全 文 :三花龙胆和东北龙胆地上 、地下器官中獐芽菜苦苷积累规律研究
江蔚新
(哈尔滨商业大学药学院 ,黑龙江哈尔滨 150076)
收稿日期:2004-12-01
作者简介:江蔚新(1957~ ),男 ,黑龙江哈尔滨人,副教授 ,从事天然药物教学研究 ,电话:0451-84838207。
关键词:三花龙胆;东北龙胆;獐芽菜苦苷;反相高效液相色谱法;含量测定
摘要:目的:研究三花龙胆地上器官和地下器官獐芽菜苦苷积累相关规律。方法:采用反相高效液相法。结果:獐芽菜苦
苷在三花龙胆中积累规律 ,根 >茎 >叶 >花 , 且随植物的花期而变化。在东北龙胆中积累规律 , 地下部分根 、根茎和地上
部分茎的含量相对高于叶和花 ,且茎在 5月份后含量逐渐减少 , 而根的含量变化不大。叶的变化比较平稳 , 含量很低。
而花中由于獐芽菜苦苷含量太低 ,几乎检测不到。结论:可能存在着花期时有效成分向上输送 , 而花期后有效成分向下
输送的趋势。
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2005)04-0459-03
Swertiam arin of related overground and underground organ ofGen tiana
JIANG Wei-x in
(D epartm ent o fPha rmacy , Harbin Comm ercia lUniversi ty, Harbin 150076 , Ch ina)
KEYWORDS:G. triflora pall. ;G. manshurica K itag. ;sw e rtiamarin;RP-HPLC;de te rm ination
ABSTRACT:AIM:To study the re lated regu lation of sw ertiam arin of overg round and unde rg round organ o fG.
triflora pall and G. manshurica K itag. METHODS:RP-HPLC was applied. RESULTS:The con tent of sw er-
tiama rin inGentiana triflora pall andG. manshurica K itag. :Rad ix>S tem >leaf>flow er, changed w ith the blosso-
m ing period. CONCLUSION:Itmay be a rela tionship betw een the conten t and blossom ing period.
龙胆为常用中药 ,中国药典 2000版收载为龙胆
科植物条叶龙胆 Gen tiana manshurica K ITAG. 、龙胆
Gentiana scabra BGE. 、三花龙胆 Gentiana triflora
PALL.或坚龙胆 Gentiana rigescens FRANCH.的干燥
根及根茎 ,具有清热燥湿 ,泻肝胆火的功效 ,主治湿
热黄疸 ,阴肿阴痒 ,带下 , 强中 ,湿疹搔痒 ,目赤等
症 [ 1] 。一直以来中医以龙胆入药 ,只取其根及根茎
部分 ,而地上部分则被当作废料丢弃。近年来的研
究表明 ,龙胆地上部分也有一定的药用价值 ,而龙胆
药材需求量大增 ,野生资源逐年减少 ,不少地区开始
大量人工栽培 ,仍不能满足需求 ,因此 ,为了更合理
有效的开发有效资源 ,充分发掘我国中医药宝库中
的潜在价值 ,我们对三花龙胆 、东北龙胆的茎 、叶 、
花 、根中的獐芽菜苦苷进行了较深入的研究。
1 仪器与试药
仪器 美国 (戴安 )高效液相色谱仪 , UVD340U
二极管阵列检测器 , P680LPG泵 , ASI-100自动进样
器 ,美国 d imoC18色谱柱 , dionex色谱工作站。
对照品 獐芽菜苦苷 (0785-200203)购自中国
药品生物制品检定所。
试剂 水为重蒸水;甲醇为色谱纯;其他试剂均
为分析纯 。
样品 三花龙胆 、东北龙胆采自哈尔滨市蒋化
龙胆种植基地 ,经本院中药鉴定教研室沈志滨副教
授鉴定为三花龙胆 。
2 实验方法及结果 [ 2 ~ 3]
2. 1 液相色谱条件
流动相:水-甲醇(70∶30),检测波长 240 nm ,柱
温 28 ℃,流速:0. 8 mL m in-1。
2. 2 标准曲线的制备
分别精密称取獐芽菜苦苷 0. 0066 g置于 10mL
量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 。分别取上述溶
液 0. 25 , 0. 5, 1, 2, 5 mL置于 5 mL量瓶中并稀释至
刻度 ,摇匀 ,备用。
459
2005年 4月
第 27卷 第 4期
中 成 药
Chine se T raditiona l PatentM ed icine
April 2005
Vo .l 27 No. 4
分别取上述标准液 10 μL,进样 ,以进样量 (X)
为横坐标 ,峰面积 (Y)为纵坐标 ,得线性方程为:Y =
22. 215X - 3. 7038, r=0. 9998,在 0. 32 ~ 6. 6 μg呈
线性关系。
2. 3 供试液的制备
精密称取干燥生药粉末(40目 )500mg,置玻璃
试管中 ,准确加入甲醇 10 mL,称重 ,室温下超声处
理 60m in,取出补足重量后 ,离心 ,上清夜备用。
2. 4 精密度实验
取供试品溶液连续进样 5次 ,测得獐芽菜苦苷
平均含量为 0. 217 ,RSD为 1. 1 。
2. 5 重复性实验
精密称取样品粉末 5份 ,按含量测定方法操作。
结果:獐芽菜苦苷平均含量为 0. 215 , RSD 为
1. 47 。
2. 6 样品溶液的稳定性实验
取供试品溶液 ,分别在 0, 2, 4, 6, 8 h稳定 ,獐芽
菜苦苷 RSD为 0. 5 ,表明獐芽菜苦苷在 8 h内稳
定。
2. 7 加样回收实验
精密称取样品粉末 500 mg 6份 , 5份分别加入
一定量对照品并加甲醇 10 mL,另一份作对照 ,依法
测定 ,计算回收率 ,结果见表 1。
表 1 回收率结果(n=5)
Tab le 1 R esu lts of recovery test(n=5)
对照品 样品含量(mg) 对照品加入量(m g) 加样后测得的总量(mg) 回收率( ) –x±s RSD( )
獐芽菜苦苷 1. 121 1. 2 2. 406 104. 6 100. 1±3. 55 3. 55
1. 121 1. 3 2. 455 101. 4
1. 121 1. 1 2. 154 97. 0
1. 121 1. 3 2. 324 96. 0
1. 121 1. 2 2. 356 101. 5
2. 8 样品测定
分别精密称取三花龙胆和东北龙胆各部位干燥
生药粉末(40目 )500 mg,按 2. 3项下方法制备供试
品溶液 。
样品浓度在线性范围内的样品直接吸 10μL进
样 ,浓度大的样品适当稀释后进样 ,均通过回归方程
计算浓度 ,所得结果见表 2,东北龙胆所得结果见表
3。獐芽菜苦苷对照品和样品色谱图见图 1,獐芽菜
苦苷在三花龙胆和东北龙胆中的积累规律见图 2和
图 3。
表 2 三花龙胆样品含量测定结果
Tab le 2 Assay resu lts of sam p les( , n=3)
采收期 根 茎 叶 花
5月 0. 230 0. 09 0. 058
6月 0. 134 0. 102 0. 054
7月 0. 130 0. 201 0. 059 0. 035
8月 0. 147 0. 119 0. 037 0. 114
9月 0. 216 0. 076 0. 053 0. 117
10月 0. 122
表 3 东北龙胆样品含量测定结果( , n=3)
Table 3 A ssay resu lts o f samp les( , n=3)
采收期 根 茎 叶 花
5月 0. 490 1. 600 0. 0062
6月 0. 389 0. 589 0. 0313
7月 0. 402 0. 301 0. 0160
8月 0. 282 0. 010 0. 0350 tr
9月 0. 294 0. 025 0. 0278 tr
10月 0. 304
注:tr表示痕量
图 1 对照品 、三花龙胆样品 、东北龙胆样品色谱图
A:獐芽菜苦苷对照品色谱图 B:三花龙胆样品色谱图 C:东北龙
胆样品色谱图 a:獐芽菜苦苷
460
2005年 4月
第 27卷 第 4期
中 成 药
Chine se T raditiona l PatentM ed icine
April 2005
Vo .l 27 No. 4
图 2 獐芽菜苦苷在三花龙胆中的积累规律
图 3 獐芽菜苦苷在东北龙胆中的积累规律
4 讨论
4. 1 本文用水-甲醇 (70∶30)系统可较好地将其中
2味苦味苷分开 ,且全部组分在 30 m in内流出 。 2
种苦味苷在 240 nm 处均有吸收 ,且能避免在 254
nm处杂质产生的干扰 [ 4] 。
4. 2 在三花龙胆样品色谱图中 ,獐芽菜苦苷与前一
峰的分离度 R为 1. 5,与后一峰的分离度 R为 1. 8,
实现了有效的分离。在东北龙胆样品色谱图中 ,獐
芽菜苦苷与前一峰的分离度 R为 1. 6,与后一峰的
分离度 R为 2. 0,实现了有效的分离。
4. 3 獐芽菜苦苷在三花龙胆中积累规律 ,根 >茎 >
叶 >花 ,且随植物的花期而变化 。可能存在着花期
时有效成分向上输送 ,而花期后有效成分向下输送
的趋势。
4. 4 獐芽菜苦苷在东北龙胆的不同部位含量均很
低。獐芽菜苦苷在不同部位的含量分布也随植物的
生长发育而波动 ,地下部分根 、根茎和地上部分茎的
含量相对高于叶和花 ,且茎在 5月份后含量逐渐减
少 ,而根的含量变化不大 。叶的变化比较平稳 ,含量
很低 。而花中由于当药苦苷含量太低 ,几乎检测不
到。
参考文献:
[ 1] 中华人民共和国药典 2000版.一部 [ S] . 北京:化学工业出版
社 , 2000, 72-73.
[ 2] 高光跃 ,李鸣 ,冯毓秀 ,等. 11种獐芽菜及近缘植物中有效成分
的高效液相色谱测定 [ J] .药学学报 , 1994, 29(12):910-914.
[ 3] 张建生 ,田子新.九种龙胆中五种裂环烯醚萜类苦味成分的高
效液相色谱定量分析 [ J] .药学学报 , 1991, 26(11):864-870.
[ 4] Sakam am oto I. App lication of h igh perform an ce liqu id ch rom a-
tograpgy and field desop tionm ass spectroscopy to seerelative ana ly-
sis of b itter secoirdoid glu cos ides of Sw ertia H erb a[ J] . Chen
Pharm Bu ll, 1983, 31:25-26.
英科学家成功研发心脏病预警系统
伦敦消息:位于英国牛津科学园区的一家小型公司已成功研发出一种仪器 ,可以在心脏病患者发病前两
小时 ,测出他们在心律与体温上的轻微变化并预先发出警示 。
“牛津生物信息公司”最初研发这种仪器时并非为心脏病患者而设计 ,而是为了测出飞机引擎震动频率
的改变 ,以便及时发出警告 ,避免问题继续恶化 。
据悉 ,这种仪器已经被美国医学界引进 ,目前正在进行进一步的试验。
(信息由新华社提供)
秘鲁科研人员称科科纳果具有降血糖降血脂功效
据当地新闻媒体报道 ,秘鲁医学科研人员经过长期的研究后确认 ,秘鲁大量生产的一种名叫科科纳
(Cocona)的水果不仅有明显的降血脂作用 ,而且还有很好的降血糖功能。
医学科研人员建议血脂或血糖高的人食用科科纳果 ,食用这种水果 3天后就能出现血脂或血糖下降的
效果。试验证明 ,食用科科纳果不仅能获得比服用药物更明显的效果 ,而且没有任何副作用。
(信息由新华社提供)
461
2005年 4月
第 27卷 第 4期
中 成 药
Chine se T raditiona l PatentM ed icine
April 2005
Vo .l 27 No. 4