全 文 ：药材样品中菝葜皂苷元的含量 ,方法准确、简便、灵
敏、重现性良好。 虽然天冬中菝葜皂苷元的含量不
高 ,但在至今天冬尚无单一指标性成分的含量测定
标准的情况下 ,该法可作为天冬及其制剂的质量控
制手段之一。
3. 3　样品溶液制备时 ,笔者对天冬的提取方法进行
过考察 ,对先提取皂苷再水解成皂苷元与先水解后
再提取皂苷元 ,采用超声提取和索氏提取器回流提
取分别进行了对比研究 ,结果表明:采用先水解后再
用索氏提取器回流提取皂苷元杂质干扰少 ,样品提
取完全 ,故确定采用 2. 2样品制备方法。
3. 4　在天冬样品液薄层层析板上 ,在菝葜皂苷元淡
黄色斑点上方有一红紫色斑点 ,经验证该点为 β-谷
甾醇斑点。此二点极难分离 ,故须多次展开。
3. 5　天冬药材的传统加工工艺是将生品蒸或煮后
剥去外皮 ,晒干得药材。但由表 7可看出天冬皮中菝
葜皂苷元的含量较高 ,笔者还曾对天冬皮中多糖和
总皂苷含量进行过测定 ,结果表明天冬皮中总多糖
和总皂苷的含量亦较高 (该内容将另文报道 )。由此 ,
笔者认为天冬传统加工工艺的合理性有待于进一步
验证。
参考文献
[ 1 ]　中华人民共和国卫生部药典委员会 .中国药典 .一部 [S ] .北
京:人民卫生出版社 , 2000. 42.
[ 2 ]　天冬类专题研究 .常用中药材品种整理与质量研究 (第四册 )
[M ] , 1995. 216.
[3 ]　余伯阳 ,罗向东 ,徐颖 .天冬类药材中洋菝葜皂苷元的含量测定
[ J ].中药材 , 2001, 24( 8): 577.
[ 4 ]　姚念环 ,孔令义 .天门冬属植物中的甾体皂苷及药理作用 [ J ].
国外医药 (植物药分册 ) , 2001, 16( 6): 247.
[ 5]　程志红 ,余伯阳 .天门冬属植物化学成分及生物活性研究进展
[ J ].天然产物研究与开发 , 2000, 11( 2): 67.
[ 6 ]　马长华 ,钱　捷 .知母中菝葜皂苷元含量测定 [ J ] .中成药 ,
2000, 22( 11): 804.
[7 ]　任爱农 ,季锡忠 ,农湘鸿 .知母中菝葜皂苷元含量测定方法探讨
[ J ].中成药 , 2000, 22( 2): 171.
[8 ]　张国刚 ,徐绥绪 ,周　密 .双波长薄层扫描法测定抗病毒口服液
中菝葜皂苷元的含量 [ J] .中草药 , 1994, 25(2) : 69, 90.
[9 ]　闫雪生 ,于宗渊 ,周向华 .薄层扫描法测定酸枣仁颗粒中菝葜皂
苷元的含量 [ J] .中草药 , 1997, 28( 5): 271.
收稿日期: 2004-02-20
不同采收期三花龙胆中龙胆苦苷含量测定
林政义1 ,姚丽娜 1 ,闫广慧 2
( 1.哈药集团制药六厂 ,黑龙江 哈尔滨 150056; 2.哈药集团世一堂制药厂 ,黑龙江 哈尔滨 150056)
　　摘要: 目的　研究不同时节采收的三花龙胆中龙胆苦苷的含量。 方法　采用 HPLC法 ,以甲醇 -水 ( 60∶
40)为流动相 , 274 nm为检测波长。结果　三花龙胆中龙胆苦苷的含量随采收月份不同而各异 ,地下部分根中
龙胆苦苷的含量以新生根含量较高 ,药用价值最大。结论　采收期为春季的三花龙胆中龙胆苦苷含量最高。
　　关键词:三花龙胆 ;龙胆苦苷 ; HPLC;含量测定
　　中图分类号: R284. 1　　　　文献标识码: A　　　　文章编号: 1004-2199( 2004) 04-0037-02
Determination of Gentiopicroside inGent iana triflora Pall.
Collected from Different Seasons
LIN Zheng-yi
1 , YAO Lina
1 , YAN Guang-hui
2
( 1. Ha rbin Rha rmaceutical Group Six th Pharm Facto ry, Ha rbin 150056, China;
2. Harbin Rharmaceutical Group Shiyi tang Pharm Factory )
Abstract: Objective　 To study the contents o f Gentiopio roside in Gentiana t ri flo ra Pall. collected f rom
di fferent seasons. Method　 The method of HPLC was used wi th the methanol-w ater( 60∶ 40) as mobi le
pha se and wi th 274 nm as the checking waveleng th. Results　 The contants of g entiopicroside varied
—37—现代中药研究与实践 2004年第 18卷第 4期Resear ch and Practice of Chinese Medicines
DOI : 10. 13728 /j . 1673 -6427. 2004. 04. 013
acco rding to collecting seasons The content o f gentiopicro side in new roo ts was hisher. Conclusion　 The
content of g entiopicroside in Gentiana tri f lore Pall. co llected in the spring is highest.
Key words: Gentiana tri f lora Pall. ; gentiopicro side; HPLC; determination
　　三花龙胆为龙胆科植物三花龙胆 Gentiana
tri f lora Pall.的干燥根及根茎 ,有泻肝胆实火 ,除下
焦湿热的功效 [1 ]。 其主要成分龙胆苦苷有保肝、健
胃、利胆、利尿及降压作用并且抗炎、抗菌作用也很
明显 [ 1]。近期研究表明 ,其含量与采收期有关。本文
用 HPLC法测定了不同采收期三花龙胆中龙胆苦
苷的含量 ,以便于更合理有效的开发现有资源。
1　实验材料
1. 1　仪器　 Waters高效液相色谱仪 (美国 ) ; SPD-
10A紫外检测器 ;色谱柱 ( 4. 6mm× 200mm); 10μL
进样器。
1. 2　材料　龙胆苦苷对照品 (中国药品生物制品检
定所 ) ;三花龙胆购于哈尔滨市郊 ,经鉴定为龙胆科
植物三花龙胆的干燥根及根茎 ;甲醇 (色谱纯 )。
2　含量测定
色谱条件: 色谱柱: Hypersil C18柱 ;流动相: 甲
醇 -水 ( 60∶ 40) ;柱温:室温 ;流速: 0. 7 mL /min;检
测波长: 274 nm。
2. 2　标准曲线的绘制　精密称取龙胆苦苷对照品
12. 50 mg ,置 10 mL容量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释
至刻度 ,摇匀。 分别取对照品溶液 2、 4、 6、 8、 10μL,
测得各峰面积。以对照品进样量为横坐标 ,峰面积为
纵坐标 ,计算得回归方程: Y= 1. 38× 106X+ 6. 9×
104,相关系数 r= 0. 999 4;结果表明龙胆苦苷在 2. 5
～ 12. 5μg呈良好线性关系。
2. 3　精密度试验　取同一对照品溶液 ,重复进样 7
次 ,每次 10μL,连续测定 ,峰面积 RSD为 1. 16%。
2. 4　稳定性试验　取同一对照品溶液 ,每 30 min
进样一次 ,重复进样 5次 ,峰面积的 RSD 为 1.
37% ,表明在 150 min内基本稳定。
2. 5　重复性试验　精密称取同一批号龙胆药材粉
末 0. 5 g (n= 5) ,按样品液的制备操作 ,其含量的
RSD为 1. 44%。
2. 6　回收率试验　精密称取已知含量的样品 0. 5 g
(n= 5) ,分别精密加入龙胆苦苷对照品 1. 80、 1. 90、
2. 00、 2. 10、 2. 20 ( mg ) ,按样品液的制备操作 ,测
定 ,平均回收率为 98. 82% , RSD为 1. 66% 。
2. 7　样品的含量测定
2. 7. 1　样品液的制备　分别称取不同月份采收的
三花龙胆药材的干燥粉末 (过 4号筛 ) 0. 5 g (同时另
取本品粉末测定水分 ) ,精密称定 ,置于 50 m L容量
瓶中 ,加适量甲醇 ,超声提取 30 min,放至室温 ,过
滤至 50 mL容量瓶中 ,残渣用少许甲醇洗涤 ,滤入
50 mL容量瓶 ,加甲醇至刻度 ,摇匀。
2. 7. 2　含量测定　分别吸取上述样品液 1 mL,置
于 10 mL容量瓶中 ,加甲醇定容至刻度 ,微孔滤膜
过滤 ,取 10μL进样 ,结果见表 1。
表 1　不同时间采收的龙胆苦苷含量
Tab. 1　 The contents of gentiopicroside of diff erent s easons
样品 用量 /g 含量 /%
两年生 4月采收 0. 5 16. 30
两年生 5月采收 0. 5 14. 68
两年生 6月采收 0. 5 12. 17
两年生 7月采收 0. 5 11. 73
两年生 8月采收 0. 5 9. 45
两年生 9月采收 0. 5 10. 02
3　讨 论
3. 1　试验表明采用高效液相法进行测试 ,方法简
便、稳定性好、灵敏度高。
3. 2　三花龙胆中龙胆苦苷的含量随着采收的月份
不同而不同 ,地下部分根中龙胆苦苷的含量以新生
根含量较高 ,药用价值最大。
3. 3　通过不同溶剂对龙胆中龙胆苦苷提取 ,以甲醇
为最好 ,其次为 70%乙醇 ,故本文选用甲醇为提取
溶剂 ,但由于甲醇有毒 ,在大规模生产时 , 70%乙醇
亦可作为良好的选择溶剂。
参考文献
[1 ]　江苏新医学院 .中药大辞典 [M ] .上海:上海科技出版社 , 1986:
627-629.
[2 ]　宋万志 .中国龙胆科药用植物概况 [ J ].中药通报 , 1986: 627.
[ 3]　张建生 ,田子心 ,彭　红 ,等 .九种龙胆中五种裂环烯醚萜苷类
苦味成分的高效液相色谱定量分析 [ J ].药学学报 , 1991, 26
( 11): 864-870.
[ 4]　高　海 ,金惠敏 ,刘丽文 ,等 .龙胆药材中龙胆苦苷的 HPLC法
测定 [ J ].西北药学杂志 , 1998, 13( 3): 140.
—38— 现代中药研究与实践 2004年第 18卷第 4期Resear ch and Practice o f Chinese Medicines