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不同产地藏药材湿生扁蕾中多糖的含量测定



全 文 :作者简介:李 炀(1987 -) ,男,硕士研究生,主要从事中药制剂
工艺与新剂型研究
* 通讯作者:景 明(1963 -) ,男,教授,主要从事中藏药资源与
开发研究。Tel:(0931)8761250,E - mail:jm@ gszy. edu. cn
不同产地藏药材湿生扁蕾中多糖的含量测定
李 炀1 景 明1,2﹡ 陈 晖1
(1.甘肃中医学院,甘肃 兰州 730000; 2.甘肃省中药药理与毒理学重点实验室,甘肃 兰州 730000)
摘 要:目的:通过测定不同产地、不同采收期湿生扁蕾中多糖的含量,考察湿生扁蕾的最佳最佳产地与采收期。方法:用
硫酸 -苯酚法测定分析甘肃 15 个不同产地湿生扁蕾药材中多糖的含量。结果:15 个不同产地湿生扁蕾药材中多糖的含量
差别较大,最高为 2. 98%(g·g -1) ,最低为 1. 01 %(g·g -1)。结论:同一产地 7 月份以后采收的湿生扁蕾多糖的含量高;
甘肃 15 个产地中以甘肃卓尼县口子下村产湿生扁蕾中多糖的含量最高。
关键词:湿生扁蕾;多糖;含量测定;分光光度法
中图分类号:R291. 4 文献标识码:A 文章编号:1006 - 6810(2013)01 - 0048 - 02
湿生扁蕾为龙胆科扁蕾属植物 Gentianop sispaludosa
(Munro)Ma.的干燥全草,藏药称机合斗,产于甘肃、青
海、四川、西藏等地区,生长在海拔 2300 ~ 4100 m 的河滩
草地、沟边、山坡。具有清热解毒、止痛、利湿消黄、健脾
止泻等功效,用于治疗肝炎、胆囊炎、热病发斑、泄泻、肠
胃炎、结膜炎、急性肾盂肾炎、疥疮肿毒等症,藏医用全草
治疗流行性感冒及胆病引起的发烧〔1〕。对所含化学成分
包括黄酮类、山酮类、三萜类、三十烷醇、胡萝卜苷、β -谷
甾醇、酚类、有机酸等的研究已有报道〔2 - 3〕,但对湿生扁蕾
多糖成分的研究尚未见报道。本实验拟采用硫酸苯酚法
测定藏药湿生扁蕾中多糖的含量,对不同产地、不同采收
期湿生扁蕾中多糖的含量作一比较,为该药材的质量评
价提供参考依据。
1 仪器与试药
AE - 240 电子天平(梅特勒 -托利多仪器上海分公
司) ;KQ - 100 超声波清洗器(昆山市超声技术有限公
司) ;R - 200 旋转蒸发仪(瑞士布奇)。硫酸(分析纯,白
银良友化学试剂有限公司) ;苯酚(分析纯,天津市光复精
细化工研究所) ;水为重蒸馏水;其它试基金项目:甘肃省
科技支撑计划项目(0804NKCA119 - 08)剂均为分析纯。
葡萄糖对照品(含量测定用,购自中国药品生物制品检定
所) ;湿生扁蕾药材采自甘肃 15 个不同产区,由甘肃省药
品检验所中药室宋平顺主任中药师对以上品种进行鉴
定。
2 方法与结果〔4 - 5〕
2. 1 多糖的提取分离:湿生扁蕾药材用石油醚(60 ~
90℃)脱脂,药渣挥尽石油醚,加水煎煮 3 次,每次加 10 倍
量水,煎煮 1h,合并水煎液,滤过,滤液减压浓缩至相对密
度为 1. 15 ~ 1. 20(g·mL -1)的浸膏,搅拌下加 4 倍 95%乙
醇沉淀 24h,滤过,沉淀加水溶解,加 1 倍量 20%三氯乙酸,
搅拌 20min,滤过,滤液用 2mol·L -1氢氧化钠迅速中和至
pH7. 0 左右,加 1. 5%活性炭脱色 30min,滤过,滤液再加 4
倍 95%乙醇沉淀,滤过,沉淀 60℃以下干燥,即得湿生扁蕾
多糖。
2. 2 对照品溶液的制备:精密称取 105℃干燥至恒重的无
水葡萄糖对照品 82mg,置 100 mL量瓶中,加水溶解并稀释
至刻度,摇匀,作为对照品溶液。
2. 3 供试品溶液的制备:精密称取不同产地湿生扁蕾药材
提取的多糖 0. 5g,置 100mL 量瓶中,加水溶解并稀释至刻
度,摇匀,作为供试品溶液。
2. 4 标准曲线的制备:精密吸取对照品溶液 1. 0、1. 5、2.
0、2. 5、3. 0mL,分别置 50mL量瓶中,加水至刻度,摇匀。精
密量取上述各溶液 2. 0mL,置具塞试管中,分别加 4%苯酚
溶液 1mL,混匀,迅速加入硫酸 7. 0mL,摇匀,于 40℃水浴
中保温 30min,取出,置冰水浴中 5min,取出,以相应试剂为
空白,在 490nm测定吸光度。以吸光度(A)为纵坐标,浓度
(C)为横坐标,绘制标准曲线。回归方程为:A =57. 248C +
0. 0695,r = 0. 9984。结果无水葡萄糖在 0. 82 ~ 2. 46μg 范
围内线性良好。
2. 5 样品含量测定:分别精密量取供试品溶液 2. 0mL,按
2. 4 项下方法自“加 4%苯酚溶液 1mL”起处理,依法测定
吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中无水葡萄糖的重
量(mg) ,计算含量,结果见表 1 及表 2。
84 中国民族医药杂志 2013 年 1 月第 1 期
DOI:10.16041/j.cnki.cn15-1175.2013.01.041
表 1 不同产地湿生扁蕾多糖的质量分数
产 地 采收日期
多糖含量%
(g·g - 1)
甘肃临潭县冶力关村 2008 - 07 - 22 1. 78
甘肃临潭县下拉地村 2008 - 07 - 22 2. 48
甘肃卓尼县上卓村 2008 - 07 - 22 2. 01
甘肃卓尼县口子下村 2008 - 07 - 22 2. 98
甘肃卓尼县刹地沟村 2008 - 07 - 22 1. 70
甘肃临潭县江果河村 2008 - 07 - 23 1. 52
甘肃合作市多合寺村 2008 - 07 - 23 1. 39
甘肃合作市德乌鲁村 2008 - 07 - 25 1. 57
甘肃合作市上上加寺村 2008 - 07 - 25 1. 07
甘肃合作市日多马村 2008 - 07 - 25 1. 65
甘肃碌曲县科才沟口村 2008 - 07 - 27 1. 43
甘肃碌曲县唐龙多村 2008 - 07 - 27 1. 22
甘肃夏河县洛赤霍纳尕村 2008 - 07 - 28 1. 16
甘肃夏河县观音大庄村 2008 - 07 - 28 1. 34
甘肃夏河县甘加贡玛村 2008 - 07 - 28 1. 01
表 2 不同采收期湿生扁蕾多糖的质量分数
采收日期 /年 -月 -日 多糖含量%(g·g - 1)
2009 - 07 - 14 2. 03
2009 - 07 - 20 2. 62
2009 - 07 - 28 2. 92
2009 - 08 - 07 2. 89
2009 - 08 - 15 2. 91
2009 - 08 - 24 2. 87
2009 - 09 - 03 2. 89
2009 - 09 - 15 2. 83
2009 - 09 - 22 2. 90
2009 - 10 - 04 2. 82
2009 - 11 - 09 2. 89
2009 - 12 - 07 2. 81
3 讨 论
实验曾考察了加水量、煎煮时间、煎煮次数对水煎提取
的影响,结果以每次加 10 倍量水煎煮 1h 煎煮 3 次时湿生
扁蕾多糖提取率最高。同时对影响醇沉的因素浸膏密度、
加醇速度、含醇浓度也进行了考察,结果以浸膏密度 1. 15
~ 1. 20(g·mL -1) ,搅拌下按 1 /2 浸膏体积速度加入 4 倍
量 95%乙醇时湿生扁蕾多糖得率最高。
实验中还曾对 20%三氯乙酸与氯仿 -正丁醇(5:1)去
除蛋白进行比较,结果氯仿 -正丁醇宜乳化,分离困难,确
定用 20%三氯乙酸去除蛋白。同时对石油醚脱脂、活性炭
脱色进行考察,10 倍量石油醚(60 ~ 90℃)脱脂 2 次、1. 5%
活性炭脱色 30min较理想。
实验结果表明,甘肃 15 个不同产地湿生扁蕾全草中多
糖的含量差别较大,其中最高为 2. 98%(g /g) ,最低为 1. 01
%(g /g)。而且同一产地的不同采收期之间多糖含量也有
差异。分析影响本实验结果的因素可能是生态环境光照、
气候、土壤等的不同所致。
参考文献
[1]张宝琛,甄润德,胡柏林,等.湿生扁蕾的化学成分研究
〔J〕.中草药,1980,11(4) :149.
[2]李作平,霍长虹,郑小莉. 扁蕾的化学成分研究〔J〕. 中
国现代应用药学杂志,2003,20(1) :24.
[3]王焕弟,谭成玉,杜昱光,等.藏药湿生扁蕾的化学成分
研究〔J〕.中国药学杂志,2005,40(14) :105.
[4]单俊杰,王顺春,刘 涤,等.黄芪毛状根与栽培黄芪中多
糖的比较〔J〕.中草药,2001,32(5) :413 - 414.
[5]中华人民共和国药典(2010 版一部)〔M〕.北京化学工
业出版社:57.
2012 年 10 月 17 日收稿
乌珠木(1982 -) ,呼伦贝尔人,药师,学士,从事蒙医药物制剂研究
HPLC法测定蒙药安神补心六味丸中丁香酚的含量
乌珠木
(呼伦贝尔市人民医院,内蒙古 海拉尔 021000)
摘 要:目的:建立蒙药安神补心六味丸中丁香酚的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,HypersiL ODS C18(250mm
×4. 6mm,5μm)色谱柱;以甲醇 -水 -磷酸(65:35:0. 05)为流动相;流速:1. 0mL·min -1;柱温为 30℃;检测波长:203nm。
结果:丁香酚在 0. 025μg ~ 0. 150μg与峰面积值具有良好的线性关系。丁香酚的平均回收率为 99. 27 /%、RSD 为 1. 63%。
942013 年 1 月第 1 期 中国民族医药杂志