免费文献传递   相关文献

苗药观音草正丁醇萃取工艺的研究



全 文 :民 族 医 药
Ethnomedicine and Ethnopharmacy
基金项目:贵州省教育厅自然科学研究项目,黔教科 (2007)074 号。
作者简介:刘亮 (1981 ~) ,男,汉,硕士研究生,主要从事中药、民族药化学成分及质量研究。
苗药观音草正丁醇萃取工艺的研究
刘 亮1 杜 江2 姚 丽1 罗海明1
1. 贵州省遵义医药高等专科学校,贵州 遵义 563002;2. 贵州省贵阳中医学院,贵州 贵阳 550002
【摘 要】 目的:优选观音草总皂苷的正丁醇萃取工艺。方法:采用正交试验法,以提取液中总皂苷的含量为考察指标。结果:试
验设计三因素中正丁醇用量及萃取次数有显著影响,最佳的萃取工艺为:用 30 倍量的正丁醇萃取 5 次,每次振摇时间 30s。结论:本法操
作简便,经济、可行。
【关键词】 观音草;正丁醇;萃取工艺
【中图分类号】R284. 2 【文献标识码】A 【文章编号】1007 - 8517 (2011)20 - 0005 - 02
观音草 Reineckia carnea (Andr.)Kunth 为百合科植物
吉祥草的带根全草,又名结实兰,竹叶草,佛顶珠,小青
胆,是一味著名的苗药。苗医药理论认为其药性为性冷,
质征为气微味甜,入热经,走肺、肝二架,表、中、里三
关,治疗肺热咳嗽,跌打损伤,疮毒等。本试验旨在为正
丁醇萃取法提取观音草中总皂苷在工业生产中的应用积累
参数,为观音草的进一步开发、利用提供试验数据。
1 仪器与试药
UV75 - 18 可见分光光度计 (天津市拓普仪器有限公
司) ;DHG 90AOA型电热恒温鼓风干燥箱 (宁波江南仪器
厂) ;Senco R系列旋转蒸发仪 (上海申生科技有限公司) ;
FY130 型药物粉碎机 (天津市泰斯特仪器有限公司) ;DKS
- 26 型电热恒温水浴锅 (宁波江南仪器厂)。
薯蓣皂苷对照品购于上海华壹生物科技有限公司 (批
号:19057 - 60 - 4) ;观音草药材采集于贵州遵义,经遵义
医药高等专科学校张学愈副教授鉴定为百合科植物观音草
Reineckia carnea (Andr.)Kunth;其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 正交试验设计
本试验以观音草中总皂苷的含量为指标,选择正丁醇
用量、萃取次数、振摇时间三因素为考察因素[1 ~ 3],采用
L9 (34)正交设计表进行试验。正交因素水平表见表 1。
表 1 正交试验因素水平表
水平 \ 因素
正丁醇用量 (mL)
A
萃取次数
B
振摇时间 (s)
C
1 5 3 30
2 10 4 45
3 15 5 60
2. 2 供试品溶液的制备
准确称取观音草药材粗粉 5 克,共 2 份,置索氏提取
器中,在 78℃水浴中,用 20 倍甲醇回流提取 4h,得到两
份提取液。分别将两份提取液回收甲醇后加入蒸馏水溶解,
并转移至 100mL 的容量瓶中加蒸馏水稀释至刻度,摇匀,
合并两份水溶液。准确吸取 10mL水溶液于分液漏斗中,用
石油醚分 6 次萃取 (15,10,10,10,10,10mL) ,弃去石
油醚液,水液再用水饱和正丁醇按照正交表 L9 (34)安排
进行萃取,正丁醇萃取液用正丁醇饱和的水 20mL洗涤,减
压回收正丁醇至干,残渣用甲醇溶解并定容于 25mL容量瓶
中,作为供试品溶液[4]。
2. 3 对照品溶液的制备
精密称取薯蓣皂苷对照品 1. 2mg,置于 10mL 容量瓶
中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,作为对照品溶液。
2. 4 标准曲线的制备
分别精密移取薯蓣皂苷对照品溶液 0. 0,0. 2,0. 4,
0. 6,0. 8,1. 0 和 1. 2mL 置于 10mL 具塞试管内,挥干甲
醇,再分别加入 5%的香草醛 -冰醋酸溶液 0. 2mL 和高氯
酸 0. 8mL,摇匀,密塞,60℃水浴显色 15min,取出后立即
用冰水冷却 5min,再加入 5mL 冰醋酸稀释,摇匀,静置
10min,于 460nm处测定其吸光度[5]。以吸光度 (A)为纵
坐标,质量浓度 (C)为横坐标进行线性回归。结果表明,
薯蓣皂苷在 4 ~ 24μg /mL 与吸光度呈良好的线性关系。回
归方程为 A =0. 019121C + 0. 006133,r = 0. 9995。标准曲线
见图 1。
图 1 标准曲线
2. 5 供试品溶液的测定
分别精密吸取供试品溶液 0. 2mL,按 2. 4 项下的操作
方法显色,于 460nm处作含量测定,试验设计及数据处理
结果见表 2,方差分析见表 3。
2. 6 结果与方差分析
由表 2 分析可知最佳的萃取工艺为 A3B3C3。由表 3 方
差分析可知,各因素对总皂苷得率的影响大小顺序为 A ﹥
B﹥ C,结果显示正丁醇用量及萃取次数对总皂苷的得率有
显著影响,萃取时间无显著性。因此,考虑实际情况,提
取工艺调整为 A3B3C1,即用 30 倍量 (与药材的比例)的
正丁醇萃取 5 次,每次振摇时间 30s。
·5·
中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy
民 族 医 药
Ethnomedicine and Ethnopharmacy
蒙西医结合治疗心脏神经官能症 32 例
娜布琪
内蒙古兴安盟蒙医院,内蒙古 乌兰浩特 137400
【关键词】 蒙西医结合;心脏神经官能症
【中图分类号】R291. 2 【文献标识码】A 【文章编号】1007 - 8517 (2011)20 - 0006 - 01
心脏神经官能症是以心血管疾病有关症状为主要临床
表现的综合症,是神经症的一种类型。大多发生在青壮年,
以 20 ~ 50 岁之间发病者最多见。女性多于男性,尤其是更
年期妇女多见。病理上无器质性心脏病证据。考虑本病与
神经类型、环境因素、性格、遗传等有关。本人在以往实
践中采用蒙西医结合方法治疗心脏神经官能症,取得了良
好的疗效,现报告如下。
1 临床资料
32 例患者均符合本病临床诊断标准、其中女 20 例、男
12 例、年龄 21 - 50 岁、平均年龄 35 岁、临床表现为胸闷、
心悸、紧张、多疑、乏力、失眠等。辅助检查:X 线胸片
均无异常,心电图偶有窦性心动过速或心率不齐以及也有
时出现非特异性 ST - T改变等。
2 治疗方法
早饭后服珍宝丸 15 例温开水送服,中午饭后顺气安神
丸 15 例温开水送服,晚睡前肉蔻五位丸 15 例温开水送服,
失眠多梦者加用谷维素或安定片等调节神经,镇静等西药
配合治疗。
3 判定疗效标准
3. 1 疗效标准
治愈:临床症状完全消失。显效:症状明显好转,偶
有复发者。有效:部分症状消失。无效:治疗后症状无改
善或有加重者。
3. 2 结果
治愈 24 例、显效 6 例、无效 2 例、总有效率达 94%。
4 病例资料
例 1. 患者 李 XX、女、42 岁、已婚、出纳员、主因
“间断心悸、胸闷、一个月,加重伴失眠一周”就诊。一周
前体检报告示:心电图窦性心律不齐。胸部 X片:心、肺、
膈、未见异常。生化提示:血脂轻度高。肝胆脾双肾彩超
示:未见异常。蒙药给予珍宝丸 15 例,早饭后服、顺气安
神丸 15 例,午饭后服、肉蔻五位丸 15 例,晚睡前服、西
药谷维素 30mg,晚睡前服、治疗一个月,症状完全消失。
复查心电图:正常心电图。
例 2. 患者 郝 XX、女、36 岁、已婚、家务、主因“间
断胸闷、心慌、失眠半年,加重伴乏力、易怒两个月”就
诊。查体:神清语利、精神可、BP 120 /75mmHg、双肺呼吸
音清、心界不大、各瓣膜听诊区未及杂音、腹软、肝脾肋下
未及、双下肢不肿。辅助检查:心电图提示窦性心动过速。
胸部 X片示:未见异常。甲状腺功能均处于正常范围。血离
子正常。蒙药给予早饭后肉蔻五位丸 15 例口服、晚饭后顺
气安神丸 15例口服。午饭后珍宝丸 15 例口服。西药给予谷
维素 30mg日三次口服、心得安 10mg日三次口服。治疗半个
月后症状基本消失。复查心电图提示:正常心电图。HR:80
次 /分。蒙药继续服用一个月后随访时痊愈。
5 体会
心脏神经官能症属蒙医赫依盛型心悸症范畴。主要由
于赫依偏盛或因血、希拉偏盛侵及心脏与赫依相搏、也可
由巴达干粘液聚增阻塞心脏之脉等原因所指。一般表现为
心慌时有时无、心神不安、烦躁少眠等症状。治疗时以抑
赫依、宁心安神为原则、口服珍宝丸、顺气安神丸、肉蔻
五位丸为主治疗效果非常好。
(收稿日期:2011. 09. 21
檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾
)
表 2 L9 (34)正交试验结果
因素
试验号
A B C D
观音草总皂
苷的含量 (%)
1 1 1 1 1 1. 81
2 1 2 2 2 1. 96
3 1 3 3 3 2. 23
4 2 1 2 3 2. 27
5 2 2 3 1 2. 44
6 2 3 1 2 2. 49
7 3 1 3 2 2. 38
8 3 2 1 3 2. 39
9 3 3 2 1 2. 74
K1 2. 000 2. 153 2. 230 2. 330
K2 2. 400 2. 263 2. 323 2. 277
K3 2. 503 2. 487 2. 350 2. 297
R 0. 503 0. 334 0. 120 0. 053
3 讨论
由于皂苷类化合物在含水正丁醇中具有较大的溶解度,所以本
试验用水饱和的正丁醇作为纯化提取皂苷的溶剂。正丁醇萃取法在
工业生产中应用广泛,与大孔树脂吸附法比较,具有操作简单、用
时短、工艺成熟等优点。本研究结果表明正丁醇的用量及萃取次数
对总皂苷的含量有显著性影响。故试验的最佳工艺为用 30 倍量
(与药材的比例)的正丁醇萃取 5 次,每次振摇时间 30s。
表 3 方差分析表
因素 偏差平方和 自由度 F比值 F临界值 显著性
A 0. 424 2 106. 000 19. 000 P < 0. 05
B 0. 173 2 43. 250 19. 000 P < 0. 05
C 0. 024 2 6. 000 19. 000
误差 (D) 0. 00 2
参考文献
[1]刘越,张旋,贾璞,等. 珠子参薄层色谱鉴别方法的研究 [J]. 西北药
学杂志,2010,25 (3) :182 - 184.
[2]夏勇兵,李林珍,马琳,等. 响铃草抗炎镇痛活性部位的确定及其质量
控制方法的建立 [J]. 药物分析杂志,2010,30 (9) :1599 - 1603.
[3]李少亮. 天然甾体皂苷的提取分离现状 [J]. 辽宁化工,2010,39
(4) :428 - 430.
[4]丁宁,杜江,贾宪生. 黄褐毛忍冬总皂甙的含量测定 [J]. 贵阳中医学
院学报,2001,23 (2) :39 - 40.
[5]刘亮,杜江,潘炉台,等. 苗药观音草中总皂苷的含量测定 [J]. 中国
民族民间医药,2011,20 (4) :2 - 3.
(收稿日期:2011. 09. 20)
·6·
中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy