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三花龙胆不同器官中獐芽菜苦苷含量变化研究



全 文 :三花龙胆不同器官中嶂芽菜苦普含量变化研究
江蔚新 (哈尔滨商业大学药学院 , 黑龙江 哈尔滨 巧助6)
摘要 : 目的 研究三花龙胆地上 器官和地下器官璋芽莱苦苍积 累相关规律 。 方法 采用反相高效液相色谱法 。 结果 择芽
菜苦普在三花龙胆中积 累规律 ,根 > 茎 > 叶 > 花 ,且随植物的花期 而 变化 。 结论 樟芽菜苦普在地 下部分根 、 根茎和地上部
分茎的含量相对高于叶和花 , 且茎在 7 月份达到最大值 , 而根在 9 月份达到最大值 。
关键词 : 三花龙胆 ; 璋芽菜苦普 ;反相高效液相色谱法 ;含量测定
中图分类号 : 9R 31 . 5 文献标识码 : A 文章编号 : 10 1 一 2 4 94 (2X() 5 ) 13 - ({珍7 5 一 02
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龙胆为常用中药 , 中国药典 2州X〕年版一部收载
的龙胆药材为龙胆科植物条叶龙胆 ( 晓nt 讯an anI n -
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.
)
, 龙 胆 ( G . cs ab ar Bge . ) , 三 花龙 胆
( ` . t r办 , ar alP l . )或坚龙胆 ( ` . 门邵〕义 c o Fm l l c h . )的
干燥根及根茎 。 龙胆具有清热燥湿 , 泻肝胆火的功
效 ,主治湿热黄疽 , 阴肿阴痒 ,带下 , 强中 ,湿疹搔痒 ,
目赤等症 〔` 〕。 一直以来药用龙胆只取其根及根茎部
分人药 , 而地上部分则被当作废料丢弃 。 近年来的
研究表明 , 龙胆地上部分也有一定的药用价值 ,而龙
胆药材的需求量大增 ,野生资源逐年减少 ,不少地区
开始大量人工栽培 ,仍不能满足需求 , 因此 , 为了更
合理的开发有效资源 , 充分发掘我 国中医药宝库中
的潜在价值 , 我们对三花龙胆的茎 、 叶 、 花 、根中的璋
芽菜苦昔含量进行了比较研究 。 同时 ,对三花龙胆
各器官有效成分的动态积累进行了探讨 , 为龙胆栽
培 、采收 、 生产 、加工提供科学依据 。
1 仪器与试药
美国 (戴安 )高效液相色谱仪 , vu D 340 u 二极管
阵列检测器 , 6P 80 I J毛 泵 , AS I 一 10 自动进样器 , 美
国 iD mo 1C 8色谱柱 , iD on ex 色谱工作站 。 璋芽菜苦昔
( 0’7 85 一 20 20 3 ,中国药品生物制品检定所 ) 。 水为重
蒸水 ;甲醇为色谱纯 ;其他试剂均为分析纯 。 药材采
自哈尔滨市蒋化龙胆种植基地 , 经本院中药鉴定教
研室沈志滨副教授鉴定为三花龙胆 ` . t r尹。 ar p a U . 。
每次采挖 10 株以上全草 , 自然干燥 ,备用 。 样品保
存在哈尔滨商业大学药学院药化教研室 。
2 方法及结果 [ 2 一 3 ]
2
.
1 色谱条件
流动相 : 水一甲醇 ( 70 : 3 0 ;) 检测波长 : 2 40 ln ;柱
温 : 28 ℃ ;流速 : o . s mL
· 而 n 一 ’ 。
.2 2 标准 曲线的制备
分别精密称取璋芽菜苦昔 0 . 0 3 9 置于 or mL
量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 。 分别取上述溶
液 0 . 25 , 0 . 5 , 1 , 2 , s mL 置于 s nrL 量瓶中并稀释至刻
度 ,摇匀 ,备用 。
分别取上述标准液 10 拼L , 进样 , 以进样量 ( X )
为横坐标 ,峰面积 ( )Y 为纵坐标 ,得线性方程为 : Y =
2 2
.
Z 15 X 一 3
.
7 0 3 8
, r = 0
.
99 8
,在 0 . 15 一 3 . 0 此 呈
线性关系 。
.2 3 供试液的制备
精密称取干燥生药粉末 ( 40 目 ) so mg ,置粗玻
璃试管中 ,准确加人甲醇 10 nrL , 称重 , 室温下超声
处理印 而 n ,取出补足重量后 ,离心 ,上清液备用 。
.2 4 精密度实验
取供试品溶液连续进样 5 次 , 测得璋芽菜苦昔
平均含量为 0 . 21 7% , SR D 为 1 . 1% 。
作者简介 : 江蔚新 , 硕士 ,教授 T e l月 ; ,拟 : (以 5 1 )别 83 82 (n E 一~ :lj i出 Ig w e 加 .设砚1〕3 @ 163 . ~
中国药学杂志 2田 5 年 7 月第 4D 卷第 13 期 hC 认 产刁刁左n J , 2仪万 五为 , Vol . 40 oN . 了了 · 97 5
.2 5 重复性实验
精密称取样品粉末 5份 ,按含量测定方法操作 。
结果 璋 芽 菜苦 昔 平 均 含量 为 0 . 21 5% , SR D 为
1
.
4 7%

2
.
6 样品溶液的稳定性实验
取供试品溶液 , 分别在 。 , 2 , 4 , 6 , s h 测定 ,璋芽
菜苦昔 SR D 为 0 . 5% , 表明璋芽菜苦昔在 s h 内稳
定 。
2
.
7 加样回收率实验
精密称取已知被测成分含量的三花龙胆粉末
25 0 mg s 份 ,分别加入一定量的对照品 ,按供试液制
备方法处理并测定 ,计算回收率 ,结果见表 1。
表 1 回收率实验结果 . n = 5
T a b 1 eR
s曲 5 of er e 盯 e叮 t e s t s . n = 5
样品中苦昔量 加人量 测得量 回收率 无 B SD
/ mg /毗 l/ 飞 / % / % / %
0
.
57 0
,
5 3 1
. 田 勇 . 17
0

5 8 0
.
5 3 1
. 《哭) 98 . 5 9
0
.
58 0
.
53 1 10 98
.
7 8 98
.
72 0 5 6
0 58 0 53 1
.
1 0 卯 . 2 3
0
.
57 0
.
53 1
.
08 97
.
8 5
3 样品测定
精密称取干燥生药粉末 (钓 目 ) s o mg ,置粗玻
璃试管中 ,准确加入 甲醇 10 rnL , 称重 ,室 温下超声
处理 60 m in ,取出补足重量后 ,离心 ,上清液备用 。
样品浓度在线性范围内的样品直接吸 or 胖L 进
样 ,浓度大的样品适当稀释后进样 ,均通过回归方程
计算浓度 , 所得结果见表 2 。 璋芽菜苦昔对照品和
样品色谱图见图 1 , 樟芽菜苦昔在三花龙胆中的积
累规律见图 2 。
表 2 样品含量测定结果 . % , n = 3
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采收期 茎 叶 花
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4 讨 论
4
.
1 通过对三花龙胆不同部位中璋芽菜苦普 的含
量测定 ,结果表明 ,璋芽菜苦昔在三花龙胆的不同部
位含量均很低 。 但地下部分根 、 根茎和地上部分茎
图 1 璋芽菜苦普对照 品和三花龙胆样品色谱图
A一 璋芽菜苦昔对照品色谱图 ; B 一 三花龙胆根色谱图 ;C 一 三花龙胆茎色谱图 ;D 一 三花龙胆叶色谱图 ;E 一三花龙胆花色谱图 ; a 一璋芽菜苦昔
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~ 部分茎的变化与根系相反 ;叶的变化比较平稳 。
4
.
2 流动相用 甲醇 一水 ( 3 0 : 7 0) ,在波长 240 lun 的条
件下 ,可较好地将样品中的璋芽菜苦昔与其他成分
分开 。 在三花龙胆样品色谱图中 , 璋芽菜苦昔与前
一峰的分离度 R 为 1 . 5 , 与后 一峰的分离度 R 为
1
.
8
,实现了有效的分离 。 且全部组分在 20 而 n 内流
出 [4〕。
参考文献
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〔2] 高光跃 ,李鸣 ,冯毓秀 ,等 . H 种璋牙菜及近缘植物中有效成
分的高效液相色谱测定 〔J] . 药学学报 , 1卯 4 , 29 ( 12) : 9 10 .
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高效液相色谱定量分析「J] . 药学学报 , 19 1 , 26 ( 11 ) : 8“ .
[4 ] S砍盖” 1 1田 n o t o I . A即 il e丽 on of h igh l ” , 毛” 1 l l an c e li甲 id d l r O l ll a t卿习 x〕盯
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(收稿日期 : Z J 妈一 fl 一03 )
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采收期 / 月
图 2 三 花龙胆 不同部位璋芽菜苦普变化趋势
闷卜 一根 ; 屯工 一 茎 ; 刁` 一叶 ; 刁卜 一 花
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n d e cn y of ~ irt一 n in d漩re nt it me闷卜 一 。 此 4二乎 一 s tem ; 刁` 一 L ,司 ; 刁卜 一 几明 e r
的含量相对高于叶和花 ,且茎在 7 月份达到最大值 ,
而根在 9 月份达到最大值 。 璋芽菜苦昔在不同部位
的含量也随植物的生长发育而波动 , 龙胆根系中的
璋芽菜苦昔含量随植株生长发育而波动 ,在花期前
和花期均减少 ,但花期末和花期结束后增加 ;而地上
97 6
·
hC in 月 u ln 刀 J , 2`叉巧 九匀, Vol . 40 oN . 月 中国药学杂志 2 (X) 5 年 7 月第 4D 卷第 13 期