全 文 ：蒙药材悬钩子木中黄酮类
化合物含量测定及体外抗氧化性研究
包玉敏，康大伟，张 力，王书妍，刘景海
（内蒙古民族大学 化学化工学院，内蒙古 通辽 028043）
〔摘 要〕采用分光光度法测定了悬钩子木中黄酮类化合物的含量，通过Fenton反应测定了悬钩子木黄酮类
化合物提取液清除羟基自由基的能力.结果表明，悬钩子木中黄酮类化合物平均含量为23.66mg/g，样品回收
率为90%～94%.悬钩子木黄酮类化合物提取液对羟基自由基有较强的清除作用，其清除作用随黄酮类化合
物含量的增高而增加.研究结果可为悬钩子木药效功能提供科学依据.
〔关键词〕悬钩子木；黄酮；分光光度法；自由基；抗氧化性
〔中图分类号〕R282.2；Q949.9 〔文献标识码〕A 〔文章编号〕1671-0185（2011）01-0014-02
Determination of Ramulus RuBi Flavonoids in the Mongolian
Medicine and Study of Its Antioxidant Effect in Vitro
BAO Yu-min，KANG Da-wei，ZHANG Li，WANG Shu-yan，LIU Jing-hai
（College of Chemistry and Chemical Engineering,Inner Mongolia University
for Nationalities, Tongliao 028043,China）
Abstract：The content of flavonoids in the Ramulus RuBi was determined using UV-Vis spectrophotometry.
In the meantime, the ability to scavenge hydroxyl free radical of flavonoids extracting solution was
measured through Fenton reaction. The results shows that the flavonoids content was 23.66mg/g, the
recovery rate was 90%~94% and the flavonoids in the Ramulus RuBi had a relatively strong effect on
scavenging free radical. The scavenging rate of hydroxyl free radical increased with the addition of total
flavonoids. Accordingly, the results could provide scientific foundation to fuether study and develop the
medical efficiency and function of flavonoids in Ramulus RuBi.
Key words: Ramulus RuBi；Flavonoids；Spectrophotometry；Free radical；Antioxidant
悬钩子木为蔷薇科植物库叶悬钩子干燥茎枝.具有解表、调元、止咳之功效，用于治疗瘟疫、肺热咳嗽、气喘〔1〕，是蒙医
临床常用药.本文首次采用分光光度法测定了悬钩子木中黄酮类化合物的含量，考察对羟基自由基的清除作用.意在为进
一步开发和利用通辽地区丰富的资源，并从蒙药中发掘更理想、疗效更好的药品和保健品等提供参考.
1 试验部分
1.1 仪器与试剂
UV-VIS240型分光光度计（日本岛津）；KQ3200V型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；FA2104N电子天平
（上海民桥精密科学仪器有限公司）.
芦丁（中国药品生物制品鉴定所，批号：10080-200306），所用试剂均为分析纯（A.R.），实验用水为二次石英亚沸蒸馏
水.悬钩子木购于内蒙古通辽市（产自内蒙古地区）.
基金项目：内蒙古高校自然科学基金资助项目（NJZY07138）
作者简介：包玉敏，内蒙古民族大学化学化工学院教授.
第26卷 第1期 内蒙古民族大学学报（自然科学版） Vol.26 No.1
2011年1月 Journal of Inner Mongolia University for Nationalities Jan.2011 2
DOI:10.14045/j.cnki.15-1220.2011.01.003
1.2 试验方法
1.2.1 标准曲线
准确称取浓度为0.25 mg/mL.芦丁标准品溶液0.00、0.40、0.80、1.20、1.60、2.00、2.40 mL分别置于10 mL的比色管中，均用
水稀释至2.40 mL各加5%亚硝酸钠0.40 mL，混匀，放置6 min，加10%硝酸铝0.40 mL混匀，放置6 min，加4.3%氢氧化钠
4.00 mL，最后用水稀释至刻度，混匀，放置15 min.以试剂空白为参比，在506 nm处测定吸光度值（A）〔2，3〕，以A为纵坐标，浓度
C为横坐标绘制标准曲线，得回归方程：A =－0.01587+1.0434C（mg / 10 mL），R=0.9993.
1.2.2 黄酮类化合物的提取和测定
准确称取2.5990 g悬钩子木于100 mL锥形瓶中，加入一定浓度乙醇30 mL，浸泡24 h，超声提取，过滤，洗涤，滤液用
该浓度的乙醇定容于100 mL容量瓶，得到黄酮类化合物的提取液〔4〕，待测.
吸取适量黄酮类化合物提取液于10 mL比色管中，按上述标准曲线测定方法测定提取液吸光度值（A）带入回归方程，
计算黄酮类化合物的含量.
1.2.3 回收率的测定方法
吸取适量黄酮类化合物提取液于10 mL比色管中，加芦丁标准液1.00 mL，按1.2.1标准曲线测定步骤操作，得加入芦
丁标准液的样品的吸光度值，计算回收率.
1.2.4 对羟基自由基的清除作用
Fenton反应产生自由基：H2O2 + Fe2+=·OH+ OH-+Fe3+，Fe2+与邻二氮菲生成红色配合物，加入提取液后，减弱·OH 对
Fe2 —邻二氮菲的氧化作用，引起吸光度变化，得到清除率.
书
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（A样品、A未损、A损分别为加入羟基自由基的体系，不加过氧化氢及加入过氧化氢的吸光度值）.
取9个10 mL的比色管，分别加入0.20 mL7.5mmol/L邻二氮菲、0.20mL7.5 mmol/L硫酸亚铁铵溶液，1.00 mL tris-HCl
（pH=7.47）缓冲溶液.在2—9号比色管中加1.00 mL7.5 mmol/L过氧化氢.在3—9号比色管中加入适量黄酮类化合物提取液，
用二次蒸馏水定容至刻度，在37℃水浴中反应1 h，冷水冷却，以水为参比，在508 nm处测定吸光度值，计算清除率〔5〕.
2 结果与讨论
2.1 测定结果
2.1.1 黄酮类化合物的含量 取黄酮类化合物提取液0.50 mL，按1.2.2测定方法操作，平行测定4次，结果见表1.
2.1.2 样品的回收率 样品回收率按1.2.2测定方法操作，平行
测定3次，结果见表2.
2.1.3 对羟基自由基的清除效果 按1.2.4测定步骤操作，结果
见图1.
2.2 讨论
2.2.1 黄酮类化合物的含量与回收率 由表1、表2可见，悬钩
子木中含有黄酮类化合物，总黄酮的含量为23.66 mg/g，RSD为
1.43%；样品加标回收率为90%～98%.
2.2.2 黄酮类化合物对羟基自由基的清除效果
（下转第20页）
表1 黄酮类化合物含量测定结果
Table 1 Results of the flavonoids content
表2 回收率测定结果
Table 2 Results of recovery rate（n=3）
编号
1
2
3
4
样品含黄
酮量/mg
0.3171
0.3123
0.3027
0.3086
芦丁标样
加入量/mg
0.25
0.25
0.25
0.25
加入芦丁标
样测的值/mg
0.5423
0.5423
0.5375
0.5416
回收率
/%
90
92
94
93
编号
1
2
3
4
样品加
入量/mL
0.5
0.5
0.5
0.5
黄酮的
含量/mg/mL
0.3171
0.3123
0.3027
0.2979
样品中总黄酮
含量/mg/g
23.66
RSD/%
2.86
黄酮的含量/mg
清
除
率
/%
图1 黄酮类化合物对羟基自由基的清除作用
Figure 1 Effect on scavenging hydroxyl free radical
第1期 包玉敏等：蒙药材悬钩子木中黄酮类化合物含量测定及体外抗氧化性研究 15
忍冬藤挥发油化学成分的分析，为其活性成分的研究和资源利用提供科学依据.在忍冬藤挥发油中的31种成分中，仍有16
种成分经过计算机检索无法准确定性，尚有对于今后工作中进一步确认.
图1 忍冬藤挥发油总离子流图
Figure 1 Total ion current chromatogram of essential oil in Caulis Lonicerae Japonicae
参 考 文 献
〔1〕许丹，孙文基. 忍冬不同部位马钱苷含量比较〔J〕.中药材, 2006,11:1138-1139.
〔2〕国家药典委员会.中国药典〔M〕.北京：化学工业出版社，2005.
〔3〕曹娇仙,陈云龙, 傅承新，等.结香花挥发油化学成分的气质联用分析〔J〕.药物分析杂志，2005，25（10）:1211-1214.
〔4〕吕晴,秦军,章平，等.同时蒸馏萃取三七花挥发油成分的气相色谱-质谱分析〔J〕.药物分析杂志，2005,25（3）:
284-287.
〔责任编辑 郑 瑛〕
（上接第15页）
由图1可看出，悬钩子木中黄酮类化合物对羟基自由基有较强的清除作用，随黄酮类化合物添加量的增加而增加.作
为天然的抗氧化剂，悬钩子木中的黄酮具有一定的开发利用价值.
参 考 文 献
〔1〕中华人民共和国卫生部药典委员会编. 中华人民共和国卫生部药品标准（蒙药分册）〔M〕. 北京：人民卫生出版社，
1998.
〔2〕伍蔚萍，孙文基，阎宏涛，等. 分光光度法测定甘草中总黄酮的含量〔J〕. 药物分析杂志，2005，25（4）：469-472.
〔3〕李文芳, 黄美娥，唐纯翼,等. 甘薯地上部分黄酮类化合物含量的变化〔J〕. 天然产物研究与开发，2006，18（2）：
304-307.
〔4〕兰昌云，周崇松, 范必威，等. 超声波法提取槐花中黄酮的最佳工艺研究〔J〕. 天然产物研究与开发，2005，17（1）：
55-58.
〔5〕赵二劳, 张海荣，盖青青，等. 沙棘黄酮的测定及其抗氧化作用〔J〕. 化学研究与应用，2003，15（4）：284-285.
〔责任编辑 郑 瑛〕
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内 蒙 古 民 族 大 学 学 报 2011年20