全 文 :·62· Chinese Journal of Information on TCM Nov.2015 Vol.22 No.11
湿生扁蕾-苦豆子不同比例配伍抗炎、镇痛作用研究
赵慧巧,张艳霞,刘雪枫,陈正君,卢年华,景明
甘肃中医药大学,甘肃 兰州 730000
摘要:目的 比较湿生扁蕾与苦豆子不同比例配伍对小鼠的镇痛、抗炎作用。方法 将小鼠随机分为正常
组、阳性药组、不同配伍组,每组 10只,连续灌胃 7 d,每日 1次。采用冰醋酸扭体法和热板致痛法比较不同配
伍的镇痛作用,采用二甲苯致小鼠耳肿胀法和琼脂致肉芽肿法比较不同配伍的抗炎作用。结果 与正常组比较,
湿生扁蕾复方镇痛、抗炎作用明显(P<0.01),湿生扁蕾和苦豆子按 20∶0.6和 20∶0.9配伍时,镇痛、抗炎效
果较好。结论 湿生扁蕾-苦豆子配伍具有较好的镇痛、抗炎作用,以湿生扁蕾和苦豆子 20∶0.6配伍最佳。
关键词:湿生扁蕾;苦豆子;镇痛;抗炎;小鼠
DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2015.11.017
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2015)11-0062-03
Analgesic and Anti-inflammatory Effects of Different Compatibility of Gentianopsis
Paludosa and Sophora Alopecuroide on Mice ZHAO Hui-qiao, ZHANG Yan-xia, LIU Xue-feng,
CHEN Zheng-jun, LU Nian-hua, JING Ming (Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China)
Abstract:Objective To compare analgesic and anti-inflammatory effects of Gentianopsis Paludosa
and Sophora Alopecuroide of different kinds of compatibility on the mice. Methods Mice were
randomly divided into normal control group, positive medicine group, and different kinds of
compatibility groups, 10 mice in each group. Mice received gavage for successive 7 days, once a
day. Glacial acetic acid twist body method and hot board to pain method were used to observe and
compare analgesic effects of different kinds of compatibility. Xylene to ear swelling method and
agar to granulation swollen method were used to observe and compare inflammatory effects of
different kinds of compatibility. Results Compared with normal group, compound Gentianopsis
Paludosa had obvious analgesic and anti-inflammatory effects (P <0.01). When the ratio of
Gentianopsis Paludosa and Sophora Alopecuroide was 20∶0.6 and 20∶0.9, the analgesic and
anti-inflammatory effects were the best. Conclusion Gentianopsis Paludosa and Sophora
Alopecuroide have good analgesic and anti-inflammatory effects, among which, when the ratio of
Gentianopsis Paludosa and Sophora Alopecuroide is 20∶0.6, the best effects show.
Key words:Gentianopsis Paludosa;Sophora Alopecuroide;analgesic effect;anti-inflammatory
effect;mice
湿生扁蕾 Gentianopsis paludosa(Munro)Ma.为
龙胆科扁蕾属草本植物,产于甘肃、青海、西藏、四
川等地。湿生扁蕾全草入药,具有清热解毒、利湿消
黄、健脾止泻等功效[1],是青藏高原地区临床常用的药
用植物。苦豆子 Sophora alopecuroides L.是豆科槐
属植物苦豆草的种子,多年生草本植物,主要分布于
我国宁夏、新疆、甘肃等西北省区[2]。该植物味苦性
寒,具有清热解毒、抗菌消炎、止痛杀虫、平喘止咳
基金项目:国家自然科学基金(81360522)
通讯作者:景明,E-mail:1339512509@qq.com
等功效。笔者采用 4 种动物模型观察湿生扁蕾和苦豆
子不同配比的镇痛、抗炎作用,为湿生扁蕾复方的开
发利用提供依据。
1 实验材料
1.1 药物
阿司匹林片,哈药集团制药总厂,批次 20120608;
湿生扁蕾样品于 2012 年 8 月初采自甘肃省临潭县冶
力 关 镇 , 经 甘 肃 农 业 大 学 陈 垣 教 授 鉴 定 为
Gentianopsis paludosa(Munro)Ma.全草;苦豆子样
品于 2012 年 10 月初采自甘肃省金塔县东坝镇,经甘
肃中医药大学杜弢教授鉴定为Sophora alopecuroides
2015 年 11 月第 22 卷第 11 期 中国中医药信息杂志 ·63·
L.原植物。
1.2 动物
SPF 级 2 月龄昆明种小鼠,体质量(20±2)g,雌雄
兼有,甘肃中医药大学动物实验中心,合格证号
SCXK(甘)2011-0009,饲养于 SPF 级实验室。
1.3 主要试剂与仪器
冰醋酸(中国医药集团上海化学试剂公司),二甲
苯(国药集团化学试剂有限公司),琼脂(天津市大茂
化学试剂厂)。YLS26B 型智能热板仪(淮北正华生物仪
器设备有限公司),YLS2Q4 型耳肿打孔器(上海玉研科
学仪器有限公司),BS/BT 型电子天平(Sartorius AG)。
2 实验方法
2.1 药物制备
按表1中湿生扁蕾和苦豆子不同配比,称取药材,
分别用 10、8 倍量 80%乙醇回流提取 2次,每次 1.5 h,
减压抽滤得滤液,合并2次乙醇提取液,旋转蒸发仪蒸
发至滤液无醇味,将药液统一定容至 150 mL。
表 1 湿生扁蕾与苦豆子配伍表
组别 剂量(g) 含药量(g 原药材/mL)
配伍 1 组 湿生扁蕾 10+苦豆子 0.3 0.69
配伍 2 组 湿生扁蕾 10+苦豆子 0.6 0.71
配伍 3 组 湿生扁蕾 10+苦豆子 0.9 0.73
配伍 4 组 湿生扁蕾 15+苦豆子 0.3 0.82
配伍 5 组 湿生扁蕾 15+苦豆子 0.6 0.83
配伍 6 组 湿生扁蕾 15+苦豆子 0.9 0.85
配伍 7 组 湿生扁蕾 20+苦豆子 0.3 0.81
配伍 8 组 湿生扁蕾 20+苦豆子 0.6 0.82
配伍 9 组 湿生扁蕾 20+苦豆子 0.9 0.84
2.2 给药剂量
不同配伍组按 70 kg 人与 20 g 小鼠体质量换算
为不同给药剂量,阳性药组予0.1g/kg阿司匹林溶液,
均按 0.2 mL/10 g 灌胃。
2.3 冰醋酸致小鼠扭体反应实验
取昆明种小鼠 110 只,雌雄各半。随机分为正常
组、阳性药组及不同配伍组共 11 组,每组 10 只。按
表 2 设计分组及给药,每日灌胃给药 1 次,连续 7 d。
末次给药 1 h 后,腹腔注射 0.6%冰醋酸 0.2 mL/只,观
察 5 min 内各组小鼠出现扭体反应次数,并计算反应
抑制率[(正常组扭体次数-给药组扭体次数)÷正常
组扭体次数×100%]。
2.4 热板实验
取雌性小鼠 110 只,将热板温度调至 55 ℃,以小
鼠舔后足、跳跃反应为观察指标,从小鼠置于热板仪
上到出现上述反应的时间为痛反应潜伏期。给药前
30 min测定2次潜伏期,取平均值作为基础阈值,选择
5 s<潜伏期<30 s 的小鼠,随机分组,每组 10 只。按
表 3 设计分组及给药,每日灌胃给药 1 次,连续 7 d,
末次给药后 2 h 测潜伏期,为防止组织烫伤,采用 30 s
作为切断时间,并计算痛阈提高率[(给药后潜伏期-
基础阈值)÷基础阈值×100%]。
2.5 二甲苯致炎实验
取昆明种雄性小鼠110只,按表4分组及给药,每
日 1 次,连续 7 d,末次给药后 30 min,每只小鼠右耳
前后两面分别涂抹二甲苯 10 μL,30 min 后小鼠脱颈
处死,沿耳廓剪下两耳,在相同部位用直径为 9.00 mm
的打孔器,分别凿下相等面积的耳片,称重,以左右耳
片质量差值为肿胀度,计算肿胀抑制率[(正常组肿胀
度-给药组肿胀度)÷正常组肿胀度×100%]。
2.6 琼脂致肉芽肿实验
取昆明种雄性小鼠110只,按表5分组及给药,所
有小鼠均在背部皮下注射2%琼脂0.3 mL/只,并于第2
日开始连续给药 7 d,第 8 日将小鼠脱颈处死,剥离琼
脂肉芽块,并称湿重,并计算肿胀抑制率[(正常组琼
脂肉芽质量-给药组琼脂肉芽质量)÷正常组琼脂肉
芽质量×100%]。
3 统计学方法
采用 SPSS19.0 统计软件进行分析。计量资料以
—x±s 表示,组间比较采用方差分析。P<0.01 表示差异
有统计学意义。
4 结果
与正常组比较,阳性药组和湿生扁蕾各配伍组镇
痛、抗炎作用明显(P<0.01),湿生扁蕾和苦豆子配伍
比例为 20∶0.6 和 20∶0.9 镇痛、抗炎效果较好,尤
以湿生扁蕾和苦豆子配比为 20∶0.6 为最佳。结果见
表 2~表 5。
表 2 各组小鼠扭体次数和抑制率比较(—x±s)
组别 只数 剂量(g/kg) 扭体次数 抑制率(%)
正常组 10 25.05±6.95
阳性药组 10 0.10 10.45±7.36** 58.3
配伍 1 组 10 2.94 21.53±6.05** 14.1
配伍 2 组 10 3.03 19.85±8.28** 20.8
配伍 3 组 10 3.11 19.36±5.16** 22.7
配伍 4 组 10 4.37 21.37±8.64** 14.7
配伍 5 组 10 4.46 20.96±3.18** 16.3
配伍 6 组 10 4.54 20.76±4.46** 17.1
配伍 7 组 10 5.80 20.87±6.56** 16.7
配伍 8 组 10 5.89 18.10±9.84** 27.7
配伍 9 组 10 5.97 18.69±6.38** 25.4
注:与正常组比较,**P<0.01(下同)
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表 3 各组小鼠痛阈提高率比较(—x±s)
组别 只数
剂量
(g/kg)
基础阈值(s) 潜伏期(s)
痛阈提高率
(%)
正常组 10 14.61±3.79 14.43±2.64
阳性药组 10 0.10 13.73±3.63 25.78±3.52** 87.75
配伍 1 组 10 2.94 15.21±3.89 18.95±3.98** 24.56
配伍 2 组 10 3.03 16.09±2.81 20.18±4.22** 25.43
配伍 3 组 10 3.11 14.32±3.54 18.00±2.85** 25.72
配伍 4 组 10 4.37 15.48±3.37 19.03±2.32** 22.92
配伍 5 组 10 4.46 14.88±3.75 18.12±4.53** 21.78
配伍 6 组 10 4.54 16.42±4.60 20.29±4.56** 23.55
配伍 7 组 10 5.80 15.46±2.76 19.23±3,25** 24.37
配伍 8 组 10 5.89 14.78±3.34 18.89±3.01** 27.84
配伍 9 组 10 5.97 15.68±4.51 20.28±3.34** 29.38
表 4 各组小鼠耳肿胀度和抑制率比较(—x±s)
组别 只数 剂量(g/kg) 肿胀度(mg) 抑制率(%)
正常组 10 11.18±1.90
阳性药组 10 0.10 8.11±1.19** 27.46
配伍 1 组 10 2.94 10.77±1.55** 3.67
配伍 2 组 10 3.03 10.41±2.92** 6.89
配伍 3 组 10 3.11 9.76±1.41** 12.70
配伍 4 组 10 4.37 10.37±0.99** 7.25
配伍 5 组 10 4.46 10.28±1.32** 8.05
配伍 6 组 10 4.54 10.55±2.83** 5.64
配伍 7 组 10 5.80 9.53±1.27** 14.76
配伍 8 组 10 5.89 9.02±1.31** 19.32
配伍 9 组 10 5.97 9.19±2.34** 17.80
表 5 各组小鼠琼脂肉芽质量和抑制率比较(—x±s)
组别 只数 剂量(g/kg) 琼脂肉芽质量(g) 抑制率(%)
正常组 10 0.372±0.025
阳性药组 10 0.10 0.259±0.034** 30.38
配伍 1 组 10 2.94 0.334±0.025** 10.22
配伍 2 组 10 3.03 0.329±0.032** 11.40
配伍 3 组 10 3.11 0.322±0.037** 13.44
配伍 4 组 10 4.37 0.342±0.019** 8.06
配伍 5 组 10 4.46 0.337±0.023** 9.40
配伍 6 组 10 4.54 0.325±0.033** 12.63
配伍 7 组 10 5.80 0.323±0.031** 13.17
配伍 8 组 10 5.89 0.315±0.027** 15.32
配伍 9 组 10 5.97 0.319±0.029** 14.25
5 讨论
湿生扁蕾、苦豆子 2 味药组成复方。方中重用味
苦性寒之湿生扁蕾,入大肠经,功擅清热解毒、祛湿止
泻,以除致病之因,为君药;臣以苦豆子清热燥湿,协
助湿生扁蕾清热祛湿之功。二者相须为用,共奏清热
解毒、祛湿止泻之功,主治慢性溃疡性结肠炎。湿生
扁蕾主要含有𠮿酮类、黄酮类和三萜类化合物,𠮿 酮
类和黄酮类化合物具有抗炎、抗菌等作用[3-5],其中木
犀草素是黄酮类化合物,对番泻叶诱导的小鼠腹泻模
型有较好止泻作用[6],且对溃疡性结肠炎小鼠也有一
定的治疗作用[7]。苦豆子中生物碱、黄酮等多种化学
成分具有抗菌、抗炎作用[8]。
本实验采用镇痛模型、炎症模型各 2 种,全面分
析湿生扁蕾和苦豆子两味药不同配比时的镇痛、抗炎
作用。镇痛模型采用冰醋酸致扭体模型和热板致痛模
型,其中,冰醋酸致小鼠扭体实验是通过化学物质刺
激导致小鼠腹膜发生炎症产生疼痛而表现歪扭反应,
而热板致痛是通过物理刺激产生疼痛而表现舔后足、
跳跃反应,2 种模型分别从不同的角度验证在湿生扁
蕾复方不同配比时的镇痛作用。实验结果表明,与正
常组比较,湿生扁蕾复方镇痛作用明显(P<0.01);以
湿生扁蕾和苦豆子配比为20∶0.6和 20∶0.9时镇痛
效果最佳,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。抗
炎模型采用二甲苯致炎模型和琼脂致肉芽肿模型分
别从急性和亚急性角度分析湿生扁蕾复方抗炎作用。
实验结果表明,与正常组比较,湿生扁蕾复方抗炎作
用明显(P<0.01);以湿生扁蕾和苦豆子配比为 20∶
0.6 和 20∶0.9 时抗炎效果最佳,两者比较差异无统
计学意义(P>0.05),考虑到苦豆子毒性比较大,给药
剂量不宜太大,因此以 20∶0.6 为最佳配比。
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(收稿日期:2015-03-17)
(修回日期:2015-03-30;编辑:华强)