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椭叶花锚醇提物对高脂血模型小鼠降血脂作用研究



全 文 :203
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2012 NO.08
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学 术 论 坛
椭叶花锚 (Halenia el liptica D.Don)
系龙胆科 (Gentianaceae)花锚属植物 ,一年
生草本植物 ,是“藏茵陈”类药用植物中的
一种 ,主产于青藏高原 ,分布于我国华北、
西北、西南各省区。全草或地上部分入药 ,
味苦 ,性寒 ,具有清热祛湿 ,疏肝利胆等功
效 ,用于治疗急性黄疸型肝炎、胆囊炎、头
昏头痛等症 ,是我国藏族民间常用草药 [1]。
目前 ,从椭圆叶花锚中分离得到的化合物
有酮及其苷、裂环烯醚萜类、三萜类及黄
酮苷等 [2]。对椭叶花锚的药理研究甚少 ,本
实验以椭叶花锚醇提物为研究对象 ,利用
药理学实验方法 ,探讨其对降血脂的作
用。为青藏高原药用植物资源现代化开发
与利用提出新思路。
1 材料
1.1仪器
LD4-2A低速离心机 (香港兴万电子仪
器有限公司)、Rotavapor R-210旋转蒸发仪
(瑞士步琪有限公司)、UV-1800紫外可见分
光光度计(日本岛津制造所)。
1.2试剂与药品
生化试剂盒:TC试剂盒(干粉型)、TG试
剂盒(干粉型)、LDL试剂盒(干粉型)、HDL试
剂盒(干粉型),以上试剂均购自中生北控生
物科技股份有限公司 ,批号110311。
1.3实验动物来源
实验用昆明种小白鼠60只 (雄性 ,体重
18g~22g),清洁级 ,由青海省地方病防治研
究所实验动物中心提供 ,动物许可证编号
(青医动字01号 )。置于动物饲养箱内 ,室温
(21±1)℃饲养 ,适应一周后开始实验。
1.4实验药物来源
椭叶花锚(Halenia elliptica D.Don),采
自青海省大通县。
2 实验方法
2.1椭叶花锚提物的制备
将椭叶花锚粉碎 ,75%乙醇浸泡10h,提
取三次 ,浓缩乙醇提取物。
2.2高血脂药物动物模型建立及血清制备
2.2 .1 高血脂动物模型制备
将小鼠随机分组 ,每组10只。分为正常
对照组、高脂模型组、阳性对照组、高剂量
给药组、中剂量给药组和低剂量给药组。
正常对照组灌胃给予蒸馏水。利用高
脂乳剂造动物模型 ,脂肪乳剂配方 :20g猪
油 ,10g胆固醇 ,1g丙硫氧嘧啶 ,吐温 -8020m
L,丙二醇 20mL,10%去氧胆酸钠水溶液
20mL,加蒸馏水至100mL。
2 . 2 . 2 给药
椭叶花锚醇提物的低、中、高给药剂量
分别为 :137mg/kg、411mg/kg、1233mg/
kg。对照组灌胃给予蒸馏水 ,阳性对照组脂
必妥的给药剂量为 :7mg/kg。
2 .2 .3 样品制取
连续药物及蒸馏水灌胃 29天 ,每天 1
次 ,第 30天禁食 16 h后采用摘眼法取血 ,
8000r/min离心15min取血清测定。
2.3数据测定
TC、TG、HDL、LDL含量参照ALLain.
C.C的方法进行测定 [2]。
2.4数据统计与处理
本数据用计算机 SPSS17. 0统计软件
包中的ANOVA法进行单因素方差分析处
理 ,试验数据均采用平均数±标准差(x-±s)
表示 ,组间比较采用 t检验处理 , P>0. 05认
为无显著性差异 ,P<0.05认为有显著性差
异 ,有统计学意义 , P<0 . 01有极显著性差
异。
3 结果
分别测定各组小鼠血清中的总胆固醇
TC、TG、HDL、LDL浓度 ,结果见表1。
3.1椭叶花锚醇提物对对小鼠血清TC、TG、
HDL、LDL的影响
实验结果显示 ,高脂模型组的 TC水
平极显著高于对照组 ,表明小鼠高脂血症
模型造模成功。阳性试验组、椭叶花锚醇
提物低剂量组、中剂量组、高剂量组都能
极显著的降低高脂模型血清中TC水平。
然而却存在剂量的选择性。其中椭叶花锚
低剂量组与高剂量组无显著性差异 ,而中
剂量组对比高剂量及低剂量组具有显著
性差异 ,同时阳性实验组与椭叶花锚低剂
量组降TC水平上无显著性差异。椭叶花
锚能极显著的降低高脂模型血清中TG水
平 ,存在剂量的选择性 ,降甘油三酯效用
表现出随剂量的增大而增强 ,其中高剂量
组效果最好。椭叶花锚能提高高脂模型血
清中HD L水平 ,与模型组相比只有阳性实
验组表现出极显著性。椭叶花锚对提高
HDL效果不明显。椭叶花锚醇提物能极显
著的降低高脂模型血清中LDL水平。椭叶
花锚醇提物降低密度脂蛋白效用表现出
椭叶花锚醇提物对高脂血模型小鼠降血脂作用研究①
庞一阳1 胡凯1 李思未1 李超1 谢惠春1,2*
(1.青海师范大学青藏高原资源与环境教育部重点实验室 西宁 810008; 2.陕西师范大学 西安 710062)
摘 要 :目的:研究椭叶花锚醇提物对小鼠降血脂的作用。方法:将60只雄性昆明种小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组、高、中、
低剂量组,采用脂乳剂及饲料灌胃造模,连续喂养29天,分别测定小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)
含量。结果:喂养29天后,阳性试验组、高、中、低剂量组对高脂模型血清的影响,表现为极显著的降低TC水平上(P<0.01),极显著的降低TG水平上
(P<0.01),提高HDL水平,极显著降低了LDL水平(P<0.01)。结论:椭叶花锚醇提物对小鼠高脂血症有明显的降血脂作用。
关键词:椭叶花锚 醇提物 降血脂
中图分类号 :R285.5 文献标识码 :A 文章编号 :1672-3791(2012)03(b)-0203-02
注 :同行模型组与对照组比较 ,P<0.01,☆ P<0.05;给药组与模型组比较 ,▲P<0.01,△P<0.05,★P>0.05
①作者简介 :庞一阳 (1987— ),男 ,青海人 ,在读硕士 ,研究方向 :植物生物化学。
*通讯作者 :谢惠春 ,Tel:13639786226,E-mail:yezino.1@163.com。
基金项目 :科技支撑项目“青藏高原道地药材规范化种植技术研究与示范”(2007BAI45B04)。
组别 血脂指标
对照 模型 阳性 低剂量 中剂量 高剂量
TC(mmol/L) 3.31±0.30 8.99±0.63▼ 5.70±0.49▲ 6.17±0.30▲ 5.01±0.35▲ 6.36±0.29▲
TG(mmol/L) 1.08±0.19 14.56±1.59▼ 9.37±0.86▲ 10.45±1.08▲ 8.94±0.52▲ 6.99±0.61▲
HDL(mmol/L) 8.14±1.31 6.02±0.61▼ 7.43±0.92▲ 6.21±0.18★ 6.42±0.40★ 6.43±0.35★
LDL(mmol/L) 1.46±0.06 5.60±0.39▼ 3.56±0.12▲ 3.65±0.28▲ 4.27±0.27▲ 3.15±0.33▲
表1 椭叶花锚醇提物对小鼠血清TC、TG、HDL、 DL浓度影响(Mean±SD)
DOI:10.16661/j.cnki.1672-3791.2012.08.037
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随剂量的增大降LDL先减弱后增大的效
用。椭叶花锚醇提物三种剂量及阳性实验
组都对高脂模型有明显的降LDL效果 ,存
在剂量的选择性。其中低剂量椭叶花锚与
阳性对照相比无显著性差异 (P>0 .05) ,效
果明显优于中剂量组却劣于高剂量组。三
个剂量间存在极显著性差异 (P<0 .01) ,在
三个剂量间降LD L效用表现随剂量的增
大降LDL先减弱后增大的效用。其中高剂
量组效果最好 ,优于阳性对照组。
4 讨论
高脂血症是由于脂肪代谢或运转异
常使胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)和 (或 )低
密度脂蛋白 (LDL)过高和 (或 )高密度脂蛋
白 (HDL)过低而引发的一种病症。它所引
起的脂肪肝是一种重要的新型临床疾病
实体 ,是导致肝功能紊乱最常见的原因。
中药降脂具有疗效稳定副作用小等优点 ,
是目前常用的方法 [3]。椭叶花锚作为青藏
高原特有的道地药材 ,在降血脂方面具有
显著效果。
本研究观察了椭叶花锚醇提物对小
鼠的降血脂作用。主要从血清中TC、TG、
HDL、LDL浓度的变化来衡量椭叶花锚的
作用。结果表明 ,椭叶花锚醇提物对各组
实验小鼠血清中的TC、TG、LDL浓度均显
著降低。其中 ,在降TC水平上 ,中剂量显
现出较好的水平。这可能是由于椭叶花锚
醇提物能够增加高脂动物胆汁流量 ,从而
抑制肝细胞胆固醇的合成 [3~4]。在降TG效
用上 ,三个剂量间降TG效用表现出随剂
量的增大而增强 ,且它们之间都存在极显
著性差异 (P<0 .01) ,其中高剂量组效果最
好。高胆固醇血症和高甘油三酯血症的特
点是改变动脉扩张能力 ,表现为血流介导
的血管扩张的减弱和可溶性细胞粘附分
子的表达增强。这可能是由内皮型一氧化
氮的供应量减少造成的。在升 LDL效用
上 ,三个剂量间升LD L效用表现出随剂量
的增大而增大 ,但它们之间不具有显著性
差异 (P>0.05)。高胆固醇血症血管内皮损
伤的关键机制是氧化应激介导的 ,以往研
究表明 ,在正常血管管壁中 ,内皮衍生的
NO量足以维持正常的血管张力 ,还可能抑
制LDL氧化。但在高胆固醇血症组织中 ,有
效的NO浓度低 ,导致LDL氧化增加。实验
结果表明 ,椭叶花锚醇提物能够明显的抑
制 LD L浓度 ,可能是通过刺激血管内皮
NOS的转录来提高内皮衍生N O的量 ,进
而抑制LDL的氧化。在降LDL效用上 ,三个
剂量间降HDL效用表现随剂量的增大表
现出降LDL先减弱后增大的效用。其中高
剂量组效果最好 ,优于阳性对照组。
总之 ,椭叶花锚醇提物具有显著的降
血脂和调节脂肪代谢或运转紊乱的作用。
本研究为临床提供了实验参考。同时 ,也
为青藏高原中草药的开发及利用提供新
的途径。
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(上接202页)
月的平均气温和降水的平均值与3个标准
化年表的9个参数年表进行相关分析(表1、
表2)。结果表明了以下几点。
(1)早材灰度年表与4月平均气温呈负
相关且相关最好 ,达到 -0.429,显著性水平
超过0.003;全轮灰度、早材灰度和最大灰度
与4、5月气温相关较好 ,表明温度是新疆西
部伊犁北天山南坡树木年轮径向生长的限
制性因子 ,4、5月的平均气温对树木年轮径
向生长响应强烈。从树木生长生理学的角
度来看 ,每年树木生长的起始时间 ,即早材
生长的起始时间 ,主要受其生长前期及后
期的气温控制。分析发现 ,霍城和伊宁气象
站1960年至2005年4~5月平均气温分别为:
14.91℃和13. 86℃ ,新疆西部伊犁北天山
南坡3个采点的平均海拔高度与两气象站
的海拔高度相差1500m~2100m,按照干绝
热直减率换算 ,采点位置4~5月平均气温
在0~5℃。说明4~5月仍然处于雪岭云杉
的生长季前期 ,而4~5月的降水占全年20%
以上 ,这一时段平均温度偏低 ,有利于积雪
的累积 ,使生长季内有足够的积雪融化 ,以
补给树木生长所需的水分 ,导致形成较宽
的、密度较小、平均灰度较大的年轮 ,如果
此时段最低气温偏高 ,不但4~5月的降水
以径流的形式流失 ,而且冬季部分降雪融
化 ,导致整个生长季缺水 ,雪岭云杉形成年
轮偏窄、密度偏大、灰度偏小。因此4~5月
时段的平均气温与全轮平均灰度年表和早
材平均灰度年表呈负相关是具有树木生理
学意义的。
(2)4月的降水和实测宽度、全轮宽度以
及早材宽度相关较好 ,超过0.05显著性水
平 ,这与崔宇等研究发现的雪岭云杉与4~
5月降水相关较好一致 ;而6月降水与全轮
灰度和早材灰度相关较好。从树木生理学
角度看 ,生长期内的降水量对树木的作用
最大。许多资料证明 ,生长期内的降水量与
树木的径向生长常呈正相关 ,6月份处于新
疆西部伊犁北天山南坡树木早材径向生长
的关键时期 ,降水量多 ,树木早材细胞分裂
快 ,因此形成的年轮宽、密度小、灰度大。同
时降水对年轮宽窄的影响也具有明显的滞
后效应。若生长季前期降水条件好 ,大量降
水以积雪的形式储存 ,使生长季开始时有
足够的水分补给 ,有利于早材细胞分裂 ,所
以易形成偏宽的年轮。
(3)宽度方面 ,早材宽度对气候的响应
强于晚材宽度 ;灰度方面 ,全轮灰度和早材
灰度对气候的响应较为强烈 ,最小灰度表
现最差。利用树轮图像分析所得到的8个树
轮参数年表可以增加气候重建代用指标 ,
提高气候重建的精度。
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