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西宁花锚(Halenia Sibirica Born)对小鼠肝糖原含量的影响



全 文 :西宁花锚(Halenia Sibirica Born)对小鼠肝糖原含量的影响
周富强
(青海师范大学 ,青海西宁 810008)
摘 要:本实验通过采用 CCl4 所致小鼠的肝损伤为模型 ,研究不同剂量西宁花锚对CCl4实验性肝损伤后对肝糖原含量的影
响.结果表明 ,一定的西宁花锚可以显著提高小鼠肝糖元的含量.
关键词:西宁花锚;四氯化碳;小鼠;肝糖元
中图分类号:Q949.95    文献标识码:A    文章编号:1001-7542(2006)03-0084-03
花锚(Halenia Sibirica Born),是龙胆科花锚属植物 ,除华南华东外 ,广泛分布我国其他地区.在青海
地区 ,作为一种常用藏药 ,别名“藏茵陈” .全草入药 ,性甘苦 、寒 ,主要功用清热解毒 、凉血止血 ,常用于治
疗肝炎 、脉管炎 ,外伤出血.对慢性胆囊炎和急性黄胆型肝炎有明显的疗效[ 1] .对于西宁花锚 ,对其药用
成份的分离和鉴定工作已有报道 ,并已从中分离和确定 6 种酮类衍生物[ 2] .西宁花锚所含的酮甙 ,对
CCl4所引起的实验性肝损伤有促进恢复作用 ,能促进肝细胞再生 ,可提高肝细胞糖元和核糖核酸[ 3] .进
一步实验证明 ,西宁花锚煎剂及其所含花锚甙和去甲基花锚甙有明显的保肝作用 ,可增加肝糖元 ,促进
肝细胞再生 ,加速坏死组织修复 ,花锚甙(2 、3 、5 、7-四甲基口山酮)和去甲基花锚甙(2 、3 、5-三甲基口山
酮)及其它酮甙 ,是该植物抗肝炎的成份[ 4] .
通过不同剂量的西宁花锚对已损伤小鼠肝糖元的研究 ,发现西宁花锚对 CCl4 损伤后小鼠肝糖元的
储存的恢复有一定的药效 ,本文为进一步研究西宁花锚对肝损伤的的修复功能提供了一定的作用依据.
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1 实验动物 昆明种健康小白鼠 ,体重 18-20g ,兰州生物制品厂提供.
1.1.2 主要药品与试剂 醇提西宁花锚浸膏(花生油:土温 80:蒸馏水按:1∶1∶8比例配制的基质对三
种不同质量的西宁花锚进行稀释),四氯化碳(0.12%四氯化碳),食用鲁花花生油 ,土温 80(莱阳市双双
化工有限公司),95%乙醇 ,5%三氯乙酸(分析纯上海试剂厂),葡萄糖 ,蒽酮试剂(分析纯 上海化学试
剂采购供应站),氢氧化钾(洛阳市化学试剂厂).
1.1.3 仪器设备
UV9100分光光度计(北京瑞利分析仪器公司.型号:UV9100), 电子分析天平(型号:FA -
2004 200g/0.2mg),低温冰箱(MDF-192),电热鼓风干燥箱(重庆试验设备厂制造.型号:CS1012),电
热恒温水浴锅(北京长安科学仪器厂 ,型号:HH.SL L-4),匀浆机(宁波新芝生物科技股份有限公司 ,
DY89-1).
1.2 方法步骤
1.2.1 小鼠的处理
实验室饲养数天后 ,将小鼠随机分为空白组 、CCl4 模型组 、 西宁花锚高剂量组 、 中剂量组 、低剂量
组 , 除空白组 , 其余各组小鼠均所配制的西宁花锚溶液灌胃 (分别给药剂量为 0.5g/mL 、 0.17g/mL、
0.06g/mL), 剂量按 0.1mL/10g体重给 1次/天 , 连续一周.末次给药后 2小时 , 除出空白对照组外 ,
收稿日期:2006-03-14
作者简介:周富强(1970-),男(汉族),山东人 ,青海师范大学讲师.
2006年
第3期          
青海师范大学学报(自然科学版)
Journal of Qinghai Normal University(Natural Science)         
2006
No.3
DOI :10.16229/j.cnki.issn1001-7542.2006.03.028
其他均按 0.1mL/10g一次性腹腔注射 0.12%CCl4花生油溶剂 ,禁食禁水 ,经 13h断颈取血 ,并取肝组织
冷冻.
1.2.2 肝糖元的提取
(1)称取 200mg肝加1.5 mL三氯乙酸(TCA)置于玻璃匀浆管中 ,3500转/分 、均浆 15-20分钟.
(2)取已匀浆的肝提取液 1mL 置于 10mL 刻度试管中 ,加入 10mol KOH 1mL.于沸水液中煮沸 1小
时 ,取出冷却后加 0.5mL 冰醋酸 ,再加水致 10mL 刻度处 、摇匀.
1.2.3 肝糖元的测定(蒽酮法)
蒽酮可与游离糖或多糖起反应 ,反应后溶液呈蓝绿色 ,于650nm 处有最大吸收峰 ,测定其光密度 ,可
以确定糖元的含量.
(1)取加了冰醋酸的上述溶液 1mL ,置于冰浴内 ,加蒽酮试剂 2mL ,摇匀 ,冷致室温后 ,于沸水浴中 6
分取出冷却.
(2)将冷却后的溶液倒入比色皿中在分光光度剂650nm处测吸光度.
(3)数据处理:所有实验结果用 x±s表示采用 t检验.
2 结果
结果见表 1.比较空白组与模型组小鼠 ,模型组小鼠肝糖元显著下降 ,说明 CCl4可能损伤肝功能 ,使
代谢下降;肝脏储存糖元能力下降.模型组与药物组高 、中 、低 、剂量比较 ,高 、中 、低剂量都可提高肝糖元
含量 ,而且高剂量可较显著提高肝糖元含量 ,说明药物可能对肝功能恢复起了一定作用;空白组与药物
组比较 ,药物组高 、中 、低剂量的糖元量都有所提高;说明药物可能提高肝糖元含量.
从表中可以看出空白组与模型组 、药物组的糖元都存在一定差异.空白组与模型组相比 ,模型组的
糖元量较低 ,差异较明显.空白组与药物组高剂量相比差异显著 ,与中剂量相比差异显著 ,与低剂量相比
差异显著.模型组与药物组高剂量相比差异较明显 ,与中剂量相比差异明显 ,与低剂量相比差异明显.
表 1 西宁花锚对小鼠肝糖元含量的影响
组 别 动物数(单位:只) 剂量(g/ kg) 肝糖元含量
高剂量 10 6.4 7.12±1.91 ■**
中剂量 10 2.1 6.47±1.44 **
低剂量 10 0.75 5.96±1.97
模 型 10 — 5.33±1.90
空 白 10 — 8.52±2.03
注:*表示药物组与模型组小鼠肝糖元含量的比较 P<0.05
* *表示药物组与模型组小鼠肝糖元含量的比较P<0.5
■表示药物组与空白组比较P<0.5
3 讨论
肝脏是药物代谢的主要器官 ,肝对糖的储存 、分布和调节起重要作用[ 5] .模型组糖元含量下降 ,可能
与肝组织损伤 、糖元代谢有关.CCl4 是一种典型的肝脏毒物 ,CCl4 经肝脏微粒体细胞色素激活后 ,产生活
泼的三氯甲基自由基(-CCl3)-CCl3 可攻击肝细胞膜上的磷脂分子 ,引起膜质过氧反应 , -CCl3 还可与
肝细胞微粒体脂质和蛋白质发生共价结合 ,损伤比较低膜的结构和功能 ,从而使肝脏的可溶性酶的活性
提高 ,并且 CCl4可以抑制内质网上的钙离子泵 ,使钙离子水平增加 ,升高的钙离子可激活肝细胞膜上的
磷酸化酶 ,而引起膜的脂质过氧化 ,导致肝细胞的损伤[ 6] ,肝细胞膜结构和功能完整性被破坏 ,会导致肝
细胞内的一些酶类进入血液[ 7] .肝细胞内的 6-磷酸葡萄糖在葡萄糖磷酸变位酶的催化下转化为1-磷
酸葡萄糖 ,经和三磷酸尿嘧啶核苷合成二磷酸核苷葡萄糖和无机磷 ,然后在糖元合成酶催化下合成糖
85第 3期      周富强:西宁花锚(Halenia Sibirica Born)对小鼠肝糖原含量的影响       
元.小鼠注射CCl4 后 ,可能是因为糖元合成酶进入血液 ,无法合成适量的糖元 ,导致糖元合成减少 ,使肝
轻易受损伤.也有可能是因为钙离子水平急剧增加 ,大量的钙离子激活肝细胞膜上的磷酸化酶 ,其促进
糖元分解为1-磷酸葡萄糖 ,进而转变为6-磷酸葡萄糖 ,经肝脏中磷酸酶转变为葡萄糖进入血液中 ,导
致糖元分解增多 ,容易使肝受损.
药物组与模型组相比肝糖元升高 ,药物可能与肝功能恢复有一定的关系.有关文献报道 ,西宁花锚
所含口山酮甙 ,对CCl4 所引起的实验性肝损伤有促进恢复作用 ,花锚甙和去甲基花锚甙也有明显的保肝
作用 ,它们都能促进肝细胞再生[ 3] .增加肝细胞内的糖元 ,后者可加速坏死组织的修复 ,是花锚抗肝炎的
两种有效成份.
模型组与空白组相比 ,模型组小鼠的肝糖元含量下降;模型组与药物组相比 ,药物组的三个剂量都
可提高CCl4 所致小鼠肝糖元的含量;空白组与药物组相比 ,小鼠肝糖元含量显著.
空白组与药物组高 、中 、低剂量比较 ,高 、中 、低三种药物剂量对小鼠肝糖元都有提高作用 ,从中可看
出 ,用低剂量也可提高CCl4 所致得肝损伤小鼠降低的肝糖元 ,所以用低剂量既可以提高肝糖元 ,又可以
节省药物资源.
糖尿病是一种常见顽疾 ,此病因是胰岛素缺乏或其受体异常 ,因此不能对抗由肾上腺素 、高血糖素 、
肾上腺皮质激素等引起的血糖升高作用 ,使病人在空腹时血糖浓度超过 140mg/dl ,产生高血糖和糖
尿[ 5] .西宁花锚对CCl4 诱导的肝损伤有明显保护作用 ,可提高肝损伤小鼠后的糖元含量 ,因此西宁花锚
有可能成为糖尿病 ,低血糖等病症的治疗药物 ,并且疗效与剂量有一定的量效关系.
参考文献:
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The Halenia Sibirica Born Influence with Deal in Sugar in Liver of Small Rat
ZHOU Fu-qiang
(Qinghai Normal University ,Xining 810008 ,China)
Abstract:This experiment passes to adopt a liver for with the result that small rat harm as the model , studying
the different the west of amount of to spend the anchor man(xinning haienia corniculata)to experinent the sex liver
harm empress to the CCl4 rather to the original influence the sex sugar in liver.As a result express , the west of the
different amount of spends rather , the anchor man can show the exaltation the small rat liver sugar dollar contains
the deal.
Key words:the xining haienia Sibirica Born;Small rat;Four chlorination carbon;liver suger dollar
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