全 文 ：复方广金钱草颗粒对肾结石的影响及其利尿、
抗炎镇痛作用
刘天竹，陆海玲，张慧，潘洁桃，郭丽冰，杨超燕
(广东药学院 中药学院，广东 广州 510006)
摘要:目的 观察复方广金钱草颗粒对肾结石的影响及其利尿、抗炎、镇痛的作用，为其临床应用提供药
理学依据。方法 采用乙二醇、氯化铵所致大鼠肾结石，生理盐水所致大鼠水负荷，二甲苯致小鼠耳郭肿
胀，醋酸所致小鼠疼痛等模型，观察其相应的作用。结果 复方广金钱草颗粒能明显防治乙二醇、氯化铵
诱发的肾结石形成，使大鼠结石形成率降低;有明显的利尿作用;复方广金钱草颗粒高剂量显著减轻二
甲苯致小鼠耳郭肿胀及显著减少醋酸致小鼠扭体次数(P＜0．05)。结论 复方广金钱草颗粒具有排石、利
尿、抗炎、镇痛作用。
关键词:复方广金钱草颗粒;肾结石;利尿;抗炎;镇痛
中图分类号:Ｒ285．5 文献标志码:A doi:10．3969 / j．issn．1006-8783．2014．06．016
文章编号:1006-8783(2014)06-0735-05
Influence of complex herba lysmachiae granules on the experimental kidney stone
and its diuretic，anti-inflammatory and analgesic effects
LIU Tianzhu，LU Hailing，ZHANG Hui，PAN Jietao，GUO Libing，YANG Chaoyan
(School of Traditional Chinese Medicine，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China)
Abstract:Objective To study the effect of complex herba lysmachiae granules on the experimental kidney
stone and its diuretic，spasmolytic and anti-inflammatory effects． Methods Ethylene glycol and ammonia
chloride were used to establish the rat model of renal calcium oxalate stone． Saline was applied to test water
load． Xylene was used to induce mouse ear edema． Acetic acid was used to establish the mouse writhing
model． The effect of complex herba lysmachiae granules on these models was measured． Ｒesults The
number of renal stone formation decreased in complex herba lysmachiae granules-treated groups． This drug
also obviously promoted diuretic action in rats，suppressed xylene-caused ear swelling and reduced the
number of body torsion in mice． Conclusion Complex herba lysmachiae granules may inhibit kidney stone
formation，and show diuretic，anti-inflammatory and analgesic effects．
Key words:comlplex herba lysmachiae granules;kidney stone;diuresis;anti-inflammation;analgesia
收稿日期:2014-09-12
基金项目:国家自然科学基金项目(81073045);广东省科技厅社会发展科技项目(20120318063)
作者简介:刘天竹(1990—)，女，2012级中药学硕士研究生，Email:bamboo．0906@ 163．com;通信作者:郭丽冰(1965—)，女，教
授，硕士研究生导师，主要从事中药化学成分研究与开发，电话:020-39352179，Email:guolibing512@ 126．com。
网络出版时间:2014-11-21 10:07 网络出版地址:http:/ /www．cnki．net /kcms /detail /44．1413．Ｒ．20141121．1007．002．html
复方广金钱草为广州医科大学第五附属医院的
临床验方，由广金钱草、车前子、路路通、泽泻、穿破
石、黄芪、党参、瞿麦、冬葵子、茯苓、牛膝及甘草等
12味药组成，具有清热利湿、通淋排石之功效，该方
经临床应用，治疗小结石疗效显著，常用于激光碎石
后辅助排石。临床上对于直径较大的结石，选用腔
镜技术疗效确切，而对于直径较小的结石，选择药物
治疗意义重大。碎石治疗费用高，碎石后仍然需要
药物辅助排石。中医药与西医在治疗泌尿系统结石
方面起到取长补短的作用。目前国内尚未有与本方
药物组成相同的成药，且市场上具有通淋排石功效
的药品较少，本课题组前期实验优选了复方广金钱
广东药学院学报
Journal of Guangdong Pharmaceutical University Dec． 2014，30(6)
草颗粒的提取工艺［1］，并将其研制成颗粒剂。根据
泌尿系统结石的一些症状，结合该复方的作用特点，
本研究从排石、利尿、抗炎、镇痛等方面对复方广金
钱草颗粒的药效学进行初步研究，为后续深入研究
提供理论依据，同时为临床应用提供药效学资料。
1 实验材料
1．1 动物
SPF级 NIH种小鼠，体质量(20±2)g，由广州中
医药大学实验动物中心提供，生产许可证号 SCXK
(粤)2008-0020;SPF 级 Wister 大鼠，雄性，体质量
160～200 g，生产许可证号 SCXK(粤)2011-0015，南
方医科大学动物实验中心提供。
1．2 受试药物与试剂
复方广金钱草颗粒(每 1 g 颗粒含生药 3 g，批
号:20140310，实验室自制);吲哚美辛(临汾奇林药
业有限公司，批号:20130904);五淋化石丸(广西梧
州三鹤药业有限公司，批号:121003);氢氯噻嗪(山
西云鹤制药有限公司，批号:A130701);乙二醇(天
津市富宇精细化工有限公司，批号:2014214);氯化
铵(天津市大茂化学试剂，批号:2013516);钙测试
盒(南京建成生物工程研究所，批号:20140414)，其
他试剂均为分析纯。
1．3 主要仪器
UV-2450紫外可见分光光度计(日本岛津);680
型酶标仪(美国 Biorad公司)。
2 方法
2．1 二甲苯诱导小鼠耳郭肿胀试验［2］
选取健康 NIH 小鼠，雌雄各半，适应性喂养 48
h后，随机分为 5 组:空白对照组 ig 生理盐水 15
mL /kg;复方广金钱草颗粒溶液高、中、低剂量组分
别 ig 27．9、18．6、9．3 g /kg;吲哚美辛 0．02 g /kg，灌胃
1 次 /d，连续 5 d，各组于末次给药 30 min后，在小鼠
右耳两面涂二甲苯 50 μL致肿，左耳不涂为正常耳，
1 h后脱颈椎处死，沿耳郭基线剪下双耳，用直径 6
mm打孔器冲下左耳及右耳同一部位的圆片，用电
子天平精确测定左右耳样品质量，比较差值，计算耳
肿胀度和肿胀抑制率。
肿胀度=右耳质量－左耳质量
肿胀抑制率=(空白组耳肿胀度－用药组耳肿胀
度)/空白组耳肿胀度×100%
2．2 醋酸致小鼠扭体法实验［2］
选取健康 NIH 小鼠，雌雄各半，适应性喂养 48
h后，随机分为 5 组:空白对照组 ig 生理盐水 15
mL /kg;复方广金钱草颗粒溶液高、中、低剂量组分
别 ig复方广金钱草颗粒溶液 27．9、18．6、9．3 g /kg;吲
哚美辛 0．02 g /kg，灌胃 1次 /d，连续 4 d。各组于末
次给药 1 h后，腹腔注射 0. 7%(φ)醋酸溶液(醋酸
溶液临用前配制)0．2 mL /只，记录各组小鼠给药后
15 min内扭体次数(腹部收缩内凹、伸展后肢、臀部
抬高、蠕动)。
2．3 大鼠水负荷实验( 代谢笼法)
选取 160 ～ 200 g 雄性大鼠 30 只，随机分为 3
组，每组 10 只:空白对照组、复方广金钱草颗粒组
(18．6 g /kg)、氢氯噻嗪组(5 mg /kg)，ig给药 15 mL /
kg，连续灌胃 7 d。末次给药前禁食不禁水 12 h。实
验前 1 h每只大鼠灌生理盐水 20 mL /kg。实验开始
时轻压大鼠的下腹部，以排空余尿，每组给药后将大
鼠放入代谢笼中，收集 6 h尿液，记录尿量。
2．4 大鼠排石试验［3］
选取 160 ～ 200 g 雄性大鼠 40 只，随机分为 4
组，每组 10只。空白对照组、模型组、复方广金钱草
颗粒组(18．6 g /kg)、五淋化石丸组(3 g /kg)，ig 给
药 15 mL /kg，每天灌胃 1次，连续 30 d。在此期间，
除空白对照组外，其余 3组 1%乙二醇水溶液作为饮
水、2%氯化铵每天灌胃 1 mL /100 g，造成肾结石模
型。实验结束前 1 天用代谢笼收集大鼠 24 h 尿液，
记录尿液体积，测 pH，对尿钙、尿草酸进行检测。实
验结束时处死动物，剖腹观察双肾外形，取出双肾，
左侧肾脏用 10%(φ)甲醛溶液固定进行病理学检
测，右侧肾脏匀浆后，用去离子水配制而成的生理盐
水配成 20%肾组织匀浆液，离心，取上清液，对钙离
子及草酸根离子进行检测。
2．5 检测指标和方法
2．5．1 草酸根离子、钙离子［4－5］应用铬酸钾氧化甲
基红催化光度法测定肾脏组织匀浆及尿草酸，甲基
麝香草酚蓝比色法测定肾脏组织匀浆及尿钙。
2．5．2 病理结果 大鼠处死后称质量，摘取双肾，
纵向剖开，左肾用 10%(φ)甲醛溶液固定，HE 染色
石蜡切片，100 倍光镜下观察肾剖面有无明显草酸
钙结晶及游离结石或钙化斑，根据结石形成的多少
及肾脏损伤程度分为 5 级［3］，Ⅰ级:肾皮质、髓质及
肾乳头均为无可见的结石和结晶沉淀物，肾脏外形
无异常变化，记 0 分;Ⅱ级:肾皮质或髓质可见少量
637 广东药学院学报 第 30卷
散在结晶沉淀物，记 1分;Ⅲ级:肾皮质、髓质及肾盂
可见结晶沉淀物或有小的游离结晶，记 2 分;Ⅳ级:
肾剖面可见较多结晶，并有游离结石形成，肾乳头可
见钙化斑，肾盂扩张积水，记 3 分;Ⅴ级:肾皮质、髓
质可见大量结晶，有游离结石形成，肾乳头可见钙化
斑，肾盂明显扩张积水，记 4分。根据肾结石形成率
及肾结石程度与模型对照组进行比较。
2．6 统计学处理
计量资料以 珋x±s表示，组间比较采用 t检验，P＜
0．05为差异有统计学意义。
3 结果
3．1 二甲苯诱导小鼠耳郭肿胀试验
吲哚美辛组、复方广金钱草高剂量组与空白组比
较，肿胀度差异有统计学意义(P＜0．05)，见表 1。提示
复方广金钱草颗粒高剂量组对小鼠可能有抗炎作用。
表 1 复方广金钱草颗粒对小鼠耳郭肿胀的影响
Table 1 Effect of complex herba lysmachiae granules on
xylene-induced ear edema in mice (珋x±s，n= 10)
组别
剂量 /
(g·kg－1)
肿胀度 /
mg
抑制率 /
%
空白对照组 － 6．32±2．20 －
吲哚美辛组 0．02 3．74±0．80* 40．82
广金钱草 高剂量组 27．9 3．07±0．14* 51．42
中剂量组 18．6 4．26±1．56 32．59
低剂量组 9．3 5．65±2．96 10．60
与空白对照组比较:* P＜0．05。
3．2 醋酸致小鼠扭体法实验
与空白对照组比较，吲哚美辛组、复方广金钱草
颗粒高剂量组能显著降低小鼠扭体次数(P＜0．05 或
P＜0. 01)，提示复方广金钱草颗粒高剂量组可能对
小鼠有镇痛作用。见表 2。
表 2 复方广金钱草颗粒对醋酸致小鼠扭体反应的影响
Table 2 Effect of complex herba lysmachiae granules on acetic
acid-induced writhing in mice (珋x±s，n= 10)
组别 剂量 /(g·kg－1) 扭体次数 /次
空白对照组 － 22．29±6．24
吲哚美辛组 0．02 3．74±1．80＊＊
广金钱草 高剂量组 27．9 16．89±2．93*
中剂量组 18．6 18．6±4．35
低剂量组 9．3 20．56±5．63
与空白对照组比较:* P＜0．05，＊＊P＜0．01。
3．3 大鼠水负荷实验
与空白对照组比较，复方广金钱草颗粒组及氢
氯噻嗪组均能显著增加大鼠尿量(P＜0．01)，提示复
方广金钱草颗粒具有一定的利尿作用。见表 3。
表 3 复方广金钱草颗粒对大鼠利尿作用
Table 3 Diurctic effect of complex herba lysmachiae granules
in rats (珋x±s，n= 10)
组别 剂量 /(g·kg－1) 尿量 /mL
空白对照组 － 2．00±0．28
氢氯噻嗪组 0．005 4．02±0．51＊＊
复方广金钱草颗粒组 18．6 4．15±0．31＊＊
与空白对照组比较:＊＊P＜0．01。
3．4 大鼠排石实验
3．4．1 尿液生化指标检测结果 见表 4。与空白对
照组比较，模型组大鼠尿量、尿草酸量显著升高(P＜
0．01)，尿钙量显著降低(P＜0．05);与模型组比较，
五淋化石丸组、复方广金钱草颗粒组尿量、尿草酸显
著降低(P＜0．05或 P＜0．01)，尿钙显著增加(P＜0．05
或 P＜0．01)。说明复方广金钱草颗粒能够抑制草酸
的形成并且能促进钙离子的排泄。
表 4 高草酸诱致草酸钙结石模型中大鼠尿生化检验结果
Table 4 Urinary biochemistry examination in calcium oxalate stone rats(珋x±s，n= 10)
组别 剂量 /(g·kg－1) 尿量 /(mL·24 h－1) 尿草酸 /(μmoL·24 h－1) 尿钙 /(μmoL·24 h－1) pH
空白对照组 － 3．10±1．38 0．021±0．003 15．37±4．87 9．16±0．47
模型组 － 8．19±3．83## 0．051±0．008## 9．65±1．29# 8．68±0．52
五淋化石丸组 3 6．71±4．07 0．028±0．013* 17．50±7．63* 9．10±0．19
复方广金钱草颗粒组 18．6 6．75±2．27 0．039±0．006＊＊ 19．31±1．63＊＊ 8．46±0．68
与模型组比较:* P＜0．05，＊＊P＜0．01;与空白对照组比较:#P＜0．05，##P＜0．01。
737第 6期 刘天竹，等．复方广金钱草颗粒对肾结石的影响及其利尿、抗炎镇痛作用
3．4．2 肾组织匀浆检测结果 见表 5，与空白对照
组比较，模型组大鼠肾组织匀浆中草酸浓度、钙离子
浓度显著升高(P＜0．05)。与模型组比较，五淋化石丸
组和复方广金钱草颗粒组肾组织匀浆中草酸浓度、钙
离子浓度显著降低(P＜0．05或 P＜0．01)。说明复方广
金钱草颗粒能够抑制肾脏中草酸钙结石的形成。
表 5 高草酸诱致草酸钙结石模型中大鼠肾组织匀浆生化检验结果
Table 5 Biochemistry examination of kidney homogenate in calcium oxalate stone rats(珋x±s，n= 10)
组别 剂量 /(g·kg－1) c(草酸)/(μmol·L－1) c(钙离子)/(mmol·L－1)
空白对照组 － 2．33±0．35 0．75±0．35
模型组 － 3．05±0．54## 1．35±0．50#
五淋化石丸组 3 2．40±0．44＊＊ 0．89±0．23*
复方广金钱草颗粒组 18．6 1．49±0．18＊＊ 0．77±0．36*
与模型组比较:* P＜0．05，＊＊P＜0．01;与空白对照组比较:#P＜0．05，##P＜0．01。
3．4．3 肾脏病理切片检查 见图 1。除空白对照组
外，模型组、五淋化石丸组、复方广金钱草颗粒组皆
可以观察到灰紫色为主草酸钙结晶存在，其中模型
组中大块草酸钙结晶簇拥;五淋化石丸组、复方广金
钱草颗粒组存在草酸钙结晶的数量与模型组比较，
均有不同程度降低，表明乙二醇诱致 Wister 雄性大
鼠肾损伤的草酸钙结石模型成功。提示复方广金钱
草颗粒能明显防止乙二醇诱发的肾结石形成，并使
大鼠结石形成率降低。
由表 6 可知，模型组与空白对照组比较差异有
统计学意义，说明造模成功;五淋化石丸组、复方广
金钱草颗粒组与模型组比较差异有统计学意义(P＜
0．01)，表明复方广金钱草颗粒能明显防止乙二醇、氯
化铵诱发的肾结石形成，并使大鼠结石形成率降低。
A．空白对照组;B．模型组;C．五淋化石丸组;D．复方广金钱
草颗粒组。
图 1 各组大鼠肾组织切片草酸钙结晶显微镜检查(HE 染
色，100×)
Figure 1 Crystalline of calcium oxalate in the rat kidney (HE
staining，×100)
表 6 复方广金钱草颗粒对大鼠肾结石的影响
Table 6 Effect of complex herba lysmachiae granules on
kidney stone in rats (珋x±s，n= 10)
组别
剂量 /
(g·kg－1)
肾结石
程度 /分
形成结石的
大鼠 /只
结石形
成率 /%
空白对照组 － 0 0 0
模型组 － 2．50±0．71## 10 100
五淋化石丸组 3 1．20±0．42＊＊ 10 100
复方金钱草颗粒组 18．6 0．70±0．67＊＊ 6 60
与模型组比较:＊＊P＜0．01;与空白对照组比较:##P＜0．01。
4 讨论
肾结石是泌尿系统常见的疾病之一，当结石由
肾脏掉落到输尿管，阻塞尿路，所伴随的症状会使结
石患者疼痛难忍，极大地危害患者的健康［6］。临床
上复方广金钱草汤剂常用于激光碎石后辅助排石，
并用于治愈后预防结石复发。汤剂应用不方便，开
发成颗粒剂有利于推广应用。
实验结果表明，复方广金钱草临床验方经过提
取，制备成颗粒剂后，高剂量组能减轻二甲苯致小鼠
耳郭肿胀并能减少醋酸致小鼠扭体次数，说明该颗
粒对小鼠有一定的抗炎镇痛作用。这可能与复方中
含有穿破石、广金钱草、车前子、党参、茯苓等药材有
关。其中穿破石具有抗炎镇痛作用［7］，广金钱草、
车前子、党参、茯苓等药材皆具有一定程度的抗炎作
用［8-11］。尿液生化指标及肾组织匀浆生化指标检测
结果均表明该复方具有良好的抑制结石形成的功
效，能防止乙二醇、氯化铵诱发的肾结石形成，使大
鼠结石形成率降低，利尿作用明显。说明该复方在
临床使用过程中可能减少结石病人的疼痛及炎症反
837 广东药学院学报 第 30卷
应，降低结石的形成率，预防结石的复发，这种多靶
点、多途径的防治方法与该复方中复杂的活性成分
是分不开的。本研究为该复方的临床应用提供了药
效学资料。但其临床效果还有待于临床药理学实验
进一步验证，其作用机制有待于进一步研究。
该复方药味多，按照汤剂水煎煮法提取出膏率
大，且吸湿性强，难以制成颗粒剂。本实验结果说明
该优选工艺［1］制成的颗粒剂，保留了复方中广金钱
草、泽泻、车前子、冬葵子等清热利湿、通淋化石、排
石的作用，为该方的进一步开发提供了重要依据。
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( 责任编辑:幸建华)
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研究发现 MMP-2的新作用
当前，研究人员对蛋白水解酶的研究主要围绕着酶对蛋白的降解作用，该过程是细胞生命延续的一个重要环
节。蛋白水解酶基质金属蛋白酶(MMPS)的作用是可分解细胞外基质蛋白。最近，西奈山伊坎医学院的一项研
究表明 MMP-2除了能降解蛋白外，还可以影响炎症、感染及自身免疫疾病的治疗情况，相关的研究结果发表在
2014年 12月的《Cell Ｒeports》上。
当树突细胞遇到外侵物时，会将外侵物“吞噬”，并将外侵物转移至最近的淋巴结，将外侵物暴露于淋巴细胞
(如 B细胞和 T细胞)。研究发现，树突细胞能使 MMP-2发出改变基因表达的信号，增加 OX40L 蛋白合成的量。
OX40L属Ⅱ型跨膜糖蛋白，主要表达于成熟树突细胞、活化 B细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞等。OX40L与树突细
胞表面的受体蛋白相互作用，可改变受体的形状，从而使 TH2细胞的数量增加。
因此，MMP-2可充当人体免疫系统的信使角色，MMP-2可将一些细胞转变成机体免疫应答的一部分，促进患
者的治疗;但在某些情况下，TH2细胞会触发 B细胞产生抗体，将机体自身的细胞识别为外来物，损害狼疮患者的
肾脏和类风湿关节炎患者的关节，使炎症恶化。另一方面，MMP-2信号传递导致 TH2 细胞的数量增加，表明 TH2
细胞将分泌更多对抗寄生虫感染的炎症 TH2 细胞因子，如 TNF-α、白细胞介素 4和 13;但如果分泌的量过多则会
导致自身免疫系统疾病。
此外，由于 TH2细胞能产生抗感染和修复组织的细胞因子，因此 TH2 细胞具有促进伤口愈合的作用。MMP-
2的组织修复功能，可能是基于其可以驱动 TH2免疫应答的能力。
药物设计人员希望利用 MMP-2上述作用机制，制备出能预防感染转化成肿瘤及免疫疾病或促进伤口愈合的
药物。
(Cell Ｒeports，2014;DOI:10．1016 / j．celrep．2014．10．067 温玉琴 编译)
937第 6期 刘天竹，等．复方广金钱草颗粒对肾结石的影响及其利尿、抗炎镇痛作用