全 文 ：收稿日期:201601-28011
基金项目:国家自然科学基金地区项目(81460651) ;内蒙古自然科学基金面上项目(2014MS0833) ;内蒙古医科大学 2015 中青人才团队项
目(NYTD-2015004)
作者简介:任珊珊(1992-) ，女，在读硕士研究生，专业方向:中药质量控制研究;Tel:15148039382，E-mail:1605654379@ qq. com。
* 通讯作者:张屏，Tel:15947031797，E-mail:pingzhang@ vip. 126. com。
蒙药悬钩子木黄酮类成分及其生物活性研究
任珊珊1，包保全1，格根塔娜2，布 仁1，陈建平1，张 屏1*
(1. 内蒙古医科大学药学院，内蒙古 呼和浩特 010110;2. 北京大学药学院，北京 100191)
摘要 目的:研究悬钩子木中黄酮类化学成分及其生物活性。方法:采用大孔吸附树脂柱色谱、Sephadex LH-
20 凝胶柱色谱、反相制备高效液相色谱及等方法分离纯化。根据理化性质及核磁共振(1D、2D-NMＲ)、高分辨质谱
(HＲ-MS)等光谱方法进行结构鉴定。采用 FＲAP抗氧化法、Griess 法及 MTT 法方法测定单体化合物的抗氧化、抗
炎及细胞毒活性。结果:从悬钩子木的乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物分离得到 8 个黄酮类化合物，分别为:山柰
酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯(1)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯(2)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷
(3)、顺式椴树苷(4)、椴树苷(5)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸乙酯(6)、槲皮素(7)、山柰酚(8)。活性检测表
明化合物 1 ～ 8 均具有不同程度的抗氧化活性，化合物 1、2、4、6 具有显著的抗炎活性，所有化合物细胞毒活性 IC50
值均远大于 200 μmol /L。结论:蒙药悬钩子木中黄酮类成分具有抗氧化、抗炎活性，所有化合物均为首次从该植物
中分离得到，其中化合物 1、2、6 为首次从悬钩子属内分离得到。
关键词 悬钩子木;化学成分;抗氧化;抗炎;细胞毒活性
中图分类号:Ｒ284. 1 /Ｒ284. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2016)09-2019-05
DOI:10. 13863 / j. issn1001-4454. 2016. 09. 021
Study on the Flavonoids and Biological Activity of Ｒubus sachalinensis
ＲEN Shan-shan1，BAO Bao-quan1，Gegentana2，BU Ｒen1，CHEN Jian-ping1，ZHANG Ping1
(1. College of Pharmacy，Inner Mongolia Medical University，Hohhot 010100，China;2. College of Pharmacy，Peking University，Beijing
100191，China)
Abstract Objective:To study the chemical constituents and biological activity of Ｒubus sachalinensis. Methods:The compounds in
the ethyl acetate and n-butanol fraction were isolated and purified by macroporous resin，Sephadex LH-20 column chromatography，and
reverse-phase preparative HPLC. The structures were identified by various spectroscopic data such as 1D，2D-NMＲ，HＲ-
MS. Antioxidant，anti-inflammatory and cytotoxicity of the compounds were determined by FＲAP，Griess and MTT methods. Ｒesults:
Eight compounds were isolated from the ethyl acetate and n-butanol extract of Ｒubus sachalinensis，and identified as kaempferol-3-O-β-
D-butyl glucuronate(1) ，quercetin-3-O-β-D-butyl glucuronate(2) ，quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside(3) ，cis-tiliroside(4) ，tiliroside
(5) ，quercetin-3-O-β-D-ethyl glucuronate(6) ，quercetin(7)and kaempferol(8). Activity assay showed that the compounds 1 ～ 8 had
different levels of antioxidant activity，all the compounds showed cytotoxicities of IC50 greater than 200 μmol /L. Conclusion:Flavonoids
are the main antioxidant consitituents of Ｒubus sachalinensis and have a good anti-inflammatory activity. All the compounds are isolated
from this plant for the first time，compounds 1，2，6 are obtained from the this genus for the first time.
Key words Ｒubus sachalinensis Lévl.;Chemical constituents;Anti-oxidant activity;Anti-inflammatory activity;Cytotoxicity
蒙药悬钩子木为蔷薇科悬钩子属植物库页悬钩
子 Ｒubus sachalinensis Lévl. 的干燥茎枝，又名珍珠
杆，蒙文名为“博格日乐吉根”、“杆达嘎日”。本品
味甘、微辛，性平，具有解表、调元、止咳之功效，临床
上常用于治疗未熟热、瘟疫、讧热、感冒、肺热咳嗽、
气喘和赫依热等疾病〔1〕。悬钩子木药用历史悠久，
为常用蒙药之一，特别是作为蒙医瘟疫热证经典方
和基础方“四味土木香散”的组方药材，在蒙药中具
有重要作用和地位〔2〕。据报道，该属植物主要含有
黄酮、萜、鞣质、甾类多种成分，具有抗菌、镇痛、抗
炎、抗过敏、抗氧化、抗肿瘤、保肝等作用〔3〕。悬钩
子木为蒙医特色药材，主要分布于内蒙古、吉林、黑
龙江等地〔4〕，关于悬钩木化学成分和生物活性研究
的文献报道较少。本课题首次对蒙药材悬钩子木进
行了化学成分研究，从正丁醇和乙酸乙酯萃取部位
分离得到 8 个化合物，分别鉴定为:山柰酚-3-O-β-D-
吡喃葡萄糖醛酸丁酯(1)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡
萄糖醛酸丁酯(2)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷
(3)、顺式椴树苷(4)、椴树苷(5)、槲皮素-3-O-β-D-
吡喃葡萄糖醛酸乙酯(6)、槲皮素(7)、山柰酚(8)。
·9102·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 39 卷第 9 期 2016 年 9 月
所有化合物均为首次从该植物中分离得到，其中，三
个葡萄糖醛酸酯类化合物 1、2、6 为悬钩子属植物中
首次分离得到，并具有明显的抗炎活性。所有化合
物均具有不同程度的抗氧化活性，细胞毒活性 IC50
值均远大于 200 μmol /L。
1 仪器与材料
制备液相系统:LC-20AT 色谱泵，ＲID-10A 示差
折光检测器，Labsolution version 5. 71 SP1 工作站，
Shim pack PＲC-ODS 250 mm ×20 mm制备型色谱柱
(日本岛津公司) ;Agela Technologies 中压液相系
统;Venusil-XBP C18中低压色谱柱(Thermo Fisher
Scientific) ;Q-Exactive高分辨质谱色谱柱系统:HESI
加热喷雾电离离子源，四级杆-轨道阱串联质量分析
器，X-caliber数据处理系统;Bruker AVANCE Ⅲ 600
MHz超导核磁共振仪(德国 Bruker 公司) ;AB135-S
电子天平(Metter Toledo公司) ;HP-20 大孔树脂(天
津浩聚树脂科技有限公司) ;Sephadex LH-20(Phar-
macia公司)。水溶性维生素 E、MTT、三吡啶基三嗪
(Sigma-Aldrich公司) ;Griess试剂(上海惠诚生物科
技有限公司) ;48 孔、96 孔细胞培养板(美国 Coning
公司) ;DMEM 培养基、胎牛血清(FBS) (Sigma 公
司) ;甲醇(色谱纯，美国 Fisher 公司) ;其余试剂均
为分析纯。
悬钩子木于 2015 年 10 月采自内蒙古赤峰市赛
罕乌拉，原植物经笔者包保全教授鉴定为蔷薇科悬
钩子属植物库页悬钩子 Ｒubus sachalinensis Lévl. 的
干燥茎枝，标本存放于内蒙古医科大学药学院标本
室。小鼠神经母细胞瘤细胞株 N18TG2、小鼠小神
经胶质细胞株 BV-2 细胞株购自中国科学院典型培
养物保藏中心上海细胞库。
2 方法
2. 1 提取与分离 悬钩子木 5. 04 kg，粉碎后以
95%乙醇回流提取 1 次，再用 75%乙醇回流提取 2
次，提取时间分别为 3、2、2 h。合并提取液，浓缩得
到粗提物浸膏 924. 03 g。浸膏加水悬浮，依次用等
体积石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压回收
溶剂，得到石油醚部位 148. 07 g、氯仿部位 90. 18 g、
乙酸乙酯部位 75. 12 g、正丁醇部位 224. 65 g、水部
位 404. 10 g。取正丁醇部位进行大孔吸附树脂柱色
谱分离，依次用水、40%、55%、70%、85%、95%乙醇
洗脱，减压回收溶剂，得到 7 个不同极性组分。其中
55%乙醇组分经 Sephadex LH-20 柱分离，然后经制
备液相分离(流动相为 55% 甲醇)得到化合物 1
(13. 0 mg)、2(12. 2 mg)。取乙酸乙酯部位进行中
压制备色谱分离，以甲醇-水溶剂系统梯度洗脱，得
到 10 个流分。其中 40%乙醇组分经 Sephadex LH-
20 柱分段，然后经制备液相(流动相为 35%甲醇)
制备得到化合物 3(8. 2 mg)。50%乙醇组分经半制
备液相色谱(流动相为 45%甲醇) ，再经 Sephadex
LH-20 柱纯化得到化合物 4(6. 8 mg)。60%组分经
Sephadex LH-20 柱分离，再经制备液相色谱(流动相
为 58%甲醇)制备得到化合物 5(15. 4 mg)、6(4. 0
mg)、7(4. 5 mg)。70%流分经 Sephadex LH-20 柱，
再经制备液相色谱(流动相为 65%甲醇)制备得到
化合物 8(5. 6 mg)。
2. 2 抗氧化活性试验〔5〕
2. 2. 1 方法:精密吸取工作液 675 μL，供试品溶液
90 μL 和蒸馏水 45 μL 混合，摇匀，室温下静置 5
min，在 593 nm处测定吸光值，代入 Trolox标准曲线
方程，计算出供试品的 Trolox相对值。
2. 2. 2 供试品制备:化合物 1 ～ 8 称重后溶解在甲
醇中，配制成 200 μmol /L的溶液，即得。
2. 2. 3 工作液的配制:于 25 mL 的乙酸-乙酸钠
(pH 3. 6，300 mmol /L)缓冲溶液中，精密加入 20
mmol /L的 FeCl3·6H2O溶液 2. 5 mL，和 10 mmol /L
的 TPTZ盐酸溶液(用 40 mmol /L 的 HCl 配制)2. 5
mL，混合均匀，作为工作液，临用新配。
2. 2. 4 Trolox浓度-吸光度曲线:Trolox标准储备液
的配制:精密称取 12. 5 mg 的 Trolox 标准品，至 20
mL棕色量瓶中，甲醇溶解并定容至刻度，配制成
2. 5 mmol /L的 Trolox储备液，4 ℃黑暗贮存。Trolox
浓度-吸光度曲线的制作:取 Trolox 标准储备液溶液
4 mL 至 25 mL 棕色量瓶中，甲醇溶解并定容至刻
度，配制成 400 μmol /L 的 Trolox 标准溶液，再用甲
醇依次稀释为 300、200、100、50、25 μmol /L 系列浓
度的 Trolox 标准溶液。按 FＲAP 法操作，测定 593
nm处的吸光度值，制作 Trolox浓度-吸光度曲线。
2. 3 抗炎活性试验
2. 3. 1 供试品配制:化合物 1 ～ 8 称重后溶解在
DMEM中，配制成 100、50、10 μmol /L的溶液，即得。
2. 3. 2 细胞培养:BV-2 细胞在 5% CO2，37 ℃下的
培养。调整 BV-2 细胞悬液密度为每毫升 2 × 104
个，按每孔 200 μL接种至 96 孔板培养 24 h，待细胞
贴壁。
2. 3. 3 标准曲线制作:用去离子水稀释 NaNO2标
准品配制浓度为 0. 1 ～ 50 μmol /L的系列标准溶液，
各标准溶液与 Griess试剂各 200 μL等量混合，空白
为去离子水代替标准溶液同法配制。混合溶液在室
温下放置 30 min后，于 548 nm处测定吸光度，绘制
标准曲线。
·0202· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 39 卷第 9 期 2016 年 9 月
2. 3. 4 化合物对 BV-2 细胞 NO 释放量的影响:取
对数生长期的 BV-2 细胞，弃去上清液，细胞计数
后，调整 BV-2 细胞悬液密度为每毫升 2 × 105个，按
每孔 200 μL接种至 48 孔板，置于 37 ℃、5% CO2培
养箱中培养 2 h后，除空白组外均加入 LPS(100 μg /
mL)40 μL 刺激，制造炎症细胞模型。之后进行分
组给药，阳性对照组加入 100 μmol /L 槲皮素、给药
组加入不同浓度化合物(100、50、10 μmol /L)、空白
组和模型组加入培养液，每孔加入 200 μL，每组 3
个复孔，继续培养 48 h。取细胞培养上清液 200 μL
与等量 Griess 试剂混合，在室温下放置 30 min 后，
于 548 nm处测定吸光度值，采用校正曲线法计算
NO浓度。
2. 4 细胞毒活性试验
2. 4. 1 供试品配制:化合物 1 ～ 8 称重后溶解在
DMEM中，配制成 100、50、10 μmol /L的溶液，即得。
2. 4. 2 细胞培养:N18TG2 细胞在 5%CO2、37 ℃下
的培养。调整 N18TG2 细胞悬液密度为每毫升 2 ×
104个，按每孔 100 μL 接种至 96 孔板培养 24 h，待
细胞贴壁。
2. 4. 3 MTT法检测:每孔加入 100 μL不同浓度药
物(100、50、10 μmol /L) ，每组设置 3 个孔，并设置空
白对照组，在 5%CO2、37 ℃下的培养 48 h 后，加入
MTT(5 mg /mL)的 PBS溶液 20 μL，培养 2 h。弃去
培养基，加入 150 μL DMSO，置摇床上低速振荡 10
min，使结晶物充分溶解。采用酶联免疫吸附法于
570 nm处测定吸光度值。
3 结构鉴定
化合物 1:黄棕色粉末。HＲ-ESI-MS m/z:
517. 13245［M － H］－(理论值为 517. 13405) ，分子
式为 C25H26 O12。
1H-NMＲ(600 MHz，CD3OD)δ:8. 02
(1H，d，J = 8. 4 Hz，H-2，6) ，6. 85(1H，d，J = 8. 4
Hz，H-3，5) ，6. 38(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-8) ，6. 19
(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-6) ，5. 28(1H，d，J = 7. 2 Hz，H-
1″) ，4. 04(2H，m，H-1) ，3. 74(1H，d，J = 9. 6 Hz，H-
5″) ，3. 57(1H，t，J = 9. 6 Hz，H-4″) ，3. 48(1H，m，H-
2″) ，3. 45(1H，m，H-3″) ，1. 48(2H，m，H-2) ，1. 25
(2H，m，H-3) ，0. 82(3H，t，J = 7. 2 Hz，H-4) ;13 C-
NMＲ(125 MHz，CD3OD)δ:159. 2(C-2) ，135. 3(C-
3) ，179. 2(C-4) ，163. 0(C-5) ，100. 0(C-6) ，166. 0
(C-7) ，94. 8(C-8) ，158. 5(C-9) ，105. 6(C-10) ，
122. 6(C-1) ，132. 3(C-2，6) ，116. 1(C-3，5) ，
161. 6(C-4) ，104. 4(Glc-C-1″) ，75. 4(Glc-C-2″) ，
77. 2(Glc-C-3″) ，72. 7(Glc-C-4″) ，77. 6(Glc-C-5″) ，
170. 0(Glc-C-6″) ，66. 2(butyl-C-1) ，31. 5(butyl-C-
2) ，20. 0(butyl-C-3) ，13. 9(butyl-C-4)。以上波
谱数据与文献〔6〕报道对照基本一致，故鉴定化合物
1 为山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯。
化合物 2:黄棕色无定型粉末。HＲ-ESI-MS m/
z:533. 12891［M － H］－(理论值 533. 12897) ，分子式
为 C25 H7 O13。
1H-NMＲ(600 MHz，CD3OD)δ:7. 60
(1H，H-2) ，7. 59(1H，d，J = 8. 4 Hz，H-6) ，6. 83
(1H，d，J = 8. 4 Hz，H-5) ，6. 37(1H，d，J = 1. 8 Hz，
H-8) ，6. 19(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-6) ，5. 27(1H，d，J
= 7. 2 Hz，H-1″) ，4. 05(2H，t，J = 6. 6 Hz，H-1) ，
3. 74(1H，d，J = 9. 6 Hz，H-5″) ，3. 58(1H，t，J = 9. 6
Hz，H-4″) ，3. 53(1H，t，J = 8. 4 Hz，H-2″) ，3. 46(1H，
t，J = 8. 4 Hz，H-3″) ，1. 49(2H，m，H-2) ，1. 24(2H，
m，H-3) ，0. 82(3H，d，J = 7. 2 Hz，H-4) ;13 C-NMＲ
(125 MHz，CD3OD)δ:159. 1(C-2) ，135. 3(C-3) ，
179. 2(C-4) ，163. 0(C-5) ，99. 9(C-6) ，166. 0(C-7) ，
94. 7(C-8) ，158. 5(C-9) ，105. 6(C-10) ，123. 5(C-
1) ，112. 9 (C-2) ，146. 0 (C-3) ，149. 9 (C-4) ，
115. 9(C-5) ，122. 2(C-6) ，104. 4(Glc-C-1″) ，75. 4
(Glc-C-2″) ，77. 3(Glc-C-3″) ，72. 7(Glc-C-4″) ，77. 4
(Glc-C-5″) ，170. 2 (Glc-C-6″) ，66. 2 (butyl-C-1) ，
31. 5(butyl-C-2) ，19. 9(butyl-C-3) ，13. 9(butyl-C-
4)。以上波谱数据与文献〔7〕报道对照基本一致，
故鉴定化合物 2 为槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸
丁酯。
化合物 3:黄色无定型粉末。HＲ-ESI-MS m/z:
463. 08905［M － H］－(理论值为 463. 08710) ，分子
式为 C21H20 O12。
1H-NMＲ(600 MHz，CD3OD)δ:7. 70
(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-2) ，7. 57(1H，dd，J = 8. 4 Hz，
H-6) ，6. 86(1H，d，J = 8. 4 Hz，H-5) ，6. 37(1H，d，J
= 1. 8 Hz，H-8) ，6. 18(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-6) ，5. 24
(1H，d，J = 7. 2 Hz，H-1″) ，3. 70(1H，d，J = 12. 0 Hz，
H-6″a) ，3. 56(1H，dd，J = 5. 4，12. 0 Hz，H-6″ b) ，
3. 47(1H，t，J = 8. 4 Hz，H-2″) ，3. 42(1H，t，J = 8. 4
Hz，H-3″) ，3. 39(1H，t，J = 8. 4 Hz，H-4″) ，3. 21(1H，
m，H-5″) ;13C-NMＲ(125 MHz，CD3OD)δ:159. 0(C-
2) ，135. 6(C-3) ，179. 4(C-4) ，162. 9(C-5) ，99. 9(C-
6) ，165. 9(C-7) ，94. 7(C-8) ，158. 4(C-9) ，105. 6(C-
10) ，123. 2 (C-1) ，117. 6 (C-2) ，145. 8 (C-3) ，
149. 8(C-4) ，116. 0 (C-5) ，123. 0 (C-6) ，104. 4
(Glc-C-1″) ，75. 7(Glc-C-2″) ，78. 1(Glc-C-3″) ，71. 2
(Glc-C-4″) ，78. 4(Glc-C-5″) ，62. 6(Glc-C-6″)。以上
波谱数据与文献〔8〕报道对照基本一致，故鉴定化合
物 3 为槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
化合物 4:淡黄棕色结晶。HＲ-ESI-MS m/z:
·1202·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 39 卷第 9 期 2016 年 9 月
593. 12805［M － H］－(理论值为 593. 12897) ，分子
式为 C30H26 O13。
1H-NMＲ(600 MHz，CD3OD)δ:7. 95
(1H，d，J = 8. 4 Hz，H-2，6) ，7. 50(1H，d，J = 8. 4
Hz，H-2，6) ，6. 81(1H，d，J = 8. 4 Hz，H-3，5) ，
6. 68(1H，d，J = 12. 0 Hz，H-7) ，6. 67(1H，d，J = 8. 4
Hz，H-3，5) ，6. 31(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-8) ，6. 19
(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-6) ，5. 50(1H，d，J = 12. 0 Hz，
H-8) ，5. 19(1H，d，J = 7. 2 Hz，H-1″) ，4. 17(2H，m，
H-6″) ，3. 42(3H，m，H-2″，3″，5″) ，3. 27(1H，m，H-
4″) ;13C-NMＲ(125 MHz，CD3OD)δ:159. 9(C-2) ，
135. 2(C-3) ，179. 4(C-4) ，163. 7(C-5) ，101. 7(C-
6) ，166. 3(C-7) ，96. 3(C-8) ，159. 5(C-9) ，105. 1(C-
10) ，104. 4(Glc-C-1″) ，76. 4(Glc-C-2″) ，78. 9(Glc-
C-3″) ，72. 4(Glc-C-4″) ，76. 6(Glc-C-5″) ，64. 9(Glc-
C-6″) ，128. 4(Coumaroyl-C-1) ，134. 5(Coumaroyl-C-
2，6) ，116. 5(Coumaroyl-C-3，5) ，160. 9(Cou-
maroyl-C-4) ，146. 2(Coumaroyl-C-7) ，117. 0(Cou-
maroyl-C-8) ，168. 6(Coumaroyl-C-9)。以上波谱
数据与文献〔9〕报道对照基本一致，故鉴定化合物 4
为顺式椴树苷。
化合物 5:黄色针状结晶。HＲ-ESI-MS m/z:
593. 13116［M － H］－(理论值为 593. 12897) ，分子
式为 C30H26 O13。
1H-NMＲ(600 MHz，CD3OD)δ:7. 97
(1H，d，J = 8. 4 Hz，H-2，6) ，7. 39(1H，d，J = 15. 6
Hz，H-7) ，7. 29(1H，d，J = 8. 4 Hz，H-2，6) ，6. 80
(1H，d，J = 8. 4 Hz，H-3，5) ，6. 78(1H，d，J = 8. 4
Hz，H-3，5) ，6. 29(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-8) ，6. 12
(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-6) ，6. 06(1H，d，J = 15. 6 Hz，
H-8) ，5. 23(1H，d，J = 7. 2 Hz，H-1″) ，4. 29(1H，d，J
=12. 0 Hz，H-6″ a) ，4. 18(1H，dd，J = 6. 0，12. 0 Hz，
H-6″b) ，3. 47(3H，m，H-2″，3″，5″) ，3. 32(1H，m，H-
4″) ;13C-NMＲ(125 MHz，CD3OD)δ:159. 3(C-2) ，
135. 2(C-3) ，179. 4(C-4) ，158. 4(C-5) ，100. 0(C-
6) ，165. 9(C-7) ，94. 8(C-8) ，162. 9(C-9) ，105. 6(C-
10) ，104. 0(Glc-C-1″) ，75. 7(Glc-C-2″) ，78. 0(Glc-
C-3″) ，71. 7(Glc-C-4″) ，75. 8(Glc-C-5″) ，64. 3(Glc-
C-6″) ，127. 1(Coumaroyl-C-1) ，131. 2(Coumaroyl-C-
2，6) ，116. 8(Coumaroyl-C-3，5) ，161. 2(Cou-
maroyl-C-4) ，146. 5(Coumaroyl-C-7) ，114. 7(Cou-
maroyl-C-8) ，168. 8(Coumaroyl-C-9)。根据以上
波谱数据与文献〔10〕中报道对照基本一致，因此鉴定
化合物 5 为椴树苷。
化合物 6:黄色颗粒结晶。HＲ-ESI-MS m/z:
505. 09955［M － H］－(理论值为 505. 09767) ，分子
式为 C23H22 O13。
1H-NMＲ(600 MHz，CD3OD)δ:7. 59
(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-2) ，7. 58(H，dd，J = 8. 4 Hz，
H-6) ，6. 83(1H，d，J = 8. 4 Hz，H-5) ，6. 40(1H，d，J
= 1. 8 Hz，H-8) ，6. 21(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-6) ，5. 20
(1H，d，J = 7. 8 Hz，H-1″) ，4. 10(2H，q，J = 7. 2 Hz，
H-1) ，3. 40 ～ 3. 75(4H，葡萄糖上质子信号) ，1. 15
(3H，t，J = 7. 2 Hz，H-2) ;13C-NMＲ(125 MHz，
CD3OD)δ:158. 5(C-2) ，135. 6(C-3) ，179. 3(C-4) ，
163. 0(C-5) ，99. 9(C-6) ，166. 2(C-7) ，94. 8(C-8) ，
159. 4(C-9) ，105. 6(C-10) ，123. 0(C-1) ，117. 2(C-
2) ，145. 9 (C-3) ，149. 9 (C-4) ，116. 1 (C-5) ，
123. 5(C-6) ，104. 9(Glc-C-1″) ，75. 4(Glc-C-2″) ，
77. 3(Glc-C-3″) ，72. 7(Glc-C-4″) ，77. 4(Glc-C-5″) ，
170. 2(Glc-C-6″) ，62. 5(Ethyl-C-1) ，14. 3(Ethyl-C-
2)。以上波谱数据与文献〔11〕报道对照基本一致，
故鉴定化合物 6 为槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸
乙酯。
化合物 7:黄色针状晶体。HＲ-ESI-MS m/z:
301. 03671［M － H］－(理论值为 301. 03428) ，分子
式为 C15 H10 O7。
1H-NMＲ(600 MHz，CD3OD)δ:7. 68
(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-2) ，7. 57(1H，dd，J = 1. 8，8. 4
Hz，H-6) ，6. 82(1H，d，J = 8. 4 Hz，H-5) ，6. 33(H，
d，J = 1. 8 Hz，H-8) ，6. 12(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-6) ;
13C-NMＲ(125 MHz，CD3OD)δ:146. 8(C-2) ，135. 7
(C-3) ，175. 8(C-4) ，156. 1(C-5) ，98. 1(C-6) ，163. 8
(C-7) ，93. 4(C-8) ，160. 7(C-9) ，103. 0(C-10) ，
121. 9(C-1) ，115. 0(C-2) ，145. 0(C-3) ，147. 7(C-
4) ，115. 6(C-5) ，119. 9(C-6)。以上数据与文
献〔12〕报道对照基本一致，故鉴定化合物 7 为槲皮
素。
化合物 8:黄色无定型粉末。HＲ-ESI-MS m/z:
285. 04108［M － H］－(理论值为 285. 03936) ，分子
式为 C15 H10 O6。
1H-NMＲ(600 MHz，CD3OD)δ:8. 09
(2H，d，J = 8. 4 Hz，H-2，6) ，6. 90(d，J = 8. 4 Hz，H-
3，5) ，6. 40(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-8) ，6. 18(1H，d，J
= 1. 8 Hz，H-6) ;13C-NMＲ(125 MHz，CD3OD)δ:
146. 8(C-2) ，135. 6(C-3) ，175. 9(C-4) ，156. 2(C-
5) ，99. 3(C-6) ，163. 9(C-7) ，94. 5(C-8) ，160. 7(C-
9) ，103. 0(C-10) ，123. 2(C-1) ，129. 5(C-2，6) ，
116. 3(C-3，5) ，159. 2(C-4)。以上波谱数据与文
献〔13〕报道对照基本一致，故鉴定化合物 8 为山柰
酚。
4 生物活性结果
4. 1 单体化合物的抗氧化能力 以 FＲAP 法测定
各单位化合物的抗氧化能力，其 Trolox 浓度-吸光度
曲线方程为 y = 0. 0024x － 0. 0073，线性相关系数为
·2202· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 39 卷第 9 期 2016 年 9 月
0. 9988，线性范围为 25 ～ 300 μmol /L。化合物 1 ～ 8
Trolox当量值(TEAC)范围为 0. 122 ～ 1. 547。结果
见表 1。
表 1 化合物 1 ～8 抗氧化活性测定结果
(珔x ± s，n =3)
化合物 样品名称 TEAC
1 山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯 0. 270 ± 0. 016
2 槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯 1. 546 ± 0. 009
3 槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 1. 547 ± 0. 044
4 顺式椴树苷 0. 431 ± 0. 016
5 椴树苷 0. 122 ± 0. 011
6 槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸乙酯 1. 240 ± 0. 048
7 槲皮素 2. 021 ± 0. 005
8 山柰酚 0. 983 ± 0. 002
4. 2 单体化合物抗炎活性 Griess 法 NaNO2浓度-
吸光度曲线方程为 y = 0. 01988x + 0. 00287，线性相
关系数为 0. 9991，线性范围为 0. 1 ～ 50 μmol /L。结
果见表 2。
表 2 化合物 1 ～7 对 LPS刺激 BV2 细胞产生
NO的影响(珔x ± s，n =3)
组别
给药浓度 /
(μmol /L)
NO/(μmol /L)
空白对照组 － 2. 12 ± 0. 5312
模型组(LPS) － 17. 80 ± 1. 5560#
阳性对照组(槲皮素) 100 6. 87 ± 0. 8868
LPS +化合物 1 10 13. 18 ± 2. 2190*
50 5. 72 ± 0. 7449*
100 4. 81 ± 1. 0290*
LPS +化合物 2 10 14. 14 ± 0. 4089*
50 7. 10 ± 0. 0734*
100 3. 80 ± 0. 6026*
LPS +化合物 3 10 21. 73 ± 0. 1574
50 20. 42 ± 1. 3640
100 17. 46 ± 0. 6101
LPS +化合物 4 10 18. 21 ± 3. 3260
50 15. 60 ± 1. 9540*
100 10. 39 ± 2. 2740*
LPS +化合物 5 10 23. 79 ± 0. 3586
50 19. 37 ± 0. 2077
100 18. 81 ± 0. 7136
LPS +化合物 6 10 14. 09 ± 1. 9683*
50 11. 12 ± 0. 1403*
100 9. 74 ± 0. 9220*
LPS +化合物 7 10 24. 90 ± 3. 7790
50 19. 02 ± 1. 6660
100 32. 75 ± 1. 6605
注:与空白对照组比较，#P ＜ 0. 05;与模型组比较，* P ＜ 0. 05
4. 3 单体化合物细胞毒活性 MTT 检测结果表明
化合物 1 ～ 8 细胞毒活性 IC50值均大于 200 μmol /L，
无明显的细胞毒活性。
参 考 文 献
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·3202·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 39 卷第 9 期 2016 年 9 月