1，王祥培 2，邹孔强 1，聂明华 1，罗秀琼 1，申桂霞 1
（ 1. 贵州省遵义市药品检验所， 贵州 遵义 563001 ；2. 贵阳中医学院 贵州 贵阳 5653002）
摘要 ：目的 建立黔北凹叶厚朴的 HPLC 指纹图谱分析方法，为控制和评价黔北凹叶厚朴的质量提
供依据。方法 采用 DiamonsilC18 (4.6 mm×200 mm) 柱 ；流动相 ：乙腈－水，梯度洗脱，检测波长为 294
nm ；以厚朴酚为参照物，对黔北 10 批不同产地厚朴进行指纹图谱分析。结果 建立黔北厚朴的 HPLC 指
纹图谱共有模式，标定了 8 个共有峰，10 批厚朴的相似度在 0.921~0.983。结论 该方法简便、准确、重复
性好。可专属性地研究厚朴的指纹图谱，为有效地控制黔北凹叶厚朴的内在质量提供科学依据。
关键词 : 黔北凹叶厚朴 ; 厚朴酚 ; HPLC ; 指纹图谱
中图分类号 ：S567.1+1 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673-6427(2010)06-0025-03
HPLC Fingerprints of Magnolia offi cinalis Rehd.et Wils. in Guizhou Province
FENG Hua1, WANG Xiang-pei2,ZOU Kong-qiang1 , NIE Ming-hua1 ,LUO Xiu-qiong1, SHEN Gui-xia1
(1.Zunyi Institute for Drug Control, Zunyi 563002, China ;2.Guiyang College of Traditional Chinese Medicine,
Guiyang 550002, China)
Abstract: Objective To establish the analytical method of HPLC fingerprints of Magnolia officinalis
and offer the evidence for quality control and quality evaluation carbonized Magnolia officinalis accordingly.
Methods Ten batches of Magnolia offi cinalis were measured by HPLC with Magnolol as a reference substance
and the HPLC analysis was performed on a DiamonsilC18 column (4.6 mm×200 mm), with Acetonitrile and water
as mobile phase and detection wavelength was 294 nm. Results The common mode of the HPLC fi ngerprints
was set up .There were 8 common peaks in the fingerprint of ten samples, and the similar degrees to the ten
batches were between 0.921~0.983. Conclusion The method is simple, accurate and reproducible. And the
quality of Magnolia offi cinalis can be controlled effectively by the HPLC fi ngerprint.
Key words: Qianbeis district; Magnolia offi cinalis；magnolol ；HPLC； fi ngerprint
检定所，批号 ：0729-200309）。
10 批凹叶厚朴药材分别采集四川及黔北等地
区，打粉，过三号筛。所采集的厚朴药材经贵阳中医
学院何顺志教授鉴定为木兰植物凹叶厚朴 Magnolia
offi cinalis Rehd.et Wils.var.biloba Rehd.et wils 的 干 燥
干皮。厚朴药材的采集地见表 1。

收稿日期：2010-01-11
基金项目：遵义市中药现代化科技产业研究开发专项项目课题（项目编
号：市科合中药专字〔2008〕2号）。
作者简介：冯 华， 硕士，主管中药师，从事新药研究及药品检验 。
表1 黔北凹叶厚朴收集情况
Tab. 1 Collecting of Magnolia offi cinalis in Qianbeis region
编号
A1
A2
A3
A4
A5
A6
A7
A8
A9
A10
产地
四川
遵义习水县
遵义赤水县
遵义道真县
遵义正安县
遵义湄潭县
遵义务川县
遵义余庆县
遵义桐梓县
遵义凤冈县
采集日期
2009-6-2
2009-6-7
2009-6-9
2009-6-23
2009-6-25
2009-5-29
2009-5-27
2009-5-19
2009-6-13
2009-6-22
指纹图谱标号
S1
S2
S3
S4
S5
S6
S7
S8
S9
S10
DOI:10.13728/j.1673-6427.2010.06.007
— 26 — 现代中药研究与实践2010年第24卷第6期Chin Med J Res Prac,2010 Nov.,Vol.24 No.6
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱 ：DiamonsilC18(4.6 mm×200
mm) ； 流动相 ：乙腈 - 水溶液，梯度洗脱程序见表
2。检测波长为 294 nm ；流速 ：1.0 mL•min-1 ；柱温 ：
30℃ ；分析时间 ：60 min ；进样量 ：20 μL。

2.2 供试品溶液制备 精密称取厚朴药材粉末（过
三号筛）约 0.2 g，置带塞的锥形瓶中，加甲醇 25
mL，称重，超声 40 min（500 W, 50 Hz），用甲醇补
足重量，滤过，滤液置 50 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，
制得供试品溶液。
2.3 对照品溶液的制备 精密称取厚朴酚对照品
11.40 mg，置 50 mL 量瓶中，加甲醇溶解至刻度，摇
匀，精密取 5 mL 置 25 mL 量瓶中加甲醇至刻度，即
得对照品溶液 。
2.4 方法学考察
2.4.1 精密度试验 取厚朴（样品 A2 号）为供试品
溶液，按 “2.1” 项下色谱条件，连续进样 6 次，记录
色谱图，计算其各共有峰的相对保留时间、相对峰面
积的 RSD 均小于 3%，表明精密度良好，符合对指纹
图谱的要求。
2.4.2 稳定性试验 以厚朴样品 A2 号为供试品溶
液，按 “2.1” 项下色谱条件，分别在 0、2、4、8、
16、24 h 进样进行测定，记录色谱图，计算其各共有
峰的相对保留时间、相对峰面积的 RSD 均小于 3%，
表明 24 h 内成分稳定，稳定性良好。
2.4.3 重现性试验 取样品 A2 号供试品过三号筛粉
末 5 份，每份约 0.2 g，按上述供试品溶液的制备方
法平行 5 份供试品溶液。按 “2.1” 项下色谱条件，记
录色谱图，计算其各共有峰的相对保留时间、相对峰
面积的 RSD 均小于 3%，表明重复性良好，符合对指
纹图谱的要求。
2.5 样品测定 取 10 批凹叶厚朴供试品，按 “2.2”
项下方法制备供试品溶液，按 “2.1” 项下色谱条件依
次进样检测，记录色谱图。对照品及样品溶液 HPLC
图，见图 1、图 2。10 批凹叶厚朴的 HPLC 色谱叠加
图，结果见图 3。


2.6 指纹图谱建立
2.6.1 参比峰的选择 将厚朴酚对照品色谱与样品图
谱中相应位置的色谱峰进行比较，其相对保留时间
和紫外光谱与对照一致，故样品图谱中 11 号特征峰
为厚朴酚。在各批次样品图谱中厚朴酚的色谱峰分
离良好，峰位居中，峰面积较大且为所有样品共有，
所以确定厚朴酚为参照峰。
表2 凹叶厚朴指纹图谱梯度条件
Tab.2 Gradient condition of fi ngerprints from Magnolia offi cinali
T/min
0
3
22
27
37
45
55
60
乙睛（%）
10
10
20
80
90
95
10
10
水（%）
90
90
80
20
10
5
90
90
图1 对照品溶液HPLC图
Fig.1 HPLC chromatogram of reference
图2 供试品溶液HPLC图
Fig.2 HPLC chromatogram of samples
S1~S10.10 批凹叶厚朴 ；11. 厚朴酚
图3 10批样品HPLC指纹图谱
Fig.3 HPLC fi ngerprints from 10 batches sample
表3 供试品S1~S10共有色谱峰相似度结果
Tab.3 Similarity of fi ngerprints common peak from samples S1~S10
样品编号
S1
S2
S3
S4
S5
S6
S7
S8
S9
S10
对照图谱
S1
1.000
0.803
0.851
0.831
0.972
0.969
0.963
0.954
0.966
0.967
0.967
S2
0.803
1.000
0.942
0.983
0.805
0.825
0.821
0.828
0824
0.817
0.963
S3
0.851
0.942
1.000
0.976
0.854
0.846
0.840
0.877
0.846
0.855
0.923
S4
0.831
0.983
0.976
1.000
0.830
0.841
0.835
0.859
0.841
0.841
0.921
S5
0.972
0.805
0.854
0.830
1.000
0.986
0.981
0.948
0.985
0.971
0.974
S6
0.969
0.825
0.846
0.830
0.986
1.000
0.999
0.952
0.999
0.969
0.983
S7
0.963
0.821
0.840
0.841
0.984
0.999
1.000
0.946
0.999
0.964
0.980
S8
0.954
0.928
0.877
0.835
0.948
0.952
0.946
1.000
0.952
0.962
0.966
S9
0.966
0.824
0.846
0.841
0.985
0.999
0.999
0.952
1.000
0.967
0.983
S10
0.996
0.817
0.855
0.841
0.971
0.969
0.964
0.967
0.967
1.000
0.971
对照图谱
0.960
0.953
0.923
0.921
0.974
0.983
0.980
0.946
0.983
0.971
1.000
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2.6.2 指纹图谱的建立及相似度评价 将所得的 10
批凹叶厚朴的 HPLC 图谱，按 “ 中药色谱指纹图谱
相似度评价系统 2004 版 A” 的方法处理，对供试品
S1-S10 中的 8 个共有色谱峰进行匹配，其相似度均
在 0.920 以上，相似度良好，10 批供试品指纹图谱见
图 3，色谱峰相似度结果见表 3。
3 讨论
3.1 提取溶剂和方法的选择 本实验对提取溶剂的
考察结果表明，比较甲醇、乙醇不同浓度为提取溶剂 ,
以纯甲醇提取液的出峰数较多，且基线较平整，故提
取溶剂选择纯甲醇。对超声、浸渍、回流 3 种不同提
取方法考察结果表明，浸渍和超声提取方法提取率
没有差异，由于超声操作较方便，故选择超声提取。
对不同提取时间的考察结果表明 40 min 后各时间提
取率基本一致，故选择超声时间为 40 min。
3.2 色谱条件的选择 本实验对甲醇 - 水、乙腈 - 水 -
磷酸、甲醇 - 乙腈 - 水、甲醇 - 水 - 磷酸、乙腈 - 水
等 5 个系统的流动相考察，结果发现乙腈 - 水作为流
动相，各峰的保留时间适中，分离度较好，且基线稳
定，有利于指纹图谱分析，因此采用乙腈 - 水作为流
动相系统。
3.3 扫描波长选择 本实验使用 DAD 检测器进行
紫外区全波长扫描，波长设置 210~400 nm，在 294
nm 波长下，色谱图基线噪音较低，色谱信息较完全，
综合比较后，选择 294 nm 为本实验的检测波长。
3.4 黔北凹叶厚朴指纹图谱的建立 对各批次样品
的提取条件，色谱条件进行了考察后用 HPLC 进行
检测，并采用 “ 中药色谱指纹图谱相似度评价系统
2004 版 A” 对不同批次的凹叶厚朴的 HPLC 指纹图谱
进行相似度评价，结果表明其指纹图谱互相间较为
吻合，由于产地、环境因素及生长年龄等方面影响，
各批次的凹叶厚朴的有效成分含量有一定差异，这
方面有待进一步研究。但各成分之间的比例却相似，
整体均符合共有特征，对相似度影响不大。从凹叶厚
朴的整体色谱入手，选取 8 个较明显且分离度较好的
共有峰构成凹叶厚朴的指纹图谱，以共有模式作为研
究黔北凹叶厚朴的提取工艺及原理的参考依据，实验
证明该方法操作性强，重复性好，可为黔北凹叶厚朴
的内在质量控制提供科学依据。
参考文献
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科学家提出记忆形成新解
当记忆一件事情时，一遍又一遍地重复，能加强对事件和单词的回忆。然而记忆形成的神经机制长期以来依旧是个谜。科学家使用功
能磁共振成像仪（fMRI）分析了大脑活动图像，结果发现，通过多次学习记住一张面孔或一个单词，与忘掉它相比，其神经活动在多个脑
区显示出更大的相似性。《科学》杂志近日发表的一项研究表明，多次激活同样的神经连接方式能将事物印在记忆里。这与心理学家 40 年
前提出的编码变异假说结合，能使人们更好地理解记忆的形成机制。
记忆是多种不同事物的集合，可以是微妙的感觉、具体的影像、连贯不连贯的事件过程；也可以是抽象的概念和逻辑。不论哪种记忆，
都是大脑神经网络中的一组神经元被激发，形成某种特定的连通回路。大脑储存的方式是把事情分拆为最基本的单元，每个单元分别由指
定的神经元储存。完整的记忆只有在被提取时才形成，它既存在又不存在。我们无法在大脑中找到记忆图像，它只是百亿个神经元的组合。
不同的记忆素材通过编码，储存在不同的脑区，提取的方式也不同，需要几十个不同的脑区共同合作，才能形成或再现。
短暂记忆靠神经传导素增强神经元之间的信息传递形成，只能保留几分钟 ；而长期记忆能保存许多天甚至多年。不断重复能使短暂记
忆转变为长期记忆。通过不断重复，大脑中的化学信号系统会把一种特殊蛋白质推入神经元的核心，并且在那里启动遗传基因合成蛋白质，
神经元因此有了基本的改变，增加新的触突，创造新的连接网络。结果是大脑有了结构性的改变，这就是长期记忆的建立。
与某事件相关的素材以适当的间隔重复出现，而不是一次性出现，回忆这件事情会更加容易。比如，在几天内多次、短时间看到同一
张脸，就比在一天内长时间对着这张脸更容易记住。这就是心理学家 40 年前提出过一种编码变异假说。
其中一个原因就是，多背景的联系能从多途径提取记忆 ：这张脸与多种不同的背景联系起来，比如学校、工作场所和家庭相对于舞会
等单纯的一种背景，更容易让人想起。每种不同的背景或环境，能激活大脑的不同功能区。这一假说认为，不同的神经反应能提高记忆。
但是得克萨斯州立大学认知神经科学家拉塞尔·博德里克领导的一项神经影像研究提出，反过来也是对的，即用同一种背景多次激活
同样的神经连接方式，事物能被更好地记忆下来。
为了分析这种情况，还须进一步分析受试者对单个目标的大脑反应。博德里克说，我们把这些神经影像数据综合起来，有助于更好地
理解编码变异理论。也许情况正相吻合，编码变异假说跟我们的实验结果并不违背。 （本刊辑）
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