全 文 ：中国药房 2008年第 19卷第 9期 Ch ina Pharmacy 2008 V ol.19 No.9 · 657·
复方荔枝草颗粒体内外抗菌消炎作用研究
黄 庆 1 *,方 芸 2 #(1.南京中医药大学药学院 ,南京市 210029;2.南京大学医学院附属鼓楼医院 ,南京市
210008)
中图分类号 R285.5;R977.27 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2008)09-0657-03
摘 要 目的:研究复方荔枝草颗粒的抗菌消炎作用 。方法:采用体内和体外抗菌 、二甲苯致小鼠耳肿胀及二甲苯致小鼠腹部毛细
血管通透性实验 ,研究复方荔枝草颗粒的抗菌消炎作用 。结果:复方荔枝草颗粒在体外对金黄色葡萄球菌 、绿脓杆菌 、大肠杆菌及变
形杆菌有不同程度的抑制作用;能够显著降低变形杆菌感染小鼠的死亡率 ,但对大肠杆菌感染小鼠的死亡率没有显著作用;能显著
抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀和小鼠腹部毛细血管通透性增加 。结论:复方荔枝草颗粒体内 、外均具有良好的抗菌消炎作用 。
关键词 复方荔枝草颗粒;抗菌作用;消炎作用;体内 、外实验
Antibacterial and Anti-in flammatory Effects of Compound Sage Herb Granules in Vivo and in Vitro
HUANG Qing(College o f Pharmacy , N anjing U niversi ty o f T radit ional Chinese Medicine , N anjing 210029 ,
China)
FANG Yun(The Aff iliated Drum Tow er Hospital of M edical Schoo l of Nanjing University , Nanjing 210008 ,
China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study the antibacter ial and anti-inflamm ato ry effect s o f the com pound Sage Herb granules.
M ETHODS:The in vit ro and in vivo antibacterial test , xy lene -induced mouse ear sw elling test , xy lene-induced abdominal
capillary perm eability test were conducted to study the antibacte rial and anti-inflammatory ef fects o f the compound S age Herb
granules.RESU LTS:The compound Sage H erb granules show ed dif ferent degree of inhibito ry ef fects on staphy lococcus au-
reus , pseudom onas aureg inosa , escherichia coli and pro teus in vitro , significantly brough t dow n the mortality ra tes o f mice in-
fected by pro tei , but had on impact on the mort ality rate of mice infected w ith coli infection , and significantly inhibited xy-
lene-induced ear sw elling and increased abdominal capillary permeability o f mice.CONCLUSION :The com pound Sage Herb
granules have good antibacterial and anti-inflamm ato ry effect s bot h in vivo and in v itro.
KEY WORDS Compound Sage Herb granules;Antibacte ria l action;Anti-inflammato ry ef fect;In vivo ＆ in vitro experi-
ment
*硕士研究生 。研究方向:药物新剂型技术。E-mail:huang_
qing 3@yahoo.com.cn
#通讯作者:主任药师 ,硕士研究生导师。研究方向:临床药学、药
动学。电话:025-83304616-66669
复方荔枝草颗粒为南京大学医学院附属鼓楼医院院内制
剂 ,具有清热解毒 、利尿通淋之功效 [1 ] ,临床用于治疗泌尿系统
感染 20多年 ,疗效较好且毒副作用较低 。为了进一步研究开发
该药 , 笔者对复方荔枝草颗粒在抗菌消炎方面的药效作用进行
了研究 。
1 材料
1.1 仪器
UV -2201型紫外分光光度计(日本岛津公司);AG -204
型电子分析天平(瑞士M et tler To ledo 公司);YXQ -SG41-
280型电热手提压力蒸汽消毒器 (上海医用核子仪器厂);
PYX-DHS-50×65型隔水式电热恒温培养箱 (上海跃进医
疗器械一厂);SW -CJ-1C 型洁净工作台(苏州安泰空气技术
有限公司);80-2型离心沉淀器(上海手术器械厂)。
1.2 试药
地塞米松(天津天药药业股份有限公司 ,批号:060703);营
养肉汤(广州市乐通泰生物科技有限公司 ,批号:299978);双黄
连口服液(河南太龙药业股份有限公司 ,批号:06092023);复方
荔枝草颗粒(南京鼓楼医院药剂科提供 , 批号:20051201 , 实验
前用生理盐水配成所需浓度)。
1.3 动物及菌种
昆明种小鼠 300只 , ♀♂兼半 , 18 ～ 21 g ,由南京大学医学
院附属鼓楼医院动物中心提供 (动物使用许可证号 :SYXK
(苏)2004-0013);金黄色葡萄球菌[ CMCC(B)26003] 、大肠杆
菌 [ CMCC(B)44102] 、绿脓杆菌 [CMM C(B)10104] 由江苏省
药品检验所提供;临床分离菌株———变形杆菌 、肺炎克雷伯杆
菌 、表皮葡萄球菌 、枸橼酸杆菌及不动杆菌由南京大学医学院
附属鼓楼医院检验科微生物室提供 。
2 方法与结果
2.1 抗菌实验[ 1 ～ 5]
2.1.1 体外抑菌试验———试管法测最低抑菌浓度(M IC):取
灭菌小试管 10支 , 按照 1 ～ 10编号 , 按无菌操作 , 分别加入普
通肉汤培养基 0.5 mL 。用吸管吸取药液 0.5 mL 放入第 1管
内 ,反复吹匀 。从第 1管吸取 0.5 mL 放入第 2管 ,同样吹匀后
吸出 0.5 mL 放入第 3管 。依此法逐管进行稀释至第 9管 。第
10管不加药液作为阳性对照管 。各管均加入菌液 0.5 mL(菌
液浓度用比浊计比浊 ,调整浓度为 106 cf u·mL -1),放入 37 ℃
恒温培养箱中培养 24 h ,取出 ,观察生长情况 。以细菌不生长的
最低浓度作为药液对细菌的M IC 。再依次将未见细菌生长各
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管转种于营养琼脂平板 , 37 ℃下培养 18 h ,未见细菌生长的最
低药物浓度即为最低杀菌浓度(MBC)。结果表明 ,复方荔枝草
颗粒对金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌 、绿脓杆菌 、变形杆菌 、肺炎
克雷伯杆菌 、表皮葡萄球菌 、枸橼酸杆菌及不动杆菌均有不同
程度的抑菌作用 , 其中以变形杆菌的抑菌作用最强 。体外抑菌
试验结果详见表 1 。
表 1 复方荔枝草颗粒的体外抑菌试验结果
Tab 1 Antibacterial test of compound Sage Herb granules
in vitro
菌株 M IC/ g·mL -1 MBC/ g·mL -1金黄色葡萄球菌 0.032 0.063
大肠杆菌 0.032 0.063
绿脓杆菌 0.063 0.125
变形杆菌 0.016 0.016
肺炎克雷伯杆菌 0.063 0.250
表皮葡萄球菌 0.016 0.032
枸橼酸杆菌 0.032 0.063不动杆菌 0.032 0.125
2.1.2 体内抗菌实验:取昆明种小鼠 200只 , 随机均分为 10
组:1 、2组为生理盐水(20 mL · kg -1)组;3 、4组为双黄连口服
液(10 mL ·kg -1)组;5、6组为复方荔枝草颗粒低剂量(12.6
g · kg -1)组;7、8组为复方荔枝草颗粒中剂量(25.2 g ·kg -1)
组;9、10组为复方荔枝草颗粒高剂量(50.4 g ·kg -1)组 。各组药
物剂量为 20 mL ·kg -1 , ig ,每日 1次 ,连续 3 d 。末次给药后 1
h ,ip大肠杆菌培养液(1 、3 、5、7、9组)和变形杆菌培养液(2 、4 、
6 、8 、10组),每只 0.5 mL ,观察 72 h内动物死亡情况 。复方荔
枝草颗粒对大肠杆菌感染小鼠的保护作用详见表 2。
表 2 复方荔枝草颗粒对大肠杆菌感染小鼠的保护作用
(n=20)
Tab 2 Protect ive ef fect of compound Sage Herb granules
on mice with coli infection(n=20)
组别 剂量 大肠杆菌 变形杆菌死亡动物数 死亡率/ % 死亡动物数 死亡率/%
生理盐水组 20 mL· kg -1 16 80.0 17 85.0
双黄连口服液组 10 mL· kg
-1 12 60.0 10 50.00*
复方荔枝草颗粒低剂量组 12.6 g · kg
-1
16 80.0 12 60.0
复方荔枝草颗粒中剂量组 25.2 g · kg
-1 12 60.0 12 60.0
复方荔枝草颗粒高剂量组 50.4 g · kg
-1 12 60.0 10 50.0*
与生理盐水组比较:*P<0.01
vs.no rmal saline (NS)group:*P<0.01
由表 2可知 , 复方荔枝草颗粒对大肠杆菌感染小鼠死亡的
保护作用不显著;在较高的剂量(50.4 g ·kg -1)时 , 复方荔枝
草颗粒使变形杆菌感染小鼠死亡率显著下降 , 显示有显著的保
护作用 。
2.2 抗炎作用 [2 ～ 7]
2.2.1 复方荔枝草颗粒对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响:取
昆明种小鼠 50只 ,随机分为 5组(每组 10只 , ♀♂兼半):正常
对照(等量生理盐水)组 、地塞米松(5 mg ·kg -1)组及复方荔枝
草颗粒低 、中、高剂量(12.6、25.2 、50.4mg ·kg -1)组。各组小鼠
ig 给药 ,给药剂量为 20 mL ·kg -1 ,每日 1次 ,连续 5 d。末次给
药后 1 h ,将 30μL 二甲苯涂于小鼠左耳前后两面致炎 ,右耳为
对照 , 致炎后 45 min 处死小鼠 , 用直径 8 mm 的打孔器打下左
右耳片 ,称重 ,以左右耳片重量差作为肿胀度 ,计算肿胀抑制百
分率 , 并与对照组比较组间差异 。复方荔枝草颗粒对二甲苯致
小鼠耳廓肿胀的影响详见表 3。
表 3 复方荔枝草颗粒对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 (x ±
s , n=10)
Tab 3 Effect of compound Sage Herb granules on xylene-
induced ear swelling of mice(x ±s , n=10)
组别 剂量/ g· kg -1 肿胀度/mg 肿胀抑制率/ %
正常对照组 - 24.10±3.04
地塞米松组 0.005 12.63±2.28* 47.59
复方荔枝草颗粒低剂量组 12.6 17.84±3.58* 25.97
复方荔枝草颗粒中剂量组 25.2 12.19±2.38* 49.41
复方荔枝草颗粒高剂量组 50.4 13.26±2.90* 44.97
与正常对照组比较:*P<0.01
vs.no rmal con trol group:*P<0.01
由表 3可知 , 复方荔枝草颗粒 3个剂量均能显著降低二甲
苯致小鼠耳廓的肿胀程度。
2.2.2 复方荔枝草颗粒对小鼠毛细血管通透性的影响:小鼠
分组及给药同“2.2.1”项下操作 。于末次给药后 1 h ,小鼠尾 iv
0.5%伊文思蓝溶液 , 20 mL ·kg -1 , 立即在去毛腹部滴加二甲
苯 40μL , 15 min后处死动物 ,用直径 1.2 cm 打孔器取下等面
积蓝染皮肤 ,剪碎放入盛有 2 mL 丙酮-水(7∶3)溶液的试管
中浸泡 ,放置 20 h ,3 000 r ·min -1离心 5m in ,取上清液于 590
nm 波长处比色 , 以吸光度(OD)值判断小鼠皮肤毛细血管通
透性 。复方荔枝草颗粒对小鼠腹部毛细血管通透性的影响详
见表4。
表 4 复方荔枝草颗粒对小鼠腹部毛细血管通透性的影响(x ±
s , n=10)
Tab 4 Effect of compound Sage Herb granules on xylene-
induced abdominal capillary permeability of mice(x ±s ,
n=10)
组别 剂量/g· kg -1 OD值
正常对照组 - 0.119±0.064
地塞米松组 0.005 0.043±0.024*复方荔枝草颗粒低剂量组 12.6 0.088±0.033
复方荔枝草颗粒中剂量组 25.2 0.086±0.034
复方荔枝草颗粒高剂量组 50.4 0.047±0.016*
与正常对照组比较:*P<0.01
vs.no rm al control g roup:*P<0.01
由表 4可知 , 复方荔枝草颗粒在 50.4 mg ·kg -1剂量时 ,
可显著降低小鼠皮肤毛细血管通透性 。
3 讨论
复方荔枝草颗粒主要由荔枝草 、车前草、六月雪及紫花地
丁组成 ,具有清热解毒 、利尿通淋之功效 ,主要用于治疗泌尿系
统感染等 。其中 ,荔枝草 、车前草均含有黄酮类成分 ,紫花地丁
全草含有黄酮及苷类成分 ,具有良好的抑菌作用 。
本实验观察了复方荔枝草颗粒的抗菌消炎作用 。结果表
明 , 复方荔枝草颗粒对金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌 、绿脓杆菌 、
变形杆菌 、肺炎克雷伯杆菌、表皮葡萄球菌 、枸橼酸杆菌及不动
杆菌有良好的体外抑菌作用;对大肠杆菌感染小鼠死亡的保护
作用不显著 , 高剂量能使变形杆菌感染小鼠死亡率显著下降 ,
显示有显著的保护作用;此外 , 对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀
和小鼠腹部毛细血管通透性增加有显著的抑制作用 。以上结果
可为复方荔枝草颗粒的临床应用提供理论依据 。
中国药房 2008年第 19卷第 9期 Ch ina Pharmacy 2008 V ol.19 No.9 · 659·
*主管药师。研究方向:医院药学。E-mail:czh1997@tom.com
乌点规醇溶性成分降压作用研究
汤丹灵*(汕头大学医学院第一附属医院 ,汕头市 515041)
中图分类号 R285;R965 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2008)09-0659-02
摘 要 目的:研究乌点规醇溶性成分的降压作用 。方法:用 90%乙醇在 40 ℃对乌点规的有效成分进行提取 ,以离体兔主动脉肌
条为实验材料 ,观察乌点规醇溶性成分对去甲肾上腺素(NE)、氯化钾(KC l)的浓度-效应曲线的影响以及对α受体和 β受体的作
用 。结果:乌点规醇溶性成分对家兔离体主动脉血管平滑肌具有很强的扩血管作用。结论:乌点规醇溶性成分能舒张被 NE 、KCl收
缩的主动脉肌条 ,并且不依赖于阻断α受体和β受体 ,而是通过阻断钙通道实现的 。
关键词 乌点规;醇溶性成分;降压作用;药理研究
Hypotensive Effect of Alcohol Soluble Composition of Wudiangui
TANG Dan-ling(The First Aff iliated Hospital of Medical Colleg e of Shantou University , Shantou 515041 ,
China)
ABSTRACT OBJECT IVE:To study the antihyper tensive effect o f the alcohol soluble composition of Wudiangui.M ETH-
ODS :The active component in Wudiangui w as ex tracted w ith 90%alcoho l a t 40 ℃;w ith isolated aortic sm oo th m uscle st rip of
rabbits as exper imental mate rial to observe the ef fects of the a lcoho l soluble composition of Wudiangui on the dose-response
curves of norepinephrine (NE)and Pot assium Chloride (KCl)as we ll asα-and β recepto rs.RESU LTS:The alcohol so luble
composition o f Wudiangui has potent vasodilating effect on rabbitsaor tic smoo th muscles ex vivo.CONCLUSION :The aortic
smooth muscle strips that had been contracted by NE and KCL can be relaxed by the alcohol so luble composition o f Wudiangui
through blocking calcium channel , and this ef fect is independent o f the blockage of α-and β recepto rs.
KEY WORDS Wudiangui;Alcohol soluble com position;Antihypertensive effect;Pharmacolog ical study
综上所述 , 复方荔枝草颗粒具有良好的抗菌消炎作用 , 但
其作用机制未明 ,有待于进一步研究 。
参考文献
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究[ J] .中成药 , 2003 ,25(4):305.
(收稿日期:2007-04-05 修回日期:2007-12-10)
乌点规是我国广东潮汕地区民间传统的中草药 , 系茄科茄
属植物龙葵中的一种———少花龙葵 [1 ] , 有治疗多种疾病的作
用 , 特别对阴虚阳亢型高血压有一定的疗效 [2 ] , 但作用机制不
明确 。本实验以离体兔主动脉肌条为材料 , 观察乌点规醇溶性
成分对去甲肾上腺素(NE)、氯化钾(KCl)的浓度-效应曲线的
影响以及对α受体和 β受体的作用 。
1 材料
1.1 试药
乌点规醇溶性成分(SL)、酚妥拉明(Pho)(上海复旦复华
药业有限公司);去甲肾上腺素(NE ,上海禾丰制药有限公司);
心得安(Pro ,天津力生制药股份有限公司)。K rebs-Henseleit
营养液 , 正常 K -H 液 (mmol· L -1):NaCl 119 , KCl 4.7 ,
M gSO 4 1.2 ,KH 2PO 4 1.2 ,NaHCO 3 25 ,葡萄糖溶液 5.5 。
1.2 动物
家兔 10只 , ♀♂兼用 , 2 ～ 3 kg ,由广州中医药大学动物中
心提供(动物许可证号:粤监证字 2007A013)。
2 方法
将兔击头致昏 ,迅速剥取胸主动脉条 ,剪成 2 mm×30 mm
螺旋形肌条 ,悬挂于盛有 20 mL K -H液(37±0.5)℃的离体
器官测定仪的浴槽中 , 通纯氧 , pH 7.2 ～ 7.4.肌条连于肌力换
能器上 ,前负荷 2 g ,用台式平衡记录仪记录收缩反应 ,平衡 2 h
后 , 按累积给药法制作兔胸主动脉条对 NE(0.04 ～ 10μmol·
L -1)、KCl(10 ～ 80 mmol· L -1)的浓度-效应曲线 。
3 结果
3.1 SL对 NE 、KCl浓度-效应曲线的影响
S L使这 2种激动药的浓度-效应曲线非平行右移 , 最大反
应降低 ,右移和降低的程度随 SL 浓度的增加而加大。S L对 NE 、
KCl诱导的兔主动脉条浓度-效应曲线的影响分别见图 1 、图2。