全 文 ：圆叶大黄的化学成分及细胞毒活性初步研究
付深振1 戴闻韬1，2 费 烨1 彭江南2 闫兴丽1 高增平1
(1 北京中医药大学，北京，100102;2 University of Texas Health Science Center at San Antonio，Texas 78229，USA)
摘要 目的:研究圆叶大黄(Ｒheum Tataricum L. F. )的化学成分及主要成分的细胞毒活性。方法:采用 silica gel、Sephadex
LH-20、HPLC等色谱法对圆叶大黄 80 ﹪乙醇提取物进行分离纯化，通过 LC /MS，1H-NMＲ，13 C-NMＲ，2D-NMＲ 和薄层色谱
检识等技术，结合相关文献确定化合物的结构;运用 SＲB法对分离得到的主要成分进行 Hela细胞的细胞毒活性筛选。结
果:从圆叶大黄中分离鉴定出 11 个化合物，分别为大黄酚(1)，大黄素(2)，大黄素甲醚(3)，芦荟大黄素(4)，Ｒheosmin
(5)，1，3，8-trihydroxyanthraquinone(6)，β-谷甾醇(7)，胡萝卜苷(8)，大黄素-1-O-β(6-O-acety)glucopyranoside(9)，大黄素
甲醚-8-O-β(6-O-acety)glucopyranoside(10)，大黄酚-1-O-β(6-O-acety)glucopyranoside(11);对化合物 4、5、6、9、10、11 进行
了细胞毒活性筛选，其中化合物 4、6、9、10、11 均对 Hela 细胞具有细胞毒活性，化合物 5 对 Hela 细胞无细胞毒活性。结
论:8 个化合物(化合物 4-11)均为首次从该植物中分离得到，5 个化合物对 Hela细胞有细胞毒活性，且化合物 5，6，9，10，
11 均为首次对 Hela细胞进行细胞毒活性筛选。
关键词 圆叶大黄;化学成分;细胞毒活性
Primary Study on Chemical Constituents of Ｒheum Tataricum L． F． and Their Cytotoxic Activity
Fu Shenzhen1，Dai Wentao1，2，Fei Ye1，Peng Jiangnan2，Yan Xingli1，Gao Zengping1
(1 Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100102，China;2 University of Texas Health Science Center
at San Antonio，Texas 78229，USA)
Abstract Objective:To investigate the chemical constituents of the Ｒheum Tataricum and evaluate some of the compounds for
cytotoxic activity against Hela cell．Methods:Silica gel，Sephadex LH-20 column，chromatography High Performance Liquid Chro-
matography methods were used to do isolation． The structures of isolates were confirmed by spectral (LC /MS，1H-NMＲ，13C-NMＲ，
2DNMＲ，thin-layer chromatograph)analysis and by comparison with the literature reports;Cytotoxic activities were determined by
the SＲB method． Ｒesults:Eleven compounds were gained and they were chrysophanol (1)，emodin(2)，Physcion (3)，Aloe-emo-
din (4)，Ｒheosmin (5)，1，3，8-trihydroxyanthraquinone (6)，Sitosterol (7)，Daucosterol (8)，emodin8-O-β(6-O-acety)gluco-
pyranoside (9)，physcion1-O-β(6 -O-acety)glucopyranoside (10)，chrysophanol1-O-β(6 -O-acety)glucopyranoside (11);six
compounds were evaluated for cytotoxic activities，five of them showed cytotoxic activity against Hela cell，and they were Aloe-emod-
in，1，3，8-trihydroxyanthraquinone，emodin8-O-β(6-O-acety)glucopyranoside，physcion1-O-β(6-O-acety)glucopyranoside，chry-
sophanol1-O-β(6-O-acety)glucopyranoside，rheosmin has no activity． Conclusion:Eight (compound 4-11)of them are isolated
from Ｒheum nobile for the first time;five of the compounds show cytotoxic activities，compound5，6，9，10，11are evaluated for cyto-
toxic activities against Hela cell for the first time．
Key Words Ｒheum Tataricum;Chemical consitutents;Cytotoxic activity
中图分类号:Ｒ28 文献标识码:A doi:10． 3969 / j． issn． 1673 － 7202． 2015． 01． 029
圆叶大黄(Ｒheum Tataricum L. F. )为蓼科(Po-
lygonaceae)大黄属多年生中型草本植物，别名鞑靼
大黄，在我国主要分布于新疆西部地区，另在阿富
汗、俄罗斯、哈萨克斯坦也有分布［1］，在俄罗斯当地
可做蔬菜食用［2］，在我国尚未有食用和药用价值的
相关报道。但是在西藏市场上发现其作为藏药塔黄
有销售。塔黄为蓼科大黄属高山大黄［3 － 5］(Ｒheum
nobile Hook. f. et Thoms)的根和根茎，产于西藏喜马
拉雅山麓及云南西北部，在藏医中用于治疗黄
水［3，6］、恶性腹水、肾水肿、“培根”病［7 － 8］等，在印
度、锡金等国也被广泛作为药用［9］。对于究竟圆叶
大黄能否代替塔黄入药尚未见相关研究报道，因此
本课题组在研究藏药塔黄的基础上初步探索了圆叶
大黄的化学成分和其主成分的细胞毒活性，为全面
对比藏药塔黄与圆叶大黄的化学成分和药理活性，
确保藏药塔黄的用药安全和有效奠定基础。
1 药材、仪器及试药
药材:购自西藏拉萨，经北京中医药大学魏胜利
副教授鉴定为蓼科大黄属圆叶大黄 Ｒheum Tataricum
L. F. 的根茎。仪器:Bruker-Avance VNS-600 和
Bruker AVANCE-III-500 mHz 型核磁共振仪，Waters
高效液相色谱仪，薄层色谱硅胶及柱色谱硅胶均为
·701·世界中医药 2015 年 1 月第 10 卷第 1 期
青岛海洋化工厂生产，AB-8 型大孔树脂为天津南开
大学化工厂生产，Sanyo CO2 Incubator，Molecular De-
vices Spectra max。试剂:所用试剂均为分析纯。He-
la 细胞购自于 American Type Culture collection，Basal
Medium eagle，trypsin购自于 Sigma Life Science。
2 提取和分离
药材粗粉 10 kg，80%乙醇回流提取三次，2 h /
次。减压回收溶剂得到浸膏，加水分散，依次用石油
醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分别得到五个部
位。石油醚部位，经反复硅胶柱色谱分离及重结晶，
得到化合物 1(891. 4 mg)，化合物 2(16. 5 mg)，化合
物 3(86. 6 mg)，化合物 4(41 mg)，化合物 5(5 mg)。
乙酸乙酯部位，经反复硅胶柱色谱，HPLC 以及重结
晶，得到化合物 6(25 mg)，化合物 7(10 mg)，化合物
8(84. 4 mg)，化合物 9(30 mg)，化合物 10(20 mg)，
化合物 11(5 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1，化合物 2，化合物 3，化合物 7，化合物
8 经与对照品进行 TLC 对比(三个溶剂展开系统)，
分别为大黄酚，大黄素，大黄素甲醚，β-谷甾醇和胡
萝卜苷，化合物 5 经1H-NMＲ(600 mHz，DMSO)确定
其结构为 Ｒheosmin。化合物 4:黄色结晶。1H-NMＲ
(600 MHz，DMSO)δ:7. 261(1H，s，H-2)，7. 651(1H，
s，H-4)，7. 684(1H，d，J = 7. 2 Hz，H-5)，7. 778(1H，
t，J = 7. 8Hz，H-6)，7. 345(1H，d，J = 8. 4 Hz，H-7)。13
C-NMＲ(600 MHz，DMSO)δ:161(C-1)，120. 5(C-2)，
153. 7(C-3)，117. 1(C-4)，119. 2(C-5)，137. 4(C-
6)，123. 7(C-7)，161(C-8)，191. 4(C-9)，181(C-
10)，114. 5(C-11)，135. 1(C-12)，114. 4(C-13)，
136. 5(C-14)。以上数据与芦荟大黄素文献报道的
数据一致［10 － 11］，故鉴定该化合物为芦荟大黄素。化
合物 6:黄色粉末。1H-NMＲ(600 MHz，DMSO)δ:
7. 748(1H，s，H-2)，8. 134(1H，s，H-4)，7. 737(1H，
d，J = 6. 6 Hz，H-5)，7. 827(1H，t，J = 6. 6 Hz，H-6)，
7. 411(1H，d，J = 7. 2 Hz，H-7)。13 C-NMＲ(600 MHz，
DMSO)δ:161. 6(C-1)，124. 4(C-2)，166. 2(C-3)，
119. 4(C-4)，119. 9(C-5)，138. 1(C-6)，125. 2(C-
7)，161. 8(C-8)，191. 9(C-9)，181. 8(C-10)，111. 8
(C-11)，133. 8(C-12)，119. 1(C-13)，139. 7(C-14)。
以上数据与 1，3，8-trihydroxyanthraquinone 的文献报
道一致［12］，故鉴定该化合物为 1，3，8-trihydroxyan-
thraquinone。化合物 9:黄色粉末。ESI-MS:m/z 474
［M］+，497［M + Na］+;1H-NMＲ(600 MHz，DMSO)
δ:6. 949(1H，s，H-2)，7. 289(1H，s，H-4)，7. 445
(1H，s，H-5)，7. 147(1H，s，H-7)，5. 218(1H，d，H-
1)，3. 450(1H，dd，J = 5. 4，7. 2Hz，H-2)，3. 29-3. 376
(H-3，H-4  overlapped with H2O)，3. 686(1H，J =
1. 2，7. 2，10. 2 Hz，H-5 )，4. 100 (1H，J = 6. 0，
10. 2Hz，H-6)，4. 309(1H，J = 7. 2，10. 2Hz，H-6 )。
以上数据与 emodin-8-O-β(6 -O-acety)glucopyrano-
side的文献报道一致［13］，故鉴定该化合物为 emodin-
8-O-β(6-O-acety)glucopyranoside。化合物 10:黄色
粉末。ESI-MS:m/z 488［M］+，511［M + Na］+;1H-
NMＲ(600 MHz，DMSO)δ:7. 151(1H，s，H-2)，7. 392
(1H，s，H-4)，7. 463(1H，s，H-5)，7. 126(1H，s，H-
7)，5. 219(1H，d，J = 6. 6 Hz，H-1)，3. 482(1H，dd，J
= 4. 3，6. 6 Hz，H-2 )，3. 300(1H，t，J = 4. 3 Hz，H-
3)，3. 243(H-4，overlapped with water)，3. 752(1H，
ddd，J = 2. 6，6. 2，9. 3 Hz，H-5)，4. 056(1H，dd，J =
6. 2，9. 3 Hz，H-6)，4. 348(1H，dd，J = 2. 6，9. 3 Hz，
H-6)。以上数据与 physcion-1-O-β(6-O-acety)glu-
copyranoside的文献报道一致［14］，故鉴定该化合物为
physcion-1-O-β(6-O-acety)glucopyranoside 。化合物
11:黄色粉末。ESI-MS:m/z 458［M］+，481［M +
Na］+;1H-NMＲ(600 MHz，DMSO)δ:2. 007(3H，s，-
OAc)，2. 48(3H，s，Me)，7. 497(1H，s，H-2)，7. 725
(1H，s，H-4)，7. 633(1H，d，J = 0. 6 Hz，H-5)，7. 725
(1H，br. s，H-6)，7. 317(1H，d，J = 6. 0 Hz，H-7)，
5. 219(1H，d，J = 6. 6 Hz，H-1 )，3. 489(1H，dd，J =
4. 2，6. 6 Hz，H-2)，3. 357(1H，t，J = 4. 2 Hz，H-3)，
3. 250(H-4，overlapped with H2O)，3. 723(1H，ddd，J
= 2. 4，6. 0，9. 0 Hz，H-5 )，4. 050(1H，dd，J = 6. 0，
9. 0Hz，H-6)，4. 362(1H，dd，J = 2. 4，9. 0 Hz，H-6)，
12. 940(s，OH-8)。以上数据与，chrysophanol-1-O-β
(6-O-acety)glucopyranoside 的文献报道一致［13］，故
鉴定该化合物为 chrysophanol-1-O-β(6-O-acety)glu-
copyranoside。
4 细胞毒活性筛选
4. 1 试验方法 Hela 细胞 BME(Basal Medium Ea-
gle)培养基，置于 37 ℃细胞培养箱中 24 h 后，分别
加入浓度为 20 μg /mL的化合物 4，化合物 5，化合物
6，化合物 9，化合物 10，化合物 11，DMSO 为对照。
给药后置于 37 ℃细胞培养箱中 48 h，然后采用 SＲB
法［15 － 16］进行细胞毒活性筛选及分析。
4. 2 实验结果 经 SＲB 法分析，结果化合物 5 对
Hela细胞没有细胞毒活性，另外 5 个化合物对 Hela
细胞有不同程度的细胞毒活性。其中活性最强的是
化合物 4，细胞数为对照(DMSO)的 20. 6%，活性最
·801· WOＲLD CHINESE MEDICINE January． 2015，Vol． 10，No． 1
弱的为化合物 9，细胞数为对照的 90. 1%，化合物 6，
10 和 11 的细胞数分别为对照的 35. 5%，52. 57%和
53. 0%。
5 总结与讨论
通过对圆叶大黄的化学成分进行初步研究，共
得到 11 个化合物，其中 8 个化合物(化合物 4 － 11)
为首次从该植物中分离得到，进而为圆叶大黄与塔
黄的化学成分对比提供了部分依据;对其中的六个
化合物进行针对 Hela 细胞的细胞毒活性的初步筛
选，SＲB分析结果为其中化合物 4、6、9、10、11 对 He-
la细胞有不同程度的细胞毒活性，化合物 5 对 Hela
细胞无细胞毒活性，这为圆叶大黄与塔黄的药理活
性对比提供依据;五个对 Hela 细胞有细胞毒活性的
化合物均为蒽醌或其苷类，这将为进一步的研究蒽
醌及其苷类化合物的细胞毒活性奠定基础。总之，
通过对圆叶大黄化学成分及部分成分的细胞毒活性
研究，为其进一步的与塔黄进行比较研究奠定基础，
从而确定圆叶大黄是否可以代替藏药塔黄使用，以
确保藏药塔黄的市场规范和用药安全。
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·901·世界中医药 2015 年 1 月第 10 卷第 1 期