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肾茶提取液对肾结石模型影响的实验研究



全 文 : ○实验研究○
肾茶提取液对肾结石模型影响的实验研究
★ 蒋维晟 (广东省江门中医药学校中医教研组 江门 592000)
摘要:目的:探讨肾茶对大鼠肾结石模型影响的相关机制。 方法:在乙二醇法诱导的大鼠肾结石模型上 ,灌胃予肾茶提取液 ,
以大鼠的尿 pH值 、尿草酸 、尿量 、尿钙及肾组织学检查作为观察指标。结果:(1)肾茶提取液组大鼠饮水量正常 , 尿量增加 ,
可降低尿钙浓度与尿草酸的含量 , 其与模型组比较(P<0.01)有极显著性差异;与枸橼酸钾组相比(P<0.05), 有显著性差
异。 (2)肾茶提取液组对尿液 pH值无改变 ,其与正常组比较(P>0.05)无显著性差异;与枸橼酸钾组相比(P>0.05), 无显著
性差异。 (3)肾茶提取液组能显著减轻肾结石程度 , 与枸橼酸钾组相比 ,无显著性意义。 (4)肾茶提取液组使肾小管管腔内结
晶形成物明显减少 , 对肾组织恢复 ,与枸橼酸钾组相比 , 有优于枸橼酸钾组的趋势。结论:肾茶提取液可以增加尿量;降低尿
草酸含量及尿钙的浓度;能抑制肾脏草酸钙结晶沉积;对尿 pH值无改变。
关键词:肾结石;肾茶提取液;实验研究;大鼠
中图分类号:R285  文献标识码:A
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 标准实验用普通级 SD大鼠 48
只 ,雌雄各半 ,体重 220 ~ 250g;由贵阳医学院实验
动物中心提供(黔实动证 2002-0001)。
1.1.2 造模用药  乙二醇(天津市科密欧化学试
剂开发中心生产 ,批号:020928)配成 1%的溶液 ,在
4 ℃冰箱保存。
氯化胺 (湘中地质实验研究所生产 , 批号:
020708)配成 1%的溶液 ,在 4 ℃冰箱保存。
1.1.3 药物的制备  (1)肾茶提取液制备:肾茶
2 000 g,按人和动物用量折算公式制备成含生药 2
g/ml的水煎液 , 4 ℃冰箱保存 ,使用时充分震荡摇匀
并加热至常温 。
(2)枸橼酸钾溶液:广东汕头市西陇化工厂生
产 ,批号:020117;配成 0.771 mol/L的溶液。
1.1.4 主要要试剂和仪器 (1)偏光显微镜:由贵
阳妇幼保健院病理科提供;
(2)精密 pH酸度计:PhSJ-4A上海精密仪器
厂生产;
(3)变色酸溶液:由贵阳中医学院二附院药剂
科提供;配成 10 g/L浓度 , 4℃冰箱保存 。
(4)日立 170A型 AutomaticAnalyzer:由贵州省
人民医院检验科提供。
1.2 方法
SD大鼠 48只随机分正常对照组 、结石模型对
照组 、肾茶提取液组 、枸橼酸钾组 ,每组 12只。各实
验组均常规饲料喂养 。除正常对照组常规饲养 ,自
由饮水 ,不造模外;其余 3组均按参考文献 lyon[ 5]的
造模方法 ,即让大鼠饮含 1%乙二醇 、1%氯化铵的
自来水 ,连续 2周 ,即可造成结石模型 。从造模第 1
天始 ,正常组常规饲养 ,自由饮水 ,不造模;模型组每
日每只 2ml注射用水灌胃;肾茶组每日每只肾茶提
取液 2 ml(2 g/ml)灌胃;枸橼酸钾组每日每只枸橼
酸钾溶液 2 ml(0.771mol/L)灌胃 。 4周后实验结
束 ,大鼠脱椎法处死 。
1.2.1 观测指标及方法 (1)一般情况:每日记录
24h饮水及进食量 ,通过代谢笼观察小便量;观察
营养精神状况以及外观形态的变化 ,实验结束前 1d
称重比较实验前后大鼠体重的变化;肾脏组织光滑
感 ,比较颜色 ,肉眼结石观察。
(2)肾组织学检查:①大鼠脱椎法处死后 ,低温
下取出双肾肉眼观察肾脏有无肿胀 、淤血 。 ②光镜
观察:将左肾纵向剖开 ,用 10%福尔马林固定 ,常规
脱水 ,浸蜡后沿肾脏纵轴包埋 ,每例标本做不连续的
切片 5张(厚度为 2 μm), HE染色 ,偏光显微镜下
观察肾组织的病理改变及肾剖面有无明显结晶沉淀
物及游离结石或钙化斑作为判断结石的标准 ,比较
四组大鼠的肾结石形成率 。根据结石的多少及肾脏
损伤程度分成 5级:“ -”:肾皮质 、髓质及肾乳头均
无可可见的结石和结晶沉淀物 ,肾脏外形无异常变
化 。 “ +”:肾皮质或髓质可见少量散在结晶沉淀
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江西中医 学院学报 2 0 0 9年 2月第 2 1卷第 1期
JOURNALOFJIANGXIUNIVERSITYOFTCM 2009 Vol.21 No.1
 ○实验研究○
物。 “ ++”:肾皮质或髓质及肾盂可见结晶沉淀物
或有小的游离结晶 。 “ +++”:肾剖面可见较多结
晶 ,并有游离结石形成 ,肾乳头可见钙化斑 ,肾盂扩
张积水。 “ ++++”:肾皮质 、髓质可见大量结晶 ,
有游离结石形成 ,肾乳头可见钙化斑 ,肾盂明显扩张
积水 。
(3)尿钙含量:实验结束前 1d用大鼠代谢笼收
集 24h尿液 ,日立 7170A型 AutomaticAnalyzer进行
24 h尿 Ca2 +的含量测定。
(4)尿草酸的含量:实验结束前 1d用大鼠代谢
笼收集 24 h尿液 ,用变色酸比色法测定尿草酸的浓
度。
(5)pH值测定:用大鼠代谢笼收集各组大鼠 24
h尿液 ,用精密 pH酸度剂测定。
2 统计学处理
用 SPSS11.5统计软件进行数据处理 ,实验结果
以均数 ±标准差( x±s)描述组间差异计量资料用方
差分析进行显著性检验 ,计数资料组间比较用 χ2检
验。
3 实验结果及分析
3.1 对肾结石大鼠一般状况的影响
造模组大鼠在饮用 1%乙二醇加 1%氯化铵溶
液后 , 2 ~ 7d内相继出现食欲减退 、毛发不荣 、饮水
减小 、活动减少 、精神倦怠 、畏寒 、体重增量均少于其
它组 。而治疗组则出现尿量增加 ,精神 、饮食活动正
常 ,相对于枸橼酸钾 ,肾茶提取液组在尿量改变上明
显(见表 1), 而二者在其余症状改善上疗效相当。
正常组肾脏表面光滑 ,颜色红润 ,触摸无沙质感;结
石模型组肾脏明显肿大 ,切面苍白色 ,用手触摸有明
显之细砂摩擦感 ,皮质和髓质分界不清楚;而肾茶提
取液组与枸橼酸钾组肾脏大体观察 ,外形 、颜色无差
别。
表 1 各组大鼠尿量比较( x±s)
组别 动物数 /只 尿量 /ml
正常组 12 6.81±0.27○
模型组 12 6.26±0.22
肾茶组 12 10.03±0.36○□■
枸橼酸钾组 12 7.46±0.43○★
  注:与模型组比较 , ○P<0.01;与正常组比较 ,★P<0.05, □P
<0.01;与枸橼酸钾组比较 , ■P<0.05。
3.2 肾茶提取液对大鼠尿草酸的影响
见表 2。
模型组与正常组比较尿草酸含量明显升高 ,差
异具有显著性意义;肾茶提取液对大鼠尿草酸的含
量有明显降低作用 ,差异且有显著性意义 ,与枸橼酸
钾组比较尿草酸的含量相对低 ,但差异无显著性意
义 。
表 2 各组大鼠尿草酸比较( x±s)
组别 动物数 /只 尿草酸 /μmol·(24h)-1
正常组 12 20.23±4.12○
模型组 12 73.47±6.78
肾茶组 12 55.23±6.45○□■
枸橼酸钾组 12 62.43±12.54□★
  注:与模型组比较 , ○P<0.01;与正常组比较 , ★P<0.05, □P
<0.01,与枸橼酸钾组比较 , ■P>0.05。
3.3 肾茶提取液对大鼠尿钙的影响
见表 3。
表 3 各组大鼠 24h尿 Ca2+含量( x±s)
组 别 动物数 /只 尿 Ca2+/μmol·(24h)-1
正常组 12 3.09±0.56□
模型组 12 9.43±1.01
肾茶组 12 4.48±0.75□■○
枸橼酸钾组 12 5.01±1.01□■
  注∶与模型组比较 , □P<0.01;与正常组比较 , ■P<0.01;与
枸橼酸钾组比较 , ○P<0.05。
3.4 肾茶提取液对大鼠尿 pH值的影响
见表 4。
表 4 各组大鼠尿 pH值比较( x±s)
组 别 动物数 /只 尿 pH值
正常组 12 7.23±0.75○
模型组 12 5.69±0.57
肾茶组 12 7.77±0.76○□■
枸橼酸钾组 12 7.58±0.75○□
  注:与模型组比较 , ○P<0.01;与正常组比较 , □P>0.05;与枸
橼酸钾组比较 , ■P>0.05。
3.5 偏光显微镜观察肾茶提取液对大鼠肾结石的
影响
正常组肾组织无结晶形成;模型组大鼠肾实质
内均有大量草酸钙结石 ,绝大多数肾有成堆的结石
分布 ,结晶散在不连接 ,个别结晶成堆而且互相连
接 ,成石率为 100%;肾茶提取液组和枸橼酸钾组部
分肾脏有少量散在结晶沉淀物或有小的游离结晶
(见表 5),成石率为 33%和 50%。结果说明给予肾
茶提取液可以防止乙二醇诱发的肾结石形成 ,从而
使肾茶提取液组大鼠结石的形成率降低 (P<
0.01),差别具有极显著性意义。
表 5 各组对大鼠肾组织草酸钙结晶的影响
组别 动物数(只)
结晶分级
- + ++ +++ ++++
成石率(%)
A组 12 12 0 0 0 0 0
B组 12 0 1 2 4 5 100%
C组 12 8 2 2 1 0 33%
D组 12 6 1 3 2 0 50%
  本组数据经统计学处理 , χ2 =29.23, P<0.01, 结果有显著性差
异。
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蒋维晟:肾茶提取液对肾结石模型影响的实验研究
 ○实验研究○
经 χ2分析表明 ,肾茶组 、枸橼酸钾组肾结石比
成石组明显减轻 ,结石形成明显减少 。肾茶组比枸
橼酸钾组肾结石成石率相对低 ,但差异无显著性意
义。
3.6 光镜下观察肾茶提取液对大鼠肾组织病理改

见图 1。
正常对照组:大鼠肾皮质 、髓质无结晶形成 ,无
钙化点 ,细胞排列整齐 、规则 、结构清晰 ,肾小管腔内
无沉积物 ,上皮细胞无肿胀 、充血 ,肾乳头 、肾盂 、肾
盏清晰 ,无结石。
结石模型对照组:大鼠皮质充血明显 ,近曲小管
水肿 ,髓质充血 ,间质水肿 ,远曲小管可见结石 2 ~ 3
个 /视野倍(40×10),结石周围完整 ,无溶解现象。
染色呈嗜碱性 。大量炎性细胞浸泡 ,形状不规则 ,管
腔变窄 ,乳头管也可见结石 ,肾盂内见脱落细胞 。
肾茶提取液组:皮质 、髓质充血轻 ,可见少量炎
性渗出物 ,且以淋巴细胞为主 ,间质水肿不明显 ,近
远曲水管内结石形成少 ,只有 1 ~ 2只可见残留结石
影 ,结石周围有空泡 ,边界不清 ,有吞蚀现象 ,可能为
溶石表现 ,肾盂 、肾盏无异常 。
枸橼酸钾组:皮质 、髓质中度充血 、水肿 ,近远曲
小管可见 1只有明显结石 ,无溶解现象 ,有 1只肾盂
内可见碎石 ,近曲小管中度扩张 ,少量炎性渗出物 ,
上皮细胞肿胀 ,肾盂内可见脱落坏死细胞 ,远曲小管
变小 。
图 1 光镜下各组大鼠肾组织病理改变
3 讨论
肾结石属祖国医学的石淋 、砂淋 、血尿 、腰痛等
病的范畴。其临床以小便频数短涩 ,滴沥刺痛 ,欲出
未尽 ,小腹拘急或痛引腰腹 ,尿出砂石为特征 。从动
物实验研究结果看 ,中草药肾茶 Clerodendranthuspi-
catus(Thunb.)C.Y.W为唇形科多年生草本植物 。
方茎对叶 ,花丝伸出唇形花冠 4 ~ 6 cm,状如猫之胡
须 ,又称猫须草 ,全草入药。性味:甘淡微苦 、凉;功
效:清热去湿 、排石利水 。药理研究表明 ,肾茶具有
利尿作用 ,可使狗的尿量 、电解质及水分排泄均显著
增加 ,减少钠和氯离子的再吸收[ 2] 。肾茶中的利尿
成分肌醇可以增加尿量以及尿酸的排泄量 ,从而促
进排石 [ 3] 。汪菁菁 [ 4]报道肾茶治疗泌尿系结石 30
例 ,总有效率达 93.33%。本实验研究初步证实肾
茶提取液用于肾结石的确有整体调节的优势 ,它不
仅有效抑制结石的形成 ,而且减轻肾组织的损害;改
善了大鼠的精神状态 、增加尿量 ,降低尿钙与尿草酸
的含量 ,但对尿 pH值无改变。因此 ,其疗效机理是
综合的 、全面的 ,为临床治疗泌尿系结石提供药理依
据 。
参考文献
[ 1]薛建中 ,沈绍基.实验性泌尿系结石动物模型的复制 [ J] .国外医
学 ,泌尿系分册 , 1982, (4):148.
[ 2]钟纪育 ,邬宗宗.肾茶的化学成分 [ J] .中草药 , 1984, No3:344-
345.
[ 3]藤本琢宽 ,津田喜典.猫须草成分研究 [ J] .药学杂志(日), 1972,
92:1 060.
[ 4] WangJJ.Theclinnicalreportonthetherapyofurinarystoneswith
ClerodendranthusspicatusDecoction[ J] .ZhejiangJIn-tegrated
TraditChinWestMed(浙江中西医结合杂志), 1998, 18(4):206.
(收稿日期:2008-12-30)
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 江西中医学院学报 2009年第 21卷第 1期