全 文 ：分子质量为 59.1×103 ,等电点为 4.98的酸性纤溶酶。
纯化后的组分在不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳显示为单
一条带 ,样品经过变性处理和非变性处理 ,在 SDS-聚
丙烯酰胺凝胶电泳图谱上均为单一条带 。经过 HPLC
的C18柱后 ,层析图谱为单一峰 ,上述实验证明该组分
为单一组分 。该酶是纤溶酶而不是纤溶酶原激活物。
最适 pH 值为 7.3左右 。该组分能直接降解纤维蛋白
和纤维蛋白原。EDTA-Na2 和 β-巯基乙醇能完全抑制
它的活力 ,而CaCl2 和 ZnSO4 对其没有抑制作用 ,提示
该纤溶酶为金属蛋白酶。不能分解 TAME ,无精氨酸
酯酶活力。最适温度为40 ℃, 60 ℃则完全失去活力。
纤溶酶对 ADP 诱导的血小板聚集有抑制作用。纤溶
酶的最小出血剂量为 20.0 μg 。氨基酸分析表明它有
525个氨基酸残基 ,有较多的酸性氨基酸 ,这和其等电
点偏酸是一致的 。在体外培养的鼻咽癌 CNE2 细胞中
加入纯化的纤溶酶后 ,细胞的生长受到抑制 ,细胞形态
发生改变 ,部分裂解成碎片。
结论 分离纯化到了一个分子量比较大的具有纤
溶活性的酸性金属蛋白酶 。
基金项目:广西科学基金资助项目(桂科基 0342002-6)
＊通讯作者
3-87 抗体对小鼠相思子毒素
中毒的免疫保护作用
李丽琴 ,陈乐贵 ,徐建富 ,张瑞华 ,林福生
(北京药物化学研究所 ,北京 102205)
中图分类号:R99 文献标识码:A 文章编号:1002-
3127(2005)03-0285-01
关键词:相思子毒素;免疫预防;抗体
目的 开发相思子毒素(Abrin)的抗毒疫苗 ,为毒
素中毒采取有效的急救预防措施提供依据。
方法 将 Abrin加入到体积分数为 3.4%的甲醛
10 mmol L 磷酸缓冲液中 ,于37 ℃处理 4 d ,制备成毒
性较低的类毒素 。取减毒的类毒素免疫原与等体积福
氏完全佐剂或福氏不完全佐剂混匀 ,制备成抗原乳剂 ,
给新西兰大耳白兔皮下多点注射 ,间隔 1 月共注射 4
～ 5次 ,累计总剂量为 600 μg 兔。由耳缘静脉采血测
定滴度 ,达到要求后 ,心脏采血 ,分离血清 。抗血清经
饱和(NH4)2SO4 沉淀 、DEAE-Cellulose 柱层析 、Abrin-
Sepharose 4B 亲和柱层析 , 获得纯化抗体。抗体对
Abrin中毒的预防试验:给小鼠腹腔注射抗体 ,剂量为
2mg kg ,经过不同时间 , 1 、2 、4 、6和 15 d 后 ,再腹腔注
射Abrin的 LD50的 5倍剂量(20μg kg),观察 20 d ,记录
小鼠存活个体。抗体对 Abrin中毒的预防与急救结合
试验:给小鼠腹腔注射抗体 ,剂量为 2 mg kg , 2 d后 ,腹
腔注射不同剂量的Abrin ,剂量分别为 LD50的 10 、20和
40倍 ,其中 3组为注射毒素后3 h作抗体急救 ,另 3组
不做抗体急救 ,抗体急救剂量为静脉注射 8 mg kg 的
抗体 。给药后观察小鼠症状 ,并记录 20 d后的小鼠存
活个体。
结果 所有未预先注射抗体的小鼠 ,在注射 Abrin
的LD50的5倍剂量(20μg kg)后 ,均于2 d之内死亡 ,而
注射抗体 1 ～ 4 d 后再注射Abrin的小鼠 ,在 20 d的观
察期间全部存活下来;注射抗体 6 d后再注射Abrin的
小鼠有60%的存活个体 ,40%的小鼠于中毒后 14 d死
亡 ,在死亡时间上比对照组大大推迟;注射抗体 15 d
后再注射Abrin的小鼠 ,均于 3 ～ 4 d之内死亡 ,抗体的
中和能力消失。以上分析表明 ,注射抗体分子数为中
毒毒素的 40倍时 ,抗体在小鼠体内于 4 d之内有中和
毒素的能力 ,注射抗体 6 d后对小鼠仅有部分保护作
用 ,注射抗体 15 d后对小鼠无保护作用。给小鼠注射
2 mg kg 的抗体 ,2 d后 ,小鼠可以预防Abrin LD50的 10
倍剂量的攻击而不中毒 ,抗体与毒素的分子比例为
20∶1。如用Abrin LD50的 20倍剂量进行攻击 ,小鼠只
能存活 78 ～ 94 h。2 mg kg 的抗体预防注射的小鼠 ,用
Abrin LD50的 20倍剂量攻击 ,小鼠中毒后再于 3 h后给
予抗体急救 ,急救抗体与 Abrin的分子比例为 40∶1 ,小
鼠可以全部存活 。
结论 Abrin 抗体可以预防致死剂量的 Abrin 中
毒 ,对预防无效的动物 ,及时注射抗体具有急救作用 ,
免疫预防是对抗 Abrin中毒的重要措施 。
3-88 BC皮肤粘膜杀菌液的毒性试验
张敏 ,纪晓光 ,赵京花 ,王京燕
(军事医学科学院消毒检测中心毒理室 ,北京 100071)
中图分类号:R99 文献标识码:A 文章编号:1002-
3127(2005)03-0285-02
关键词:消毒药;毒性试验;有害作用剂量
目的 BC是以醋酸氯己定为主要成分的一种用
于皮肤粘膜的杀菌液。本试验依据卫生部颁布的《消
毒技术规范》对该产品进行安全性评价 。
方法 进行了急性经口毒性试验 、1次完整皮肤
刺激试验 、急性眼刺激试验 、阴道粘膜刺激试验 、亚急
·285·毒理学杂志 2005年 9月第 19卷第 3期增刊 J Toxicol September 2005 Vol.19 No.3 Suppl