全 文 ：海金沙提取物对实验性大鼠肾草酸钙结石形成的影响
胡露红，卞荆晶，吴晓娟
(华中科技大学同济医学院附属同济医院小儿外科，武汉 430030)
［摘 要］ 目的 研究海金沙提取物对大鼠肾草酸钙结石形成的影响，并初步探讨其作用机制。方法 采用
1． 25%乙二醇联合 1%氯化铵 1． 5 mL灌胃诱导大鼠肾草酸钙结石模型，分别给予一定剂量的海金沙醇提物，并以结石通
作为阳性对照。给药 4 周后，检测大鼠 24 h 尿量，尿钙(Ca)、镁(Mg)、磷(P)、尿酸(uric acid，UA)分泌量，血清尿素氮
(blood urea nitrogen，BUN)、肌酐(creatinine，Cr)、肾组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和谷胱甘肽过氧化
物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)水平，肾组织草酸和钙含量。镜下观察肾组织切片草酸钙结晶及肾小管扩张情况。
结果 海金沙提取物能显著降低肾结石大鼠尿 Ca、P、UA水平，提高尿 Mg水平，并增加排尿量，能抑制肾组织草酸钙结
晶的形成，降低肾组织草酸和钙含量。通过增加肾组织 SOD和 GSH-Px活性，保护肾功能，降低 BUN和 Cr含量。给予海
金沙提取物后，病理检测发现，肾组织内草酸钙明显减少，管腔未见明显扩张。结论 海金沙提取物能有效防止大鼠肾
草酸钙结石的形成。
［关键词］ 海金沙;肾结石;草酸钙
［中图分类号］ R286;R965 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1004－0781(2011)08－1007－04
泌尿系结石是泌尿外科第三大常见疾病，包括肾、
输尿管、膀胱和尿路结石，其中肾结石的发病率最高。
80%泌尿系结石由草酸钙组成［1］。随着生活水平的
提高，肾结石的发病率逐年升高。据报道，目前世界上
5%的人口正在承受着肾结石带来的病痛［2］。肾结石
治疗多采用放射或手术干预，如体外冲击波碎石、输尿
管镜、超声碎石、钬激光碎石等［3］。但手术治疗具有
价格昂贵、复发率高、肾损伤等缺点。中药预防治疗肾
结石有着悠久的历史和良好的效果，且具有无创伤、不
良反应少等优点［4］。中药海金沙［Lygodium japonicum
(Thunb．)sw．］是蕨类植物海金沙科海金沙属一年生
草质藤本植物，广泛分布于广东、广西等地［5］。海金
沙可全草入药，味甘淡，性寒，富含糖、酚和黄酮类化合
物，临床用于治疗尿路感染、尿路结石、肾炎、水肿，具
有清热解毒、利尿除湿之功效［6］。目前笔者尚未见国
内外有海金沙治疗尿路结石的基础研究的相关报道，
故在本实验中采用水提醇沉法，从海金沙中提取活性
成分，研究海金沙提取物对大鼠肾草酸钙结石的影响，
并探讨其相关作用机制，为海金沙的开发利用提供理
论依据。
1 材料与方法
1． 1 实验动物 Wistar 大鼠，雄性，体质量 150 ～
200 g，由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供
［收稿日期］ 2011－03－11 ［修回日期］ 2011－04－21
［作者简介］ 胡露红(1971 －) ，女，湖北武汉人，主管护
师，学士，研究方向:小儿外科护理、护理管理。电话:027 －
83663839，E-mail:huluhong123@ 126． com。
［通讯作者］ 吴晓娟(1979－) ，女，主治医师，研究方向:
小儿外科。电话:027－83663809，E-mail:Stnatalie@ 126． com。
(动物合格证号:00004212)。
1． 2 试药 海金沙全草(购自广州清平药材批发市
场，经华中科技大学同济医学院药学院生药学教研室
鉴定) ，乙二醇(天津市广成化学试剂有限公司，批号:
20090718) ，氯化铵(天津市北方天医化学试剂厂，批
号:20090810) ，结石通(成分:广金钱草，玉米须，石
韦，鸡骨草，海金沙草，车前草，茯苓，白茅根，广西梧州
制药股份有限公司，批准文号:国药准字 Z44021605，
批号:20090724)。钙(Ca)、镁(Mg)、磷(P)、尿酸
(uric acid，UA)、血尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)、
肌酐(creatinine，Cr)试剂盒(中生北控生物科技股份
有限公司，批号分别为 100371，100221，100171，
100581，100721，101881) ，草酸酶联免疫吸附剂测定
(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)试剂盒
(美国 R＆D 公司，批号:100421) ，超氧化物歧化酶
(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶
(glutathione peroxidase，GSH-Px)试剂盒(南京建成生
物工程研究所，批号分别为 20100424，20100512)。
1． 3 仪器 显微镜(日本 Olympus公司) ，SPX型智能
生化培养箱(宁波东南仪器有限公司制造) ，ES-C600
型电子天平(湘仪天平仪器厂) ，AVE-853 型半自动生
化分析仪(长沙高新技术产业开发区爱威科技实业有
限公司) ，MK3 酶联免疫检测仪(芬兰 Thermo 公司) ，
Z323K型低温高速离心机(法国 Hermle公司)。
1． 4 海金沙的提取 海金沙全草粉碎，称取 100 g，置
于 500 mL圆底烧瓶，加入纯化水 400 mL 回流提取 4
次，每次 2 h，合并提取液并浓缩。浓缩后加入 95%乙
醇沉淀，使乙醇含量达到 80%，静置抽滤，室温干燥滤
·7001·医药导报 2011 年 8 月第 30 卷第 8 期
液得到总膏，提取率约 2%。
1． 5 大鼠肾草酸钙结石模型的建立与分组 雄性
Wistar大鼠 60 只，饲养于清洁级动物实验中心，自由
饮水和进食，光照与黑暗各 12 h 交替，室温(22 ～
25)℃ ，相对湿度 50% ～ 60%。将大鼠随机分为空白
对照组、模型对照组、结石通组(阳性对照组)、海金沙
低剂量组、海金沙中剂量组和海金沙高剂量组，每组
10 只，各组间平均体质量比较均差异无统计学意义
(均 P＞0． 05)。适应性喂养 1 周后，空白对照组每日
以纯化水 1． 5 mL 灌胃，其余各组每日以成石液
(1． 25%乙二醇+1%氯化铵)1． 5 mL灌胃造模，连续 4
周。造模时，各组按下述剂量灌胃给药:结石通组给予
结石通 5 g·kg-1;海金沙低、中、高剂量组分别给予海
金沙提取物 50，100，150 mg·kg-1，空白对照组和模型
对照组给予等体积纯化水，连续灌胃 4 周。
1． 6 检测指标 实验结束前 1 d 用代谢笼分别收集
各大鼠 24 h空腹尿液，测定 24 h 排尿量，采用半自动
生化分析仪测定 24 h 尿 Ca、Mg、P、UA 含量。末次给
药 1 h后，处死动物，下腔静脉穿刺取血 1 mL，离心取
上层血清，采用半自动生化分析仪测定血清 Cr、BUN
含量。处死大鼠后取两侧肾脏。每只大鼠取左肾用
10%甲醛溶液固定，用于肾组织病理学检测;右肾组织
匀浆，半自动生化分析仪测定肾组织总钙、SOD、GSH-
Px含量，ELISA测定肾组织草酸含量。
1． 7 统计学方法 实验数据以均数±标准差(x±s)表
示，经 SPSS 13． 0 统计软件处理，采用 t检验进行比较，
P＜0． 05 表示差异有统计学意义。
2 结果
2． 1 海金沙提取物对大鼠一般情况的影响 实验中
无大鼠死亡。模型对照组大鼠毛发不荣、无光泽，精神
倦怠，身体蜷缩。结石通组和海金沙提取物高、中剂量
组大鼠毛色白净有光泽，体形丰满，精神状况、饮食活
动基本正常，海金沙提取物低剂量组大鼠状态与模型
组比较无明显改善。
2． 2 海金沙提取物对大鼠排尿量及尿液生化指标的影
响 与空白对照组比较，模型对照组大鼠给予成石液
后，24 h尿量显著减少(P＜0． 01)。与模型对照组比较，
海金沙各剂量组及结石通组排尿量增加，差异有统计学
意义(P＜0． 05)。模型对照组大鼠尿 Ca、P、UA 含量显
著高于空白对照组(P＜0． 01)，尿 Mg水平显著降低(P＜
0． 01)。海金沙高、中剂量组24 h尿 Ca、P、UA分泌量显
著降低，而尿Mg升高，与模型对照组比较差异有统计学
意义(P＜0． 05)。高、中剂量海金沙提取物对尿 Ca、Mg、
P、UA的作用与结石通相当。结果见表 1。
2． 3 海金沙提取物对大鼠肾组织草酸含量及血液生
化指标的影响 模型对照组肾组织草酸和钙含量、血
清 BUN和 Cr显著高于空白对照组(P＜0． 01)。海金
沙提取物高、中剂量组以及结石通组肾组织草酸和钙
含量和血清 BUN、Cr 水平显著降低，与模型组比较均
差异有统计学意义(均 P＜0． 05)。结果见表 2。
2． 4 海金沙对 SOD和 GSH-Px的影响 模型对照组肾
组织 SOD和 GSH-Px 显著低于空白对照组(P＜0． 01)，
而结石通组和海金沙高、中剂量组 SOD和 GSH-Px含量
显著升高(P＜0． 05)。低剂量海金沙虽可增加抗氧化酶
含量，但与模型组比较差异无统计学意义。见表 3。
2． 5 海金沙提取物对大鼠肾组织的影响 空白对照
组大鼠肾组织细胞排列整齐、规则，结构清晰，肾小球
及肾小管结构正常，无结晶形成。模型对照组大鼠肾
组织可见大量结晶，肾皮质充血，肾小管上皮细胞肿
胀、变性、坏死，肾盏内有脱落细胞，肾间质有炎性细胞
浸润。结石通组及海金沙高、中剂量组大鼠肾组织内
可见少量结石，大鼠肾皮质充血减轻，上皮细胞轻度水
肿，炎性细胞浸润减轻。海金沙低剂量组较模型对照
组稍有减轻，但无高剂量明显。见图 1。
3 讨论
泌尿系结石是泌尿系常见病和多发病，其中肾结
石的发病率最高，且多为草酸钙结石［7］。草酸钙结石
的形成与排尿量减少、过饱和的高尿酸尿、高草酸尿、
表 1 6 组大鼠 24 h尿量与尿液生化指标测定结果 x±s
组别
大鼠 /
只
24 h尿量 /
mL
Ca Mg P UA
(mmol·L-1)
海金沙
低剂量组 10 14． 1±1． 1* 1 2． 18±0． 11 1． 20±0． 09 2． 87±0． 17 119． 3±10． 33
中剂量组 10 14． 8±0． 4* 1 2． 09±0． 09* 1 1． 29±0． 05* 1 2． 62±0． 12* 1 110． 4±12． 83* 1
高剂量组 10 16． 3±0． 6* 1 1． 93±0． 06* 1 1． 43±0． 07* 1 2． 50±0． 14* 1 105． 5±13． 18* 1
结石通组 10 16． 8±0． 5* 1 2． 02±0． 04* 1 1． 45±0． 08* 1 2． 43±0． 13* 1 104． 19±9． 34* 1
模型对照组 10 10． 3±0． 9* 2 2． 31±0． 03* 2 1． 03±0． 11* 2 2． 94±0． 06* 2 132． 40±11． 31* 2
空白对照组 10 17． 3±1． 2 1． 83±0． 05 1． 52±0． 03 2． 45±0． 09 93． 23±3． 12
与模型对照组比较，* 1P＜0． 05;与空白对照组比较，* 2 P＜0． 01
·8001· Herald of Medicine Vol. 30 No. 8 August 2011
表 2 6 组大鼠肾组织草酸、钙含量及血液生化指标测定结果 x±s
组别
大鼠 /
只
肾 Ca 肾草酸
(mg·g－1)
血清 Cr 血清 BUN
(mg·L－1)
海金沙
低剂量组 10 0． 32±0． 04 3． 92±0． 32 1． 80±0． 90 420． 10±43． 20
中剂量组 10 0． 24±0． 02* 1 2． 98±0． 19* 1 8． 00±0． 30* 1 383． 20±32． 10* 1
高剂量组 10 0． 20±0． 01* 1 2． 31±0． 13* 1 7． 50±0． 40* 1 383． 90±23． 70* 1
结石通组 10 0． 19±0． 02* 1 2． 01±0． 21* 1 7． 10±0． 80* 1 371． 90±29． 80* 1
模型对照组 10 0． 35±0． 03* 2 4． 23±0． 32* 2 13． 20±1． 20* 2 443． 20±34． 30* 2
空白对照组 10 0． 15±0． 01 1． 42±0． 12 5． 80±0． 80 368． 90±21． 20
与模型对照组比较，* 1P＜0． 05;与空白对照组比较，* 2 P＜0． 01
表 3 6 组大鼠 SOD与 GSH-Px测定结果
U·mg－1，x±s
组别 大鼠 /只 SOD GSH-Px
海金沙
低剂量组 10 177． 49±17． 42 50． 90±9． 34
中剂量组 10 190． 65±19． 32* 1 52． 82±3． 41* 1
高剂量组 10 201． 32±23． 43* 1 56． 42±4． 21* 1
结石通组 10 198． 54±21． 42* 1 55． 40±4． 23* 1
模型对照组 10 164． 42±12． 31* 2 48． 83±4． 91* 2
空白对照组 10 208． 98±21． 23 60． 89±5． 32
与模型对照组比较，* 1P＜0． 05;与空白对照组比较，* 2 P＜
0． 01
高钙尿、低柠檬酸尿有关［8］。中药预防和治疗肾结石
有着悠久的历史与良好的效果，相对于外科治疗手段，
具有无创伤、治愈率高等优势。笔者采用乙二醇与氯
化铵诱导大鼠肾草酸钙结石，观察海金沙提取物对大
鼠肾草酸钙结石的影响，探讨其作用机制，为临床应用
提供药理依据。
乙二醇为草酸代谢通路的中间产物，诱导大鼠体
内草酸含量增加，加入氯化铵，增加结石形成概率［9］。
实验结果显示，乙二醇法诱导的大鼠肾结石模型肾组
织中形成多灶性结晶，与人类肾结石形成的病理过程
相一致。
图 1 6 组大鼠肾组织切片及草酸钙结石表达(HE，×400)
A．空白对照组;B．模型对照组;C．结石通组;D．海金沙低剂量组;E．海金沙中剂量组;F．海金沙高剂量组
笔者在本研究中发现，海金沙治疗组肾组织的草
酸和钙含量显著降低，病理学检测结果显示肾组织中
结石明显减少，上皮细胞破坏不明显，病变减轻。提示
海金沙有效抑制了草酸钙结石的形成。同时，尿生化
指标显示，海金沙可显著降低肾结石大鼠尿 Ca、P、
UA，增加尿 Mg含量，增加肾结石大鼠排尿量。已知稀
释尿液能降低尿中成石物质的过饱和度，加强对尿路
的冲刷作用，适合于各类型结石的预防与治疗［7］。高
钙尿为草酸钙结石的一个重要原因，海金沙抑制尿 Ca
的分泌，从而降低结石形成率［8］。Mg2+为结石形成的
重要的抑制药，Mg2+与 Ca2+竞争性与草酸结合，形成可
溶性的草酸镁，减少草酸钙的形成［10］。尿 P 的增加通
过促进磷酸钙的形成，为草酸钙的沉积提供微环
境［11］。而尿酸可与草酸钙结合，促进晶体生长［12］。
海金沙通过促进上述排石因素，减弱成石因素，降低结
石形成风险。
此外，海金沙可显著降低肾结石大鼠 BUN 和 Cr
含量。本研究结果提示，肾结石模型大鼠肾功能受损，
而海金沙可明显缓解该症状，改善肾小球滤过功能，保
护肾功能，防止氮质血症发生。已知肾脏组织中高浓
度草酸使上皮细胞产生活性氧簇，导致细胞凋亡、坏
死，细胞膜表面特性的改变会促进草酸钙结晶的粘
附［13-14］。因此，活性氧的产生导致上皮细胞的损伤是
肾结石形成的重要原因［15］。本研究结果表明，海金沙
可增加抗氧化物 SOD 和 GSH-Px 水平，降低上皮细胞
的损伤程度，从而抑制草酸钙结晶的形成。
综上所述，海金沙可降低肾组织草酸含量，保护肾
组织上皮细胞，减少尿 Ca、P、UA 分泌，增加尿 Mg 水
平，增加排尿量，从而抑制结石形成。其作用机制可能
与海金沙增加尿中结石抑制物，减少结石形成促进因
素，利尿及抗氧化物损伤有关。
［DOI］ 10． 3870 /yydb． 2011． 08． 011
·9001·医药导报 2011 年 8 月第 30 卷第 8 期
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金银花提取物对肝损伤小鼠的保护作用研究
王东升
(河南省漯河市郾城区人民医院内科，462300)
［摘 要］ 目的 探讨金银花提取物对对乙酰氨基酚所致小鼠肝损伤的影响。方法 将 60只小鼠随机分为 6 组，正
常对照组和模型组给予 0． 9%氯化钠溶液，其他各组以 0． 02 mL·g-1剂量给药，每天 1次，连续 10 d。除正常对照组外，其余
5组腹腔注射对乙酰氨基酚制备肝损伤模型，经眼静脉取血，测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶及肝组
织匀浆中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、丙二醛及一氧化氮水平。结果 金银花提取物低、中、高剂量组和联苯双
酯组各项指标改善明显，丙氨酸氨基转移酶［分别为(286． 32±20． 37)，(211． 34±18． 35)，(181． 51±11． 17) (191． 56±12． 24)
U·L-1］均低于模型组［(319． 37±21． 36)U·L-1］(P＜0． 05 或 P＜0． 01);天冬氨酸氨基转移酶［分别为(251． 78±20． 14)，
(223． 57±21． 78)，(179． 67±11． 27)，(171． 87±9． 91)U·L-1］亦低于模型组［(279． 97±15． 97)U·L-1］(P＜0． 05 或 P＜0． 01);
金银花提取物低、高剂量组和联苯双酯组肝组织丙二醛含量［分别为(3． 84±0． 19)，(2． 31±0． 21)，(2． 39±0． 17)U·L-1］均低
于模型组［(4． 39±0． 11)U·L-1］(P＜0． 05 或 P＜0． 01);金银花提取物低、中、高剂量组和联苯双酯组肝组织一氧化氮含量
［分别为(4． 89±0． 61)，(4． 11±0． 15)，(3． 84±0． 48)，(3． 87±0． 57)U·L-1］均低于模型组［(5． 74±0． 25)U·L-1］(P＜0． 05 或
P＜0． 01);金银花提取物低、中剂量组和联苯双酯组肝组织还原型谷胱甘肽含量［分别为(64． 37±2． 71)，(65． 78±1． 57)，
(70． 17±1． 47)U·mg-1］均高于模型组［(40． 12±1． 37)U·L-1］(P＜0． 05 或 P＜0． 01);金银花提取物低、中、高剂量组和联苯
双酯组肝组织超氧化物歧化酶［分别为(104． 25±11． 21)，(141． 27±13． 11)，(177． 11±14． 34)，(163． 55±16． 78)U·mg-1］均高
于模型组［(87． 32±16． 78)U·L-1］(P＜0． 05或 P＜0． 01)。结论 金银花具有显著的抗肝损伤作用。
［关键词］ 金银花;对乙酰氨基酚;损伤，肝
［中图分类号］ R286;R95 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1004－0781(2011)08－1010－03
金银花为常用中药，含有丰富的挥发油、黄酮类化
合物、有机酸类物质、三萜皂苷类物质和无机元素［1］。
有研究显示，该药具有治疗湿热黄疸、肝胆结石、尿路结
石、细菌感染等作用，可用于解热抗炎、降脂［2］、利胆保
·0101· Herald of Medicine Vol. 30 No. 8 August 2011