全 文 ：植 物 学 报 19 8 5, 2 7 ( 6 ) : 6 3 0一 6 3 4
月d a 刀b t an i“ is n i e J
崖 藤 生 物 碱 的 研 究
薛 智 吴 的 张佩玲 马建民
(中国医学科学院药物研究所 )
何 平
(中国人民解放军第 1 8 7医院)
摘要 防己科植物崖藤根茎的乙醇提取物对实验动物肿瘤有抑制作用 , 自其中分离出 7
种双苇基异哇琳类生物碱。
c o e s u l in
e 、 c o e s o l i n e 、 a p a t e li o e
I 、 1 1、 111 、 v 、 V l 和 v l l 分别 鉴定 为 a r o m o l in e 、 d a p h n o l in e 、
1 `
m
e` h y l a p a ` “ 11” e 。 碱 I v 的结构还有待进一步研究。
和碱
关键词 崖藤 ;双节基异哇琳生物碱
崖藤 ( A lbe irt 五口 l洲 irt iol 召 )为防己科崖藤属植物 。 该属共约 1 7 种 , 大部产于非洲和亚
洲的东南部 。 我国仅产崖藤一种 , 分布于台湾 、 海南岛和广西 、 云南的南部 。 该属植物的
化学成分未见有报道 。 崖藤根茎的乙醇提取物和总碱部分 , 经药理试验 , 证明对实验动物
肿瘤有抑制作用 , 因而我们对其中的生物碱成分进行了研究 , 一共分出了 7 种生物碱 。
碱 I 和碱 11的物理常数和光谱数据分别符合于 a r o m o l i n e 和 d a户 n o li n e 的结 构 〔4 , o
碱 I一I 的分子式为 C 3, H 。;从 O ; , 熔点 2 7 0一 2 7 2℃ , [ a ]护+ 2 7 8。 , 红外光谱示含经基
( 3 4 4 0
c
m
一`
)
, 核磁共振光谱中出现两个氮甲基 (况 . 斗。 , 脸 . 59 , 各 3H , s ) , 和一个甲氧基
( ” . 90 , 3H , s ) 信号 , 质谱呈现典型的木防己类生物碱的裂解方式 1[] , 根据其裂 解 碎 片
( m /
e 3 5 0 、 3 4 9 、 3 3 5
、
1 7 5 ) 说明甲氧基存在在异唆琳部分而经基存在在苯基环上 。 以上
数据符合文献报道 e o e s u li n e 的结构 , 其物理常数也和 e o c s u li n e 相同 〔4 ,。 碱 111 用重氮甲
烷甲基化 ,所得产物的熔点 、 比旋度 、 薄层层析比移值和红外光谱均与异木防己碱 ( v l l)
相同 , 证明碱 I [ I即 e o e s u li n e 。
碱 v 的分子式为 C 3; H : ZN , O , , 比碱 111少 C H Z , 熔点 1 79一 1 8 1℃ ` ) , 〔a ]” + 2 0 4 . 7 “ ,
红外光谱示含经基 ( 3 4斗o c m 一` ) ; 核磁共振谱呈现一个氮甲基 占( 2 . 6 0 , 3H , s ) 和一个甲氧
基 (邪 . 8 , 3H , s) 信号 三质谱也符合木防己类生物碱的裂解规律 , 但主要碎片均比碱 In
少 14 。 碱 v 用甲醛 一醋酸甲基化 , 得到产物的熔点 、 比旋度 、 薄层层析比移值和红外光谱 .
均与碱 11 相同 , 证明碱 v 为碱 m 的 N 一去甲基化合物 。 根据文献报道在这一类型生物碱
中 2 ` 位的氮甲基处于较高场而 2 位的氮甲基处于较低场 (异木防己碱 叔 . 4 。 , 扎 . 6叱 木防
己碱 腔 . 45 〔4] ) , 推测碱 v 的氮甲基应处在 2 位 。 碱 v 用重氮 甲烷甲基化 , 所得产物的薄层
本文于 1 9 8 4 年 5 月收到 , 1 98弓年 , 月收到修改稿 。
植物样品由陈毓享同志及海南兴隆药用植物试验站提供 , 并由陈毓享同志鉴定植物学名 : 异木防已碱 、 木防己
碱及 a aP et h en 标准品分别由上海第二军医大学及澳大利亚 T as m an ia 大学 1 . .R C . iB o k 教授赠送 ,特此致
谢。
1) 文献〔们中未报道熔点 。
薛 智等 : 崖藤生物碱的研究
层析比移值和木防己碱 (I X )不一致 , 也支持以上推测 , 证明碱 v 的结构应如 v 式所示 ,
与文献报道 co cs iol n e 的结构一致 4[] 。 其比旋度和光谱数据也均和 co cs iol n e 的一致。
碱 v l 的熔点 19 5一 1 9 7℃ , [ a ]驴+ 2 8 5 . 7 0 , 其分子式 ( e 3; H 32N 2 0 5 ) 和质谱 碎片均
和碱 v 相同 , 核磁共振谱也和碱 v 相似 , 出现一个氮甲基 (腔 . 郊 , 3 H , s ) 和一个 甲氧 基
(鸽 . 8 , 3H , s ) 信号 。 以上数据提示碱 VI 为碱 、 的差 向 异 构 体 a aP et il en , 与 标 准 品
a
sp t iel en 相比较 , 两者的薄层层析比移值和红外光谱均相同 ,证明碱 v l 为 。 aP et il en 。
碱 v l [ 的熔点 1 6 8一 1 7 0℃ , [ a ]罗+ 2 4 1 . 5 “ 。 其分子式 ( C 3, H 3; N ZO , )和质谱碎片均和
碱 I[ 相同 ; 核磁共振谱也和碱 m 极为相似 ,示含两个氮甲基 (此 . 5 0 , 3 H , 。 ; 砚 . 5 5 , 3H , s )
和一个甲氧基 (鸽 90 , 3 H , s ) , 只是两个氮甲基的化学位移和碱 m 的不同 。 以上数据提
示碱 V l [ 为碱 11[ 的差向异构体 , N 一 m e t h y l a碑 t e l in e 。 其熔点也和 N 一 m e t h y la碘 t e li n e 的一
致 ,只是比旋度稍大一些 〔41 。 为了进一步确证碱 v n 的结构 ,将碱 Vl 用甲醛一醋酸甲基化 ,
得到的氮甲基化合物的薄层层析比移值和红外光谱均 和 碱 v l 的一 致 , 证 明 碱 v u 即
N
一
m et h y l
a P a t e l i n e o
C H 3 O
C H 3 O
C H 3 N
N C H 3
N C H 3
B5RA5凡CHH
3几ó3内,诬IJ于」
CR卜RHCH阳
1
vvilXI
R Z N
实 验 部 分
熔 点用 K ofl e r 熔点测定器测定 (未校正 ) 。 比旋度和紫外光谱用 O R D /Vu’ 一 5 旋光光
谱仪测定 。 红外光谱用 P er ik n 一 lE m er ZI 型和 3 9 9 B 型红外光谱仪测定 , 固体样品用澳化
钾压片 。 、 核磁共振氢谱用 JN M C 一 60 型和 w H 一 90 型核磁共振仪 , 在氖代氯仿中测定。
质谱用 JM S一 02 B 和 z A B 一 2F 型质谱仪测定 。 薄层层析和柱层析用硅胶均 为青岛 海洋
化工厂出品。
(一 ) 生物碱的分离提取
植 物 学 报27 卷
崖藤根茎粗粉2. 2 5K g, 用乙醇回流提取 5 次 , 合并提取液 , 减压蒸去乙醇 , 用稀盐酸
捏溶 ,合并酸液 , 用少量氯仿洗涤 , 酸液加浓氨水碱化至 p H 1 0 , 析出大量沉淀 , 过滤 , 滤液
和沉淀分别用氯仿提取至 无生物碱反应 , 合并氯仿提取液 , 蒸干 , 得总碱浸膏 2 9 9 。
将以上总碱溶于氯仿 , 用 , % 氢氧化钠溶液提取 , 按常规方法分得酚性生物碱部分
9 9
, 非酚性生物碱部分 13 9 。
(二 ) 酚性生物碱部分的分离
取酚性生物碱部分 1 9 , 加 斗ml 氯仿溶解 , 用 3 0 09 硅胶 H (加 4多氢氧化钠水溶液湿
润后烤干 )进行柱层析 ,顺序用氯仿 、 氯仿一甲醇混合溶液展开 , 每 2 0ml 收一份 。
碱 I 的分离和鉴定 第 68 一 72 份洗脱液合并 , 蒸干 、 用氯仿 一甲醇混合溶液 ( 3 : l) 重
结 晶 , 得 白色 碱 x 结 晶 1 2 , m g , 熔 点 1 9 9一 Z o l oc (文 献闭 19 8一 2 0 2℃ ) ; 〔a蹭 + 3 3 1
( C 0
.
8 7 , 氯仿 ) (文献 [ 4 ] [ a ]Y + 3 2 7 0 ) ;元素分析 C 、 H 3oN : O ` 1告 C H 3O H ) (计算值 % :
e 7 o
.
o g
,
H 6
.
s 6 , N 斗. 3 6 ; 实测值外 : C 7 o . 1 3 , H 6 . 6 1 , N 4 . 5 0 ) ; 紫 外 光 谱 又恐 O H n tn
( 1
0 9 。 ) : 2 1 0 ( 4
.
9 3 )
, 2 8 3 ( 3
.
9 9 ) ; 质 谱 m / e : , 9 4 ( 1 0 0多 ) , 5 9 3 ( 7 7 ) , 4 8 7 ( 5 ) , 4 0 3 ( 2 ) ,
3 5 2 ( 5 0 )
, 3 8 1 ( 5 6 )
, 3 6 7 ( 3 2 )
, 1 9 2 ( 7 8 )
, 1 9 1 ( 6 )
, 1 7 4( 1 0 )
, 1 6 8 ( 1 2 )
,
1 0 7 ( 1 ) ; 核磁共振
谱 : 占2 . 5 2 , 占2 . 5 6 (各 3 H , s , 2 x N一 C H 3 ) , 占3 . 5 8 , 占3 . 7 9 (各 3H , s , 2 x O C H 3 ) o
碱 n 的分离和鉴定 第 84 一 92 分洗脱液合并 , 蒸干 , 用氯仿一甲醇混合溶液反复重
结晶 , 得 白色碱 11结晶 Z o m g , 熔点 2 2 0一 Z 12 oc (文献闭 2 9 , co ) ; [司驴+ 3 5 , . 5。 ( e 0 . 4 2 ,
2呢 醋酸 ) (文献闭 〔al d + 3 56 . 6 “ ) ; 高分辨质谱测得 分 子 式为 C 。, H 、 N 2 0 ` (计算 值
5 5 0
.
2 , 7 3 ; 实测值 5 5 0 . 2 , 5 9 ) ; 紫外光谱 又念 O H n m ( 10 9 5 ) : 2 1 0 ( 4 . 8 8 ) , 2 8 3 ( 3 . 9 5 ) ; 核磁共
振谱 ( C F 3C O O H ) : 占 3 . 7 2 , 占 3 . 9 2 (各 3 H , s , Z X O C H 3 ) ; 质谱 m / e : 5 8 0 ( 1 0 0并 ) , 4 7 3 ( 3 ) ,
4 0 3 ( 3 )
, 斗0 2 ( 3 ) , 3 6 8 ( 19 ) , 3 6 7 ( 3 9 ) , 3 5 3 ( 1 7 ) , 1 8 4( 2 5 ) , 1 7 8 ( 4 ) , 1 6 1( 8 6 ) , 1 6 0 ( 4 ) o
(三 ) 非酚性生物碱部分的分离
非酚性生物碱部分的分离 非酚性生物碱部分 6 9 溶于少量氯仿 , 按常规方法进行硅
胶干柱层析 , 以氯仿 一甲醇 ( 1 0。 : 5 ) 混合溶剂展开 , 自柱顶开始切割成 1 4 份 ,分别用氯仿 -
甲醇一氨水 ( 4 : 2 : l) 混合溶剂洗脱 。
碱 n l 和碱 Iv 的分离 硅胶干柱切割第 6 一 9 份洗脱物 0 . 8 9 用制备薄层 4[ 多氢氧化
钠硅胶 G F 板 ,乙醚 一甲醇 ( 1 0 : l) 展开 ]反复多次精制 , 得含碱 I[ 及碱 Iv 两部分 。
碱 lI[ 的鉴定 碱 I[ 部分用乙酸乙醋重结晶 ,得白色结晶 ,熔点 2 70 一 2 72 ℃ (文 献〔4]
2 7 2一 2 7 4 oc ) ; 〔。 ]梦十 2 7 8 “ ( C 0 . 8 3 , 氯仿 ) (文献 [ 4 ] [a ] d + 2 8 0。 ) ; 高分辨质谱测得分子
式 e 3 5H 34N 2 0 , (计算值 5 6 2 . 2 4 6 5 ; 实测值 5 6 2 . 2 4 6 8 ) ; 紫外光谱 又撇 o H n m ( 10 9 。 ) : 2 3 3
(斗. 7 7 ) , 2 7 5 ( 3
.
7 9 )
, 2 8 9 ( 3
.
8 3 )
, 3 0 7 ( 3
.
6 7 ) ; 质谱 m / e : 5 6 2 ( M + 2 6 ) , 3 5 0( 2 7 ) , 3 4 9 ( 1 0 0 ) ,
3 3 5 ( 3 7 )
, 1 7 5 ( 5 0 ) ; 核磁共振谱 : 占 2 . 4 0 , 占 2 . 5 9 (各 3 H , s , 2 x N 一 e H ) , 占3 . 9 0 ( 3 H , s ,
O e H
。
)
o
碱 1 甲基化合物的制备 碱 30 m g 溶于甲醇 ,加过量重氮甲烷乙醚溶液 , 放置 24 小
时 ,蒸干 , 用甲醇重结晶 ,得白色结晶 20 m g , 质谱测得分子离子峰 M + 5 7 6 , 〔a] 梦+ 30 2 . 60
( e 0
.
6 4 , 氯仿 ) (异木防己碱 【4 , [ a ]望, + 2 9 3 . 1“ ) ; 熔点 2 0 9一 Z l l co , 与异木防己碱混熔 ,
熔点不降 , 薄层层析比移值和红外光谱均与异木防己碱相同。
碱 VI 的鉴定 碱 VI 部分再通过硅胶柱层析及制备薄层层析精制 〔.0 4关氢氧 化钠
6期 薛 智等 :崖藤生物碱的研究
硅胶 G F板 , 乙醚 一丙酮一氯仿 一甲醇 ( 3 : 2 : 0 . 3 : 0 . 2 ) 展开 ] 得白色粉末状物 , 薄层检查 ,
显色后呈现一个斑点 , 高分辨质谱测得分子式为 C 34 H 刃。 , N : (计算值 54 6 . 2 1 5 5 ; 实测值
5 4 6
.
2 1 8 3 ) ; 质谱 rn / e : 5 4 6 ( M + ) , 5 4 5 ( 10 0 ) , 3 6 5 , 3 3 5 , 3 3 3 , 2 7 3。
碱 v 和碱 v l 的分离 硅胶干柱切割第 3 份洗脱物 0 . 8 9 , 用制备薄层反复精制 (斗多
氢氧化铀硅胶 G F 板 , 乙醚 一丙酮一氯仿一甲醇 ( 1 0 : 10 : 2 : 2 ) 展开 , 得含碱 v 及碱 vI 两部
分 。
碱 v 的鉴定 碱 v 部分用甲醇重结晶 ,得白色碱 v 结晶 10 m g , 熔点 1 79 一 1 81 ℃ ,
[a ]孟+ 2 0 4 . 7 “ ( e 0 . 4 3 ,氯仿 ) (文献 14 ] [a ] d + 2 0 4 0 ) 。 高分辨质谱测得分子式为 C 3; H : 2
N
ZO , (计算值 5 4 5 . 2 3 1 1 ; 实验值 5 4 5 . 2 2 8 9 ) ; 紫外光谱 几盟护H n m ( 10 9 5 ) : 2 3 3 ( 4 . 6 3 ) , 2 7 5
( 3
.
6 9 )
, 2 8 9 ( 3
.
6 9 )
,
3 0 5 ( 3
.
4 9 ) ; 质谱 m / e : 5 4 8( M + 6 1 ) , 3 3 6 ( 3 1 ) , 3 3 5 ( 1 0 0 ) , 3 2 1 ( 2 3 ) ,
1 6 8 ( 4 9 ) ; 核磁共振谱 ; 占2 . 6 0 ( 3H , s , N 一 C H 3 ) , 占3 . 8 8( 3 H , s , O C H 3 ) o
碱 V 氮甲基化合物的制备 碱 v 30 m g 加甲酸及甲醛各 l耐 , 在水浴上加热二 小 时 ,
减压蒸干 , 加 5% 盐酸捏溶 ,过滤 , 滤液用乙醚提取后碱化至 p H 1 0 , 用氯仿提取 , 合并提
取液 ,蒸干 ,用醋酸乙醋结晶 ,得白色结晶 , 熔点 27 0一 2 72 ℃ 〔a] 李+ 2 7 7。 (C 0 . 65 , 氯仿 )
与碱 m 混熔 ,熔点不下降 ,薄层层析比移值和红外光谱均与碱 m 一致 。
碱 v l 的鉴定 碱 VI 部分用制备薄层精制 0[ . 4外氢氧化钠硅胶 G F 板 , 乙醚 一丙酮 -
氯仿一甲醇 ( 1 0 : 2 0 : 3 : 6 )展开 ] , 甲醇重结晶 ,得白色固体 ,熔点 195 一 197 ℃ (文献 [ 3 ] 1 9 7一
Z0 0 c0 )
,
[ a 〕驴+ 2 5 5 . 7“ ( e 0 . 2 0 , 氯仿 ) (文献 [ 2 ] [ a ] d + 2 7 0“ ) ;高分辨质谱测得分子式为
c 3; H
3。凡几 (计算值 5 4 8 . 2 3 1 1 ; 实测值 5 4 8 . 2 2 9 0 ) ; 紫外光谱 又盟是。 H 2 7 5 ( 3 . 7 0 ) , 2 8 9 ( 3 . 7 0 ) ,
3 0 8 ( 3
.
5 0 ) ; 质谱 m / e : 5 4 8 ( 7 5 ) , 3 3 6 ( 5 0 ) , 3 3 5 ( 1 0 0 ) , 3 2 1( 3 9 ) , 1 6 8 ( 7 5 ) ; 核磁共振谱 : 占
2
.
5 5 ( 3 H
, 。 , N 一 e H 3 ) , 占3 . 8 5 ( 3 H , 。 , O e H 3 ) o
碱 vl l 的分离和鉴定 硅胶干柱切割第 5 份洗脱物 .0 7 9 , 用 2 5 0 9 硅胶 H 进行柱层
析 , 用 1多 甲醇 一氯仿洗脱 , 每 20 m l 收一份 , 第 36 一 4 份洗脱液合并 , 用制备薄 层精制
[中性硅胶 GF 板 , 甲醇一浓氨水 ( 1 0。 : 1
.匀 展开 ]得白色粉末状碱 v l l 。 薄层检查 , 显色后
呈现一个斑点 ,熔点 1 6 8一 l夕0℃ (文献 [ 2 ] 16 5一 16 7℃ ) , 汇a ]驴+ 2 4 1 . 5 ( C 0 . 7 9 5 , 氯仿 ) (文
献 〔2 ] [a ] d + 2 1 2 “ , 氯仿 ) ;高分辨质谱视l得分子式为 e 35 H 3; N Z仇 (计算值 5 6 2 . 2 4 6 8 ; 实测
值 5 6 2 . 2斗8 9 ) ; 紫外光谱 又撇O H n m ( 10 9 5 ) : 2夕5 ( 3 . 6 7 ) , 2 5 9 ( 3 . 6 2 ) , 3 0 7 ( 3 . 4 5 ) ; 质谱 m / e
: 5 6 2 ( M
+ 2夕) , 3 5 0 ( 2 9 ) , 3斗9 ( 2 0 0 ) , 3 3 , ( 3夕) , 2 7 5 ( 5 5 ) ; 核磁共振谱 : 占2 . 5 0 ( 3 H , s , N -
e H
3
)
, 占2 .多, ( 3H , s , N 一 e H 。 ) , 古3
.
9 0( 3 H
, s , O e H
,
)
。
碱 v I N 一甲基化合物的制备 碱 Vl g m g 加醋酸及甲醛各 .0 s ml , 在沸水浴上加热 2
小时 ,减压蒸干 ,加 5务 盐酸捏溶 ,过滤 ,滤液用乙醚洗涤后碱化至 p H 10 , 用氯仿提取 ,合
并提取液 , 蒸干 ,得 8 m g 浅黄色残渣 , 用制备薄层精制 【。 . 4界氢氧化钠硅胶 G F 板 , 乙醚 -
丙酮一氯仿一 甲醇 ( 0 . 5 : l : 0 . 巧 : 3 ) 展开 ]得白色粉末状固体 ,薄层层析比移值和红外光谱均
与碱 V l 一致 。
参 考 文 献
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1
.
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T o s恤 0 Ib u k a , R . 5 . k a扭1 a n d 0 . N . P o r t e r , 1972 : M a s s s P e e t r o m e t即
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o l in 。 a lk a lo i d P a r t l
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A玫a lo 全d s d e r i v e d f ro 功 以l a u ir n e un i t s i咖 ed t o . tial
`3 4植 物 学 报 27 卷
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[ 多:
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S T U D I E S O N A L K A L O I D S O F A L B E R T I S I A L A U R E F O L I A
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.
T h e s t r u t u r o d e t e r
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m i n a t i o n o f a l k a lo id I V 15 h a m P e r e d a t P r e s e n t b y l a e k o f m at e r i a l
.
K e y w o r d s A l b e , t落s试a l a 杯 : 扩。沉a ,. a r o m o l i n e ; d a P h n o il n e ; e o c s u li n e ; e o o os il en ;
a P a t e l i n e ; N
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m e t h y l a p a忱 l i n e