全 文 ：3　讨论
水飞蓟素是混合黄酮类化合物 ,且水飞蓟宾和异
水飞蓟宾都是非对映体组成 ,因此在色谱图中是双
峰。本色谱条件下 ,两个峰完全分离。此方法简便快
捷 ,准确可靠。可以作为水飞蓟提取物中水飞蓟宾、异
水飞蓟宾含量测定方法。
参考文献:
〔 1〕　定天明 ,田颂九 . 水飞蓟素制剂中有效成分 HPLC分离
测定 [ J]. 药物分析杂志 , 1999, 10( 3): 304.
〔 2〕　姚水宝 ,杨水新 ,施红敏 . 梯度高效液相色谱法分离测
定利加隆片中水飞蓟宾的含量 [ J]. 中国药业 , 2001, 10
( 8): 13.
〔 3〕　李凤前 ,胡晋红 ,朱全刚 . 水飞蓟素固体分散体中总黄
酮的测定 [ J]. 中草药 , 2002, 33( 1): 31.
(收稿日期: 2004-08-25)
天山大黄总黄酮超声提取及含量测定
张　梅 1 ,兰　卫1 ,李　艳 2 ( 1. 石河子大学药学院 ,新疆
石河子 832002; 2. 石河子大学师范学院 ,新疆 石河子
832003)
摘要: 目的　从天山大黄中提取总黄酮 ,并测定其含
量。方法　运用超声技术连续提取天山大黄总黄酮 ,
用比色法测定总黄酮含量。结果　测得天山大黄中总
黄酮含量 0. 385% ,平均回收率为 98. 96% , RSD =
1. 45% (n = 6)。 结论　首次运用超声技术从天山大
黄中连续提取总黄酮 ,速度加快 ,收率提高。
关键词:超声提取 ;天山大黄 ;总黄酮 ;含量测定
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: A　　　
文章编号: 1004-2407( 2005) 02-0064-02
　　天山大黄 (rheum wittrochi i L. ) ,学名皱叶酸
模。多年生草本 ,多生于山区。全疆均有分布 ,为新疆
特有大黄品种。药理研究表明 ,天山大黄具有泻下、抗
菌、抗病毒、抗肿瘤、利胆和降血脂等作用〔 1〕。目前 ,对
天山大黄有效成分黄酮的研究很少 ,为正确评价天山
大黄的药材质量 ,我们运用超声技术从天山大黄中连
续提取总黄酮〔2〕、并测定其含量 ,结果满意。
1　仪器与试药
1. 1　仪器　 TV -1800紫外分光光度计 , S53 /54紫外
可见分光光度计 , DL-360超声波仪 ( 35kHz,浙江象
山县石浦海天电子仪器厂 ) , TG328B分析天平 ,
DZKW-C电子恒温水浴 (北京光明医疗仪器厂 ) , R-
201旋转蒸发器 (上海申胜生物技术有限公司 ) ,索氏
提取器。
1. 2　试药　芦丁对照品 (中国药品生物制品检定
所 )。其余试剂均为分析纯。天山大黄:采自天山北坡
新疆沙湾县林场内 ,经石河子大学生物学院何敬琨教
授鉴定为 rheum wittrochi i L.。秋后采挖 ,洗净 ,根茎
切片晾干 ,破碎后备用。
2　天山大黄中总黄酮含量测定
2. 1　样品溶液制备　取天山大黄样粉精密称定 2g ,
置索氏提取器中 ,用石油醚 ( 60～ 90℃ )水浴回流脱脂
2次 (每次 2 h)。残渣挥干溶剂后 ,置锥形瓶中 ,加体
积分数 85%的乙醇 50 mL,浸泡 12 h ,超声提取 2
次 ,每次 30 min。过滤 ,另用少量体积分数 85%乙醇
多次洗涤滤渣 ,并入提取液 ,并转入 100 mL容量瓶
中 ,用体积分数 85%乙醇定容 ,摇匀 ,即得测总黄酮
的天山大黄样品液。
2. 2　总黄酮含量测定
2. 2. 1　标准曲线的制定　精密称取 120℃干燥恒重
的芦丁标准品 10 mg,加 85%乙醇溶解 ,定容至 50
mL容量瓶中 ,摇匀 ,制成浓度为 0. 2 g· L- 1的标准
品溶液。分别取标准品溶液 0. 0, 0. 2, 0. 5, 1. 0, 2. 0,
3. 0, 4. 0 m L于 10 mL容量瓶中 ,加 5%亚硝酸钠
0. 4 m L,放置 6 min后 ,加 10%硝酸铝 0. 4 mL,放置
6 min,再加 4%的氢氧化钠 4 mL,加水至刻度 ,摇匀 ,
放置 15 min,然后在 510 nm测定。 以测定吸收度对
浓度做图得直线方程。直线方程为 C = 79. 23A -
0. 459, r = 0. 998 1。在 0. 04～ 0. 8 g· L- 1的范围内 ,
浓度与吸收度有良好的线性关系。
2. 2. 2　样品含量测定　精密吸取供试品溶液 1. 0
mL,置 10 mL容量瓶中 ,按标准曲线的制定项下相
同的方法显色测定。通过标准曲线 ,计算出样品总黄
酮的含量 ,见表 1。
表 1　天山大黄中总黄酮含量测定结果 (% )
测定次数 总黄酮含量 (% )含量 /( mg· L- 1 ) x± s R SD%
1 0. 391
2 0. 377 0. 385± 0. 007 2 1. 87
3 0. 387
2. 2. 3　回收率试验　取已知总黄酮含量的供试品溶
液 0. 5 mL于 10 mL容量瓶中 ,再加入 0. 2 g· L- 1的
标准品溶液 0. 5 mL,依法测定 ,结果平均回收率为
98. 96% , RSD = 1. 45% (n = 6)。
2. 2. 4　稳定性试验　按样品测定方法操作 ,测定同
一供试液在不同时间吸收度。结果表明 ,吸收度值在5
～ 45 min内基本不变。因此测定应控制在45 min内完成。
3　讨论
超声技术已经广泛应用于植物有效成分的提
取〔 3〕 ,其可以大幅度地提高有效成分的提出率 ,既缩
短提取时间 ,又节省溶剂。超声提取一般在常温条件
下进行 ,避免了黄酮的分解。 超声波破碎过程是一个
物理过程 ,浸提过程中无化学反应 ,被浸提的生物活
64 西北药学杂志　 2005年 4月　第 20卷　第 2期
性物质在一定时间内保持不变〔4〕 ,因此 ,采用超声法
提取黄酮 ,可避免因结构改变而使后续的结构分析及
药理活性研究产生错误的结论。 超声法所用仪器简
单 ,操作方便 ,且自动化程度高 ,便于大规模工业化生产。
参考文献:
〔 1〕　郑俊华 . 生药学 [M ]. 北京: 人民卫生出版社 ,第 3版 .
2001. 199.
〔 2〕　任爱农 ,鞠建明 . 野菊不同部位的总黄酮含量测定 [ J].
中草药 , 1999, 30( 8): 589.
〔 3〕　赵兵 ,王玉春 ,欧阳藩 ,等 . 超声波在植物提取中的应用
[ J]. 中草药 , 1999, 30( 9):附 1-3.
〔 4〕　张代佳 ,刘传斌 ,修志龙 ,等 . 微波技术在植物细胞内有
效成分提取中的应用 [ J]. 中草药 , 2000, 31( 9): 附 5-6.
(收稿日期: 2004-09-28)
复方丹参片质量标准的商榷
王亚梅 (南京医药盐都有限公司 ,江苏 盐城 224005)
中图分类号: R927. 11　　　文献标识码: A　　　
文章编号: 1004-2407( 2005) 02-0065-01
　　复方丹参片由丹参、三七、冰片三味中药组成 ,具
有活血化瘀、理气止痛功能 ,用于冠心病的胸闷、心绞
痛等症。目前 ,市场上复方丹参片的假劣药泛滥 ,质量
问题较为严重。而《中国药典》 2000年版中收载的复
方丹参片质量标准又不尽完善 ,据此 ,笔者针对复方
丹参片经常出现的质量问题对其标准的改进提出一
些建议 ,仅供参考。
1　复方丹参片质量检验中发现的问题及分析
1. 1　性状不符合规定　我们比较了市售四家药厂复
方丹参片的性状 ,其中南通中诚药业有限公司生产的
批号为 020421,包装规格为 45片 ,其性状为: 糖衣
片 ,除去包衣后显褐色 ,气芳香 ,味微苦 ,符合药典规
定。另外三家的药品为市场上发现的假药 ,分别是广
东省皇冠药业有限公司生产的批号为 020418,包装
规格为 60片 ,其性状为:糖衣片 ,除去包衣后显灰色 ;
广东大埔制药厂生产的批号为 20020827,包装规格
为 60片 ,其性状为:糖衣片 ,除去包衣后显棕色 ;古井
集团九方制药有限公司生产的批号为 200202030,包
装规格为 60片 ,其性状为:糖衣片 ,除去包衣后显黄
色 ;可见这三家药品的性状均不符合药典规定。 经鉴
定 ,主要是片芯中掺入大量淀粉、滑石粉、微晶纤维素
及其他非药用成分。
1. 2　鉴别 ( 1)不符合规定　 2000年版《中国药典》采
用薄层色谱法鉴别丹参 ,但实践证明 ,按此法检验 ,供
试品色谱中难以显示丹参酮Ⅱ A的斑点。 于是 ,我们
参照了 1990年版《中国药典》收载的紫外吸收分光光
度法 ,分别对上述 4个样品进行紫外吸收检测。结果 ,
南通中诚药业有限公司的样品在 283 nm波长处有
最大吸收 ,吸收度为 0. 59,符合标准规定 ;广东省皇
冠药业有限公司、广东大埔制药厂、古井集团九方制
药有限公司的样品 ,在 283 nm波长处均没有最大吸
收 ,在该波长处的吸收度分别为 0. 14, 0. 09和 0. 10,
不符合规定。 显然 ,后三者的制剂中不含丹参。
1. 3　显微特征与正品不符　虽然复方丹参片质量标
准中没有设定显微鉴别作为质量控制指标 ,但实践证
明 ,采用粉末显微鉴别法 ,结果明显 ,方法简便。 通过
对以上四份样品的粉末显微检测 ,我们发现正品与伪
品的显微特征图截然不同 ,这是因为药品所含成分不同。
复方丹参片存在的质量问题令人担忧 ,究其原
因 ,我们认为 ,这与该品种质量标准的不完善有着密
切的联系。
2　对现行质量标准提出改进的建议
2. 1　仪器与试药　 Olympus牌生物显微镜 (日本 ) ,
硅胶 G薄层板为青岛海洋化工厂预制板 , 10 cm× 20
cm,厚 0. 2 mm。复方丹参片样品由南通中诚药业有
限公司生产 ,批号为 020201, 020301, 020502。 三七、
冰片、丹参酮Ⅱ A都是中国药品生物制品检定所的药
材对照品和化学对照品。化学试剂均为分析纯。
2. 2　方法与结果　取本品 5片 ,糖衣片除去糖衣 ,研
碎 ,加乙醚 50 mL,加热回流 1. 5 h,滤过 ,滤液蒸干 ,
残渣加醋酸乙酯 2 mL使溶解 ,作为供试品溶液。另
取丹参酮Ⅱ A、冰片对照品 ,分别加醋酸乙酯制成每 1
mL含 0. 5 mg的溶液 ,作为对照品溶液。照薄层色谱
法 ( 2000年版《中国药典》附录Ⅵ B)试验 ,吸取上述 3
种溶液各 4μL,分别点于同一硅胶 G薄层板上 ,以苯
-醋酸乙酯 ( 19∶ 1)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干。 供试
品色谱中 ,在与丹参酮Ⅱ A对照品色谱相应的位置
上 ,显相同颜色的斑点 ;喷以 1%香草醛硫酸溶液 ,在
110℃加热数分钟 ,在与冰片对照品色谱相应的位置
上 ,显相同颜色的斑点。
取样品粉末以水合氯醛装片 ,置显微镜下观察:
淀粉粒甚多 ,单粒圆形、半圆形或圆多角形 ,直径 4～
30μm;复粒由 2～ 10余分粒组成。树脂道碎片含黄
色分泌物。梯纹、网纹及螺纹导管直径 15～ 55μm。草
酸钙簇晶少见 ,直径 50～ 80μm。再取三七粉末 ,同法
置显微镜下观察 ,结果样品主要显微特征与三七一致。
2. 3　小结与讨论　复方丹参片原标准《中国药典》
2000年版一部 ,采用超声波提取法提取丹参酮Ⅱ A
与冰片 ,供试品色谱中只显示冰片斑点 ,不显示丹参
酮Ⅱ A斑点。 采用改进后的方法 ,这两个斑点都能显
色清晰 ,易于观察。原标准未设定显微鉴别项 ,改进后
的方法增加此项鉴别 ,能更准、更快地检出三七 ,因丹
参经过了提取 ,冰片含量较少 ,不能通过此法鉴别。实
践证明 ,改进后的方法是切实可行的。
参考文献:
〔1〕　中国药典 2000年版 [ S]. 一部 . 2000. 518.
(收稿日期: 2004-09-17)
65西北药学杂志　 2005年 4月　第 20卷　第 2期